Буферные системы и их значение в анализе

Ведущий электролит всегда содержит буфер, поскольку pH — важный параметр в электрофорезе. Величина pH ведущего электролита определяет как скорость течения жидкости в капилляре (ЭОП), так и форму нахождения компонента в растворе. Чувствительность ЭОП к изменению pH раствора регламентирует использование ведущих электролитов с высокой буферной емкостью, при этом диапазон pH, как правило, имеет значения рк 1 [71]. Благодаря высокой стабильности кварцевого капилляра при электрофоретическом разделении можно использовать буферные системы от 2 до 12 ед. pH. При анализе кислот наиболее часто используют боратный буфер (pH = 9,3), оснований — фосфатный (pH = 2,5). Эти буферные системы имеют высокую буферную емкость и низкое поглощение в УФ-излучении. Если основания не растворяются в фосфатном буфере, используется ацетатный (pH = 4,8). В табл. 4.2.2 представлены наиболее распространенные буферные системы, используемые в КЭ. [c.346]

Вероятно, подобное влияние условий анализа сказалось на результатах ряда других работ. Влиянием условий следует объяснять большие отклонения pH от значений pH, характерных для обычной бикарбонатной буферной системы вблизи нейтральной области. Следовательно, данные, полученные в условиях замедленной стабилизации ила при 52° С, когда регистрировались низкие значения pH, требуют корректировки, толь- [c.325]

Буферные системы и их значение в анализе [c.80]

Большое количество фермента обеспечивает полное превращение мочевины и постоянство характеристик колонки в течение по меньшей мере месяца ее эксплуатации, несмотря на неоптимальное значение pH буферного раствора [5]. Анализ выполняли в 0,05 М Трис-НС (pH 8,1), тогда как уреаза проявляет максимальную активность при pH 7,0. Градуировочная кривая для проб объемом 0,2 мл линейна вплоть до концентрации 40 мкМ, а предел обнаружения равен 0,2 мкМ (рис. 27.10). В течение часа можно проанализировать 20 проб сыворотки, разбавленной в 500 раз, с погрешностью около 2%. Очевидно, скорость выполнения анализов недостаточна для обработки крупных серий проб и должна быть повышена, например за счет использования нескольких параллельных сенсоров (а возможно, и ферментных колонок) и соответствующего автоматического переключателя. Однако и имеющаяся в настоящее время проточная система великолепно обрабатывает ограниченное число проб, а в силу высокого постоянства характеристик и короткого стартового периода является вполне удовлетворительной дублирующей системой. [c.436]

Хотя определение щелочности традиционно включается в любой анализ воды, оно прежде всего необходимо при рассмотрении различных вопросов, связанных с ее очисткой. Известь, используемая для умягчения воды, и коагулянты, применяемые для устранения мутности, в той или ной степени изменяют щелочность, поэтому важно, чтобы этот параметр контролировался как в необработанной, так и в обработанной воде, что позволит определить оптимальные количества вводимых химических веществ. В биологических средах при определенном значении pH система углекислый газ — бикарбонат обладает определенными буферными свойствами поэтому при контроле процессов биологической обработки воды и осадков необходимо определение щелочности. [c.29]

В случае анализа пятикомпонентной системы сначала из щелочного раствора (pH = 9-ь 10) экстрагируются в хлороформ все комплексы металлов N1, Ре, Си, Мп, 2п с 1-(2-пиридилазо)-2-нафтолом (экстракт 1). Обрабатывая часть органической фазы буферным раствором с тем же значением pH, но с добавкой сульфида натрия (экстракт 2) и измеряя оптическую плотность экстракта 1 относительно экстракта 2, можно определить содержание меди (при Я = 580 нм). Затем часть хлороформного экстракта, не содержащего меди, промывают буферным раствором с pH — 3-ь3,5 (экстракт 3). При этом из органической фазы реэкстрагируются комплексы цинка и марганца. Содержание цинка и марганца рассчитывают по результатам измерения оптической плотности экстракта 2 относительно экстракта 3 никель и железо, оставшиеся в экстракте 3, определяют по измерениям [c.191]

При дальнейшем повышении pH равновесие реакции 2 смещается влево и зеленая флуоресценция постепенно сменяется голубой, связанной с протеканием реакции 1 в обратном направлении. Количественный анализ системы приводит к величине рК возбужденного состояния, равной 10,6, что хорошо согласуется со значением, полученным из различия между двумя спектрами флюоресценции. В простой интерпретации предполагается, что реакция 2 протекает значительно быстрее реакции, обратной первой, т. е. что кислотная и основная формы возбужденного состояния находятся в равновесии. Зто довольно редкий случай, так как время жизни возбужденных состояний очень мало (порядка 10 с), и более детальный анализ системы дает информацию о скорости быстрого процесса переноса протона. Если задачей исследования является определение р/С, то эти процессы могут быть ускорены применением соответствующих буферных растворов. [c.133]

Для разделения низкомолекулярных соединений, экстрагированных разбавленной кислотой из подзолистой почвы горизонта Б, предложен ряд методов [15]. Разделение проводили осаждением после добавления сначала раствора солей двухвалентного свинца или избытка двухвалентного бария, после этого — избытка двухвалентной меди и затем избытка двухвалентного свинца. Ионы металлов удаляли из экстрактов, пропуская их через колонку, заполненную насадкой дауэкс 50. Дальнейший анализ проводили на колонке с целлюлозой. Для разделения на бумаге этих соединений было испытано большое количество элюентов, в том числе нейтральных, кислотных, основных и буферных. В ряде экспериментов бумагу предварительно пропитывали буфером. Оптимальными составами элюентов оказались смесь метилэтилкетон— ацетон — уксусная кислота — вода [16] и системы на основе смеси изопропанол — вода, которые подкисляли уксусной кислотой или подщелачивали аммиачной водой или буфером. Содержание изопропанола колебалось от 40 до 60%. Для соединений с большой молекулярной массой и более темной окраской следует применять растворители с большим содержанием воды. Основные, кислотные и буферные элюенты разделяют смеси на более компактные хроматографические зоны по сравнению с нейтральными элюентами. Проявление хроматограмм лучше всего проводить, облучая их УФ-светом. Изучение хроматограмм показывает, что в каждой из описанных методик часть соединений остается полностью или частично неразделенными [15]. Первая элюируемая из колонки фракция и соединения, в последнюю очередь выпадающие в осадок при добавлении ионов металлов, имеют самую светлую окраску, характеризуются максимальными значениями Rf и дают наиболее характерные реакции с реактивами, которыми опрыскивают хроматограмму для ее проявления. Так, фракция, элюируемая из [c.305]

В качественном и количественном анализе буферные системы используют тогда, когда необходилю поддерживать постоянное значение pH среды. Например, при комплексонометрическом определении катионов некоторых металлов (магния кальция Са , свинца и др.) применяют аммиачную буферную смесь. [c.140]

Для создания определенного pH и поддержания на необходимом уровне готовят соответствующий буферный раствор. Если это возможно, то буферный раствор подбирают таким образом, чтобы его функциональная группа была похожа на функциональную группу образца. Так, ацетатный буферный раствор приемлем для анализа карбоновых кислот, фосфатный — для люирования нуклеотидов. Большое значение имеет чистота буферного раствора, так как он не должен детектироваться выбранным детектором, что особенно важно при работе в режиме градиентного элюирования. Чистота буферного раствора зависит от фирм-производителей, и даже разные партии одной фирмы могут различаться по составу. Каждая новая партия буферного раствора тестируется двумя холостыми хроматографическими опытами перед использованием. Второй опыт показывает, существуют ли вещества, отложившиеся в колонке в процессе регенерации или в течение последних стадий предыдущего градиента. Хотя большинство разделений проводят в водных буферных растворах, иногда добавляют органический растворитель (метанол, этанол) в количестве 3-10% для повышения селективности и улучшения растворимости образца. При этом концентрация растворителя не должна быть велика, чтобы не выдать осаждения буферной соли, о чем будет свидетельствовать появление течи в системе и увеличение сопротивления в колонке. [c.38]

Анализ аминокислот белковых гидролизатов, физиологических жидкостей и биологических экстрактов проводят на колонке длиной 133 см в одной системе буферных растворов [61-Элюирование ведут в плавном градиенте концентраций и значений pH, которые определяются составом исходных буферных растворов (табл. 32.1) и способом построения градиента в девятикамерном смесителе Varigrad (рис. 32.3). Для построения градиента используют два буферных раствора цитрата натрия [c.347]

Ход анализа. Измерения проводят на рН-метре ЛПУ-01. Э. д. с. электродной системы фиксируют после установления значения потенциала, не изменяющегося в течение 5 мин. Скорость установления потенциала фторидного электрода в растворах с концентрацией нонов фтора >0,019 г/л составляет 1—2 мии. В разбавленных растворах время установления потенциала 5—10 лиги. Все измерения проводят при 20 2° С и непрерывном перемешивании. С течением времени (примерно один месяц)фторидная функция электрода падает. Для ее возобновления необходимо периодически (—2 раза в месяц) помещать его в концентрированный по фтор-иону раствор (>0,1 г/л). Для проведения анализа 20 мл анализируемого раствора, нейтрализованного метилоранжем до pH = 4 8, вносят в полиэтиленовую термостатируемую ячейку и добавляют 20 мл буферного раствора фона (б,5М NaNOg и 0,5М уксусноацетатный буфер pH 6,0). Ячейку устанавливают на магнитную мешалку, погружают в раствор электроды. После установления потенциала отсчитывают значения э. д. с. [c.468]

Лленадо и Речнр.ц [22] использовали в своей автоматической установке для анализа глюкозы в качестве катализатора ионы молибдата вместо пероксидазы. Они изучали функции проточного 1 -селективного электрода, применяя метод кинетики с фиксированным временем . Авторы исследовали и указали оптимальные значения параметров, определяющих работу системы, таких, как pH, тип и концентрация буферного раствора, время и температура выдерживания смеси в термостате для полного протекания реакции, количество фермента, которое определяет сигнал электрода. Поток раствора, содержащего глюкозу, смешивался с другими потоками (воздуха или кислорода, энзима, иодида и катализатора) и происходила реакция при постоянной температуре. Через определенное время реакция (XI.1) прекращалась при добавлении сильной кислоты (0,25 М НСЮ4), которая приводила к завершению и реакцию (XI.7). Поток исследуемого раствора затем освобождался от пузырьков газа и пропускался через камеру с проточным Г-селективным электродом, посредством которого определялось содержание иодида в образце. [c.329]

Интенсивное исследование реакций в буферном газе со слабыми столкновениями позволяет более детально сравнивать получаемые результаты с описанной выше теорией это удобно сделать, сравнивая рассчитанные и экспериментальные значения р в широком интервале условий. Эффективности столкновений могут быть рассчитаны и измерены в любой части области перехода, но легче всего использовать область второго порядка [6, 23]. Из детальных расчетов следует, что р изменяется с изменением относительных концентраций реагента и буферного газа. Предельные значения в области второго порядка (индекс О ) обозначаются как Ро(°°) и Ро(0), где оо и О относятся соответственно к бесконечно разбавленному и чистому реагенту. Более того, предсказываемое изменение с разбавлением таково, что можно было бы различать разные модели вероятностей перехода при достаточно точных экспериментах. Однако имеющиеся экспериментальные данные не позволяют сделать этого. Примером такого анализа является работа Лина и Рабиновича [27] по изомеризации метилизонитрила с использованием в качестве буферных газов гелия, этана и пентена-1. Для гелия данные лучше всего интерпретировались в рамках экспоненциальной модели, а для этана и пентена — в рамках модели ступенчатого возбуждения и дезактивации. Значения (А > [24] равны 1,2 ккал/моль для гелия и более 6 ккал/моль для пентена последнее значение приближается к случаю сильных столкновений. Кроме того, было измерено изменение с температурой в системе с гелием, которое качественно согласуется с теорией [28]. [c.334]

Одна из главных проблем определения Са в присутствии Мд состоит в отсутствии до сих пор простого индикатора на Са для визуальных определений, функционирующего при таких значениях pH, когда Mg еще остается в растворе. Рингбом [58(4)] разрешил это затруднение, применив косвенную индикацию точки эквивалентности с помощью системы 2п—ГЭДТА—цинкон. В растворе устанавливают pH = 9,5—10 с помощью буферного раствора, содержащего 25 г буры, 2,5 г МН4С1 и 5,7 г МаОН в 1 уг. В чистых растворах получаются очень резкие переходы окраски и правильные значения содержания Са. Но для этого необходимо, чтобы, во-первых, концентрация аммония соблюдалась очень точно и, во-вторых, отношение Са 2п равнялось приблизительно 10 выполнение этих оптимальных условий при практическом проведении анализов, к сожалению, не всегда возможно. Другой путь описывают Флашка и Ганчоф [61(50)] они титруют раствором ГЭДТА с мурексидом в качестве индикатора при pH около 10. При фотометрической индикации можно определять Са в присутствии более чем 100-кратного избытка М . Кальций в присутствии магния можно также потенциометрнчески титровать раствором ГЭДТА при pH = = 10 [57(10)]. [c.167]

Ни одна из известных систем растворителей не способна полностью разделять обычные аминокислоты, однако многие системы позволяют идентифицировать большое число соединений при совместном их присутствии, что особенно ценно нри проведении некоторых количественных или серийных анализов, для которых двумерная хроматография пригодна в меньшей степени. О систелшх фенол — буферный раствор с pH 12, трет-бута-НОЛ — буферный раствор с pH 8,4 и о повторном хроматографировании в системе и-бутапол — уксусная кислота — ода мы y ie упоминали. Приведем еще некоторые системы, имеющие практическое значение [c.425]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология