кажущийся седиментация

Однако, как известно, в этом распределении часть ширины кривой обусловливается диффузией, поэтому д (з) обозначается, как кажущееся распределение, по константам седиментации. Из уравнения (36) следует, что диффузионное уширение растет пропорционально уТ , а уширение за счет полидисперсности — пропорционально /. Поэтому при экстраполяции на бесконечное время диффузионное уширение отстает от уширения за счет полидисперсности и в пределе становится исчезающе малым. Таким образом, при экстраполяции уширения экспериментальной кривой на бесконечное время остается уширение только за счет полидисперсности. [c.153]

Вообще при отсутствии постороннего электролита кажущийся молекулярный вес полимера с зарядом Z будет MI Z -f 1) [105, 125]. Это соотношение справедливо для измерений как седиментационного равновесия, так и скорости седиментации и диффузии. Даже при большой ионной силе раствора поведение заряженных молекул отнюдь не является таким простым, как это предполагают [105, 180]. [c.57]

Изучалась седиментация хаотически разветвленных полимеров [50]. Было показано, что коэффициент седиментации в соответствии с изложенными теоретическими результатами увеличивается с ростом разветвленности. Поэтому при определении ММР разветвленных образцов отсутствие данных о разветвленности макромолекул может приводить к существенным искажениям ММР (кажущемуся увеличению высокомолекулярного хвоста ММР). [c.279]

В случае полидисперсных образцов (с которыми обычно и приходится иметь дело на практике) и ГПХ, и скоростная седиментация дают распределения кажущихся молекулярных масс Р (Мг) и С (М ). Для линейных образцов обе эти функции в пределах погрешностей экспериментов совпадают с истинным молекулярномассовым распределением Ц (М), а для разветвленных, есте-стве)1но, различаются. Можно показать, что для полимеров, степень разветвленности которых монотонно возрастает с молекулярной массой, справедливость неравенства [c.243]

Оценка чистоты. — Шведские химики Сведберг и Тизелиус внесли большой вклад в развитие химии белка разработкой аналитических методов, чрезвычайно удобных для характеристики этих, высокомолекулярных соединений. Метод ультрацентрифугирования Сведберга служит для определения молекулярного веса. При вращении с очень большой скоростью ячейки, содержащей раствор белка, молекулы белка под действием центробежных сил движутся от центра со-скоростью, зависящей от величины молекулярного веса. Специальная оптическая система дает возможность наблюдать и фотографировать ячейку во время центрифугирования. Молекулярный вес может быть, найден либо из определения седиментационного равновесия, либо по-скорости седиментации- Хотя теоретически первый метод точнее, для достижения равновесия требуется длительное время, и поэтому более точные значения получают, исходя из определения скорости седиментации. При применении ультрацентрифуги можно установить также гомогенность молекул (по величине и форме). Тизелиус предложил (1937) электрофоретический метод разделения молекул белка в электрическом поле молекула белка движется со скоростью, определяющейся величиной молекулы, ее формой, количеством и типом ионизированных групп. Материал, кажущийся гомогенным по растворимости, может содержать компоненты, отличающиеся по электрофоретической подвижности. Жестким критерием чистоты является профиль кривой распределения, получаемой при противоточном распределении молекул (Крейг, см. 31.29). [c.674]

Если развертывание макромолекулы белка произошло, для справедливо скорее уравнение (26-42), чем уравнение (26-30). Для w также может быть выведено соответствующее соотношение вместо уравнения (29-32). Если рассчитать по этому уравнению кажущийся радиус развернутой макромолекулы, то получатся результаты, близкие по величине к результатам, найденным из гидродинамических данных . Например, при рН=2 и ионной силе, равной 0,15, из измерений га следует значение радиуса около 42 А, из измерений [т,1—около 43 А, а из из.мерений константы седиментации—около 45 А. Однако использо- [c.639]

Рис. 8-9. Распределения по молекулярным весам, полученные методом скорости седиментации для полистирола S 105 (получен анионной полимеризацией) и полистирола В 8 (подучен термической полимеризацией). Пунктирная линия представ- ляет кривую кажущегося распределения по молекулярным весам, построенную с учетом поправки па давление и концентрацию (без поправки на диффузию) по одной кривой седиментации после ультрацентрифугирования 0,30 г/100 мл раствора полистирола S 105 в циклогексане при 59 780 об мин и 35° в течение 4520 сек.

Надежность применения способа анализа в ультрацентрифуге методом скоростной седиментации для оценки распределений по молекулярным весам, очевидно, зависит в определенной степени от природы использованного растворителя. Указанный метод должен приводить к истинному распределению по молекулярным весам независимо от природы примененного растворителя, если кажущиеся кривые распределения, полученные при конечных концентрациях, надежно экстраполируются на бесконечное разбавление [1] тем не менее оказывается, что при концентрациях, обычно используемых для большинства измерений в ультрацентрифуге, наиболее высокую степень разделения молекул по размерам можно получить в идеальном [c.235]

Рис. VI. 10. Схематическое изображение процедуры преобразования кажущихся интегральных ММР разветвленного полимера, определенных с помощью автоматического проточного вискозиметра [Ч т]( т1)]> эксклюзионной хроматографии (Ме) и скоростной седиментации (Л1 ), в истинное ММР 7 (М).

При работе с концентрированными растворами зависимость коэффициента седиментации от концентрации проявляется в еще большей степени. Процесс искусственного обострения границ можно сбалансировать с процессом расширения за счет диффузии [36, 37]. При этом если рассчитанная отсюда кажущаяся величина коэффициента диффузии окажется больше, чем получаемая в опытах со свободной диффузией при той же концентрации, то это может свидетельствовать о гетерогенности препарата. [c.83]

А. Кажущееся содержание полимера, определенное по площади диффузного пика. Б- Изменение коэффициентов седиментации, отвечающих двум пикам, по измерениям положений центров тяжести пиков [12]. [c.163]

Отсюда следует, что минимальная кажущаяся скорость седиментации частицы, движущейся между любыми двумя уровнями, составляет [c.190]

Химическое осаждение и процессы, протекающие в изучаемой системе, могут быть иллюстрированы диаграммой кажущийся объем осадка — состав осадка. Под кажущимся объемом осадка предложено понимать его объем, определяемый в процессе седиментации по линии видимой границы между прозрачным раствором и сильно гидратированным осадком. В зависимости от способа проведения эксперимента диаграмма может характеризовать или кинетику седиментации суспензии, или состав осадка, или процесс его старения. [c.14]

Объем гидратированного осадка зависит как от степени его кристалличности , так и от параметров процесса химического осаждения, а также от соотношения между реагирующими компонентами системы. Методика измерения кажущегося объема осадков заключается в следующем. В градуированных цилиндрах проводят одновременно серию операций химического осаждения с заданными различными соотношениями между реагирующими компонентами системы. Процесс осаждения в цилиндрах осуществляют в течение одинакового времени и затем наблюдают за седиментацией осадков в цилиндрах через определенные промежутки времени. По полученным данным строят кривые изменения объема осадков в изучаемой системе. [c.14]

Определение сопротивления спеченных карбидов поперечному излому Определение кажущейся плотности металлических порошков Определение распределения частиц порошков тугоплавких металлов методом седиментации Технические требования бронзовым подшипникам, маслом [c.22]

Величину d /dt можно определить экспериментально. Если бы мы не знали заранее о существовании смеси, мы связали бы эту величину с кажущимся коэффициентом седиментации [c.245]

Константа Михаэлиса для субстрата Коэффициент, связывающий вязкость с длиной цепи Коэффициент, связывающий седиментацию с длиной цепи Кажущаяся константа равновесия для перехода от полностью нативного к полностью денатурированному состоянию К- Макроскопическая константа равновесия. Константа равновесия для об- [c.521]

Средние значения содержания взвешенных форм ртути (за исключением пробы из р. Ярлы-Амры) при фильтровании с предварительным отделением "грубых" взвесей и без этой операции составляет 0.12 и 0.29 мкг/л соответственно. Следовательно, на долю "грубых" взвесей приходится чуть более 50 % взвешенных форм ртути. Однако эта величина явно завышена, так как пробы перед фильтрованием хранились в течение 1-2 дней, что могло привести к укрупнению взвесей за счет их седиментации и дополнительной сорбции растворенной ртути. Определенный вклад вносят, вероятно, описанные выше эффекты уменьшения размера пор фильтров за счет их засорения и происходящее за счет этого "кажущееся" увеличение содержания взвешенных форм ртути. [c.55]

Сигнер и Эгли предполагали однородное распределение растворенного вещества в растворе. Однако кажущийся диаметр полистирола в бутаноне ( плохой растворитель) больше, чем в толуоле ( хороший растворитель), как это было найдено из данных по седиментации в концентрированных растворах [221 ]. Это значит, что в плохих растворителях полимерные сегменты стремятся в среднем располагаться ближе друг к другу (образование роев) и что однородное распределение сегментов может существовать только в энергетически выгодных растворителях. [c.56]

В случае линейных полимеров уравнение ( 1.50) обычно используют для корреляции значений константы седиментации и молекуд 1рной массы. Если же полимер разветвлен, из уравнения (VI.50) можно получить только кажущуюся молекулярную массу [c.242]

Полученные таким способом кажущиеся распределения оказываются истинными распределениями по коэффициентам седиментации лишь в том случае, если степень уширения границы седиментации не зависит от давления, диф-4>узии или концентрации растворенного вещества. Подобные зависимости все же имеют место при ультрацентрифугировании большинства полимеров в органических растворителях, поэтому для получения точного распределения ло молекулярным весам необходимо учитывать эти влияния. При используемых обычно в методе скоростной седиментации силовых полях ультрацентрифуги возникает большое гидростатическое давление, изменяющееся от 1 атм на уровне мениска до нескольких сотен атмосфер в придонном слое кюветы. От величины давления зависят плотность и вязкость раствора, а также удельный парциальный объем молекул растворенного вещества, поэтому характер седиментации, осуществляющейся в таком градиенте давления, меняется в зависимости от расстояния до мениска. Рассмотренное влияние давления наиболее выражено при использовании относительно сжимаемых органических полимеров и растворителей, обычно применяемых в химии полимеров. Проблема влияния давления на седиментацию, впервые рассмотренная Мосиманом и Сигнером [39], недавно вновь привлекла внимание исследователей. С помощью математической интерпретации качественного рассмотрения проблемы Отом и Деро [40] Фужита [41] использовал уравнение Ламма и показал, что линейная зависимость седиментации от давления приводит к выран ению [c.231]

Рис. 8-7. Кажущиеся распределения по коэффициентам седиментации при увеличении времени ультрацентрифугирования 0,30 г/100 мл раствора полистирола S 105 в циклогексане при 59 780 обЫин и 35° кривые приведены к давлению 1 атм. Пунктирная линия показывает кривую, полученную с учетом поправки на диффузию.

Зависимость кривых кажущегося распределения по коэффициентам седиментации от времени обусловлена влиянием диффузии на степень уширения границы седиментации. Подобное влияние диффузии можно свести до минимума путем экстраполяции к бесконечному интервалу времени, поскольку уширение границы, обусловленное различием величин , пропорционально времени в первой степени, а уширение в результате диффузии пропорционально времени в степени V2 Если влияние диффузии не слишком велико, расчет такой поправки можно проводить по методу Болдуина и Вильямса [26]. Согласно данным этих авторов, кажущиеся функции распределения g ( ) при данных значениях 8, полученные из нескольких кривых, откладывают на графике в зависимости от н и экстраполируют графически на бесконечно большой момент времени. Исправленные с учетом диффузии частотные функции распределения, полученные для нескольких коэффициентов седиментации, описывают распределение по коэффициентам седиментации в отсутствие влияния диффузии. Такая кривая, построенная с учетом поправок, представлена на рис. 8-7. Хотя Гостинг [45] и показал, что существует область значений времени, в которой (а°) линейно зависит от И1, эту область редко удается достигнуть при исследованиях методом скоростной седиментации вследствие ограниченной длины кюветы. Все же Болдуин [36] показал, что область примерно линейной зависимости, которой можно воспользоваться [c.232]

И1. Что касается пропорций, то хроматографии уделено несколько больше внимания, чем скоростной седиментации и диффузии. Это связано с двумя обстоятельствами. Во-первых, седиментация и диффузия старше , и о них написано гораздо больше. [Из этого, впрочем, не следует, что теория применений этих методов завершена со скоростной седиментацией дело обстоит почти так же, как ко времени выхода в свет знаменитой-монографии Сведберга и Педерсена Ультрацентрифуга (1939 г.) метод относительно прост в реализации, но теория его и сейчас весьма далека от завершения это будет достаточно наглядно показано в I части и особенно П1 этой книги.] Во-вторых, мы хотели преодолеть некий психологический барьер, на который нам (и не только нам) нередко приходилось наталкиваться при дискуссиях с исследователями, привыкшими иметь дело с однозначными приборами типа ультрацентрифуги, диффузометров, гонионефелометров и т. п. Этим исследователям представляется, что в хроматографию а priori заложена избыточная неопределенность и субъективность , ибо сорбент (который, к тому же, надо готовить, а потом заполнять им колонки — отсюда субъективность разные операторы могут по-разному проделать эту процедуру), строго говоря, не подходит под привычные определения элементов прибора. Однако эта неопределенность лишь кажущаяся многими методами (например, ртутной порометрией в случае макропористых стекол — см. стр. 181) сорбент может быть охарактеризован по своей топологии количественно настолько полно, что он превращается как бы в зеркало , отражающее ММР, конформации в разных растворителях, композиционную неоднородность и т. п. Действительно, если воспользоваться простейшим примером — колонкой или набором колонок, одинаково заполненных макропористым стеклянным сорбентом с известным распределением размеров пор однозначно предопределяет распределение полимера с заданным (или подлежащим определению) ММР между порами и проточной (жидкой) фазой. [c.5]

Метод использования x yi" не зависит от формы седиментационной кривой и от типа зависимости 5 (С). При использовании абсциссы максимума седиментационной кривой вместо (или х)) получается [31 ] кажущийся коэффициент седиментации 5, отличающийся от истинного 5 5 = 5 4- (D/ o xo). Эта поправка может быть существенной для низкомолекулярных и широких образцов. Если седиментационная кривая симметрична относительно максимума х, т. е. x ,ax = х), использование лгщах или приводит К совпздающим (в пределах погрешности определения) результатам. Поэтому на практике очень часто для таких кривых в качестве х используют Определяемый коэффициент седиментации соответствует концентрации в области плато, а не локальной концентрации при х = (х ) / . [c.18]

Следующей ступенью седиментационного анализа является построение кривой молекулярно-весового распределения, которое удобно проводить по методу Гостинга - С помощью этого метода можно пересчитать седиментационные диаграммы в дифференциальные кривые распределения (х). В основе метода Гостин-га лежит предположение о независимости смещений вследствие полидисперсности и диффузии. Так как расширение градиентной кривой за счет диффузии пропорционально з за счет полидисперсности— пропорционально /, то, как показал Гостинг, пренебрегая расширением экспериментальной кривой в результате диффузии, по константам седиментации можно вычислить кажущуюся функцию распределения (5) [c.126]

Медленный пик при всех концентрациях белка, превышающих 1,75 мг/мл, обладает постоянной площадью. Быстрый пик также можно наблюдать только при этих концентрациях. Зависимости от концентрации белка кажущегося количества полимера и коэффициентов седиментации М и Р, которые определены Джилбертом по положениям вершин пиков, приведены на фиг. 35. Очевидно, такое аномальное изменение площадей пиков при изменении концентрации, их асимметрия и необычная [c.161]

Кажущийся мол. вес гетерогенного препарага зависит от того, каким методом он определен. Любой из группы методов, основанных на оценке числа молекул (понижение точки замерзания, измерение осмотического давления, методы титрования и т. д.), дает так называемый среднечисленный мол. вес Мц. Другая группа методов, основанных на учете размеров и формы молекул (методы диффузии, седиментации, двойного лучепре- [c.391]

Вопрос о возможном композиционном распределении в природных полимерах представляет чрезвычайный интерес. Для его решения Суеока предложил [59] комбинировать результаты центрифугирования в градиенте плотности с исследованием скоростей седиментации. Болдвин и Шутер [60] разработали оригинальный метод центрифугирования в градиенте плотности с предварительно образованным градиентом. Метод будет рассмотрен ниже. И наконец, будет показано, как из результатов центрифугирования в градиенте плотности может быть получена информация о флуктуациях молекулярного веса и кажущегося парциального удельного объема. [c.438]

Различия в размерах, форме и заряде белковых молекул, а также в степени их гидратации приводят к различиям в скоростях седиментации, диффузии и электрофореза белков и к различиям в растворимости их в разных растворителях. Измерение любого из этих свойств вскрывает наличие нескольких компонентов в большинстве белковых смесей и может быть использовано также для определения степени разделения смеси на каждой стадии фракционирования и для установления кажущейся гомоген-рости конечных продуктов. [c.23]

Рис. 88. Функция кажущегося распределения констант седиментации при двух концентрациях декстрана и функция распределения, полученная экстраполяцией экспериментальных данных до сг = 0.

При получении функции распределения констант седиментации для системы, коэффициент трения в которой зависит от концентрации, кажущиеся распределения для ряда конечных концентраций растворенного вещества должны экстраполироваться до = 0. Соответствующая процедура получения такого результата была описана Вильямсом и Сондерсом [685]. Рис. 88, взятый из работы этих авторов, представляет наглядную иллюстрацию постепенного расширения кажущегося распределения констант седиментации по мере постепенного разбавления раствора. Работа Кантоу [680], посвященная исследованию растворов полистирола в циклогексане, дает основание предполагать, что концентрационная зависимость коэффициента трения (выявленная по изменению В или [c.238]

Очень чувствительным тестом на монодисперсность является разработанная недавно методика [43, 44], в какой-то мере аналогичная электрофоретической методике Хоха [25]. Для системы, в которой происходит как обострение границы, вызванное изменением коэффициента седиментации с концентрацией, так и диффузия, можно найти условия, при которых оба эти эффекта равны и противоположны. В этих условиях граница принимает такую форму, что все точки с определенной концентрацией фракций имеют одинаковые коэффициенты седиментации. Это может происходить только при одной определенной скорости ротора. Из-за радиального разбавления приходится несколько усложнить измерения, чтобы установить, что описанные выше условия достигнуты из предварительных экспериментов необходимо знать как коэффициент диффузии, так и истинную зависимость от с. Максимальная высота кривой градиента концентрации, расстояние от оси вращения и угловая скорость ротора при этих условиях могут быть связаны с О — кажущимся коэффициентом диффузии. О учитывает факторы рас-1иирения границы как за счет диффузии, так и за счет нолидиснерсности. Если полидисперсность отсутствует, равно — коэффициенту диф- [c.49]

Уравнение, предложенное Фудзита [45], описывает форму границы раздела монодисперсного раствора в ультрацентрифуге в том случае, когда коэффициент диффузии не зависит от концентрации, а коэффициент седиментации находится от нее в линейной зависимости. Это уравнение можно использовать и, оно действительно было применено [46] для определения примерно аналогичным способом кажущегося коэффициента диффузии для сравнения с наблюдаемым коэффициентом. Это также является чувствительным критерием монодисперсности, хотя следует иметь в виду, что используемое уравнение выведено в предположении, что изменения коэффициента седиментации в зависимости от концентрации малы. [c.50]

I и с. 88. Функция кажущегося распределеиия констант седиментации при двух концентрациях докстрана и функция распределения, полученная экстраполяцией эксиериментальпых данных до = 0. [c.238]

Приведенные уравнения позволяют теоретически определить ошибки пробоотбора, возникающие при нарушении принципа изокинетичности, т.е. при несоблюдении условия w = Несмотря на кажущуюся техническую простоту обеспечения этого условия (для этого нужно, чтобы статическое давление внутри зонда и вне его было одинаковым), на практике всегда получают экспериментальные значения концентрации дисперсной фазы с той или иной погрешностью, так как реальные аэрозоли полидисперсны В этом случае необходимо определять коэффициент аспирации для каждой фракции частиц отдельно и подсчитывать суммарную пробу в соответствии со скоростью седиментации отдельных фракций. [c.119]

Предположение о существовании на мембране эритроцитов структурно упорядоченного комплекса гликолитических ферментов было высказано еще в 1965 г. D. Е. Green et al. Позднее с использованием метода седиментации на препарате миогена было обнаружено увеличение кажущихся молекулярных масс альдола-зы, лактатдегидрогеназы, пируваткиназы и фосфофруктокиназы (F. М. larke, С. J. Masters, 1973), Полученные результаты подтвердили наличие полиферментных комплексов гликолитических компонентов при физиологических условиях pH и ионной силы. [c.83]

Гуаниловые нуклеотиды и фторид также изменяют состояние Л -белка. Показано, что после освобождения от ГДФ и связывания ГТФ у фракции Л -белка из эритроцитов голубя, почти полностью свободной от каталитического белка, коэффициент седиментации уменьшался от 5,5 до 3,4 5 [28]. В лаборатории Джилмана наблюдали уменьшение массы Л -белка, солюбилизированного из мембран клеток 549, от 130 000 до 90000 дальтон при активации ГТФ Y 5 или фторидом и восстановление прежней массы после удаления эффекторов [17]. Этот феномен был показан и при измерении гидродинамических характеристик высокогомогенного Л -белка. После активации эффекторами молекулярная масса Л -белка из печени кролика уменьшалась от 70 000 до 50 ООО дальтон [14], а Л -белка из эритроцитов индюка — от 81000 до 50 000 дальтон [15]. Эти факты могут указывать либо на диссоциацию Л -белка на субъединицы в результате действия лигандов-эффекторов, либо на конформационный переход с аномальным изменением в результате этого кажущейся молекулярной массы. Предварительные данные об ингибирующей функции, выполняемой в Л -белке полипептидом с массой 35000 дальтон [33], могут свидетельствовать в пользу первого предположения они дали исследователям возможность сделать вывод о том, что активация полипептида с массой 45 000 дальтон происходит после отделения от нее ингибирующего полипептида с массой 35 ООО дальтон. [c.106]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология