Пептиды выделение

По хим. св-вам А,-типичная алифатич. о.-аминокислота. L-A.-кодируемая аминокислота, встречается во всех организмах в своб. виде и в составе белков. D-A. обнаружен только в бактериях и в опиоидных пептидах, выделенных из кожи южноамериканских лягушек. Биосинтез L-A. происходит в результате аминирования и переаминирования пировиноградной к-ты или -декарбоксилирования аспарагиновой к-ты. [c.81]

Все белки, изученные до сих пор, обладают антигенными св-вами. У белков различают линейные детерминанты, построенные из аминокислотных остатков, расположенных рядом в одном участке полипептидной цепи, и конформационные, к-рые слагаются из аминокислотных остатков разных участков одной или большего числа полипептидных цепей. Антитела, полученные при иммунизации данного животного определенным белком, могут реагировать, хотя и с небольшим сродством, с нек-рыми пептидами, выделенными из гидролизата зтого белка. Такие пептиды, построенные из 5-7 остатков, часто располагаются на изгибах или выступающих отрезках пептидной цепи и, очевидно, являются детерминантами или их частями. Однако в иных условиях, напр, при иммунизации др. вида животного, могут образовываться антитела к иным участкам молекулы того же белкового А. Практически вся пов-сть белковых молекул обладает антигенными св-вами, она, т. обр., представляет собой сумму перекрывающихся детерминант, каждая из к-рых может вызывать иммунную р-цию или не вызывать ее в конкретных условиях. Последние определяются различиями в строении между белковым А, и собственными белками организма, а также регуляторными иммунными механизмами, находящимися под генетич. контролем. По-видимому, почти все детерминанты белков конформационно зависимы. Согласно данным рентгеноструктурного анализа, антигенные детерминанты обладают повыш. подвижностью. [c.174]

По сравнению с относительно большими пептидами тимуса пептид, выделенный из крови свиньи [794], содержит всего 9 аминокислотных остатков [c.296]

Тринадцать основных пептидов, выделенных при гидролизе рибонуклеазы, содержат все аминокислотные остатки, входящие в состав этого фермента исследование осколков позволило точно определить количество остатков двух аминокислот [152]. Порядок соединения пептидов между собой в исходном белке был установлен по результатам исследования пептидов, полученных из рибонуклеазы под действием химотрипсина [154]. [c.191]

По мере того как растет число новых по свойствам пептидов, выделенных из природных источников, возрастающая сложность Их структур отражает совершенство методов установления их строения. За исключением особо интересных случаев установление структуры рассматриваться не будет, и основное внимание в [c.295]

При специфическом ферментативном гидролизе или химическом расщеплении любого белка среднего молекулярного веса получается довольно сложная смесь пептидов. Выделение и очистка всех пептидов, из которых состояла полипептидная цепь и которые содержатся в нефракционированном гидролизате, — задача достаточно трудная. Поэтому гидролизат белка рекомендуется сначала подвергнуть предварительному разделению. Среди современных методов фракционирования наиболее подходящим для этой цели является гель-фильтрация. [c.226]

Растворимые пептиды, выделенные после дигерирования с химотрипсином, содержат большое количество (около 40%) [c.293]

Тонкие различия в первичной структуре родственных белков часто удается выявить методом отпечатков пальцев . Метод этот состоит в том, что белок подвергают частичному перевариванию с помощью одного или нескольких протеолитических ферментов, а затем разделяют продукты гидролиза и идентифицируют их, пользуясь для этого либо электрофорезом, либо хроматографией на бумаге. На фиг. 32 приведены полученные таким способом отпечатки пальцев , или пептидные карты , нормального и аномального гемоглобинов. Детальное изучение этих пептидных карт показывает, что все пептидные пятна, за исключением одного, идентичны. Таким способом генетически измененный структурный элемент выявляется очень легко, и для установления природы структурного изменения нет надобности устанавливать полную аминокислотную последовательность всей молекулы. Действительно, в ряде случаев весьма определенные указания относительно природы имеющегося замещения можно получить просто исходя из результатов анализа аминокислотного состава соответствующих пептидов, выделенных из двух белков. Но, конечно, однозначные доказательства замены одной аминокислоты на другую получают только после установления аминокислотной последовательности анализируемых пептидов. [c.96]

Свободный пептид выделен в виде ртутной соли) [c.364]

Порядок чередования аминокислот в небольших полипептидных цепях, содержащих 5—10 аминокислотных остатков, может быть установлен прн помощи весьма трудоемких и сложных аналитических методов. Таким путем была установлена, например, структура циклопептида — грамицидина С (см. гл. XV). Структура различных пептидов, получаемых при частичном гидролизе инсулина и гемоглобина, была установлена главным образом путем метки концевых групп динитрофторбензолом [17,89]. Результаты этих анализов показали, что как инсулин, так и гемоглобин построены из гетерогенных фрагментов. Так, например, пептид А, полученный из инсулина, содержал глицин, изолейцин, валин и тирозин. Определение аргинина, гистидина, лизина, фенилаланина и треонина в этом пептиде дало отрицательные результаты. Пептид В, выделенный из того же препарата инсулина, содержал фенилаланин, валин, аспарагиновую кислоту, глутаминовую кислоту, лизин, треонин и аланин [89] (см. гл. 111 и ХП1). Полученные данные указывают на то, что в пептидах, выделенных из инсулина, нет того периодического чередования аминокислот, о котором говорит Бергман [90]. [c.135]

Оптическое вращение пептидов, полученных Фищером, впоследствии проверялось химиками, использовавшими более современные методы, и почти во всех случаях данные Фищера подтверждались, что доказывает очень высокую точность результатов его экспериментов. Применение этого метода учениками Фищера, так же как и использование этого метода в других лабораториях, никогда не приводило к столь точным результатам. Пептиды, полученные при этом, оказывались частично, а иногда и полностью рацемизированными, и далеко не всегда пептид, используемый в качестве эталона для сравнения с пептидами, выделенными из гидролизата белка, состоял из остатков -изомеров аминокислот. [c.85]

Таким образом, Фишеру удалось расшифровать структуру пептида, выделенного из гидролизата фиброина шелка, который оказался глицил-аланином [182] [c.88]

Вместе с тем в период с 1902 г., когда был синтезирован первый дипептид, и до 1945 г., хотя и было синтезировано огромное количество пептидов, изучение деталей структуры природных белков продвинулось вперед весьма незначительно. Количество пептидов, выделенных из гидролизатов белков, строение которых было установлено, исчислялось единицами, а расположение этих пептидов в белковой молекуле было совершенно неясно. Очень незначительными были успехи в деле изучения строения природных пептидов. Практически самым большим достижением в этой области было установление строения трипептида глутатиона Ф. Гопкинсом. [c.130]

Н-С з-А1а-А1а-А1а-А1а-С з-ОН S S В (Свободный пептид выделен в виде ртутной соли) 6,5 0,5 37% [106] [c.364]

При эгом они основывались на специфическом действии ферментов. В пептидах, образовавшихся в результате трипсинного гидролиза, С-концевыми аминокислотами являются аргинин и лизин. Пептиды, выделенные из гидролизата рибонуклеазы химотрипсином, содержат основном в качестве концевых С-аминокислот остатки тирозина и фенилаланина. [c.524]

Структурно сходы также следующие пептиды, выделенные из кожи амфибий и объединенные в группу бомбезина [c.283]

Возможно, что исследования в этой области, привлекшие большое внимание, касались пептидов, выделенных из мозга животных, которые возникали лишь в связи с определенным стимулом. В некоторых случаях утверждалось, что такие пептиды способны к передаче обусловленного ответа при инъекции подопытным животным [37]. Среди таких веществ наиболее известен скотофобин. Полученные биологические результаты несколько противоречивы, полученные химические данные не помогли разрешить это противоречие. Синтетический пептид, имеющий предложенную ранее последовательность остатков аминокислот, оказался неактивным, однако активность природного пептида была подтверждена (38]. Эта проблема находится, несомненно, на ранней стадии своего разрешения, но она явно представляет значительный интерес для химии и биологии и, возможно, связана с другими, более широкими областями нашего знания. [c.295]

Выяснить локализацию ответственного пептида далеко не просто. Природа редко наделяет интересную с точки зрения экспериментатора структуру какой-либо меткой. Однако такая метка имеется, например, у гем-связывающего пептида цитохрома с. Часть пептида, непосредственно участвующая в осуществлении биологической функции, ковалентно соединена тиоэфирной связью с прос-тетической группой цитохрома. Эта стабильная связь облегчает выделение и анализ этого пептида. Туппи и сотр. [87—91] удалось сравнить последовательности гем-связывающих пептидов, выделен- [c.40]

Аминокислоты, пептиды, белки и ферменты образуют группу химически и биологически родственных соединений, которым принадлежит исключительная роль во многих жизненно важных процессах [1, 2]. Биогенная связь этих веществ подтверждается полным гидролизом белков и пептидов, которые распадаются на а-аминокарбоновые кислоты (HjN- HR- OOH). Все аминокислоты можно рассматривать как С-замещенные производные аминоуксусной кислоты. К настоящему времени из гидролизатов белков выделено более 20 аминокислот, которые по конфигурации асимметрического атома углерода принадлежат к 1-стерическому ряду, отличаясь друг от друга в основном остатками заместителей [3-5]. а-Аминокислоты, имеющие цвиттерионную природу, являются наиболее важными и многочисленными среди всех аминокислот, встречающихся в природе. Общее число а-аминокислот, идентифицированных в свободном или связанном виде из живых организмов, исчисляется сотнями, и число их увеличивается [1,2]. Все а-аминокислоты, обнаруженные в белках, за исключением глицина, хиральны [3, 6]. Больщинство других а-аминокислот, обнаруженных в природе, также имеют -конфигурацию а-углеродного атома, однако известны многие природные а-аминокислоты D-ряда [7]. D-ами-нокислоты выделены из микроорганизмов [8, 9], растений [7, 10, 11], грибов [12], насекомых [13] и морских беспозвоночных [14, 15]. Также эти кислоты найдены в белках животных [16] и в пептидах, выделенных из раковых новообразований [17]. Природные галогенированные а-аминокислоты и пептиды редко встречаются в природе, и их можно отнести к новой группе соединений [18-20]. [c.289]

Окситоцин и вазопрессин — первые биологическ>1 активные пептиды, выделенные нэ нервной ткани (Дж. Абель. 1924). Структура этих нейрогормонов была подтверждена химическим синтезом (В. Дю Виньо, 1953) — впервые осуществленным полным синтезом природных пептидов (см. с. 126). [c.263]

Пептиды, выделенные из продуктов ненолного гидролиза коллагена бычьих кож [1599]. [c.304]

Преимущество фтора в качестве замещаемой группы по сравнению с более тяжелыми галогенами привело к тому, что именно 2,4-динитрофторбен-зол (реагент Зангера) находит применение как специфическое средство для характеристики первичных и вторичных аминов. Особенно широкое применение находит этот реагент для пометки концевых единиц в молекуле белков и полипептидов (гл. 26). Пептид обрабатывают реагентом Зангера и в образующемся веществе под действием гидролиза расщепляются амидные связи, соединяющие аминокислотные единицы в данном пептиде. Выделение и идентификация этого аминокислотного фрагмента, несущего динитрофениль-ную группу, выявляет концевую единицу данного пептида. [c.320]

Число пептидов, выделенных из гидролизатов белков, в настоящее время измеряется сотнями. Во многих случаях была установлена структура выделенных пептидов, некоторые из них. как оказалось, сами по себе обладают интересными биологическими свойствами. Например, Ь-серил-Ь-гистидил-Ь-лейцил-Ь-валил-Ь-глутаминовая кислота, выделенная из гидролизата инсулина, специфически ускоряет развитие некоторых бактерий (стрептогениновая активность). [c.814]

При химической и ферментативной деградации фосфорилированного фермента образуется фосфосерин, связанный по С-концу с остатком гистидина. Если не считать этого остатка гистидина, то пептид, содержащий реакционно-снособный остаток серина, по своему аминокислотному составу напоминает соответствующие пептиды, выделенные из протеаз и эстераз (см. ниже). Аналогичным способом может быть получена и изучена фосфорилированная мутаза фосфоглицериновой кислоты, которая по ряду своих свойств весьма близка к фосфоглюкомутазе. [c.197]

Выбор метода выделения зависит от свойств получаемого пептида. Выделение сопряжено с особенно большими трудностями в случае пептидов, хорошо растворимых в воде [2638]. Некоторые пептиды мол<но осаждать спиртом из их водных растворов, поскольку ацетаты аммония и натрия растворимы в спирте [2247]. Возможно также выделение пептидов в виде нерастворимых солей, например флавианатов [2638], пикратов [627] или бариевых солей [2583]. Часто, однако, приходится прибегать к более сложным процедурам [2583]. Необходимо учитывать также, что при неполном восстановлении сульфонильной группы образуется сульфит, который частично окисляется кислородом воздуха и превращается в сульфат [1847]. В настоящее время наилучшие результаты можно получить на основе использования при очистке ионообменных смол этот способ нашел особенно широкое применение в исследованиях последних лет [686, 1414, 1524, 1943]. Так, Рудингер [1847] использовал этот метод для удаления избытка металлического натрия, с помощью ацетата аммония. При этом сначала путем добавления катионита ионы натрия замещались ионами аммония, затем сульфит- и сульфат-ионы осаждались ацетатом бария, и, наконец, для замещения ионов бария ионами аммония вновь использовалась катионообменная смола. В результате в растворе оставалась единственная соль — ацетат аммония, который хорошо растворим в спирте и не мешает осаждению пептида. Ацетат аммония можно также удалить лиофилизацией. При изучении применимости для реак- [c.42]

Следующим этапом исследований Сенгера было определение структуры небольших (в основном ди-, три- и тетра-) пептидов, выделенных из кислотного и щелочного гидролизатов фракций А и В инсулина. Строение пептидов определяли при помощи методов динитрофенилирования и карбоксипептидазного [384]. Кроме того, из гидролизата были выделены крупные пептиды, которые снова подвергались гидролизу и строение которых устанавливалось особо [385]. [c.134]

Дальнейшая работа Д. Кендрью при разрешающей способности в 2 А привела к выяснению новых подробностей вторичной конфигурации полипептидной цепи миоглобина. Это представлялось чрезвычайно важным, так как могло привести исследователей к установлению закономерностей образования третичной структуры белков. Сам Кендрью сначала даже не предполагал, Что удастся идентифицировать и боковые радикалы. Но, как он сказал на V Международном конгрессе по биохимии в 1964 г., результаты превзошли все ожидания, поскольку оказалось возможным различать на рентгенограмме отдельные боковые цепи в виде оптически более плотных участков, отходящих от основной спиральной цепи. Более детальное их исследование зачастую позволяет довольно точно идентифицировать боковые цепи иногда остаются семнения в абсолютной правильности этой идентификации, но во всяком случае при установлении строения боковых цепей уже можно выбирать всего Из двух или трех возможных вариантов [23]. Такая высокая разрешающая способность позволила ученому точно идентифицировать около одной трети всех боковых радикалов, а остальные две трети — с бчень большой степенью вероятности [23]. Эти результаты говорили сами за себя — наука очень близко подошла к возможности непосредственного определения последовательности аминокислотных остатков в молекулах глобулярных белков методом лишь одного рентгшоструктурного анализа. Кендрью сообщил о сопоставимости результатов рентгеноструктурного анализа с предварительными результатами, полученными другими авторами при помощи чисто химических методов. Так было проведено сравнение последовательности аминокислотных остатков пептидов, выделенных из миоглобина. Кендрью обнаружил, что почти все полученные таким образом пептиды могут быть размещены вдоль полипептидной цепи построенной им модели, причем этот порядок размещения соответствовал порядку размещения пептидов вдоль цепи, предложенному на основании химического анализа. Несмотря на некоторые противоречия и несовпадения, можно надеяться, что увеличение разрешающей способности метода позволит однозначно решать вопрос о последовательности аминокислотных остатков с применением только рентгеноструктурного анализа. [c.152]

Синтез фрагментов молекулы полимиксина М в основном сводится к получению пептидов диаминомасляной кислоты с треонином, лейцином и ацильных производных с остатком жирной кислоты. Последовательность сочетания аминокислотных остатков отвечает тому порядку, который соблюдается в пептидах, выделенных из продуктов парциального гидролиза полимиксина М. При встречном синтезе производных по а- и у-аминным группам диаминомасляной кислоты с жирной кислотой показано, что природному соединению, выделенному из полимиксина М, отвечает а-производное диаминомасляной кислоты с (Ч-)6-метило ктановой кислотой [20]. Далее были получены ди-, три-, тетр а-, гекса- и гептапептиды линейного и циклопептидного строения [21—24]. [c.396]

Гидролиз цитохрома с трипсином дал двадцать триптических пептидов, выделение, очистка и установление строения которых осуществлялись методами, полностью аналогичными использованным в случае хи-мотриптических пептидов. [c.160]

ПЕПТИДЫ, ВЫДЕЛЕННЫЕ ИЗ ПРОДУКТА ЧАСТИЧНОГО ГИДРОЛИЗА ЭНЕЛПЕИТИДЛ, [c.493]

Исследования ИК-спектров, выполненные Идельсоном и Блаутом [36], показали, что образующийся в начальных стадиях полимер имеет форму статистического клубка при растворении его в диоксане (авторы называют эту конформацию Р-формой). По мере протекания реакции появляются новые частицы, которые по данным ИК-спектроскопии имеют конформацию а-спирали. Эта стадия процесса соответствует началу быстрой реакции. При использовании дейтерированного н-гексиламина в качестве инициатора был приготовлен меченый р-пептид, который затем применяли для инициирования дальнейшей полимеризации, в результате которой образовывался а-пептид. Выделение последнего и его анализ показали, что а-пептид содержит ожидаемое количество дейтерия, что свидетельствует о синтезе а-пептида на инициирующей Р-форме. [c.612]

Относительное значение каждой из этих характеристик зависит, конечно, от задачи исследования. Первые реагенты применялись в виде характеристических ацил-производных аминокислот. Во многих прежних работах применялись нафталинсульфокислоты часто также применялся -иафталинсульфохлорид [86]. Школа Абдергальдена особенно активно применяла этот реагент для определения последовательности аминокислот в пептидах, выделенных из фиброина шелка и других белков [93]. Р-Нафталинсульфохлорид и другие вещества, применявшиеся для аминогруппы, перечислены ниже. [c.223]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология