Орцин определение

При взаимодействии фенолов с хлороформом в указанных выше условиях образуются аурины разного цвета гваякол, карвакрол, орцин, резорцин дают продукты красного цвета тимол — оранжевого, фенол — желтого нафтолы, салициловая кислота — зеленовато-синего 8-оксихинолин — зеленого цвета. Эти реакции можно применить для фотометрического определения фенолов. [c.308]

Реакция с орцином значительно чувствительнее при 420 тц, чем при 540 тц, но различные гексозы больше различаются между собой при более коротки.х волнах и, если процентное содержание их в стандарте отличается от такового в исследуемо.м растворе, ошибка определения будет больше. При определении при 540 Ш 1 не мешают гексозамин и фукоза, заведомо имеющиеся в глюкопротеинах сыворотки, а также и сиаловая кислота . [c.210]

Методика. 1 мл стандартного раствора или раствора гликонротеина, содержащий 50—500 мкг углеводов, помещают в пробирку с сужением (на уровне 2/3 ее высоты) и прибавляют 8,5 мл охлажденного (4°) реагента орцин — серная кислота. После перемешивания растворов в пробирки вводят стеклянные трубки меньшего диаметра, содержащие немного холодной воды они остаются в сужениях и выполняют роль холодильников. Все пробирки (в том числе и контрольную с водой) нагревают 15 мин при 80°. После охлаждения измеряют оптическую плотность при 505 ммк и вычисляют содержание сахаров в гликопротеине но калибровочной кривой, полученной с помощью стандартных растворов сахаров. Известно, что 200 мкг маннозы при измерении в кювете толщиной 1 см дают при 505 ммк величину около 0,51 тем не менее анализ известных количеств сахаров следует проводить при каждом определении. [c.228]

Определение РНК по реакции с орцином [c.337]

При определении РНК с орцином анализу мешают гексозы, дающие коричневую окраску. Поэтому определение количества РНК в сахарозных градиентах или в растворах, содержащих гексозы или их полимеры, лучше всего проводить с помощью УФ-спектрометрии. [c.340]

Орцин применяется для определения концентраций РНК, хотя в ограниченной степени он реагирует н с ДНК Подробно эта методика описана в разд, 17.5,2. [c.126]

Образование окраски с орцином можно использовать для колориметрического определения. [c.478]

Определение при помощи орцина. В 00 мл бутилового спирта, насыщенного водой, растворяют 0,5 г орцина (3,5-диокситолуола) и 15 г трихлоруксусной кислоты. Реактив можно хранить в холодильнике в течение суток. [c.192]

Первую информацию о наличии высших сахаров, а также обш,ее представление о природе высшего сахара дают качественные цветные реакции в сочетании с данными о хроматографическом поведении. В основе-цветных реакций на высшие моносахариды лежит взаимодействие с минеральными кислотами, которое приводит к образованию производных фурфурола, даюш,их окрашенные соединения с орцином, карбазолом, цистеином, дифениламином. Эти окрашенные соединения имеют максимум погло-ш,ения в ультрафиолетовой части спектра при определенных длинах волн, характерных для данного типа высшего сахара Так, например,, при реакции Дише на гептозы (серная кислота — цистеин) максимум поглош,ения возникаюш,его хромофора находится при 505 ммк, тогда как октулозы образуют хромофор с максимумом поглош,ения при 480 ммк. Высшие кетозы значительно легче, чем альдозы, превраш,аются в производные фурфурола, что используется для идентификации кетоз. Так, при реакции с орцином в присутствии соляной кислоты высшие кетозы дают более интенсивную окраску, чем альдозы, а если соляную кислоту заменить трихлоруксусной, то высшие альдозы не реагируют вообш,е [c.319]

Для обнаружения сиаловых кислот служат характерные цветные реакции с тиобарбитуровой кислотой после предварительного окисления перйодатом (реакция Уоррена) с /г-аминобензальдегидом в присутствии концентрированной соляной кислоты (прямая реакция Эрлиха) и с раствором орцина или резорцина в соляной кислоте (реакция Биаля) Наиболее специфична первая реакция, которая может применяться для обнаружения и количественного определения сиаловых кислот в гидролизатах животных тканей. Она основана на образовании формилпиро-виноградной кислоты, которая и дает окраску с тиобарбитуровой кислотой. [c.337]

Для определения содержания углеводов в исходном и про-гидролизованном остатках с бстрата используют ряд методов с применением концентрированной серной кислоты фенол-серно-кислый, орцин-сернокислый, антроновый [56]. Наиболее часто употребляемый и дающий более стабильные результаты — антроновый метод. Он основан на исчерпывающем гидролизе углеводов в концентрированной кислоте, образованием в условиях реакции производных фурфурола, которые при взаимодействии с антроном дают окрашенный продукт. Метод достаточно чувствителен и позволяет регистрировать до 10 мкг/мл сахаров в пробе. [c.134]

Общим методом детектирования нуклеиновых кислот в элюатах является измерение УФ-поглощения при 260 нм. В тех, случаях, когда нуклеиновые кислоты вследствие включения меченых предшественников содержат радиоактивную метку (Щ, или Р), спектрофотометрия дополняется более чувствительным методом определения радиоактивности. Кроме того, качественный и количественный анализы фракций можно проводить колориметрически, с реактивами, используемыми обычно для определения нуклеиновых кислот в экстрактах из тканей [32] орцина в случае определения РНК [33] и дифениламина в случае определения ДНК [34]. Для этих же целей используют специфические нуклеазы (ДНКаза, РНКаза, РНКаза Н, нуклеаза из Кеигоз-рога, фермент Лемана и т. п.) [c.68]

Фурфурол дает в присутствии соляной или уксусной кислот глубоко окрашенные продукты конденсации с анилином (красный), бензидином (синий), ксилидином (красный), орцином или резорцином (сине-фиолетовый). Последние слунчат для аналитического определения фурфурола, а также и пентоз, из которых он происходит. Фурфурол применяется в больших количествах в качестве селективного растворителя для рафинирования минеральных масел. Он исиользуется также в производстве фенолфурфурольных смол, сходных с бакелитом, и служит сырьем для получения фурилового спирта, тетрагидрофурилового спирта, тетрагидро-фурана и других производных. В результате окисления фурфурола хлоратом калия в водном растворе в присутствии ванадиевых солей образуется фумаровая кислота окисление фурфурола в газовой фазе воздухом пад пятиокисью ванадия приводит к получению малеинового ангидрида. [c.598]

При определении по рибозе в присутствии ДНК орциновый реактив неприменим, так как орцин реагирует с обеими пен-тозами. В этом случае рибоза определяется по Хану и Эйлеру с флороглюцином [10]. [c.43]

Одновременное иодирование других соединений, кроме резорцина, является недостатком и метода Вилларда [6j. В определенных условиях иодируются флороглюцин, пирогаллол, орцин, пирокатехин и гидрохинон. Однако метод Вилларда позволяет определить содержание резорцина в смесях с др тими двухатоль ными фенолами путем выделения основной массы пирокатехина осаждением уксуснокислым свинцом и разложением продуктов иодирования гидрохинона. Поэтому метод Вилларда и был применен нами при анализе смесей, содержащих три двухатомных фенола. [c.227]

Более подробно были изучены полисахариды, входящие в состав комплексов. В кислотных гидролизатах изучаемых фракций проводили количественное определение сахаров. Для определения сахаров использовали водные элюаты, полученные из непроявлен-ных участков хроматограммы, соответствующих определенным сахарам. Гексозы определяли антроновым методом (7], пентозы — с помощью окраски орцином [8], гексозамин — методом Элсона и Моргана [9]. [c.289]

С цняовая реакция — наиболее чувствительный и широко распространенный тест на пентозы. Реакция основана на использовании орцина. Именно эта реакция лежит в основе количественного способа определения РНК. Этим методом определяется рибоза РНК, связанная с пуриновыми основаниями, и поэтому достоверность метода зависит от соотношения пурины—пиримидины, неодинакового для РНК различного происхождения. [c.65]

В настоящее время нет специфических методов качественного и количественного определения дерматансульфата, кроме выделения. Фракционирование цинковых или кальциевых солей спиртом в сочетании с осаждением медной соли вышеописанным способом можно проводить на минимальном количестве материала. При достаточном его количестве идентификация основана на определении оптического вращения. Можно также идентифицировать п-галактозаминовый компонент методом хроматографии на бумаге и ь-идуроновую кислоту по цветной реакции, используя соотношение карбазол/орцин [8]. Количественное определение чистого дерматансульфата основано на количественном определении о-галакто-замипа [91. [c.352]

Известно несколько стандартных колориметрических методов количественного определения углеводов [213], которые могут быть использованы в сочетании с автоматизированными аналитическими системами для детектирования углеводов, вымываемых с различного рода колонок. В первоначальном варианте углеводного анализатора фирмы ТесЬп1соп [74] реализован орцин-сернокислотный метод [73], который включает динамическое смешение реагента с элюатом, поступающим с колонки, при помощи перистальтического многоканального насоса. Поток жидкости, разделенный пузырьками воздуха, проходит затезм через нагревательную баню и после удаления пузырьков воздуха поступает в кювету проточного колориметра (420 нм). Предел обнаружения по сахарам для этой системы составляет около 10 моль. Использование насосов, изготовленных нз кислотоустойчивых материалов и обеспечивающих прецизионную подачу реагента (и, следовательно, низкий уровень шума нулевой линии), позволило отказаться от разделения потока жидкости пузырьками воздуха, что привело к значительному повышению чувствительности автоматизированного орцин-сернокислотного метода детектирования сахаров (в случае пентоз Ы0- ° моль, в случае гексоз З-Ю моль) [214]. Такого рода насосы в настоящее время широко используются в аналитических системах данного типа [80, 98]. [c.37]

Методики Винцлера и Сёренсена и Хаугарда, по-видимому, дают в общем случае удовлетворительные значения содержания нейтральных сахаров в гликопротеинах ). Однако определение с фенолом и серной кислотой после предварительного гидролиза в разбавленной кислоте дает несколько большие значения содержания маннозы в яичном альбумине [99, 100], по сравнению с результатами, полученными без гидролиза [98] или другими методами [7, 101]. Ранее Диксон [54] отметил, что предварительное нагревание с 0,5 н. серной кислотой повышает интенсивность окрашивания при реакции овомукоида с орцином. [c.206]

Полуколичественное определение сахаров, освобождающихся при кислотном гидролизе, можно осуществить методом последовательного разбавления [33], онисанным на стр. 227. Часто проводят количественные определения сахаров, которые разделены предварительно на бумаге и затем элюированы такие методы хорошо известны [87, 116]. Для определений используют реакции восстановления щелочного феррицианида [72] (1—9 мкг) или щелочного раствора медной соли [52] (6—60 мкг). В других колориметрических методах используют о-аминодифенил в ледяной уксусной кислоте [127] (20—500 мкг), фенол и серную кислоту [128] (10—70 мкг) или орцин и серную кислоту (5—40 мкг методика Винцлера, описанная на стр. 228, но количества вещества уменьшены в 10 раз). Недостатком методов, включающих элюирование с бумаги, является высокая оптическая плотность растворов сравнения. [c.208]

Начальные, промежуточные и конечные фракции асимметричного пика при хроматографии на ТЭАЭ-целлюлозе не показали заметного различия в антитрипсиновой активности, содержании нейтральных сахаров (по орцину) и в соотношении маннозы к галактозе [19]. Содержание сиаловой кислоты лри определении методом с дифениламином варьировало от 1% в первых л до 2% в последних фракциях, но было одинаковым (около 0,5%) при определении прямым методом Эрлиха (см. том 1, гл. 8). Выделение овомукоида [c.26]

Определение обш его количества нейтральных сахаров в овомукоиде обработкой гликопротеина орцином или антроном в присутствии высококонцентрированной минеральной кислоты обычно дает приблизительно 8—10%. Однако при определении свободных гексоз в кислом гидролизате овомукоида получали значительно меньшую величину (например, 7% [37] 5,7% [38] 5,7% [21]). Очень маловероятно, что величины, полученные при применении орцина или антрона, при исследовании овальбумина являются завышенными. Если приведенная выше величина верна для овомукоида, расхождение может быть обусловлено потерей нейтрального сахара даже при сравнительно мягком кислотном гидролизе гликопротеина. Такая потеря может быть результатом разрушения выделенного сахара или, что более вероятно, захвата нейтральных сахаров дезацетилированпыми гексо-заминами ([38] см. также том 1, гл. 8). При работе с овомукоидом могут иметь место ошибки последнего типа, что объясняется сравнительно высоким отношением в его молекуле количества гексозаминов к гексозам (около [c.31]

К недостаткам метризамида относятся следующие. Ультрафиолетовое облучение его (и даже дневной свет), а та1сже нагревание выше 55° ведут к частичному освобождению йода. Растворы метризамида нельзя автоклавировать их стерилизуют фильтрованием. Метризамид сильно поглощает в ультрафиолетовой. области спектра (Яи с=242 нм), в том числе при 260 и 280 нм, но не мешает окраске биополимеров, например нуклеиновых кислот, -бромистым этидием. Для сцинтилляторов на основе диоксана и -нафталина метризамид является очень сильным тушителем, а для тритон-толуольных — умеренным (падение эффективности счета до 20%) Определение РНК с орцином, ДНК с дифениламином и белка по методу Лоури нельзя проводить в присутствии метризамида — его следует удалить ультрафильтрацией, [c.207]

Некоторые из методов определения пентозы основаны на высвобождении фурфурола после нагревания с НС1 (разд. 2.2.6.3). Фурфурол дает красное окрашивание с ацетатом анилина или желтое окрашивание с л-бромфенилгидрази-ном. Рибоза дает характерную окраску после реакции с орцином в соответствующих условиях (табл. 2.1). [c.213]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология