Взаимодействие гидрофобное неспецифическое

Неполярный растворитель (толуол) увеличивает вращательную подвижность адсорбированного радикала I (тс уменьшается до 2,5-10-э с [29]), по-видимому, в результате уменьшения неспецифического взаимодействия гидрофобной части молекулы I с поверхностью. [c.247]

Термин гидрофобная связь следует считать не совсем удачным, как справедливо отметил Гильдебранд [39], поскольку при ассоциации гидрофобны молекул в воде речь идет не об образовании каких-то определенных связей, а о неспецифических взаимодействиях, определяемых изменениями структуры воды, как растворителя. [c.26]

При замене воды органическим полярным растворителем метанолом, имеющим гидрофобную группу СНз, происходит ослабление адсорбции органического вещества 1 на саже. Причиной этого является ак конкуренция молекул растворителя — метанола, адсорбирующегося на саже сильнее воды, так и усиление неспецифического межмолекулярного взаимодействия органического вещества с органическим же растворителем, т. е. с объемом раствора. [c.255]

Для данного антитела на связывание антигена влияет наличие активного центра и его конформационная целостность. Связывание большее, чем ожидаемое, может также являться результатом неспецифического взаимодействия с определимым веществом. В случае систем твердофазного анализа использование поверхностно-активных веществ, чтобы сделать поверхность менее гидрофобной, может уменьшить вторую проблему, ио высокая концентрадия поверхностно-активного вещества может привести также к потере антител, если оии связаны нековалентно. [c.602]

Если встречаются затруднения при непосредственном связывании лиганда с носителем, зачастую этого можно добиться с помощью промежуточных спейсеров — плеч, т. е. небольшой линейной углеводородной цепи, несущей с каждого конца химическую группу, одна из которых служит для закрепления на носителе, а другая—для связывания лиганда. Главная задача плеча состоит в ослаблении стерических взаимодействий между лигандом и подлежащим очистке веществом, так как его длина является важным параметром для выделения. Кроме того, большое значение имеют свойства спейсера — гидрофильные или гидрофобные. Преимущество гидрофобных спейсеров заключается в достаточной простоте и доступности этих веществ, но они неудобны тем, что образуют неспецифические связи. Гидрофильные спейсеры, обычно представляющие собой синтетические полипептидные соединения, вызывают неспецифические ионные взаимодействия. По правде говоря, идеальные спейсеры должны обладать неионными и гидрофильными свойствами, устанавливая неспецифические взаимодействия. [c.82]

Полярность материалов, модифицированных органическими радикалами с амино- и цианогруппами, меньше, чем у исходных силикагелей, и полярные органические соединения удерживаются такими сорбентами слабее. Следовательно, они могут быть рекомендованы для разделения наиболее полярных соединений в нормально-фазовом режиме. С другой стороны, эти сорбенты гидролитически устойчивы при pH 2,0—7,5 и потому могут использоваться также в обращенно-фазовом режиме. Хотя возможности такого их использования изучены пока недостаточно, можно ожидать, что помимо неспецифических гидрофобных взаимодействий проявятся также взаимодействия между полярными группами в молекулах сорбатов и неподвижной фазой. В результате селективность таких систем будет отличаться от селективности традиционных обращенно-фазовых систем. [c.161]

Если известна общая эффективная концентрация лиганда, способного связывать фермент (8 мкмоль в 1 мл геля), то можно определить расстояние между ножками , на которых молекулы лиганда прикреплены к гелю оно равно 29 А. Поскольку диаметр молекулы р-галактозидазы 140 А, можно сделать вывод, что приблизительно 19 ножек (пространственных групп) могут взаимодействовать с каждой молекулой белка. Это объясняет, почему в замещенных гелях настолько сильно проявляются неспецифические электростатические и гидрофобные взаимодействия. Если к этим пространственным группам привязан ингибитор, можно ожидать более специфических взаимодействий фермента с сорбентом при низком уровне модификации геля лигандом. [c.99]

НОГО лиганда были больше диаметра молекул выделяемого вещества. Это, однако, не должно оказывать влияния на специфическое взаимодействие молекулы вещества с молекулой лиганда, например активного центра фермента с иммобилизованным субстратным аналогом. Другой способ уменьшения неспецифической сорбции— предотвратить образование зарядов и гидрофобных участков в иммобилизованных аффинных лигандах (разд. 5.1 и 8.3). [c.279]

С уменьшением pH могут происходить изменения в механизме связывания. Так, при использовании колонок с иммобилизованным фенилборонатом при рН<8,0 возникают затруднения по количественному разделению HbAi и НЬА, поскольку при этом pH имеет место гидрофобное взаимодействие, вызывающее неспецифическое связывание с колонкой НЬА [14]. [c.110]

В случае этанола значительно более сильное взаимодействие с ГТС обеспечивается наличием в молекуле гидрофобной части — ее этильной группы. Это стабилизирует молекулы С2Н5ОН на поверхности ГТС и обеспечивает их ассоциацию за счет водородных связей, возникающих между адсорбированными молекулами. В результате этого низкая теплота адсорбции изолированных молекул спирта при малых заполнениях поверхности ГТС быстро растет и уже при сравнительно небольших Г достигает значений, равных и даже ббльЩих L, после чего медленно приближается к L. Соответственно изотерма адсор бции пара этанола на ГТС быстро поднимается, проходит точку перегиба, после чего рост Г с ростом р/ро замедляется. Таким образом, в этом случае проявляются два важных фактора стабилизирующее действие неспецифических меж- [c.223]

На неполярных адсорбентах из сильно полярных элюентов, например, водно-спиртовых смесей, сильнее адсорбируются молекулы, содержащие неполярные углеводородные цепи, циклы или группы (см. рис. 14.4 и 14.15). В основном эти молекулы удерживаются на неполярной (гидрофобной) поверхности за счет адсорбции их неполярных частей, т. е. за счет неспецифического межмолекулярного взаимодействия с адсорбентом, как это было показано в разделе 16.5 при адсорбции ароматических углеводородов из водных растворов на гидроксилированной поверхности кремнезема. Полярные же группы молекул дозируемого вещества при адсорбции на неполярном адсорбенте из полярного элюента уменьшают удерживание, так как их межмолекулярное взаимодействие с полярными грушпами молекул элюента, влияя на их ориентацию, ослабляет межмолекулярное взаимодействие молекул дозируемого вещества с адсорбентом и облегчает их возвращение в объем элюента. Таким образом, в этом случае удерживание в основном определяется, во-первых, неспецифическим межмолекулярным взаимодействием молекул дозируемого вещества с адсорбентом и, во-вторых, специфическим межмолекулярным взаимодействием этих молекул с элюентом, причем последнее уменьшает удерживание. Этот молекулярный механизм удерживания надо иметь ввиду, так как распространенный в литературе по жидкостной хроматографии термин обращеннофазная хроматография не передает существа дела. Действительно, из лекции 16 следует, что органические вещества, во-первых, удерживаются из водных растворов и на полярном адсорбенте (гидроксилированной поверхности силикагеля) и, во-вторых, порядок выхода органических веществ может быть изменен при изменении состава элюента как на полярном, так и неполярном адсорбентах. [c.307]

Этот выбор диктуется в основном стремлением сохранить нативность очищаемого белка и максимально уменьшить неспецифическую сорбцию других компонентов исходной смеси. Само аффинное связывание вещества с лигандом, как правило, от состава буфера я ид-кой фазы зависит мало. Интересами сохранения нативности и растворимости белка диктуются выбор pH, наличие соли, а иногда (например, для белков мебран) введение в буфер добавок органических растворителей или детергентов. Все это определяется известными свойствами данного белка. Неспецифическая сорбция примесей, в частности балластных белков, на матрице и спейсерах происходит за счет тех же самых сил (притяжения разноименно заряженных групп, водородных связей и гидрофобных взаимодействий), которые обусловливают и биоспецифическое снизывание вещества с лигандом. Избирательность и прочность аффинной связи обусловлены кооперативным действием различных сил в области связывания, где они дополняют друг друга. Благодаря такой кооперации имеется возможность ввести в буфер факторы, ослабляющие действие сил какого-либо типа или даже всех их одновременно, но в такой степени, что биоспецифическое аффинное взаимодействие будет ослаблено лишь частично, в то время как неспецифическую сорбцию удастся подавить практически полностью. [c.404]

Распределение вещества между фазами зависит от силы электростатического взаимодействия заряженных ионизированных групп вещества с заряженными группами ионообменника. Некоторые гидрофобные соединения или вещества, способные образовывать водородные связи, могут взаимодействовать с материалом матрицы неспецифически. [c.36]

В связи с проблемой гидрофобных эффектов в биополимерах многих исследователей привлекали особенности распределения гидрофобных аминокислотных остатков в белковой молекуле, определяемые свободной энергией взаимодействия с водным окружением. Наиболее известная термодинамическая шкала гидрофобности Нозаки и Танфор-да [19] основана на измерении растворимости АК в воде и чистом этаноле. Нозаки и Танфорд предположили, что этанол может служить моделью внутренней области белковой молекулы. Поэтому разность свободных энергий гидрофобного радикала АК в этаноле и воде будет простой мерой свободной энергии взаимодействия с водой, так как неспецифические взаимодействия в этаноле имеют такую же свободную энергию, как и внутри белка. Свободная энергия переноса этанол вода рассчитывается из отношения растворимостей в этих растворителях по формуле [c.190]

Теплоты адсорбции воды и метанола на порапаке К [7], измеренные газохроматографическим методом при температурах выше температур кипения этих веществ, близки к значениям, полученным на неспецифическом адсорбенте I типа — графитированной саже. На этом основании авторы [7] считают, что вода и метанол взаимодействуют с поверхностью порапака К только неспецифически, а более высокие значения теплот адсорбции, полученные при низких температурах, свидетельствуют о сильном взаимодействии адсорбат—адсорбат. Форма изотерм адсорбции воды (вогнутая относительно оси адсорбции) — типичная для взаимодействия воды с гидрофобными адсорбентами. [c.97]

Представления о механизме удерживания на неспецифических адсорбентах описаны в работах К. Хорвата и др. Это так называемый сольвофобный или гидрофобный механизм удерживания. Рассматривается обратимое взаимодействие между адсорбируемым веществом и привитым углеводородным модификатором поверхности. Коэффициент емкости колонки связывается со свойствами углеводородных цепей и составом элюента. Сольвофобная теория разработана для низких коэффициентов распределения веществ в растворителях. Процесс растворения в этом случае — двухступенчатый. Первая ступень — образование полости в растворителе (элюенте) по форме и размерам входящей молекулы растворенного вещества. Изменение свободной энергии А(АО), требуемой для этого процесса, есть произведение площади поверхности полости и поверхностного натяжения растворителя (элюента). Вторая ступень — размещение молекул в полости. Энергия этого процесса определяется ван-дер-ваальсовым и электростатическим взаимодействиями. Окончательное выражение принимает в расчет различие свободного объема между конденсированной и газовой фазами. [c.302]

При адсорбции веществ на неполярных адсорбентах из сильнополярных элюентов, чаще всего — водно-спиртовых смесей (так называемый обращенно-фазовый вариант хроматографии), сильнее адсорбируются молекулы веществ, содержащих алкильные неполярные циклы или гр)Т1пы. В основном эти вещества удерживаются на неполярной (гидрофобной) поверхности за счет адсорбции неполярных частей их молекул, т. е. за счет неспецифического взаимодействия. Полярные гр)шпы молекул сорбата только уменьшают удерживание, так как они взаимодействуют с полярными группами молекул элюента, а это взаимодействие ослабляет межмолекулярное взаимодействие разделяемых молекул с сорбентом и облегчает их возвращение в объем полярного элюента. Таким образом, в этом случае удерживание в основном определяется, во-первых, неспецифическим взаимодействием — вещество - сорбент [c.304]

Неспецифические взаимодействия значительно более однородны и обусловлиааютсй только электростатическими или гидрофобными связями. Например, РНК-полимераза образует неспецифические комплексы с любыми полианионами — гепарином, полиинозиновой кислотой, одноцепочечнон и даухцепочечной ДНК. [c.405]

Молекулярно-клеточные механизмы действия описанных полиэлектролитов связаны с их способностью взаимодействовать с поверхностной мембраной клетки, что обеспечивает активацию неспецифических мембранных и цитоплазматических процессов, включающих лимфоциты в пролиферацию и дифференцировку [79]. Все эти полиэлектролиты способны вступать в кооперативное взаимодействие с комплементарными структурами биосистем и образовывать интерполимерные комплексы за счет электростатических и гидрофобных связей. Оказалось, что существует прямая корреляция между комплексообразующей способностью полиэлектролитов и их иммуноадъювантной активностью [80, 81]. [c.179]

Агарозные гели с привитыми углеводородными радикалами (алкил- и фе-пил-агарозы) предложены недавно для хроматографического разделения и очистки белков на основе неспецифического взаимодействия с гидрофобной поверхностью ( гидрофобная хроматография — см. Йон, 1972 и Хофсти, 1973). Фенил-агароза наряду с гидрофобным взаимодействием проявляет специфичность к ароматическим веществам (наприМер к белкам с фениловыми и тирозиловыми группами) иа основе я-л взаимодействия ароматических остатков. Элюирование веществ при гидрофобной хроматографии достигается изменением ионного состава раствора, понижением его ионной силы или полярности (например посредством включения этиленгликоля в состав элюента) или с помощью детергентов. [c.209]

Однако термин аффинная хроматография вызывал (и все еще продолжает вызывать) много возражений. Делались попытки заменить его более точным например, биоспецифическая адсорбция или биоаффинная хроматография [29, 31], в особенности когда было найдено, что ряд сорбентов, в особенности такие, ко торые связываются с синтетическими ингибиторами своей гидро фобной углеводородной цепью, могут сорбировать макромолекуль в результате преимущественно гидрофобных взаимодействий [28] Использование комплексообразования биологических макромоле кул, основанного на гидрофобных взаимодействиях, положило на чало гидрофобной хроматографии [38]. Однако во многих слу чаях провести четкую границу между биоспецифическим комплексом и комплексом, образующимся в результате действия неспецифических гидрофобных взаимодействий, не так просто, как могло бы показаться на первый взгляд. Часто одно и то же вещество, привязанное к носителю, с одной группой макромолекул может образовывать биоспецифические комплексы, в то время как с другой оно может давать комплексы исключительно благодаря неспецифическим гидрофобным взаимодействиям, а в образовании [c.9]

Адсорбционная энергия для неспецифической сорбции АОнеспец складывается из энергии гидрофобных, гидрофильных или даже ионных взаимодействий и сопоставима с адсорбционной энергией в обычной хроматографии. Она очень сильно зависит от природы нерастворимого носителя и белка. ДОнеспец должна быть по возможности низкой, потому что она включает также сорбцию молекул, которые образуют неспецифические комплексы с аффинантом. [c.63]

Работы О Карра и др. [26] показали, однако, что наиболее часто причиной мнимой аффинности систем является неспецифическая сорбция на незаряженной пространственной группе или даже не-биоспецифнческая сорбция белков, обусловленная гидрофобными взаимодействиями. При близком рассмотрении становится очевидным, что эти гидрофобные взаимодействия могут быть полезны для разделения многих веществ для этого типа хроматографии [c.95]

Морроу и др. [23] разработали иолуколичественную теорию неспецифического связывания белков на замещенных хроматографических аффинных носителях, которое обусловлено электростатическими и гидрофобными взаимодействиями. В разд. 5.1 детально рассмотрено выделение р-галактозидазы из Es heri hia соИ, проводимое на сефарозе с прикрепленным ингибитором (п-аминофе-нил-р-о-тиогалактопиранозидом) [31]. Активный сорбент получали присоединением ингибитора через пространственную группу, полученную из бис-(3-аминопропил) амина и янтарного ангидрида. Однако активность сорбента была значительно ниже, если эта пространственная группа обладала гидрофильными свойствами [26]. Робинсон и др. [29] использовали аффинный сорбент, при- [c.95]

О Карра и сотр. [71а] позднее показали, что увеличение сорбционной активности обусловлено главным образом природой группировки, которой Р-галактозидаза присоединена к носителю, а именно гидрофобными взаимодействиями. Адсорбент В (см. рис. 7.3) сохраняет сильное сродство к Р-галактозида-зе даже после замещения Р-тиогалактозида неспецифическим а-глюкозидом или N-фенилглицином. Однако он теряет активность при замене присоединяющей группировки на полярную или гидрофильную. В аналогичных случаях, когда в связывающую способность адсорбента вносит вклад неспецифическа сорбция, авторы [71а1 вводят термин сходство к данному соединению -. [c.9]

Гидрофобные углеродистые сорбенты. Графитироваиные термические сажи (ГТС) являются в высшей степени гидрофобными и термостойкими сорбентами, способными к неспецифическому взаимодействию с различными органическими адсорбатами. Эти свойства, а также химическая инертность поверхности позволяют использовать ГТС в качестве наполнителей сорбционных трубок для концентрирования органических примесей атмосферы [63, 71, 73—75]. [c.44]

Представления о механизме удерживания на неспецифических адсорбентах описаны в работах [451]. Это так называемый сольвофобный или гидрофобный механизм удерживания. Рассматривается обратимое взаимодействие между адсорбируемым веществом и привитым углеводородным модификатором поверхности. Коэффициент емкости колонны связывается со свойствами углеводородных цепей и составом элюента. Сольвофобная теория разрабатана для низких коэффициентов распределения веществ в растворителях. Процесс растворения в этом случае — двухступенчатый. Первая ступень — образование полости в раст- [c.216]

При адсорбции веществ на неполярных адсорбентах из сильнополярных элюентов, чаще всего водноспиртовых смесей (так называемый обращенно-фазовый вариант хроматографии), сильнее адсорбируются молекулы веществ, содержащих неполярные циклы или группы, например цикланные или алкильные. В основном эти вещества удерживаются на неполярной (гидрофобной) поверхности за счет адсорбции неполярных частей их молекул, т. е. за счет неспецифического взаимодействия. Полярные группы молекул адсорбата только уменьшают удерживание, так как они взаимодействуют с полярными группами молекул элюента, а это взаимодействие ослабляет межмолекулярное взаимодействие разделяемых молекул с адсорбентом и облегчает их возвращение в объем полярного элюента. Таким образом, в этом случае удерживание в основном определяется, во-первых, неспецифическим взаимодействием вещество — адсорбент и, во-вторых, специфическим взаимодействием вещество-элюент, причем последнее уменьшает удерживание. Этот молекулярный механизм удерживания надо иметь в виду, так как распространенный термин обращенно-фазовая хроматография не передает существо дела, тем более, что, как мы видели, органические вещества удерживаются и на гидроксилированной поверхности силикагеля из водных растворов. [c.239]

При взаимодействии СНг СНг> освобождается примерно 0,7 ккал моль энергии гидрофобного связывания. За счет появляющихся теперь между АиВ усиленных неспецифических ван-дер-ваальсовых сил дополнительно может быть получено еще до 0,7 ккал1моль на взаимодействие пары метилен — метилен [49]. [c.24]