Температура колонки градиент

Рис. 59. Графики программирования температуры колонки при различных градиентах температуры (Г — температура, т — время)

Названные параметры (объемы, времена и расстояния) удерживания могут быть использованы для качественной характеристики соединения лишь при проведении анализа в строго заданных условиях на одном и том же приборе. Для сопоставления получаемых значений удерживаемых объемов с литературными данными или полученными на другом приборе или в иных условиях (для той же неподвижной фазы и температуры колонки) необходимо вводить ряд поправок на объем газа-носителя (мертвый объем), не принимающий участия в вымывании компонентов пробы, на градиент давления газа-носителя по слою неподвижной фазы и на количество неподвижной фазы. [c.164]

В хроматермографии необходимо обеспечить изменение температуры колонки во времени и по ее длине. Это достигается либо применением движущихся печей с определенным градиентом температуры, либо специальным ступенчатым обогревом самой колонки с шаговым искателем. Изменение температурного поля при этом может быть как линейным, так и нелинейным. Возможно применение устройств для программированного изменения температуры. [c.171]

Отгоняемые элементы или соединения Поверхность колонки Градиент температур, С [c.106]

Для того чтобы создать многократно повторяющиеся вдоль колонки акты осаждения—растворения, используют градиент температуры. Колонка помещается в водяную рубашку, в верхней части прибора находится нагреватель, а в нижней — термостатированный сосуд с температурой, слегка выше комнатной (27—30°). Перепад температуры вдоль колонки составляет обычно 20—25°, градиент оказывается линейным. В верхней части элюирующая жидкость извлекает какую-то часть полимера из пленки, покрывающей насадку. Жидкость извлекает легче низкомолекулярную часть, но захватывает, как указывалось выше, и часть тяжелых фракций. Попадая дальше в более холодные области колонки, жидкость оказывается пересыщенной полимером, в первую очередь его наиболее высокомолекулярными компонентами. Они выпадают из раствора и покрывают пленкой насадку, бывшую до начала опыта пустой. По мере продвижения жидкости вниз этот процесс продолжается — тяжелые компоненты стремятся осесть на насадке, легкие — вымываются и устремляются к выходу. Не останавливаясь детально на теории хроматографического разделения (она описана во многих руководствах), подчеркнем главное значение этого процесса — разделение смеси на исключительно четкие фракции вследствие осуществления многоступенчатого процесса растворения — осаждения. В этом отношении хроматографическая колонка напоминает ректификационную, в которой четкое разделение смеси достигается благодаря многократному повторению актов испарения и конденсации. После фракционирования полимера на колонке получается ряд узких фракций. Для каждой из них тем или иным методом (чаще всего по вязкости) измеряется средний молекулярный вес [c.120]

На этой диаграмме А, В и С — три различных элюента. Их можно смешивать в любой пропорции, получая смесь, элюирующая способность которой меняется в результате изменения концентрации, ионной силы, pH, полярности и т. д. Это основной принцип градиентного элюирования. В смесительном узле осуществляется контроль за концентрацией (или другими перечисленными выше характеристиками) подвижной жидкой фазы, поступающей в колонку. Регулятор давления обеспечивает создание высокого давления на входе в колонку или снижение давления на выходе из нее. Благодаря контролю за температурой работа колонки ведется в изотермическом режиме или в режиме запрограммированного изменения температуры, предусматривающего изменение температуры колонки во времени или создание различного типа температурных градиентов вдоль колонки. [c.61]

Удельный удерживаемый объем. соответствует объему газа нри 0° С, необходимому для элюирования половины вещества из колонки, содержащей один грамм жидкой фазы и не имеющей градиента давления или свободного объема газа. Во всех случаях температура колонки, к которой применима приводимая величина Уг, должна быть точно указана. [c.93]

Указанные выше недостатки, присущие работе колонок в изотермическом режиме, в значительной степени устраняются методами, основанными на программировании температуры колонки. Различают два основных метода распределения температуры по колонке. В хроматермографии поддерживается постоянный температурный градиент по длине колонки, так что все точки колонки по ее длине имеют разную температуру. Высшая температура с помощью градиентной печи поддерживается на входе в колонку, низшая — на выходе из нее. Вещества, входящие в колонку с потоком газа-носителя, распределяются в соответствии с температурным градиентом, наименее летучие располагаются близ входа в колонку, а более летучие — ближе к выходу из колонки. С приближением равновесия полосы вещества становятся практически неподвижными. Передвижение градиентной печи по направлению к выходу из колонки вызывает движение полос со скоростью [c.339]

Нужно внести температурную поправку в величину скорости и, так как она непрерывно меняется при наличии в колонке градиента температуры, согласно [c.343]

В основе разделения нуклеиновых кислот на гидроксиапатите лежит взаимодействие между отрицательно заряженными фосфатными группами полинуклеотида и положительно заряженными ионами кальция в кристаллах сорбента [60]. Следовательно, элюирование нуклеиновых кислот с гидроксиапатита можно проводить либо в градиенте концентрации фосфат-иона, либо увеличением температуры колонки при постоянном значении pH и концентрации солей в элюенте [61]. При ступенчатом элюировании иногда наблюдается появление артефактов (рис. 38.3), вероятно, из-за неправильно подобранных колонок или вследствие нарушения оптимального соотношения ДНК — сорбент [62]. [c.72]

ДНК можно иммобилизовать на целлюлозе и использовать в качестве сорбента для выделения комплементарных ей нитей ДНК и РНК [116]. Адсорбцию в этом случае проводят в условиях, способствующих ренатурации ДНК. Элюирование ведут в убывающем градиенте ионной силы и при повышении температуры колонки. [c.80]

Элюент градиент вода—метанол (5%/мин). Температура колонки 70 °С. Давление 84 атм. Скорость подачи 2 мл/мин. Анализ УФ-спектрофотометрия. [c.176]

Для создания линейного градиента температуры колонка помещается в алюминиевый блок. Верхняя часть блока высотой [c.86]

Гиддингс и Смит [9] определили пять различных типов перегрузки. Перегрузка, обусловленная конденсацией, происходит из-за быстрого испарения пробы во входном устройстве хроматографа и последующей ее конденсации в начальной части колонки. При этом увеличивается эффективная толщина слоя жидкости и создается сопротивление течению газа. Перегрузку этого типа можно уменьшить, если сделать давление пара образца ниже его парциального давления при температуре колонки. Перегрузка второго типа обсуждалась выше и связана со слишком большим объемом пробы, вводимой в колонку. В случае проб больших величин и хорошо сконструированных систем ввода перегрузка этого типа является доминирующей. Перегрузка, связанная с нелинейностью изотермы распределения, эквивалентна описанным выше эффектам, обусловленным высокой концентрацией вещества в неподвижной фазе. В системах с малой растворимостью и высокими коэффициентами активности перегрузка этого типа проявляется сильнее, и для того, чтобы уменьшить ее, требуются более разбавленные растворы. Для перегрузки этого типа характерны хроматографические пики с растянутыми передними фронтами. Перегрузке этого типа противодействует энтальпийная перегрузка. Она связана с теплотой растворения, которая выделяется при растворении вещества в жидкой фазе и вызывает повышение температуры. Эта теплота рассеивается в материале насадки колонки. Несмотря на то что этот эффект частично компенсирует перегрузку предыдущего типа, искажения формы пиков все же происходят. Наконец, существует значительный градиент температуры в направлении [c.89]

Как уже говорилось в предыдущем разделе, при программировании температуры широких и коротких колонок возникают большие градиенты температуры от оси колонки к ее стенкам. Эти градиенты способствуют расширению хроматографической полосы и уменьшению эффективности разделения. В случае сложных смесей необходимость программирования температуры колонки ощущается особенно остро. С другой стороны, в этом случае для раз- [c.146]

Влияние повышения температуры на время удерживания в отсутствие подвижного температурного поля и градиента температуры вдоль колонки также исследовали Жуховицкий и Туркельтауб (1951, 1953, 1954, 1961), однако только после работы Даль Ногаре и Беннета (1958) хроматография с программированием температуры получила признание . В противоположность вариантам хроматермографии, которые следует рассматривать как новые методы, в случае газовой хроматографии с программированием температуры речь идет лишь о модифицированном проявительном методе, прп котором по определенной программе температура колонки в продолжение анализа непрерывно повышается. При этом каждый компонент достигает конца колонки при благоприятной для него температуре, так что сглаживания концентрационного профиля высококипящих компонентов (рис. 4) [c.19]

Хроматографирование на КМ-сефадексе и перекристаллизация. Суспензию кристаллов центрифугируют 20 мин при 40 ООО осадок растворяют в минимальном объеме холодной воды, диализуют, как указано выше, и наносят на колонку КМ-сефадекса С-50 (60x4,5 см) уравновешенного 10 мМ фосфатным буфером, pH 6,5. Триозофосфатизомеразу элюируют при комнатной температуре линейным градиентом хлористого натрия (от О до 0,15 М) в буфере, используя для этого 800 мл 10 мМ фосфатного буфера, pH 6,5, и 800 мл 0,15 М хлористого натрия в том же буфере. Обычно после пропускания 300 мл элюирующего раствора фермент начинает сходить с колонки и собирается примерно в 200 мл. [c.252]

Хроматограф Du Pont, колонка 4,6 250 мм, Zorbax ODS, 5 мкм, подвижная фаза - градиент от 20 до 40 % МеОН в 1,5 % АсОН за 60 мип, температура колонки 45 С, скорость элюирования 1 мл/мип. УФ-детектор 275 им (А) и 375 им (Б). [c.141]

Стальная колонка (длина 0.6 м. внутренний диаметр 1.5 мм) содержит 5% неопеитилгли-косукцниата на газохроме Р (80—100 меш) скорость потока Аг 18 мл/мин. Начало разделения при 65°С линейное программирование температуры с градиентом 1.5 град/мни, через 20 мин — 2,0 град/мин, через 42,4 мин — 4 град/мни вплоть до 200°С, после чего режим делают изотермическим. [c.334]

Колонка длиной 1,8 м с 20% ЗЕ 30 на диатопорте И скорость потока Не 62 мл/мин. Сначала режим изометрический (150°С) после выхода Сю — метилового эфира каприновой кислоты — линейное программирование температуры с градиентом 5 град/мин. 1 — Вал [c.342]

Колонка длиной 1,8 м с 10% ЗЕ 30 на диатопорте Р скорость потока Не 62 мл/мнн. Сначала режим изотермический (150°С) после выхода Сю — метилового эфира каприновой кислоты (стандарт) — линейное программирование температуры с градиентом 5 град/мии. / — Ала 2—Гли 3 —Лей 4—Асп 5 — Лей-Гли 5 — Ала-Про 7 — Тир 8 — Про-Лей [c.344]

Колонка длиной 1,8 м с 10% SE 30 иа диатопорте Р скорость потока Не 66 мл/мии. Сначала режим изотермический (150°С) после выхода Сю — метилового эфира каприно-вой кислоты — лииейиое программирование температуры с градиентом 5 1 адУмии, I — Глу 2 —Сер-Вал 3 — Иле-Вал 4—Сер-Лей 5 —Тир 5 —Вал-Глу 7 —Глу-Лей 8 — Лей-Глу 9 —Лей-Тир /О — Глу-Глу ia — метиловый эфир стеариновой кислоты [c.345]

Для очистки веществ с температурой плавления ниже —40 С в качестве хладоагента может быть использован лспд-кий азот. В этом случае колонку помещают в металлическую гильзу, опущенную в сосуд Дьюара с жидким азотом, причем верхняя часть ее выступает из сосуда Дьюара. Таким образо.м, нижняя часть гильзы охлаждается, а верхняя нагревается от окружающего воздуха, вследствие чего создается градиент температур. Перемещение градиента температур может быть обеспечено, в частности, путем постепенного выкипания жидкого азота. [c.179]

В работах [102—106] был предложен и развит новый вариант использования термического фактора в газовой хроматографии — хроматермография, применение которой особенно перспективно для анализа нримесей. В хрома-термографии для разделения применяется движущееся вдоль колонки температурное поле, т. е. изменение температуры колонки по длине колонки происходит не мгновенно, а во времени, т. е. не одновременно по всей колонке, как это имеет место в хроматографии с программируемой температурой. В стационарной хроматермографии направления газа-носителя и движения печи совпадают, причем температурный градиент в нечи имеет отрицательное значение, т. е. температура уменьшается в направлении движения печи. Молекулы, которые по каким-либо причинам обгоняют хроматографическую зону, поступают [c.65]

Как было показано, прн применении заполненных колонок в газо-жидкостпой хроматографпи величина пробы колеблется от 0,1 до 1 мпл (глава VI), а для газо-адсорбционной хроматографии с применением градиента температуры — от 10 до 100 мл (глава V). Для капиллярной колонки количество вводимого вещества составляет 0,1 — 1 мкл. Такое ма.яое количество можно ввестх , используя делитель потока, который будет описан нпже. Температура дозатора должна обеспечивать быстрое испарение вводимого вещества и, как правило, должна быть выше температуры колонки и детектора па 50—100° С. [c.287]

В аналитической практике процесс изотермический, следовательно, градиенты температуры отсутствуют, единственным эффектом, связанным с температурой, является влияние температуры колонки на время удерживания. Поэтому пренебрегают изменениями температуры колонки, кроме тех, которые предусмотрены программированием. Тем не менее, в случае конечных концентраций, учитывая, что в хроматографической колонке все фазы имеют малую теплопроводность, вполне вероятно, что термические эффекты, связанные с поглощением и выделением растворенного вещества, вызывают изменения температуры, которыми нельзя пренебречь. Это было проверено теоретически и использовано на практике для детектирования [15, 16]. Однако трудно сказать, от каких параметров зависят изменения температуры, которые не наблюдаются в общедг случае. [c.172]

Газ при переходе из колонки в ловушку резко охлаждается, что часто приводит к образованию аэрозоля (тумана), неконденсирующегося и выходящего из ловушки вместе с газом-носителем. Для осаждения тумана применяют электрическое поле (до 20 кВ), центрифугирование, заполнение ловушки насадкой (в частности, стеклянной ватой, адсорбентом, носителем, пропитанным жидкостью) или растворителем, создание температурного градиента между стенками ловушки и т. д. Полнота выделения фракции зависит не только от конструкции ловушки и температуры хладагента, но также и от летучести вещества, его концентрации в потоке газа-носителя и скорости потока. Так, в ловушке, изображенной на рис. 9.9, при —20 °С эфир не улавливается, циклогексан улавливается на 39%, изооктан — на 44,6% и гранс-декалин — на 88%. Степень улавливания компонента из потока можно повысить путем увеличения его концентрации. В частности, при повышении температуры колонки от 100 до 200 °С степень извлечения транс-яе-калина увеличивается с 47 до 93,1%. Программирование температуры также дает возможность увеличить степень улавливания. В момент выхода выделяемого компонента целесообразно снизить скорость газа-носителя. Например, при резком уменьшении расхода газа-носителя (начальный расход 200 смУмин, конечный — 25 см /мин) декалин улавливается на 97%. [c.261]

Кинетика обмена в ионообменной хроматографии аминокислот и пептидов сильно зависит от температуры. Воспроизводимый контроль температуры колонки требуется для того, чтобы получить воспроизводимые последовательность и время выхода пиков, необходимые для идентификации аминокислот или пептидов и для разделения близких по свойствам соединений. Эти контролируемые условия обычно достигаются путем циркулирования воды из термостата по рубашке колонки. Термостат снабжается контрольным термометром. Емкость термостата, мощность нагрева и скорость подачи воды насосом должны быть достаточными для поддержания температуры в рубашке колонки с точностью 0,5 °С в диапазоне 30—70 °С. Одной из тонкостей программирования температуры является скорость повышения температуры при переходе от одной температуры к другой, как это предписывается многими методиками анализа. В тех случаях, когда по методике для данного прибора требуется смена температуры, которая происходит в течение 20 мин, любой другой температурный градиент может привести к нежелательным результатам. Поэтому неудивительно, что некоторые методики не удается воспроизвести на сходных приборах, если режимы изменения температур не одинаковы. Целесообразно включать градиентное термостатирование в основную кoн tpyкцию анализатора. [c.28]

Поток охлаждающего азота прекращают путем воздействия на соответствующие клапаны, а затем его направляют через нагревательное устройство. Горячий азот протекает по обогатительной колонке от 1 к 2 (см. рис. 49) и быстро охлаждается до температуры колонки вследствие своей низкой теплоемкости. Эта опега-иия с температурным градиентом имеет то же направление что и направление, наблюдавшееся на стадии охлаждения. [c.153]