Антигены растворимые

Моноклональные антитела к растворимому белковому антигену IgG к регуляторной субъединице цАМФ-зависимой протеинкиназы). [c.325]

Метод агглютинации используется также для изучения растворимых антигенов. Они связываются химическим путем с эритроцитами или частицами латекса, образуя таким образом частицы, называемые сенсибилизированными. Антитела противо-растворимых антигенов, добавляемые в суспензию таких частиц, косвенным образом провоцируют агглютинацию сенсибилизированных частиц. Этот способ называется пассивной, или косвенной, агглютинацией [9, 72, 109]. Принцип его схематически представлен на рисунке 4.3. Указанная методика позволяет также использовать антитела вместо антигенов для получения сенсибилизированных частиц. Применение моноспецифических антител позволяет в первую очередь количественно определять содержание отдельного белка в смеси белков. Если антисыворотка не является строго специфичной, то для определения количества содержащегося белка необходимо, чтобы используемые для сенсибилизации частиц антигены были очищены от примесей, которые могут реагировать с неспецифическими антителами в сыворотке. [c.98]

Внешние проявления денатурации сводятся к потере растворимости, особенно в изоэлектрической точке, повышению вязкости белковых растворов, увеличению количества свободных функциональных 8Н-групп и изменению характера рассеивания рентгеновских лучей. Наиболее характерным признаком денатурации является резкое снижение или полная потеря белком его биологической активности (каталитической, антигенной или гормональной). При денатурации белка, вызванной 8М мочевиной или другим агентом, разрушаются в основном нековалентные связи (в частности, гидрофобные взаимодействия и водородные связи). Дисульфидные связи в присутствии восстанавливающего агента меркаптоэтанола разрываются, в то время как пептидные связи самого остова полипептидной цепи не затрагиваются. В этих условиях развертываются глобулы нативных белковых молекул и образуются случайные и беспорядочные структуры (рис. 1.12). [c.47]

После связывания Fab-участка с растворимым антигеном F -участок антитела может присоединяться к F -рецепторам фагоцитов, которые захватывают и разрушают комплекс антиген-антитело. [c.211]

Изучение растворимых комплексов антиген — антитело, образование которых особенно характерно для низкомолекулярных антигенов, представляет зачастую большие трудности. Здесь гель-хроматография также может иметь большое значение [35]. [c.149]

Принцип метода. Растворимый антиген диффундирует в агаровом геле, содержаш ем иммунную сыворотку. В том участке геля, где возникает его относительный избыток, в агаре образуется полоса преципитации. [c.127]

Область применения. Определение концентрации растворимых белковых антигенов. Определение минимального числа антигенных компонентов, выявляемых данной антисывороткой в смеси белков. [c.127]

Из многих тканей и секреторных жидкостей организма выделены растворимые вещества, способные подавлять агглютинацию эритроцитов под действием агглютининов крови такие вещества, детерминантные группы которых идентичны детерминантным группам поверхностных антигенов эритроцитов, известны под названием групповых веществ крови. [c.603]

Реакция антиген — антитело. Если чужеродные тела попадают в кровяное русло, то в ответ обычно образуются специфические растворимые в сыворотке белки, называемые антителами. Любой субстрат, который может вызвать образование антитела, называется антигеном генерирующий антитело)-, в эту категорию попадают все патогенные микробы. Антигенами являются токсины—ядовитые продукты обмена некоторых бактерий. Антитело соединяется с антигеном и обезвреживает его. Такое взаимодействие [c.349]

Если система настолько инертна, что не происходит никакого смещения равновесия во время ультрацентрифугирования, то для каждой осаждающейся формы образуются раздельные границы, и, в принципе, можно получить равновесные концентрации из соответствующих граничащих областей. Сингер и сотрудники использовали этот метод для получения концентрации свободного антигена в растворах растворимых комплексов антиген — антитело [66, 69, 70]. Однако необходима большая осторожность при объяснении измерений в системах, в которых происходит частичное смещение равновесия во время седиментации и последующее расширение границ [70]. [c.386]

Когда антиген присоединяется к молекулам антител на поверхности покоящейся В-клетки, это обычно инициирует сложную и малоизученную цепь событий, приводящую к клеточной пролиферации и диффереицировке с образованием клеток, секретирующих антитела. Такие клетки вырабатывают больщие количества растворимых (не связанных с мембраной) антител с тем же антиген-связывающим участком, что и у антител на поверхности клетки, и выделяют эти антитела в кровь. Активированные В-клетки могут начать секретировать антитела, будучи еще малыми лимфоцитами конечная стадия этого пути дифференцировки-большая плазматическая клетка (см. рис. 17-4, Х которая выделяет антитела со скоростью около 2000 молекул в секунду. По-видимому, плазматические клетки используют для производства антител столь значительную часть мощности своего белоксинтезирую-щего аппарата, что не способны к дальнейшему росту и делению и погибают после нескольких дней секреции антител. [c.20]

Мы уже упоминали о том, что антитела всех классов могут синтезироваться как в мембраносвязанной, так и в растворимой, секретируемой форме. Мембраносвязанные антитела служат рецепторами для антигена на поверхности В-клеток. После стимуляции клетки антигеном те же самые антитела вырабатываются в секретируемой форме. В случае IgM эти две формы различаются только СС-концевым участком ц-цепи у мембраносвязанных антител ц-цепь оканчивается гидрофобным участком, закрепляющим ее в липидном бислое плазматической мембраны В-клетки, тогда как у секретируемых антител IgM имеется вместо этого гидрофильный хвост , позволяющий молекулам выходить из клетки. Способность В-клеток производить ц-цепи с константными областями двух различных типов сначала казалась парадоксальной, так как В-клетки содержат лишь одиу копию гена Сц на гаплоидный геном. [c.42]

Наличие межмолекулярных поперечных связей было доказано увеличением молекулярного веса, уменьшением растворимости и набухания белков, обработанных формальдегидом. Подобного рода процессы протекают при дублении кожи и приготовлении вакцин и токсоидов. Выдерживание токсинов и вакцин с формальдегидом приводит к образованию стабильных производных со значительно ослабленной активностью и неизменной антиген-ностью. [c.70]

Причины, вызывающие преобладание той или иной формы иммунного ответа, до настоящего времени полностью не выяснены, и для их объяснения привлекают многие факторы. Давно было подмечено, что природа аллергена в известной мере обусловливает форму иммунного ответа и тип аллергической реакции. ГЗТ чаще развивается при действии корпускулярных антигенов (микроорганизмы, чужеродные клетки) и химических аллергенов (гаптенов), а гуморальный ответ характерен для внедрения растворимых белковых аллергенов. Имеет значение и путь поступления аллергена при контакте кожи с химическими аллергенами развивается аллергический контактный дерматит, т. е. ГЗТ, а при ингаляционном воздействии—крапивница, бронхиальная астма. [c.20]

При реакции антитела с соответствующим антигеном происходит одно или несколько из следующих явлений. 1) Антитела к токсинам нейтрализуют токсичность антигена, а антитела к вирусам — инфекционную способность антигена. 2) Антитела к растворимым белкам и другим растворимым антигенам вызывают преципитацию соответствующего антигена (фиг. 1). 3) Антитела к микроорганизмам и чужеродным эритроцитам вызывают склеивание (агглютинацию) клеток—носителей антигенов (фиг. 2). 4) Антитела к эритроцитам и некоторым микроорганизмам вызывают разрушение клеток подобное явление называется лизисом, и для его проявления необходимо еще участие некоторых нормальных компонентов плазмы, которые обозначаются в целом как комплемент. 5) Антитела к ряду микроорганизмов [c.10]

Общее время иммунизации варьирует от нескольких суток иммуноген—клетки) до нескольких месяцев (иммуноген—гаптены). 1ри использовании в качестве антигенов растворимых белков при ервичных иммунизациях применяются стимуляторы иммунного от-ета (например, полный адъювант Фрейнда). Для иммунизации южно использовать мышей разных штаммов. Однако поскольку, 0 сих пор основным методом получения МонАТ остается выделение IX из асцитной жидкости, работают, как правило, с животными, ингенными в отношении миеломных клеток. [c.195]

Комплексы сывороточных белков с другими веществами белковой природы могут быть также выделены с помощью гель-хроматографии, как это было уже показано на примере комплекса гемоглобин — гаптоглобин (фиг. 16) [49]. Еще проще количественно определить емкость гемоглобина (способность гемоглобина к комплексообразованию) на сефадексе G-100 [50]. Фракция макроглобулинов (выделение на сефадексе G-200), очевидно, содержит белок, связывающий трипсин [51, 52]. Активность при этом сохраняется лишь частично [51, 52]. Комплексы антиген — антитело часто выделяли на пористых гелях, а затем после разложения на составные части исследовали более подробно (см. литературу, приложение IX). В предыдущем разделе на примере инсулина были рассмотрены возможности изучения растворимых иммунокомплексов. Иммунологические методы в сочетании с гель-фильтрацией играют важную роль в исследовании строения Y-глобулинов. Среди работ на эту тему (см. литературу, приложение X) имеются блестящие исследования, посвященные восстановительному расщеплению и выделению L- и Н-цепей, их рекомбинации, ограниченному действию папаина и, наконец, иммунологическим свойствам интактного белка и его фрагментов. [c.218]

В настоящее время наиболее совершенными считаются иммунологические методы исследования плазменных или сывороточных белков. Эти методы обладают высокой специфичностью и основаны нз иммунопреципитационных реакциях. Последние представ-ляют собой реакции между растворимыми белками —антигенами и растворимыми белками — антителами в результате их взаимо- [c.240]

Многие растворимые белки, ферменты в том числе, выделенные из различных тканей животных, обладают антигенными свойствами, т. е. при введении в организм вызывают в нем образование антител. Однако их антигенные свойства (иммуногенность) различаются, что проявляется в разной способности стимулировать продукцию антител. В известных пределах иммуногенность коррелирует с молекулярной массой антигена. Иммунохимически чистые антигены применяются обычно в виде 0,01 — 1,0%-ных растворов, тогда как неочищенные антигены и смеси антигенов приходится вводить в большей концентрации. Слабоиммуногенные антигены необходимо вводить со стимуляторами иммуногенеза, из которых наиболее часто используют адъювант Фрейнда. Антисыворотки против растворимых нативных белков можно получить повторными инъекциями (внутримышечно, подкожно, внут-рикожно) эмульсии раствора белка с адъювантом или внутривенными инъекциями раствора белка без адъюванта. [c.307]

Б. В Иммуноэлектродиффузия или ракетный иммуноэлектрофорез [66], Гель агарозы содержит равномерно распределенную иммунную сыворотку. В лунки внесены антигенные растворы разных концентрации. Электрофоре. проводится при pH, при котооом антитела не мигрируют либо мигрируют очень мало. Антигены под действием электрического поля мигрируют в геле, содержащем антитела. Комплексы при избытке антигенов вначале растворимы, продолжают мигрировать в ходе электрофореза, а также посредством диффузии, обогащаются антителами, н, когда соотношение антигенов и антител достигает точки эквивалентности, они осаждаются в форме ииков. [c.102]

Принцип, положенный в основу методов RIA [91, 117], аналогичен принципу методов ELISA эти методы в основном различаются тем, что для мечения вместо ферментов применяются радиоактивные элементы (главным образом йод) [49]. Широко используемый вариант этого метода не предусматривает иммобилизацию одного из реагентов реакция проходит в растворимой фазе, поэтому очень важным дополнительным этапом является отделение меченых реагентов, участвующих в иммунокомплексах, от тех, которые не участвуют. Если антиген представляет собой белок, обычно проводят разделение иммунокомплекса, осаждая его антителами к иммуноглобулинам кролика (если специфические антитела к белку индуцированы у кролика) [49]. [c.108]

По механизму взаимодействия сорбента и сорбата можно выделить несколько видов хроматофафии распределительнся хроматография основана на различии в растворимости разделяемых веществ в неподвижной фазе (газожидкостная матофафия) или на различии в растворимости веществ в подвижной и неподвижной жидких фазах ионообменная хроматография — на разной способности веществ к ионному обмену адсорбционная хроматография — на различии в адсорбируемости веществ твердым сорбентом эксклюзионная хроматография — на различии в размерах и формах молекул разделяемых веществ, аффинная хроматография — на специфических взаимодействиях, характерных дпя некоторых биологических и биохимических процессов. Существуют пары веществ, реагирующих в растворах с высокой избирательностью, например антитело и антиген, фермент и его субстрат или ингибитор, гормон и соответствующий рецептор, и т. п. Если одно из соединений пары удерживается ковалентной связью на [c.267]

Наиболее простой способ исследования растворимых антигенов в реакции преципитации заключается в том, что исследуемый раствор смешивают со специфической иммунной сывороткой, а затем наблюдают образование преципитата. Эта реакция применяется главным образом для определения титров. Только в том случае, когда реакция ставится с иммунной сывороткой, специфичной к данному белку, величина титра может служить характеристикой белкового препарата. Действительно широкое применение имму-нохимического подхода к анализу белков началось только после того, как появились иммунодиффузионные методы исследования. [c.18]

В сущности все методы иммунодиффузии основаны на явлении, которое наблюдал Бекхольд взаимодействии антиген — антитело в геле. Растворимый белковый антиген и иммунная сыворотка диффундируют в геле навстречу друг другу. В месте встречи обоих реагентов возникает полоса преципитации, которую можно легко наблюдать и регистрировать. [c.18]

Лллергологическое исследование. Кожную пробу проводят по стандартной методике (см. подразд. 1.5.1). В качестве аллергена используют растворимый антиген из риккетсий Бернета I фазы. Возможна также постановка кожной аллергической пробы с автоклавированной культурой коксиелл или ЛПС I фазы в качестве аллергена. Результаты пробы учитывают через 24 — 48 ч после введения 0,1 мл аллергена по наличию и размерам инфильтрата и гиперемии, иногда с отеком. Проба является специфичной, но пригодна только для ретроспективного диагноза. У переболевших она остается положительной в течение 9—10 лет. [c.239]

Общий характер действия на теплокровных. Б. характеризуется высокой биологической активностью. Определяющее значение в токсическом действии имеет ион Ве +, обладающий общетоксическим, аллергическим, канцерогенным и эмбриотокси-ческим действием. Для растворимых соединений характерно также раздражающее действие. При вдыхании в легких развивается продуктивный межуточный процесс с формированием специфических гранулем. Заболевание такого рода получило название бериллиоза. Наблюдаются также изменение иммунобиологического состояния организма, активности многих ферментов, катализирующих энергетические процессы фосфоглюко-мутазы, энолазы, лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы и др. в легких, печени, почках, мышечной и костной тканях. Наиболее выражены диспротеинемия в виде снижения альбу-мино-глобулинового коэффициента, дисбаланс некоторых микроэлементов (Иванова Кейзер и др.). О канцерогенном эффекте бериллиевой интоксикации свидетельствуют характерные изменения антигенов критического органа, появление низкомолеку- [c.92]

Условия растворимости ферментов сходны во всех отношениях с таковыми у глобулинов. Если бы не были известны необычайные каталитические свойства чистых кристаллических ферментов, то их можно было бы отнести, по-видимому, к обычным классам белков или протеидов. Весьма вероятно, что во многих клетках вся или почти вся плазма состоит из ферментов (Виртапен). Подобно всем белкам, ферменты являются специфическими антигенами при введении в кровь животного они вызывают образование антител. [c.793]

Для устраяения этих недостатков мы предлож или зафикоиро ватъ б-ел-ковый антиген на бумаге [9]. Фиксация антигена а бумаге должна, очевидно. сделать невозможным образование растворимого комплекса аи- [c.363]

Каждый клон В-клеток вырабатывает молекулы антител с уникальным антиген-связывающим участком. Вначале молекулы встраиваются в плазматическую мембрану клетки, где они служат поверхностными рецепторами для антигена. Когда к таким рецепторам присоединяежя антиген, В-клетки активируютя, начинают размножаться и синтезируют большое количество растворимых антител с тем же самым антиген-связывающим участком. Эти антитела переходят в кровь. [c.31]

Непрямые данные были получены прн изучении антиидиотипнческнх антител. Как уже говорилось, можно получить антитела, которые узнают антигенные детерминанты антиген-связывающих участков других антител такие детерминанты называются идиотипами. Антиидиотипические антитела, способные реагаровать с антиген-связывающим участком растворимого антитела к некоторому антигену X, будут связываться не только с анти-Х-антитела-ми в растворе, но также и с В-клетками, имеющими на своей поверхности те же самые антитела (как рецепторы для антигена X). Неудивительно, что присоединение антиидиотипических антител к этим рецепторам на поверхности В-клеток может ингибировать способность В-клеток узнавать антиген X н отвечать на него. Было показано, что в некоторых случаях антиидиотипические антитела связываются с Т-клвткамн н тоже ингибируют их способность отвечать на антиген X (рнс. 17-55). Генетические исследования позволяют предполагать, что идиотипы, общие для рецепторов В- н Т-клеток, могут кодироваться генными сегментами, определяющими вариабельные области Н-цепей иммуноглобулинов. Антиидиотипические антитела были использованы для выделения малых количеств рецепторов нз плазматических мембран Т-клеток. Хотя эти рецепторы состоят нз полипептидов, сходных по размерам с обычными Н-цепями, они не реагируют с антителами к константным областям каких-либо известных Н- или L-цепей иммуноглобулинов. Эти данные наводят на мысль, что рецепторы Т-клеток могут представлять собой какой-то новый класс Н-цепей, кодируемый специальным набором генов константной области н, возможно, некоторыми генными сегментами, кодирующими Ун-области обычных антител Этой гипотезе противоречит то, что в экспериментах с нспользованнем техники рекомбинантной ДНК не удалось [c.51]

Учитывая, что иммунная система эволюционировала как механизм, предотвращающий микробную инфекцию, можно отметить два очевидных преимущества ассоциативного узнавания МНС. Во-первых, оно фокусирует внимание Т-лимфоцитов на клеточных поверхностях. Например, связывание цитотоксическими Т-клетками свободного вируса (нли раство жмых вирусных антигенов) было бы неэффективно, так как рецепторы оказались бы занятыми и не могли бы разрушать инфицированные вирусом клетки. Во-вторых, оно может обеспечивать то, чтобы каждая категория антигенов вызывала иммунный ответ надлежащего типа например, цитотокснческие Т-клетки не могут обезвреживать чужеродные растворимые макромолекулы (бактериальные токсины и т.п.) и убивать бактерии или другие микроорганизмы, поэтому способность узнавать соответствующие антигены была бы для них совершенно ненужной. [c.62]

Была сделана попытка установить относительное расположение соединившихся антигенов и антител методом исследования растворимых, относительно небольших комплексов, образованных в условиях значительного избытка антигена. Зингер и Кемпбелл нашли,, что константа седиментации (постоянная осаждения) такого комплекса, вероятно, состоящего из двух молекул альбумина бычьей сыворотки и одной молекулы антитела (рис. 4, А), равнялась 8,75 (Singer, ampbell, 1952). Поскольку молекулярный вес этого соединения около 300 ООО, то фактор диссиммет-рии равен 1,8, что указывает на то, что соединение совершенно асимметрично и едает возможность считать, что молекулы антигена расположены ближе к противоположным кон- . цам удлиненной молекулы антитела . Авторы считают, что другой комплекс, изученный ими, состоял из двух молекул антитела и трех молекул антигена, что фактор диссимметрии этого комплекса равен 1,9 и что он меньше, чем при линейном распО ложении трех молекул антигена и двух антитела (рис. 4, В). [c.691]

Метод, разработанный Коном и Эдсоллом, включает фракционное осаждение спиртом при низкой температуре и подходящей вариации значений pH и имеет то преимущество, что в этих условиях на растворимость белков заметно влияет ничтожно малое изменение концентрации солей. Этим методом были получены пять основных фракций, которые не были гомогенными, но оказались пригодными для клинических целей и дальнейшего фракционирования на индивидуальные компоненты. Одна фракция состоит в основном из альбумина и особенно эффективна как противошоковое средство. Другая фракция содержит у-глобулин, который захватывает большое количество антител. Эти белки образуются в живом организме ш ответ на проникновение чужеродных тел (антигенов), например белков различных патогенных организмов. Эта фракция находит клиническое применение для предохранительной временной пассивной иммунизации к различным болезням. Примерно десять глобулинов, принадлежащих к этим трем типам, были получены в индивидуальном, состоянии. Два, из них являются липопротеннами или, может быть, различными формами одного и того же липопротеина. Липопротеины крови состоят из белка, фосфолипи- [c.656]

Известна так называемая реакция Джонса Мота, которую нередко трактуют как переходную от реакций быстрого типа к ГЗТ [1]. Она появляется в ответ на введение растворимых белковых антигенов (дифтерийный токсин, пыльцовые, эпидермальные аллергены) или конъюгатов через 6—8 ч после внутрикожной реакции и стихает через 1—2 сут. Внешне проявляется эритемой и припухлостью, на срезах кожи видна лимфоидная инфильтрация вокруг мелких сосудов и капилляров. Реакция Джонса Мота исчезает по мере накопления в крови циркулирующих антител. [c.21]

Реакция пассивной гемагглютинации по Бойдену позволяет выявлять агглютинины к растворимым аллергенам и гаптенам вследствие введения в реагирующую систему эритроцитов, соединенных с антигеном. Процесс соединения антигена с эритроцитами называют сенсибилизацией, а полученный таким образом искусственный корпускулярный антиген — сенсибилизированными эритроцитами. В РПГА используют эритроциты барана или человеческие О группы крови. В первом случае исследуемую сыворотку предварительно освобождают от гетерофильных антител к форсмановскому антигену поверхности бараньих эритроцитов. Эта реакция уже более 20 лет широко используется в исследовательских и прикладных целях благодаря своей чувствительности, позволяющей определять 0,003 — 0,006 мкг N антител в [c.215]

Определение непреципитирующих антител путем дробного высаливания сульфатом аммония комплекса антиген — антитело было разработано А. И. Николаевым для выявления антител к растворимым белковым антигенам, а позже совместно с И. Я. Усмановой использовано для обнаружения противопестицидных антител, т. е. антител к химическим промышленным аллергенам. [c.245]

Эта реакция выглядит по-разному (табл. 5) в зависимости от типи антигена, проникшего в кровь. Дело обстоит относительно просто, если антигеном служит какое-нибудь растворимое вещество, например чужой глобулин или токсин, который выделен из бактерии, скажем столбнячный токсин — токсин возбудителя столбняка lostridium tetani. Если смеп1ать [c.323]

Весьма характерно, что молекулы антител, содержащихся в антисыворотках, не отличаются абсолютным подобием. Они различны по силе реакции с данным гаптеном и по специфичности. Это легко показать в нашем случае, если вначале добавлять к ан-тиметаниловой сыворотке белок, к которому присоединен один из перекрестно реагирующих гаптенов, до тех пор, пока не прекратится реа1 ,ия, а затем прибавить к обработанной сыворотке гомологичный или другой родственный гаптен. Для того чтобы в смеси не осталось растворимых комплексов антиген — антитело, сыворотку можно обработать гаптенами, присоединенными к нерастворимым структурам (строме), остающимся после лизиса эритроцитов и удаления гемоглобина. Сыворотка, обработанная с целью удаления всех антител, способных реагировать с данным антигеном, называется адсорбированной (истощенной). Вот результаты таких опытов [23] (схема IV) [c.22]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология