Альбумин плазмы, выделение

Плазма крови. Общее количество крови у взрослого человека в норме составляет примерно 5 л. Из них на долю плазмы приходится 2,75 л, а на долю эритроцитов —2,22 л. Лейкоциты занимают объем 0 мл, тромбоциты — около 20 мл. Основным компонентом плазмы являются белки. В плазме всего идентифицировано более 70 различных белков. В основе классификации белков лежат их растворимость и методы выделения. Например, если к плазме добавить равный объем насыщенного раствора сульфата аммония, выпадают глобулины. Если затем удалить глобулины и добавить твердый сульфат аммония, выпадают альбумины. Хотя этот метод классификации кажется произвольным, белки, находящиеся в этих фракциях, близки не только по растворимости, но и по функции. [c.438]

Большинство других альбуминов плазмы животного происхождения с трудом поддается очистке или кристаллизации с помощью высаливания. Альбумин сыворотки человека был выделен в кристаллическом состоянии из раствора сернокислого аммония 152]. [c.56]

Скорость выделения протеинов плазмы из печени намного больше скорости их синтеза. Однако в случае альбумина плазмы оказалось, что выделение слишком медленно, и, чтобы устранить вызванную этим ошибку, пришлось пользоваться одновременно уравнениями (IX. 18) [c.231]

Аминокислотный состав этих двух белков также различен [105]. Один из альбуминов, выделенных кристаллизацией из плазмы лошади, имеет в своем составе углевод [30, 31], тогда как другой альбумин, полученный из того же источника [106], и альбумины плазмы человека и быка углевода не содержат [33]. Зангер недавно сообщил, что в инсулине свиньи содержится треонин, хотя в образцах инсулина, полученных из нескольких других источников, он отсутствует [107]. [c.22]

В нормальных физиологических условиях в артериальных отрезках капилляров гидростатическое давление крови преобладает над величиной связывания воды альбуминами плазмы (онкотическим давлением), и жидкость переходит из крови в ткани. В венозных отрезках гидростатическое давление меньше онкотического, и жидкость устремляется из тканей в кровь. Вместе с водой перемещаются и низкомолекулярные соединения. Это способствует поступлению питательных веществ из крови в ткани и продуктов обмена веществ из тканей в кровь последние доставляются током крови к органам выделения (почки, легкие). [c.160]

При скорости протекамия 2 мл/см мин ионная сила сыворотки снижалась до 0,001 и осадок глобулина быстро пропускался через колонну осадок отделялся от этих протеинов при ионной силе 0,001 центрифугированием. Несомненно, что подбором объема ионита, скорости протекания или устройство.м специальных колонн можно добиться разделения глобулинов ионитами. 95—98%-ный выход протеина был получен при промывании ко-лонлы объемом жидкости, равным 10% объема сыворотки для извлечения 10% протеинов, адсорбированных ионитом. Работа с колоннами, видимо, будет иметь ряд преимуществ, заключающихся в легкости получения альбумина из сыворотки и минимальном количестве как ионообменных операций, так и центрифугирований. Электрофоретическим и серологическим испытанием, а также определением растворимости протеинов, выделенных фракционированием на ионитах, не обнаружено потери биологической активности. Фракционирование плазмы ионитами будет особенно применимо в лабораториях госпиталей, так как [c.617]

Время от времени в литературе появляются сообщения о превращениях альбумина в глобулин при воздействии различных реагентов, например смеси этилового спирта с диэтиловым эфиром, гепарина и некоторых других соединений. Само собой разумеется, что речь идет не о подлинном превращении такое превращение было бы невозможно, так как альбумины по своему аминокислотному составу отличаются от глобулинов (см. табл. 1). Речь может идти только о том, что при определенных экспериментальных условиях растворимость альбумина изменяется, в результате чего он по своим физико-химическим свойствам становится похожим на глобулин. Поэтому вполне возможно, что в нативной плазме крови имеется лишь небольшое количество белков и что многие из выделенных белковых фракций образованы путем соединения этих основных белков с липидами, углеводами, друг с другом, а также с некоторыми ионами. [c.178]

Общего правила, выражающего влияние температуры на растворимость белка, нет. Растворимость многих белков растет с повышением температуры. В случае одних белков растворимость увеличивается в разбавленном, а в случае других — в концентрированном растворе соли, а также в водно-спиртовых смесях. К числу белков, очищенных или выделенных в кристаллическом состоянии путем использования различия в растворимости, относятся глобулины семян [32], фосфорилаза мышц [23] и пепсин [14]. В то же время растворимость белка часто резко убывает с повышением температуры, что изображено на рис. 6. Альдолаза мышц [96] и карбокоигемоглобин человека [29] были выделены в кристаллическом состоянии из концентрированных растворов (NH4)2SO4 или фосфатов калия путем повышения температуры насыщенного раствора от 0 до 20°. Указанное явление, невидимому, чаще наблюдается в условиях, при которых происходит высаливание, однако оно не ограничивается этими случаями. Согласно опубликованным данным [9г], сульфат альбумина плазмы и сульфат инсулина обнаруживают отрицательный температурный коэффициент растворимости в воде. [c.49]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

Некоторое представление о сложности состава протеина плазмы и его терапевтической ценности можно получить на основании большого количества протеинов или биологически активных веществ, выделенных из плазмы человека [131 с помощью ионов цинка, свинца и ртути. Из них только альбумин сыворотки, гамма-глобулин и фибриноген имеются в продаже другие, например стабильный раствор протеина плазмы (5РР5), протромбин, церулоплаз-мин, могут найти применение в терапии [431. [c.606]

Действие синтетического трикозапептида на человека исследовали Дановский и сотр. [565] (ср. [1039]). Ежедневное внутримышечное-введение взрослым мужчинам 160 единиц а -АКТГ в желатине в течение 7 дней сопровождается усиленным выделением И-окси-, П-дезокси- и 17-кетостероидов с мочой. Кроме того, наблюдается снижение содержания в плазме калия, суммарного белка, альбумина, кальция и связанного с белком иода. Сравнивая действие синтетического продукта и продажного АКТГ, следует отметить, что сходный эффект вызывается введением 200 единиц последнего. Продажный АКТГ вызывает ги-полипемический эффект, а синтетический продукт, напротив, лишь в очень редких случаях приводит к снижению уровня холестерина и триглицеридов. Различные образцы АКТГ отличались друг от друга при испытании на максимально допустимые дозы инсулина и глюкозы, а синтетический препарат вообще не давал при этом какого-либо заметного и воспроизводимого эффекта. Количественные и качественные различия в поведении различных образцов АКТГ объясняются присутствием примесей других биологически активных соединений, в то время как о[1-23-АкТГ химически однороден. Кроме того, авторы отмечают различия в абсорбционных свойствах и скоростях гидролиза [c.299]

В плазме большая часть эстрогена связана с протеином (р-глобули-ном), образуя соединение, легко расщепляющееся при диализе. Эстроген, содержащийся в наиболее активной фракции, выделенной из плазмы человека, повидимому, представляет собой, главным образом, эстриол. Комплекс может функционировать как средство переноса . При, нейтральном pH эстрадиол в 22 раза лучше растворим вЗ /о ном растворе альбумина, чем в изотоническом растворе соли f-глобулин является менее эффективным диспергирующим агентом . Тестостерон и прогестерон тоже несколько лучше растворимы в растворе протеинов, но. разница не так явно выражена, как у эстрадиола. [c.462]

Молекулярная масса гиалуроновой кислоты, полученной из различных источииков, составляет (2,0—2,8) 10 . Данные светорассеяния показали, что молекула гиалуроновой кислоты образует спираль с радиусом 150—400 нм. Ее комплексы с протеинами, выделенные ультрацентрифугированием или электродиализом, имеют молекулярную массу порядка (8—10)-10 . Эти комплексы сильно гидратированы. Содержание протеина в комплексе достигает 20—30%. Он может быть отделен от полисахарида на ДЭАЭ-сефадексе или разрушением полисахарида гиалуронидазой. По иммунологическому и электрофоретическому поведению протеиновый компонент комплекса близок к а-глобулинам и содержит, по-в идимому, примеси р- и у-глобулинов, однако он отличается от глобулинов плазмы крови. О комплексах гиалуроновой кислоты с альбуминами см. [70]. [c.88]

Сывороточным альбуминам принадлежит роль в транспорте малорастворимых ве1цеств в организме. Многие ве1цества, ограниченно растворимые в воде, легко растворяются при прибавлении нх к плазме, или к сыворотке крови, или же к раствору выделенных из сыворотки кровн альбуминов. К таким веп1,ествам, в частности, относятся жирные кислоты, билирубин, сульфамидные препараты и др. Альбумины сыворотки крови играют важную роль в транспорте веи еств малорастворимых в воде, а также лекарственных веществ, вводимых в организм (например, сульфамидов). [c.509]

Чрезвычайно трудно сравнивать данные, полученные в конце XIX и начале XX столетия, а также в течение последующих тридцати лет, с данными, полученными при исследовании (-кислого гликопротеина в настоящее время. Это объясняется различием в методах выделения гликопротеинов, так как в некоторых случаях даже трудно установить, какое количество чистого гликопротеипа содержали ранее изученные препараты. Некоторые из ранних работ были проведены с белками, которые не коагулировались нагреванием, в то время как другие исследователи имели дело с гликопротеинами, соосажденными с альбумином. Необходимо также помнить, что хотя из всех гликонротеинов сыворотки крови человека а -кис-лый гликопротеин имеет самое высокое содержание углеводов, входящие в него углеводы составляют только 5—10% общего количества углеводных компонентов, связанных с белками крови. Наиболее резкое различие между ранее выделенными фракциями гликонротеинов и тем веществом, которое мы теперь называем а -кислым гликопротеином, обнаруживается при обработке этих препаратов щелочью. Фракции, полученные ранее, легко расщеплялись щелочью на углеводную и белковую части, тогда как сс -кислый гликопротеин очень устойчив к нагреванию в растворе щелочи. В связи с тем что в болео поздних работах было показано сходство углеводных ком понентов всех гликонротеинов плазмы человека, сведения, касающиеся [c.67]

Скиталось, что многие фракции, выделенные из сыворотки, являлись результатом изменения сыворотки в процессе их выделе-ВИЯ. Хотя работы с ультрацентрифугой и дали много ценных сведений (см. т. II, гл. XX) относительно природы сыворотки и ее белков в нормальных и патологических условиях, лишь Тизелиусу удалось найти простой и точный метод разделения и отбора фракций сыворотки. Тизелиус обнаружил, что необработанная человеческая сыворотка без добавления осаждающих солей начинает разделяться в электрическом поле на четыре компонента. Было найдено, что наиболее быстрый из этих компонентов является альбумином, а три более медленных компонента соответственно а-, р- и 7- глобулинами. Фибриноген появляется в плазме между 8- и 7- глобулинами. Было обнаружено, что сыворотки ряда животных дают похожие, хотя и специфические, электрофоретические изображения [39, 40]. После электрофоретического выделения отдельные компоненты сыворотки при повторном измерении проявляют те же электрические подвижности, которые были обнаружены и в. цельной сыворотке. Это является важным доказательством того, что в сыворотке находятся индивидуальные компоненты и что сыворотка не является равновесной смесью компонентов. Невозможно, однако, переоценить значение состава буферного растворителя для получаемых электрофоретических изображений, так как число, относительная величина и подвижность компонентов, а также контуры и симметричность изображений возрастающих и убывающих границ являются функцией применяемого электролита. На рис. 168 представлены результаты электрофоретического анализа фракций, полученных из патологической и нормальной сывороток. Фильтрат после добавления 13,5% сульфата натрия представляет собой фракцию, полученную после удаления эуглобина, 17,4%-ный фильтрат—фракцию лосле удаления псевдоглобулина I, 21,5%-ный фильтрат—фракцию после удаления всех белков за исключением альбумина. Значительные количества а-и р-глобулина остаются с альбумином. Подобг яые же результаты были получены Коном и другими исследователями [42] при применении различных солей. Мур и Линн [43] определили соотношения альбумина и глобулина А С для 25 [c.375]

Методом электрофореза с подвижной границей при использовании, как правило, буферных растворов с pH 8,4—8,6 белки плазмы можно разделить на 5 или 6 фракций альбумин и несколько групп глобулинов, обозначаемых какаг,а2-, Р и -гло-булины. С помощью данного метода на ранних этапах его развития были установлены многие важные свойства белков плазмы. Результаты этих исследований были суммированы в ряде обзоров [560, 1149, 1462]. Электрофорез с подвижной границей применялся также для проверки чистоты белков, получаемых в препаративных количествах для клинических целей. И до сих пор этот метод используется для тестирования выделенных из плазмы белковых фракций (следует сказать, что для контроля качества необходимы также и другие методы, такие, как ультрацентрифугирование или иммунохимический анализ). Так, например, согласно существующим стандартам (Комитет экспертов по биологической стандартизации при Всемирной организации здравоохранения, 1967), препараты иммуноглобулинов человека должны содержать не менее 90% глобулинов с электрофоретической подвижностью, не превышающей —2,8-10 см /В [c.328]

Принципиальная возможность создания таких гемосорбентов, а также сорбентов для препаративного выделения из крови некоторых ее компонентов продемонстрирована в многочисленных работах. Иммобилизованный в полимерной матрице лизин используют для выделения из сыворотки крови плазминогена. При этом для повышения специфичности связывания этого белка адсорбент предварительно насыщают гепарином. Ковалентно связанные с полимером углеводородные фрагменты с 12—йЬ атомами углерода избирательно сорбируют из плазмы сывороточный альбумин и могут быть использованы для получения [c.264]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология