Разрешение в ГХ с программированием температуры

На одной колонке ТФА-производные природных аминокислот можно разделить только с помощью программирования температуры [16, 38, 131]. Наряду с такими хорошо известными параметрами, как скорость нагрева, поток газа, тип и количество жидкой фазы, важную роль играет и длина колонки [16]. Ее чрезмерное увеличение приводит к худшему разрешению очевидно, в основе подобных эф ктов лежат структурные различия аминокислотных производных. В табл. 15 указаны условия для наилучшего разделения. Как видно из хроматограммы фиг. 74, даже в специально подобранных условиях полное разделение достигается не во всех случаях. Тем не менее такой анализ вполне удовлетворителен для качественного обнаружения аминокислот. Ярким примером эффективности данного метода послужила качественная идентификация всех аминокислот, входящих в состав рибонуклеазы [16]. [c.331]

При работе с программированием температуры в течение опыта происходит постепенное равномерное повышение температуры. Преимущество программирования температуры заключается в том, что растворенные вещества проходят по колонке при температуре, оптимальной для их разделения, если соответствующим образом выбраны начальная температура и скорость нагрева. В результате продолжительность анализа значительно снижается, достигается хорошее разрешение, а высота последних пиков возрастает. [c.55]

Программирование температуры обычно заключается в увеличении температуры колонки во время разделения (см., например, [17]). В результате величина к различных пиков, как и при градиентной подаче растворителя, снижается во время разделения. Главная проблема в программировании температуры —снижение разрешения в результате изменения вязкости растворителя, вызываемого изменением температуры растворителя. Программирование температуры редко используется в ЖХ из-за пониженного разрешения и ограниченной возможности обеспечить разделение образцов широкого диапазона. В адсорбционной хроматографии после разделения обычно необходимо проводить регенерацию колонки, так как при программировании температуры невозможно обеспечить постоянное содержание адсорбированной воды (см. гл. 6). [c.119]

Практически повышение температуры для уменьшения времени разделения можно реализовать в режиме программирования температуры. Действительно, при увеличении скорости подъема температуры уменьшается длительность процесса разделения, но одновременно уменьшается разрешение хроматографических пиков. Такой способ уменьшения про- [c.10]

НЫХ достоинств которой состоит в ТОМ, что свойства применяемых неподвижных фаз воспроизвести легче. Один из примеров разделения углеводородов с помощью ГЖХ показан на рис. 16.5 [20]. Очевидно, что, хотя достигнутое разрешение хроматографических пиков можно считать вполне удовлетворительным, тем не менее продолжительность анализа, составляющая более четырех часов, явно неприемлема. Впрочем, со времени публикации этой работы газовая хроматография достигла значительных успехов (в первую очередь это связано с интенсивным введением режима программирования температуры), поэтому вполне вероятно, что длительность разделения на такого рода неподвижных фазах можно существенно сократить. В связи с этим не исключено, что ГЖХ как метод анализа углеводородных газов окажется предпочтительнее газо-твердофазной хроматографии и постепенно вытеснит последнюю. [c.382]

Разрешение при температурном программировании рассчитывают с помощью уравнения (24-30) без изменений. Уравнение (24-35) не имеет практического аналога при условиях температурного программирования, поскольку относительное удерживание в этом случае не имеет прямого значения, а коэффициент разделения имеет значение только при определенной температуре. Тем не [c.530]

Содержащиеся э воде примеси обычно сначала экстрагируют подходящим растворителем, например метиленхлоридом, хлороформом, сероуглеродом и т. д., и затем анализируют. С этой целью можно использовать капиллярную хроматографию. Например, фенолы разделяют в капиллярной колонке из нержавеющей стали длиной 20 м и диаметром 0,2 мм. Неподвижной фазой служит трикрезилфосфат (95 мг) с ортофосфор-ной кислотой (5 мг) в ацетоне (1,0 мл). Перед проведением анализа колонку выдерживают 3 ч при 120 °С. При этой температуре получают симметричные и полностью разрешенные пики следующих соединений (перечислены в. порядке элюирования) г фенол, 2-метилфенол, 2,6-диметилфенол, 4-метилфенол, 2,4-ди-метилфенол, 2,5-диметилфенол, 2,3-диметилфенол, 3,5-диметил-фенол, 3,4-диметилфенол. На колонке 50 мХ0,25 мм с неподвижной фазой ОС 200 при программированном подъеме температуры от —8 до 130°С получены 160 пиков углеводородов, из которых 116 идентифицированы масс-спектрометрически. Объем введенного образца газа составлял 1 мл. [c.243]

Теория всех этих методов рассматривается Снайдером [23], здесь же мы обсудим только некоторые практические соображения. При любом программируемом анализе разрешение зон веществ всегда хуже, чем при непрограммируемом разделении. Однако в первом случае сокращается и оптимизируется длительность анализа. Поскольку разрешение зон веществ часто больше, чем это необходимо, особенно при разделении проб с очень большими значениями к, сокращение длительности разделения вполне допустимо. Кроме того, при программировании пробы элюируются в виде острых и концентрированных зон. При этом увеличивается чувствительность определения позднее выходящих пиков. С практической точки зрения целесообразно только такое программирование, которое позволяет получать острые пики элюируемых соединений, т. е. имеет смысл программировать увеличение скорости элюента, увеличение температуры, уменьшение активности или удельной поверхности неподвижной фазы и увеличение элюирующей силы элюента. Использовать эти методы программирования в жидкостной хроматографии при высоком давлении достаточно сложно, однако возможности разделения и область применения метода при этом увеличиваются. [c.135]

Рис. 3-5. Влияние загрязнений в устройстве ввода пробы (из работы [15], с разрешения издательства Dr. А. Huethig). Условия эксперимента колонка 20 х 0,31 мм, НФ SE-52, rf/0,14 мкм. Температура испарителя 30°С. Ввод пробы при 40°С, программирование температуры от 40 до 80" С со скоростью 2,5 град/мин. Газ-носитель водород (2,4 мл/мин), коэффициент деления потока 1 30.

Рис. 3—9. Анализ мономера стирола (с разрешения Р. Миллера, корпорация Huntsman hemi al). Условия эксперимента кварцевая капиллярная колонка 20 м х 0,25 мм, НФ DB Wax, df мкм программирование температуры от 40 до 150°С со скоростью 2 град/мин Газ-носитель водород (35 см/с) объем пробы 1 мкм, коэффициент Коэффициент деления потока 1 170.

Рис. 3—19. Холодное улавливание в опытах с программированием температуры (из работы [4], с разрешения издательства Dr. А. Huethig Publishers). Колонка 13м х 0,30 мм, НФ SE-52, df 0,5 мкм программирование температуры от 50 до 180 С со скоростью 5 град/мин.

Несмотря на то что систематическое исследование прямого ввода не проводилось, в ходе эксплуатации были сформулированы Рекомендации но его применению. Следует отметить, что широкие капиллярные колонки можно подсоединять к любому устройству ввода с делителем нотока, без делителя нотока, устройству неносредственного ввода пробы в колонку или устройству с программированием температуры испарения. Если широкие капиллярные колонки эксилуатирзтотся в режиме высокого разрешения (т.е. нри объемных скоростях газа-носителя, близких к оптимальным), то к ним применимы те же рекомендации по эксплуатации, что и к узким капиллярным колонкам. [c.59]

Рис. 3—43. Пример многократного ввода пробы (из работы [63] с разрешения издательства Dr. А. Huethig Publishers). Многократный ввод пробы позволяет концентрировать компоненты пробы выше i без каких-либо искажений. Условия эксперимента кварцевая капиллярная колонка длиной 25 м (Ultra 2) давление газа-носителя (Не) 7 кНа температурный режим термостата 40°С (0,5 мин), подъем температуры от 40 до 250 С со скоростью 50 град/мин, затем до 330°С со скоростью 15 град/мин, 330°С (15 мин) количество вводов пробы до нагрева камеры испарения 8, нагрев испарителя после 8-го ввода программирование температуры испарителя от 10 до 330°С со скоростью 13 град/мин продолжительность удаления растворителя 30 с, пламенно-ионизационный детектор (300°С) коэффициент деления потока Х 30 (30 с), затем резким без деления потока.

Рис. 3-44. Анализ каменноугольной смолы, осуществляемый при вводе пробы с программированием температуры испарителя в режиме без деления (а) и с делением (б) потока (из работы [66] с разрешения издательства Elsevier), а — холодный ввод пробы без деления поток . Анализ веществ с очень низкой летучестью — полициклических ароматических углеводородов в бензоле (раствор содержит низкие концентрации определяемых веществ). Объем пробы 0,4 мкл кварцевая капиллярная колонка длиной 20 м, НФ метилполисилоксаи, OV-1. Температура колонки 25°С (1 мин), резкий подъем до 80 С, затем программирование температуры до 320 С со скоростью 8 град/мин температура узла ввода резкий подъем с 35 до 280°С. Газ-носитель водород (4 кНа) продолжительность анализа 35 мин

Таблица 3—3. Оценка количественного онределения нри холодном вводе пробы непосредственно в колонку (А) и холодном вводе пробы с делением потока в программированием температуры испарителя (Б). Определение относительных (нормализованных) площадей пиков алканов Сю — С92 (из работы [17] с разрешения издательства Elsevier, Амстердам)

Справедливость этого выражения для процесса е программированием температуры сомнительна, так как коэффициент извлечения и коэффициенты диффузии газа и жидкости зависят от температуры. Этот вопрос был разрешен Хабгудом и Харрисом [c.360]

Ввод пробы с программированием температуры, осуществляемый в режиме вьщувания растворителя, позволяет дозировать пробы достаточно больших объемов и обеспечивает чувствительность на уровне, типичном для сочетания капиллярной газовой хроматографии и масс-спектрометрии высокого разрешения. Онлайновая система ЖХ/КГХ обеспечит экоаналитика многими возможностями для подготовки и обогащения проб, содержащих следовые количества целевых компонентов [163, 176]. [c.148]

Преимущества программирования температуры капиллярной колонки понятны. Но на практике прогряхммированное изменение температуры наполненных колонок не было широко распространено, поскольку колебания расхода газа и реагирования детектора вызывали смещение нулевой линии. Иногда оказывается затруднительным быстрое охлаждение довольно большой массы металла (колонки, блоков нагревателя и т. д.). Однако после разрешения всех этих проблем бы- ло достигнуто хорошее разделение смесей компонентов с широким интервалом кипения . [c.128]

Зомзели с сотрудниками [44] использовали в качестве летучих производных К-ТФА-бутиловые эфиры. На одной колонке была разделена смесь 19 аминокислот, наиболее часто встречающихся в гидролизатах пептидов и протеинов. Программирование температуры [45] позволяет осуществить весь процесс разделения при хроматографировании на 2-метровой колонке с 1 % неопентил-гликольсукцината (в качестве стационарного растворителя) примерно за 40—50 мин. При этом наблюдается хорошее разрешение всех аминокислот за исключением лишь аспарагиновой кислоты и фенилаланина, которые разделяются только частично. [c.265]

Разрешение в ГХ, с программированием температуры улучшается с понижением программируемой скорости гт1Р), а также с понижением начальной температуры (Т",). Гиддингс [6] предложил, что при программируемом анализе время удерживания первого пика должно превышать мертвое время колонки по крайней мере в пять раз. Поскольку температура мало влияет на селективность в ГХ (см. разд. З.П), оптимизация программы по температуре может рассматриваться как оптимизация по разрешению, а не по селективности. [c.320]

Эти обстоятельства и обусловили крайне благоприятную основу для создания объединенных приборов — хромато-масс-спектромет-ров, включающих газовый хроматограф (рассчитанный на работу как с насадочными, так и с капиллярными колонками, в изотермическом режиме и с программированием температуры) и масс-спектрометр (как правило, прибор с возможностью быстрого сканирования и получения масс-спектров среднего разрешения в диапазоне до 2000 ед. т/е). Для удобства обработки и интерпретации результатов к современным хромато-масс-спектрометрам прилагается комплекс сервисных устройств, включающих специализированную ЭВМ с блоками внешней памяти, где хранятся тысячи известных масс-спектров, записанных на магнитную ленту, и ряд других вспомогательных приспособлений. [c.175]

Рис. 3—44. Анализ каменноугольной смолы, осуществляемый при вводе пробы с программированием температуры испарителя в режиме без деления (а) и с делением (б) потока (из работы [66] с разрешения издательства Elsevier).

Метод рутинного анализа бензиновых фракций, основанный на использовании длинных (от 50 м и длиннее) капиллярных колонок высокого разрешения, был впервые предложен Сандерсом и Мейнардом [21], а затем получил дальнейшее развитие в работах Виттемора [22], Адларда и др. [23] и Шульца и др. [24]. Все эти исследователи в качестве неподвижной фазы выбрали сквалан, поскольку на этой неподвижной фазе достигается наилучшее разделение низкокипящих углеводородов, а также в силу наличия обширной информации об идентификации компонентов сложных смесей, анализируемых на колонках со скваланом. Однако сквалан обладает и серьезным недостатком на этой фазе нельзя работать при температуре выше 100 °С и как следствие в дополнение к программированию температуры приходится прибегать к программированию скорости потока газа-носителя. [c.384]

В отличие от жидкостной хроматографии, где жидкость практически несжимаема, элюентом в данном виде хроматографии является жидкость, находящаяся в условиях выше критических (по Т и АР). Поэтому программирование давления дает тот же эффект, что и изменение температуры [185]. На рис. 111.30 показана хроматограмма олигостирола с Л1 = 2000. Олигостиролы делятся на индивидуальные полимергомологи вплоть до 49-мера. Такое высокое разрешение обусловлено тем, что в критической жидкости значения и веществ низки, а поэтому хроматография происходит в условиях, более близких к равновесным. Флюидная хроматография объединяет в себе преимущества как газовой, так и жидкостной хроматографии [186, с. 65]. [c.93]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология