РНК приготовление меченых препаратов

Облученную пятиокись фосфора применяют для приготовления препаратов с изотопом в качестве меченого атома. Изотоп Р используют в промышленности и в сельском хозяйстве для решения многих практических и теоретических проблем, в химии, биологии, медицине [106, 304]. Достаточно большой период полураспада Р позволяет измерять активность без учета радиоактивного распада, так как через один час исходная активность сохраняется на 99,8%, а через одни сутки на 95,3%. [c.9]

Итак, первая задача экспериментатора — разведение исходного раствора, содержащего радиоактивный изотоп, т. е. приготовление раствора с определенной (предварительно рассчитанной) удельной активностью. Работа начинается с изучения паспорта, сопровождающего полученный радиоактивный препарат. В паспорте указывается химическая формула меченого соединения содержание (концентрация) стабильного изотопа (носителя) в мг/м.г, количество вещества (в мл или г) удельная (в мкюри мл или мкюри/г) и общая (в мкюри) активности и дата, к которой отнесены 166 [c.166]

Само собой разумеется, что таким же методом [56] можно приготовить препараты меченные тритием, если вместо окиси дейтерия (и приготовленных из нее растворителей) использовать воду, обогащенную тритием. [c.387]

При приготовлении органических соединений с высоким содержанием изотопа С следует учитывать химическое действие р-излучения на реагенты, растворитель и готовый продукт. Разложение, вызванное самооблучением, достигает особенно внушительных размеров при длительном хранении ряда соединений, меченных С . Так, например, после хранения в течение 9 месяцев препарат хлорметилат-С -холина с начальной удельной активностью Л = 13 мкюри/мг разложился на 63% препарат холестерина-С с удельной активностью А = 6,5 мкюри/мг через 18 месяцев разложился на 40%. [c.678]

С практической точки зрения меченый фосфат очень удобен как реп гент, так как период полураспада Р достаточно велик (14,5 дня), и активность однажды приготовленного препарата держится достаточно [c.11]

Следует отметить, что измерения активности твердых препаратов стандартизировать достаточно трудно. Поэтому, если исследуемое соединение помечено изотопом, испускающим укванты, или высокоэнергетические р-частицы, более точные значения растворимости можно найти, сравнивая активность аликвотной порции раствора исследуемого соединения с активностью стандартного раствора, весовая концентрация меченого элемента в котором известна. Для приготовления такого раствора обычно применяют хорошо растворимые соединения, содержащие данный меченый элемент. При этом удельные активности (отнесенные к 1 г меченого элемента) исследуемого соединения и соединения, взятого для приготовления стандартного раствора, должны быть одинаковы. [c.241]

Имеется раствор соли стронция, меченной стронцием-89, с удельной активностью 2 мкюри/мл. Во сколько раз необходимо разбавить исходный раствор, чтобы измеренная на р-счетчике активность препарата, приготовленного из разбавленного раствора, имела скорость счета 1000 имп/мин На приготовление образца расходуется 0,2 мл раствора. Коэффициент счетности 0,1. [c.66]

Растения до опыта выращивались в одних и тех же условиях на питательном растворе Гельригеля. Затем они переносились в камеру и в зависимости от варианта опыта меченая углекислота (1 % по объему) вводилась или в корневую , или в листовую части камеры. Количество поглощенной углекислоты определялось по изменению концентрации СОз в камерах, а также по активности препаратов, приготовленных из растений. Для каждого опыта бралось 6—8 молодых (2—3 листа) растений ячменя или 2 растения фасоли (возраст 12—13 дней). Продолжительность опыта была 2 часа. В табл. 6 в относительных цифрах приведены сравнительные количества углекислоты, поглощенной растениями в различных вариантах опытов. За единицу принято количество углекислоты, поглощенное листьями растений, находившихся в темноте. [c.59]

ЮТ 5 МИН в этаноле, регидратируют ЗФР, меняя его два или три раза, и заключают в глицерин, забуференный фосфатами. Фиксация препаратов предотвращает какие бы то ни было изменения в распределении меченых молекул на клеточной мембране. Такие изменения могли бы произойти во время микроскопического исследования, если бы клетки оставались нефиксированными при комнатной температуре. Наш собственный опыт показал, что этот метод весьма удобен для подсчета редко встречающихся клеток, например клеток, связывающих антиген. В этом случае важно не посчитать одну и ту же клетку дважды и такой оплошности легко избежать, если мазок приготовлен штрихами. [c.176]

Иногда УА препарата выражают не в кюри или распадах- в минуту, а числом импульсов в минуту (имп./мин), которые регистрирует прибор. Нередко это число относят не к одному миллимолю, а к миллиграмму или микрограмму вещества (например, имп./мин/мг). Строго говоря, такое выражение для УА некорректно. Как будет видно из дальнейшего, число импульсов в минуту, регистрируемое счетчиком радиоактивности, может быть значительно меньше, чем число распадов в минуту. При этом соотношение между ними зависит от способа приготовления образца для счета, настройки прибора и ряда других факторов, не имеющих прямого отношения к собственно радиоактивности препарата. Тем не менее, такое выражение может оказаться удобным для сравнительных измерений, например для наблюдения за ходом очистки индивидуального, радиоактивно меченного белка, когда измеряемую радиоактивность (в имп./мин) относят к суммарному количеству белка, содержащегося в препарате на разных этапах его очистки. [c.165]

Вместе с тем для работы с микроколичествами препарата описано приготовление гелей для горизонтального электрофореза толщиной 0,1 мм на предметных стеклах. После высушивания такой гель образует настолько тонкую, не заметную глазом пленку, что она позволяет вести авторадиографию даже меченных Н препаратов [АтаИ , 1972]. [c.36]

Определение удельной активности меченого соединения. Удельную активность меченого соединения можно найти непосредственным измерением активности препарата определенного веса. Однако при больших удельных активностях такой способ не будет достаточно точным. Обычно определяют точную активность раствора, взятого для приготовления меченого соединения после предварительного разбавления аликвотной части его до значений, удобных для измерения. Количество добавленного макрокомионента определяют непосредственным взвешиванием или по объему титрованного раствора. Все измерения активности проводят в идентичных условиях, обращая особое внимание на толщину измеряемых образцов, изменение которой должно обязательно учитываться. [c.228]

Время, исчисляемое секундами и минутами, т. е. практически не могут существовать. При хранении других меченых препаратов потери, связанные с авторадиолизом, сравнительно невелики, но загрязнения препаратов даже довольно низкой активности продуктами авторадиолиза заметны уже в первые часы после приготовления меченого соединения. [c.258]

Следующий важный вопрос относится к связи ИРНК с рибосомами и к ее участию в синтезе белка. Вьппе указывалось, что при приготовлении меченой ИРНК и ее выделении в ультрацентрифуге нри низкой концентрации магния около 10% радиоактивной ИРНК находится в нераснавшихся рибосомах 70 в, а 90% в свободном состоянии. Если экстрагировать растертый клеточный препарат при высокой концентрации магния (10" М), то 65% ИРНК будет находиться в рибосомах 70 в, которые нри высокой концентрации магния являются преобладающими, и только [c.475]

Радиоиммунологический метод. Постановку РИМ осуществляют следующим способом. На предварительном этапе готовят препарат иммуноглобулина кролика против иммуноглобулинов мыщи и метят его радиоактивным иодом. Приготовление меченых вторичных антител проводят следующим образом. [c.115]

Меченые алкилнафталины и алкилфеиантрены были получены по реакции алкилирования нафталина и фенантрена октил-хлоридом— , приготовленным, путем обработки препарата н — октанола — 1С пятихлористым фосфором. Октилхлорид — С = 185° С, = 1,4340) по данным газохроматографических анализов примесей практически не имел. [c.73]

Меченые алкилнафталины и алкилфенантрены были получены по реакции алкилирования нафталина и фенантрена октил- слоридом — приготовленным путем обработки препарата н — октанола — I пятихлористым фосфором. Октилхлорпд — С == 185° С, = 1,4340) по данным газохроматографи- [c.73]

Характерная особенность всех изложенных опытов — работа с искусственно приготовленными системами, для которых метод приготовления в значительной мере предопределяет химический результат. Возникает естественный вопрос, как все это применимо к генезису катализаторов в обычных условиях в отсутствие таких химически активных агентов, как металлоорганические соединения, сильные минеральные кислоты и т. д. Экспериментальные работы в этой области очень трудны, так как дело идет о захвате очень небольших количеств обычных веществ высокодисперсными твердыми телами, анализ которых представляет сам по себе трудную задачу. Из работ в этой области следует упомянуть работы Левиптова по спектральной методике определения металлоидов в твердых телах, использование полярографии Жабровой и другими. Однако па этом пути результаты будут получены не так скоро, так как мало обнаружить по линиям спектра или по полярографической волне наличие определенных примесей следует узнать, какие из них влияют на активность, какие — нет. Весьма перспективен другой путь введения в генетическую систему веществ в виде меченных молекул, за которыми можно следить непосредственно в сколь угодно сложной обстановке. Разведочные работы в этом направлении мы вели в 1940—1941 гг., и они оказались успешными. Ограничимся упоминанием о наблюдениях Брежневой и Озиранера над захватом и промотированием металлической платины и палладия следами фосфата. Для этого из серы нейтронным облучением приготовляли высококонцентрированный препарат радиофосфора, который в виде фосфат-иона вводили в раствор муравьинокислого натрия, применявшегося для выделения платины и палладия из их хлоридов. Концентрацию фосфат-иона легко было при этом менять в очень широких пределах, а захват наблюдать по р-изпучению катализатора. [c.42]

Важным моментом, обеспечивающим правильность результатов опыта, является метод приготовления препаратов для измерения. Выбор метода зависит от типа и энергии излучения изотопа, химической природы радиоактивного вещества, требуемой степени точности эксперимента и т. д. Г азообразные вещества (водород, меченный тритием углекислый газ, содержащий СОг, и др.) приходится непосредственно вводить внутрь счетной трубки или ионизационной камеры. Измерение радиоактивности в жидкой фазе имеет известные преимущества, но предполагает достаточно высокую удельную активность измеряемого раствора и применение специальной аппаратуры (тонкостенные счетчики погружения и т. п.). Кроме того, мягкое Р-излучение очень сильно поглощается жидкостью в таких случаях предпочитают выпаривать раствор и измерять активность сухого остатка. Приготовление для измерений препаратов в твердом состоянии является наиболее распространеннылМ методом. Такие препараты готовят испарением, осаждением радиоактивного вещества из раствора, либо электролизом. Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки. При простом выпаривании активного раствора в чашке (или на другой подложке) радиоактивное вещество отлагается неравномерно, преимущественно ближе к краям подложки. Электролитическое осаждение может дать [c.177]

В приготовленную колонку вносят 2 капли дистиллированной воды (для удаления из верхней части колонки возможного избытка осадителя), после чего пипеткой вводят 0,5 мл 0,25 н. раствора нитрата кобальта, меченого изотопом Со, концентрация которого не превышает 0,01 г-экв1л. Через 10 мин после окончания фильтрации раствора осадочно-хроматографическую колонку разрезают и ее содержимое выталкивают стеклянным пестиком на тщательно вымытую и высушенную стеклянную пластинку. Столбик сорбента разрезают по возможности на равные части шириной 2 мм. Каждую часть сорбента помещают на алюминиевую пластинку, высушивают и взвешивают на торзионных весах, затем распределяют ровным слоем на поверхности в 1,5 см и измеряют активность препарата с помощью счетчика Гейгера—Мюллера. [c.187]

Мечение веш,ества переходным металлом, как это имеет место при приготовлении препаратов 99 гхс, равнозначно в большинстве случаев комплек-сообразованию. Известно также использование ряда клинических [c.403]

Свежий препарат РЬ504, способ приготовления которого описан в табл. 6, старел на воздухе при указанных условиях, а затем отдельные его порции весом в 0,3 г смешивались с 23,53 мл раствора 0,00162 М РЬ (Н0д)2, меченного торием В(РЬ212). Реакция обмена происходила в течение 15 мин. или [c.39]

Приготовление рабочих растворов производилось следующим образом. Прежде всего готовили исходный, например 0,1 н., раствор соответствующего электролита, точную концентрацию которого устанавливали обычными аналитическими методами (например, ацидиметрически или по способу Фольгарда). Разбавляя этот раствор в необходимое число раз, мы получали рабочие растворы электролита с точно известной концентрацией. Если опыты проводились с радиоактивными препаратами, то, помимо аналитической концентрации исследуемого раствора, измерялась также и его удельная активность. Определение радиоактивности производилось общепринятым методом с помощью счетчика Гейгера — Мюллера (см., например, [И, 12]). При измерении активности растворов электролитов, меченных радиоактивными изотопами и мы пользовались обычной тонкостеитюй алюминиевой р-трубкой активность растворов, содержавших изотопы 5 , Са 5 и Ag °, определялась посредством торцового счетчика со слюдяным окошком. Плотность измеряемых радиоактивных осадков AgS, Ва304 и др. была во всех случаях очень незначительной, что делало излишним внесение поправок на самопоглощение. Ошибки, обусловленные распадом радиоактивных препаратов, элиминировались тем, что активность исследуемого раствора до и после адсорбции (или, соответственно, десорбции) измерялась практически одновременно. Расхождения между параллельными определениями радиоактивности не превышали 2—3%. [c.109]

Пример 49. Для определения давления пара использовали металлическое серебро, меченное изотопом Навеску О, г меченого серебра растворили в азотной кислоте, довели раствор до объема 50 мл, а затем 1 мл этого раствора разбавили в ШО раз. Скорость счета препарата, который был приготовлен из 0,5 мл полученного таким образом разбавленного раствора, составляла 2400 имп1мин. Рассчитаем количество т испарившегося за время опыта серебра, если активность конденсата, собранного в специальной ловушке, оказалась равной 4800 имп1мин. [c.208]

Таким образом, препарат метанола в зависимости от удельной активности, времени и условий хранения, а также характера и положения меченого атома ( СНзОН, СТ3ОН, СН3ОТ), будет содержать то или иное количество радиоактивных примесей. Иными словами, спектр активных примесей позволяет судить о биографии образца меченого метанола — времени с момента его приготовления и условиях хранения. [c.261]

Растворимость А С1 зависит от определяемой невысокой концентрации хлорид-ионов. Взбалтывают приготовленный препарат Ag l, меченный радиоактивным изотопом серебра, с анализируемым раствором до насыщения чем выше концентрация С1 , тем ниже радиоактивность раствора. [c.26]

Изучение зависимости радиоактивности препаратов, приготовленных из листьев сныти Aegopodium podagraria) и других растений, от времепр их экспозиции в атмосфере С - Оа показало (рис. 13), что по мере увеличения продолжительности фотосинтеза в листьях растений возрастает количество меченого углерода. Опыт, результаты которого изображены на рис. 13, был проведен [c.32]

Сзектрэ][ этометричеекий метод. Все разобранные методы, кроме указанных недостатков, усложнены необходимостью приготовления препаратов радиоактивно меченной ДНК, а изотопный анализ сложен и не всегда доступен. [c.134]

Целью настоящей работы было выяснить, в каких количествах проникает диметил-4-нитрофенилтиофосфат в различные органы теплокровных животных при введении водных эмульсий препарата через рот и при нанесении их на кожу, продолжительность пребывания этих соединений в организме животного и установить, каким путем препарат и продукты его разложения выводятся из организма. Работа проводилась с диметил-4-нитрсфенилткофосфатом, меченым радиоактивным изотопом фосфора (Р ). Препарат синтезирован в органической лаборатории НИУИФ и И. Л. Владимировой под руководством Н. Н. Мельникова и Я. А. Мандельбаума Активность излучения приготовленных препаратов измеряли в стандартных условиях и характеризовали количеством импульсов на 1 мг препарата в 1 мин. С этой целью готовили контрольные растворы меченого диметил-4-нитрофенилтиофосфата в метиловом спирте содержание диметил-4-нитрофенилтиофосфата в I мл раствора было равно 3 51г. Ежедневно вносили поправку на самораспад радиоактивного фосфора. Все измерения по содержанию радиоактивного фосфора (по его активности) в крови или отдельных органах животного производили в таких же условиях. [c.94]

Гофман и сотр. [40, 41] окисляли меченный 5 ксилан и полиэфиры раствором Бенедикта (HNO3, K IO3, Си(ЫОз)о), содержавшим добавленный сульфатный носитель. Серу осаждали в виде сульфата бария. Сульфат бария измельчали до суспензии и наносили на 5-миллиметровые алюминиевые формы слоем толщиной 6—11 мг1см легкими круговыми движениями стеклянной палочки. Образцы сушили под инфракрасной лампой. Для частичной компенсации неравномерного распределения образец в процессе счета 3 раза поворачивали на 120°. Для аналогично приготовленных препаратов различие составляло 5—15%, хотя было произведено 2000 отсчетов, соответствовавших статистической ошибке всего 2%. Чтобы привести к нулевой толщине, строили поправочную кривую на самопоглощение. Счет все еще оставался простым для полимера с мечеными концевыми группами и молекулярным весом 10 , где удельная активность соответствовала 100 импЫин. [c.347]

Одна из наиболее важных областей применения радиоактивных изотопов в биологии клетки - )то определение локализации радиоактивных соединений в срезах клеток или живых тканей методом радиоавтографии. При использовании этого метода живые клетки подвергают кратковременному (импульсному) мечению с последующей инкубацией в течение различных промежутков времени в нерадиоактивной среде. Затем клетки фиксируют и обрабатывают для проведения световой или электронной микроскопии. Каждый приготовленный препарат покрывают тонким слоем фотоэмульсии и оставляют на несколько дней в темноте - время, в течение которого происходит распад радиоактивного изотопа. Затем фотоэмульсию проявляют. Местоположение радиоактивных молекул в каждой клетке можно определтгть по расположению темных зерен серебра. Если инкубировать клетки с радиоактивным предшественником ДНК С Н-тимидином), то можно увидеть, что ДНК синтезируется в ядре и там же остается. И наоборот, мечение клеток радиоактивным предшественником РНК СН-уридииом) показывает, что РНК исходно синтезируется в ядре и затем быстро накапливается в цтгтонлазме клеток. [c.223]

Необходимым условием выполнения почти каждой работы с изотопами в химии является наличие определенных веществ с необычным изотопным составом. Приготовление этих веществ может составлять значительную долю труда экспериментатора, который исходит из таких обычных нолу-продукгов изотопного синтеза как ВаС 0з ВаО или Р О- . Но в тех случаях, когда вещества необычного изотопного состава используются в готовом виде, это только обозначает, что где-то в другом месте разработаны и осуществлены соответствующие методы изотопного синтеза. И в этом случае потребителю меченых веществ полезно правильно представлять, какими методами получались соответствующие препараты. Особенно это важно при каталитических исследованиях, требующих точного знания химического состава с нормировкой определенных микропримессй. [c.411]

Основная задача данной главы — дать общее представление о рестрикционной обработке различных препаратов ДНК. Подробные указания по обработке мини-препаратов ДНК Е. oli, тотальной ДНК агробактерий и ДНК растений приведены в соответствующих разделах гл. 1 и 4. Указания по нанесению рестрицированных образцов ДНК и детали, связанные с приготовлением индивидуальных проб для гибридизации по Саузерну, широко освещены в других разделах (гл. 1 и 4). Способ заливки агарозных гелей, блоттинг-гибридизация по Саузерну и мечение ДНК с помощью олигонуклеотидной затравки, приведенные в данном разделе, универсальны для всех описанных в других разделах экспериментов и могут применяться без изменений. [c.277]

Разумеется, для получения надежных результатов необходимы высокоактивные и высокоспецифические флуоресцирующие реагенты. Многие из широко используемых реагентов, например антисыворотки к иммуноглобулинам человека, имеются сейчас в продаже, однако выбор их, конечно, весьма ограничен. В настоящей главе мы рассмотрим приготовление, очистку и контроль препаратов антител, меченных флуорохромами, и применение таких антител для анализа мембранных антигенов живых клеток и внутренних антигенов фиксированных клеток. Читатель не найдет здесь полного обзора методов иммунофлуоресцеиции, а познакомится с практическими рекомендациями, помогающими в их освоении. [c.165]

Используют реактивы квалификации о. с, ч. или х. ч. (реактивы другой квалификации предварительно перекристаллизовывают). Немеченые и меченые аминокислоты используют в L-форме, а при наличии рацемаЮв концентрацию растворов аминокислот увеличивают в 2 раза. Препараты меченых аминокислот должны иметь удельную радиоактивность не ниже 100 кюри/моль для С-аминокислот и 1000—10000 кюри/моль для Н-аминокис-лот. Реактивы, применяемые для приготовления сцинтил-ляционной жидкости, должны иметь квалификацию о. с. ч. или сцинтилляционный . [c.353]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология