Моносахариды хроматографическое определени

Определение легко- и трудногидролизуемых полисахаридов в древесине и другом растительном сырье основано на реакциях их полного гидролиза с последующим нахождением общего количества образовавшихся моносахаридов. Для определения в гидролизатах содержания отдельных моносахаридов и уроновых кислот используют главным образом хроматографические методы. Легко- и трудногидролизуемые полисахариды разделяют, используя различные условия гидролиза для определения выхода моносахаридов устанавливают концентрацию редуцирующих веществ (РВ) в гидролизатах [30]. [c.297]

Как и при сульфитной варке, гемицеллюлозы древесины хвойных пород переходят в раствор с некоторым опережением по сравнению с растворением лигнина, а при использовании древесины лиственных пород значительное растворение гемицеллюлоз начинается лишь после извлечения из растительной ткани основной массы лигнина. Степень полимеризации переходящих в раствор олигосахаридов определяется в первую очередь их природой. В табл. 7.2 приведены данные, полученные при хроматографическом определении моносахаридов в щелоках, отобранных в начальной стадии варки, когда растворилось менее 40 % массы древесины смеси хвойных и лиственных пород. Табличные данные представляют собой отношение концентрации моносахаридов после проведения инверсии щелоков к их содержанию в исходных щелоках. [c.211]

Для обнаружения уроновых кислот используют хроматографические и электрофоретические методы На электрофореграммах в щелочной среде уроновые кислоты идут к аноду, что позволяет отличать их от всех других моносахаридов. Имеется ряд количественных методов определения содержания уроновых кислот в смеси. Одни из них основаны на измерении количества двуокиси углерода, выделяющейся при нагревании с сильными кислотами, в других используются цветные реакции уроновых кислот с карбазолом нафторезорцином или о-аминофе-нолом . [c.309]

Разделение смесей моносахаридов на компоненты представляет весьма сложную задачу вследствие близости многих свойств этих соединений, в первую очередь растворимости. Отдельные успехи были ранее достигнуты главным образом при выделении ряда моносахаридов в виде характерных производных, получение которых одновременно использовалось и для полуколичественного определения (см., например, ). В настоящее время проблема разделения моносахаридов в значительной степени решена благодаря широкому внедрению хроматографических методов, позволяющих быстро и эффективно анализировать сложные смеси сахаров, располагая микроколичествами вещества, и при необходимости проводить препаративное разделение смесей в крупном масштабе. [c.410]

В основу количественного определения сахаров положены те же реакции, что и для их качественного обнаружения . Классические методы анализа использовали, главным образом, восстанавливающие свойства моносахаридов и сводились к весовому или объемному определению продуктов реакции, тогда как новейшие методы являются в большинстве случаев колориметрическими. Для определения содержания данного моносахарида в смеси с другими сахарами используют, как правило, предварительное хроматографическое разделение ряд методов количественного анализа может быть с известной осторожностью применен для определения суммы сахаров в исследуемой смеси. [c.414]

Для установления структуры полисахаридов ГМЦ применяются в комплексе химические, биохимические, хроматографические и спектроскопические методы. Исторически первыми среди них получили развитие химические методы деструкции (кислотный гидролиз, окисление моносахаридов с расщеплением гликольных группировок) или модификации полисахаридов с последующей деградацией (метилирование). Для определения продуктов деградации широко используются хроматографические методы (бумажная, тонкослойная, газожидкостная хроматография) большую роль в последние годы играет масс-спектроскопия, которая применяется не только для идентификации производных, полученных при анализе полисахаридов методом метилирования, но и для анализа олигосахаридов непосредственно после нх перевода в летучие производные. И, наконец, в арсенал современных методов прочно вошла спектроскопия С-ЯМР — недеструктивный метод анализа структуры, позволяющий решить задачу установления строения полисахарида с минимальным использованием традиционных химических методов либо без них. Рассмотрим кратко характеристику этих методов. [c.58]

Полный гидролиз полисахарида проводят для установления природы и соотношения составляющих его моносахаридных остатков. Качественный анализ гидролизата в настоящее время неизменно выполняют с помощью распределительной хроматографии на бумаге, что требует лишь микроколичеств сахаров и вместе с тем дает возможность идентифицировать присутствующие нейтральные, основные и кислые моносахариды. По хроматографии углеводов существует обширная литература [91, 97, 127, 131, 162]. Было испытано множество систем растворителей и много обнаруживающих реагентов как специфических, так и неспецифических, и составлены таблицы относительных скоростей движения сахаров на бумажных хроматограммах [131]. Для окончательной идентификации определенного сахара не достаточно одного только хроматографического анализа. [c.303]

Все методы анализа сырья с целью установления состава, строения и свойств полисахаридов основаны на определении отдельных компонентов, содержащихся в гидролизатах полисахаридов, полученных при различных условиях гидролиза. Наиболее полную информацию о составе моносахаридов, олигосахаридов и уроновых кислот, присутствующих в гидролизатах, получают тогда, когда делают анализ хроматографическим методом на бумаге. Этим методом сахара и другие вещества разделяют и выделяют из смеси с различными веществами в том виде в каком они присутствуют в гидролизатах без изменений, а затем определяют их количество. При анализе смесей углеводов ч помощью газожидкостной хроматографии сахара необходимо сначала превратить в летучие производные, а затем провести их разделение и определение. Без потерь перевести сахара в летучие производные невозможно, поэтому результаты анализов менее точны, но время, затрачиваемое на анализ этим методом, значительно меньше [14]. [c.24]

В другой серии исследований [6] анализ древесины сосны по годовым кольцам проводился более подробно, с количественным хроматографическим определением всех моносахаридов, входящих в состав легко- и трудногидролизуемых гемицеллюлоз. Исследованию подвергалась древесина сосны (Pinus silvestris) в возрасте 111 лет при высоте 26 м. Пробы отбирались на поперечном срезе, сделанном на высоте 1,3 лг от основания. Диаметр ствола в этом месте был равен 45 см без коры. Полученные при этом данные приведены в табл. 62. [c.304]

Первую информацию о наличии высших сахаров, а также обш,ее представление о природе высшего сахара дают качественные цветные реакции в сочетании с данными о хроматографическом поведении. В основе-цветных реакций на высшие моносахариды лежит взаимодействие с минеральными кислотами, которое приводит к образованию производных фурфурола, даюш,их окрашенные соединения с орцином, карбазолом, цистеином, дифениламином. Эти окрашенные соединения имеют максимум погло-ш,ения в ультрафиолетовой части спектра при определенных длинах волн, характерных для данного типа высшего сахара Так, например,, при реакции Дише на гептозы (серная кислота — цистеин) максимум поглош,ения возникаюш,его хромофора находится при 505 ммк, тогда как октулозы образуют хромофор с максимумом поглош,ения при 480 ммк. Высшие кетозы значительно легче, чем альдозы, превраш,аются в производные фурфурола, что используется для идентификации кетоз. Так, при реакции с орцином в присутствии соляной кислоты высшие кетозы дают более интенсивную окраску, чем альдозы, а если соляную кислоту заменить трихлоруксусной, то высшие альдозы не реагируют вообш,е [c.319]

Хроматографические методы исследования позволяют сделать 1редположение о строении моносахарида пли его производного с большей дли меньшей степенью вероятности, но для полной идентификации в строгом смысле этого слова необходимо выделение вещества в индивидуальном остоянии. Известно много примеров, когда разные вещества имеют сходные величины Рр, так что совпадение Рр еще не является доказательством идентичности сравниваемых соединений. Строение исследуемого вещества может быть окончательно установлено только после выделения гго в индивидуальном состоянии и определения ряда физико-химических характеристик (температура плавления, удельное вращение, инфракрас- [c.412]

В химии моносахаридов благодаря широкому развитию хроматографических методов многие вопросы выделения свелись в сущности лишь к. техническим задачам той или иной степени сложности, хотя в отдельных, случаях решение этих задач вызывает определенные трудности. Так, например, недостаточно эффективны имеющиеся в настоящее время методьс разделения таких соединений, как изомерные метилированные сахара. С широким введением в практику химии углеводов аналитической и препаративной газо-жидкостной хроматографии большинство стоящих сейчас проблем такого рода, по-видимому, найдет удовлетворительное разрешение для соединений небольшого молекулярного веса. [c.626]

Разумное сочетание уже известных в настоящее время физико-химических и химических методов позволяет в большинстве случаев устанавливать структуру моносахаридов и их производных с использованием очень малого количества вещества. Наиболее узким местом является отсутствие достаточно разработанных микро- и субмикрометодов определения абсолютной конфигурации моносахарида без его препаративного выделения. Применяемые для этой цели биохимические методы, основанные на избирательной ферментативной реакции одного из антиподов, недостаточно универсальны. При их использовании необходима новая ферментная система для каждой новой пары антиподов, и, кроме того, они вообще непригодны для большинства производных моносахаридов. Поэтому существенное значение имела бы разработка более общих методов, позволяющих относить моносахариды к О- или .-ряду, например хроматографических мето- [c.627]

Для хроматографического разделения смеси летучих производных моносахаридов используют ДИП. В соответствии с % на хроматограмме в определенном порядке появляются пики индивидуальных соединений. Порядок выхода при хроматографическом разделении ТМС-производных зависит от жидкой фазы. Его устанавливают предварительно для данной фазы с использованием модельных ТМС-производных чистых моносахаридов по их времени удерживания. В качестве примера на рисунке 35 приведена хроматограмма модельной смеси, разделенной на колонке с метилхлорфенилсиликоновым маслом в качестве жидкой фазы. [c.139]

После разделения метилированные моносахариды идентифицируют путем определения их физических констант и характерных кристаллических производных. О природе исходного моносахарида можно также судить но данным хроматографического исследования веществ, полученных после деметилирования иодистым водородом или треххлористым бором [4]. С другой стороны, частично метилированный моносахарид можно полностью метилировать действием окиси серебра и иодистого метила в К,К-диметилформ-амиде [128], а полученный продукт исследовать затем методом хазо-жидкостной распределительной хроматографии. [c.332]

Определение содержания легко- и трудногидролизуемых полисахаридов в древесине основано на реакциях их гидролитического распада до моносахаридов. Легкогидролизуемые и трудногидролизуемые полисахариды разделяют, применяя различные условия гидролиза. Количество образовавшихся моносахаридов определяют по их редуцирующей (восстанавливающей) способности методом Бертрана или эбулиостатическим методом. Полученные результаты пересчитывают в количество полисахаридов и выражают в процентах от абсолютно сухой древесины. Иногда гидролизаты анализируют на содержание отдельных сахаров хроматографическим методом. [c.133]

В результате тщательного изучения окислительных свойств растворов нитрата серебра в ацетоне, содержащих аммиак в эквимолярных или меньших количествах [84], был разработан модифицированный реагент Толленса, пригодный для радиохимических определений полумикроколичеств моносахаридов [85]. Растворы AgNOa в ацетоне, содержащие менее чем эквимолярные количества аммиака, обеспечивают большую чувствительность анализа, чем растворы, содержащие эквимолярное или большие количества этого основания. Наиболее эффективным окислителем оказался реагент, в котором отношение AgNOs к аммиачному AgNOa составляет 1 2. При использовании таких наиболее чувствительных реагентов хроматограммы несколько раз быстро погружают в раствор реагента и высушивают после каждого погружения. После последнего погружения, не дожидаясь высыхания хроматограммы, пятна проявляют во влажной атмосфере при температуре 50 °С. Для удаления избытка реагента хроматограммы в течение непродолжительного времени обрабатывают 10%-ным раствором ЫагЗгОз и затем несколько раз промывают водой. Высокая равномерность отложения металлического серебра и использование эффективного проявляющего реагента приводят к повышению чувствительности метода и точности результатов анализа. Используя этот метод, глюкозу можно определить в количествах 0,008—0,06 мкМ, Для соединений, которые определяли этим методом, средние ошибки при измерении в линейной области находились в интервале dz 1,1—4,2%. Чувствительность в значительной степени з-ависит от тщательности приготовления хроматографических растворителей. [c.115]

Представлявшие ранее несомненную ценность методы адсорбционной хроматографии на колонках, заполненных смесью угля и целита [2], а также методы распределительной хроматографии на порошкообразной целлюлозе [3] в настоящее время утратили свое значение в качестве аналитических процедур, но сохранили определенную важность для препаративных целей. В качестве примера можно привести предварительное фракционирование на колонке (58X5 см), заполненной смесью угля и целита (в соотношении 2 3), олигосахаридов, образующихся при частичном гидролизе 50 г ксилана березы [4]. Ступенчатое элюирование водными растворами этанола с увеличивающейся концентрацией последнего дает в результате четырех хроматографических разделений (в каждом используется 25% гидро-лизата) обогащенные фракции, из которых далее при помощи других методов легко выделить олигосахариды вплоть до моносахарида (см. разд. 7.2.3). [c.6]