АТФ-азный комплекс

Определение активности целлюлаз с использованием окрашенной целлюлозы. Приведенные выше методы качественного и количественного определения сахаров, методы определения степени солюбилизации целлюлозы позволяют определять активность целлюлазного комплекса с использованием различных растворимых и нерастворимых субстратов. При использовании растворимой КМ-целлюлозы определяют так называемую КМЦ-азную или Сх-активность комплекса, микрокристаллической целлюлозы (авицела) — авицелазную, хлопкового волокна — так называемую l-активность. Все эти активности характеризуют активность всего комплекса. Как правило, активность определяется по одной точке. Это оправдано при массовом тестировании препаратов, скрининге продуцентов. Однако при получении количественной характеристики препарата метод может приводить к значительным ошибкам. В первую очередь это относится к определению активности по КМ-целлюлозе, поскольку линейный участок гидролиза данного субстрата очень ограничен Недостатком методов определения общей целлюлазной активности является и то, что они проводятся, как правило, без перемешивания (FPA, активность по хлопковому волокну). Это может значительно искажать получаемые результаты в силу диффузионных ограничений При определении активности с использованием нерастворимой целлюлозы необходимо учитывать и возможную нелинейную зависимость начальной скорости гидролиза целлюлозы от концентрации субстрата. [c.135]

Метод определения КМЦ-азной активности целлюлазного комплекса [57] [c.147]

Проблемы, связанные с молекулярными основами превращений химической энергии АТФ в механическую энергию процессов сокращения и движения, чрезвычайно сложны [3, 15]. Это объясняется тем, что вне живого организма отсутствуют примеры непосредственного превращения химической энергии в механическую. Механическая работа может быть представлена сокращением мышц, а также движениями ресничек и жгутиков у простейших. Большинство клеток содержат сократительные нити (фибриллы), которые осуществляют организацию содержимого клетки, движение и перенос клеточных веществ, процессы клеточного деления и т. д. В качестве примера преобразования энергии АТФ в механическую работу можно привести процессы мышечного сокращения, связанные с использованием энергии АТФ [3, 15, 18], при этом важную функцию выполняют белковые компоненты мышечных клеток — комплекс миозина и актина, названный актомиозином. Актомиозин и его компонент миозин обладают АТФ-азной активностью, т. е. способны гидролизовать концевую фосфатную группу АТФ. Однако АТФ-азную активность актомиозина стимулируют ионы Mg +, а миозина — ионы Са +. Сигналом для сокращения мышц является электрический импульс, приходящий из двигательного нерва через нервномышечное соединение. До получения импульса по обе стороны мембраны (сарколемма) мышечной клетки поддерживается, разность потенциалов (с наружной стороны имеется избыточный положительный заряд). При распространении импульса по мембране разность потенциалов сразу исчезает. Считают, что это является результатом резкого повышения проницаемости мембраны для ионов К+, Na+ и Са2+ при этом направление потоков ионов вызывает разряд трансмембранного потенциала. После этого мембрана вновь возвращается в поляризованное состояние, а ионы Са + входят внутрь саркоплазматической сети мышечной клетки. Подобный перенос ионов Са + осуществляется за счет свободной энергии гидролиза АТФ (АТФ-азный кальциевый насос мембраны). Поставщиками АТФ в мышечных клетках служат как гликолиз, так и дыхание. Однако при нарушении этих процессов мышца (скелетная мышца позвоночных животных) при стимуляции продолжает сокращаться благодаря тому, что в ней содержится богатое энергией вещество — креатинфосфат (см. стр. 416), концентрация которого более чем в 4 раза превышает концентрацию АТФ. В мышце идет реакция [c.430]

Биохимические функции. Высокая гидрофобность Т3 и является основанием для действия их по цитозольному механизму. Оказалось, что рецепторы тиреоидных гормонов в основном находятся в ядре и образованные гор-мон-рецепторные комплексы, взаимодействуя с ДНК, изменяют функциональную активность некоторых участков генома. Результатом действия Т3 и Т4 является индукция процессов транскрипции и, как следствие, биосинтез многих белков. Эти молекулярные механизмы лежат в основе влияния тире-оидньгх гормонов на многие обменные процессы в организме. Тиреоидные гормоны обладают выраженным анаболическим действием, важным проявлением которого является повышение поглощения кислорода тканями организма, а также повышение эффективности Ка /К -АТФ-азного насоса. Гормоны щитовидной железы участвуют в регуляции обмена липидов, в частности холестерина, углеводов, а также водно-солевого обмена. Гипертиреоз проявляется в патологической интенсификации основного обмена, гипертонии, тахикардии. Это происходит на фоне гипергликемии, глюкозурии в условиях отрицательного азотистого баланса. Гипофункция щитовидной железы проявляется в резком снижении скорости метаболических процессов, гипотонии и брадикардии. Врожденный гипотиреоз приводит к замедлению умственного развития в результате поражения ЦНС. Приобретенный гипотиреоз может [c.152]

Каким же образом электрохимический потенциал протонов используется в синтезе АТФ Процесс фосфорилирования катализируется Н -зависимым АТФ-азным комплексом Н -АТФ-синтетаза. Этот сложный комплекс состоит из растворимого каталитического компонента Fj и мембранного компонента Fo (рис. 15.8). [c.204]

Трансмембранная разность электрохимического потенциала ионов водорода, генерируемая на тилакоидной мембране в результате рассмотренных выше процессов, используется как энергетический ресурс для синтеза АТФ. В ходе реакции фосфорилирования через АТФ-азу из внутреннего реакционного пространства в наружную среду проходят протоны. При этом градиент Ац.д+ уменьшается. Согласно имеющимся данным, синтез каждой молекулы АТФ происходит в результате перемещения трех протонов через АТФ-азный комплекс. [c.62]

Стадией, лимитирующей синтез АТФ, является высвобождение синтезированного АТФ из активного центра фермента в матрикс. Полагают, что энергозависимое протонирование отдельных функциональных групп АТФ-азного комплекса, происходящее за счет энергии АцН , вызывает конформационные изменения в Р компоненте, которые приводят к быстрому высвобождению синтезированного АТФ из активного центра фермента. Важным моментом является обратимость реакции, катализируемой АТФ-азным комплексом. При соответствующих условиях комплекс Рд—Р может расщеплять молекулу АТФ и использовать полученную при этом энергию для транспорта протонов, т. е. для образования на мембране АцН . Согласно концепции, постулированной В. П. Скулачевым, наряду с АТФ используется как конвертируемая валюта для энергетических превращений, протекающих на мембране. В связи с этим было предложено все энергетические превращения в клетке подразделить на две группы протекающие в цитоплазме (источник энергии — АТФ, креатинфосфат и другие макроэрги) и локализованные в мембране, использующие энергию Д йН (рис. 15.9). Следует отметить, что не уникален в качестве сопрягающего иона и у некоторых видов организмов при определенных условиях его может заменить ион натрия. [c.205]

Депарафинизация твердым карбамидом с применением фильтрации — вариант АзНИИ [33. Обрабатываемый продукт — дистиллят трансформаторного масла растворитель-разбавитель — бензин, кипящий в пределах 65—130° растворитель-активатор — изопропиловый спирт агрегатное состояние карбамида — твердый, кристаллический способ отделения комплекса — вакуумная фильтрация на барабанных фильтрах непрерывного действия. [c.209]

Активный фермент содержит как минимум 2а- и 2р-субъединицы, которые плотно интегрированы в мембрану и активируются ионами В настоящее время экспериментально доказано, что Ка /К -АТФ-аза является как энергопреобразующей частью На /К -насоса , так и сама осуществляет активный транспорт Na и К" ", сопряженный с гидролизом АТФ, т. е. переносит катионы против градиента концентрации. Описаны два конформационных состояния АТФ-азного комплекса с различным энергетическим уровнем, которые принято обозначать и Е . Конформация Е имеет канал, открытый внутрь клетки, и участки, специфично связывающие ионы [c.312]

Описаны два конформационных состояния АТФ-азного комплекса с различным энергетическим уровнем, которые принято обозначать и Е2. Конформация имеет канал, открытый внутрь клетки, и участки, специфично связывающие ионы Ма+ (дефосфорилирован-ная форма АТФ-азы). При переходе в конформацию Е2 происходит переориентация комплекса в мембране, канал открыт на наружную сторону мембраны и фермент специфично связывает ионы К+ (фосфорилированная форма АТФ-азы). [c.59]

Образующийся в результате рассмотренных процессов мембранный потенциал и трансмембранный градиент pH являются движущей силой для протекания реакций фосфорилирования, осуществляемого АТФ-азой. Этот ферментный комплекс состоит из двух компонентов, один из которых ( о) расположен трансмембранно, а второй ( 1) локализован на внутренней поверхности сопрягающей мембраны. Если дыхательная цепь перекачивает протоны из внутреннего пространства в наружную среду, то -при синтезе АТФ протоны проходят через АТФ-азный комплекс в противоположном направлении, уменьшая А Лд+. В результате про-58 [c.58]

Связывание тройственного комплекса с А-участком рибосомы индуцирует его ГТФ-азную активность, и ГТФ, входящий в комплекс, гидролизуется [c.621]

ДДА)25 Ю42- (ДДА) 6002(53=04) 4 и в виде смеси этих соединений. В первом случае переход 5 =642- в водную фазу был наиболее быстрым, во втором — наиболее медленным в третьем случае скорость перехода была промежуточной. Следовательно, обмен 5 Ю42 между двумя компонентами органической фазы должен быть медленнее, чем меж( )азное изотопное разбавление. В противном случае скорость перехода не зависела бы от метода введения меченого изотопа. Медленный обмен свободных и связанных лигандов, установленный для комплексов в водных растворах, обычно считают доказательством внутренней координации. Медленный обмен во втором случае может быть объяснен возникновением сильной координационной связи. [c.324]

Показана также возможность усовершенствования технологии алкилирования при производстве присадки АзНИИ-7 подачей хлористого алюминия в виде катализаторного комплекса. Некоторые работы проведены также по усовершенствованию технологии производства новых многофункциональных нрисадок алкилфенольного и сульфонатного типа. [c.160]

Интересно в связи с этим вернуться к важному факту, открытому В. А. Энгельгардтом и М. Н. Любимовой,—наличию АТФ-азной активности у миозина (стр. 548). Миозин в комплексе с актином (актомиозин) является сократительным белковым комплексом мышечных фибрилл. Он обладает способностью не только сокращаться, но и катализировать гидролитическое отщепление фосфорной кислоты от аденозинтрифосфорной кислотьг с освобождением энергии, используемой мышцей для ее работы. [c.552]

У анаэробных бактерий Д д н+ генерируется так называемыми АТФ-азными комплексами (АТФ - основной источник энергии клетки, вещество, ответственное за аккумуляцию энергии в живых организмах). Особый фермент (мембранносвязанная АТФ-зависимая АТФ-аза) "выталкивает" протоны из клетки. Связь гидрогеназной активности СВБ с водородной деполяризацией представлена на рис. 1. [c.34]

В свете изложенного, считая поставленные задачи особо актуальными, при подготовке настоящей монографии автор стремится дать возможно полный и всесторонний анализ действующего и намечающегося комплекса переработки нефтей Баку, особенно с точки зрения развития промышленности нефтехимического синтеза, и оценить перспективы его развития. С этой целью были обработаны и использованы практические данные и материалы заводских лабораторий Управления нефтеперерабатывающей и химической промышленности совнархоза Азербайджанской ССР, исследования ведущих советских и иностранных ученых, а также АзНИИ НП им. Куйбышева (ныне ИНХП АН Азерб. ССР), ВНИИ НП (Москва), ВНИИолефин, Гипрокаучук, НИИСС, НИОПиК и других организаций. [c.7]

В мышце миозин функционирует при взаимодействии с актином,— как уже сказано, через мостики ТММ — в актомиозиновом комплексе. В этих условиях ионы Mg оказывают активирующее действие. Таким образом, для АТФ-азной активности in vivo необходимы и Са , и Mg . [c.397]

Для характеристики эндоглюканаз широко используется и изложенный выше метсд Определения КМЦ-азной активности на ранних стадиях гидролиза, когда вклад других компонентов комплекса в образование васстанавливающих сахаров минимален. Достоинством метода, по сравнению с вискозиметрией, являются простота его проведения, возможность вырг1жать активность непосредственно в международных единицах. К недостаткам метода относятся сложность определения истинного начального участка гидролиза КМ-целлюлозы, зависимость результата от степени замещения субстрата. Обычно для характеристики очищенных [c.136]

Определение экзоглюкозидазной активности осуществляют подобно определению КМЦ-азной активности, регистрируя кинетику накопления глюкозы в Реакционной смеси с использованием глюкозооксидазно-пероксидазного метода. Если целлюлазный комплекс содержит целлобиазу, следует подобрать активность глюконолактона, при которой активность целлобиазы равна нулю. Обычно, если целлобиазная активность лежит в пределах [c.148]

Компонент F — белок с молекулярной массой 36—38 kDa — состоит из пяти типов субъединиц а, р, у, 5, г. Его вероятная формула apySs, основные каталитические свойства компонента F (синтез АТФ) обеспечиваются а- и Р-субъединицами, у- и 5-белки осуществляют связь компонента F с остальными компонентами комплекса, а е-субъединица является ингибитором АТФ-азной активности. [c.204]

Ряд интересных соединений удалось получить исходя из самих ароматических арсинов. Фениларсин СеНйАзН, (темп. кип. 148° , 6 5 = 1,356) и дифениларсия (СеН5)2 АзН (темп. кип. 174° при 25 мм) сами по себе мало прочны и очень быстро окисляются на воздухе. При действии на Гриньяровские магний-комплексы оба эти арсина, образуют (в эфирном растворе) непрочные магний-галоидосоединения, например [c.182]

На опытно-промышленной установке Московского нефтеперерабатывающего завода для депарафинизации по методу АзНИИ НП применяется мочев ина в виде 70%-ного раствора в изопропиловом спирте [32, 33], а кристаллический комплекс от жидкой фазы отделяется на вакуум-фильтрах. [c.19]

L-миозин был очищен на ДЭАЭ-целлюлозе в 0,25 М растворе КС1 с 5 мМ трис-НС1-буфером, pH 7,5 [49]. Хотя удельная АТФ-азная активность не была постоянной во всех фракциях пика, общая активность была выше, чем активность исходного препарата способность вступать с актином в актомиозиновый комплекс сохранялась. [c.240]

В некоторых опытах смесь фрагментов гидролизовали Т - и панкреатической РНК-азами и затем устанавливали структуру самых крупных продуктов гидролиза стандартным фингерпринтированием. Несмотря на то что относительные выходы защищенных участков РНК от опыта к опыту несколько изменялись, в общем между опытами по связыванию наблюдалось соответствие и образующийся набор олигонуклеотидов оказывался одним и тем же независимо от того, использовалась ли для расщепления комплекса Т - или панкреатическая РНК-аза. В результате информации, полученной при анализе продуктов частичного Т i -РНК-азного гидролиза экранированных участков, многие из этих олигонуклеотидов можно было расположить в виде перекрывающихся последовательностей. Это позволило заключить, что исходному набору олигонуклеотидов отвечает несколько дискретных длинноцепочечных последовательностей. Одна из них, очевидно, включает стартовый участок цистрона белка оболочки, поскольку она содержит последовательность [c.175]

Приведенные выше заключения основываются на допущении, что в растворе ионофор сохраняет конформацию, подобную наблюдаемой в кристаллическом состоянии. Это допущение можно проверить ЯМР-исследованием, с помощью которого обнаружены различные конформации комплексов К+, Ма+ и Сз+ и свободного ионофора [32, 33]. При описании валиномицина будет дан другой пример применения метода ЯМР для изучения ионофоров. Ионная селективность макролидных актинов (смешанные образцы из нонактина и монактина), впервые обнаруженная по зависимости стимуляции дыхания в митохондриях от природы иона, изменяется в ряду К+>КЬ+>Сз+>Ыа+>Ь + [9]. Такой же ряд селективности был получен на основании АТФ-азной индукции, которая также зависит от связанного с транспортом рассеяния энергии митохондриями [34, 35]. У более высоких членов гомологического ряда ионофоров способность индуцировать К+-зависимую АТФ-азу увеличивается, но отношение селективностей K+ Na+ уменьшается. У более низких гомо- [c.251]

В ферментативных реакциях самые убедительные доказательства участия механизма с координированным ионом гидроксила получены для карбоангидразы. По данным инфракрасной спектроскопии, молекула субстрата (СО2) не связана с атомом цинка, но расположена сравнительно близко от него, чтобы быть атакованной координированным гидроксильным ионом [82] (гл. 16, разд. 7). С этим механизмом согласуется зависимость активности от pH и природы разнообразных ингибиторов [ 114, 115]. Селвин [112] предложил похожий механизм для АТФ-азы митохондрий, участвующей в окислительном фосфорилировании. Он основывался на сходстве рН-зависимостей ферментативной реакции и упомянутого выще ускорения гидролиза АТФ ионами лантанидов. Однако величина р/Са для АТФ-азной реакции (примерно 7) была намного выще р/Са воды в комплексе с активирующими двухзарядными ионами. Для наилучщих активаторов М 2+, Со2+ и Ъг эта величина примерно равна соответственно 12, ---9 и 9 [87]. Селвин [112] предполагает, что кислотность комплексов может увеличиваться под влиянием положительно заряженных групп фермента, расположенных поблизости. Надо признать, что расхождение в 5 единиц pH для Mg2+ слишком велико, чтобы его можно было объяснить таким образом (необходимая для этого энергия электростатичеокого взаимодействия должна составлять примерно 7 ккал/моль). Выще говорилось о том, что ионизация свободной молекулы воды предложена в качестве объяснения перехода при pH 8,5, наблюдаемого для 2п +-содержащей щелочной фосфатазы. При этом увеличение pH приводило к уменьщению активности фермента. В силу этого можно считать, что механизм с координированным гидроксильным ионом вряд ли играет существенную роль при ферментативном гидролизе фосфатов. [c.651]

Давно известно, что фактор IF2 обладает рибосомозависимой GTP-азной активностью. В присутствии рибосом данный фактор осуществляет гидролиз GTP, высвобождая энергию, запасенную в высокоэнергетической связи. Несмотря на то что GTP является составной частью полностью сформированного инициирующего комплекса, все же точно не ясно, на какой стадии присоединяется нуклеотид. Наиболее вероятно, что это происходит во время или сразу же после связывания бинарного комплекса с 308-субчастицей. Далее, когда присоединяется 508-субчастица и образуется полная рибосома, в присутствии IF2 происходит гидролиз GTP. Возможно, фактор IF2 сам не является GTPa3oft, но активирует какой-то рибосомный белок, выполняющий эту функцию. [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология