Рибофлавин, анализ

VI Проведите анализ смесн-Рибофлавина 0,002 г Тиамина бромида 0,03 г Аскорбиновой кислоты 0,02 г Калия йодида, [c.465]

Определение витамина Вг в дрожжах основано на получении окрашенного соединения рибофлавина. Сравнивая интенсивность окрасок растворов, полученных при анализе пробы и стандартного раствора, находят концентрацию рибофлавина в пробе дрожжей. [c.232]

Анализ порошков рибофлавина по 0,005 г и сахара по 0,1 г фотоколориметрическим методом [c.61]

Примечание Указанные величины навески и разведения рассчитаны для драже и таблеток, содержащих в 1 щт весом 1 г 0,5 мг рибофлавина и 3 мг никотинамида При анализе препаратов с другим содержанием рибофлавина и никотинамида необходимо соответственно изменить объем разведения, сохранив количества рибофлавина и никотинамида, идущие на реакцию (около 600 у никотинамида и около 100 Y рибофлавина) Если на реакцию приходится брать не 5 мл фильтрата, а меньше, то добавляют соответственное количество воды, чтобы сохранить общий объем 5 мл. [c.168]

Приготовление стандартного раствора. Перед анализом 1 мл исходного раствора, содержащего 40 мкг рибофлавина, разбавляют водой до 10 мл. [c.144]

Метод изолированной абсорбции используют для анализа папаверина и рибофлавина в смеси с другими препаратами, а также ацетилсалициловой кислоты в присутствии салициловой. [c.168]

Метод отличается исключительно высокой чувствительностью— порядка 10- —10 7 моль/л и чаще всего используется для определения низких концентраций ионов металлов, связанных в форме, подходящих флуоресцирующих комплексов, а также для определения некоторых органически веществ типа рибофлавина, витаминов группы В, алкалоидов и др. Так, комплексы 8-оксихинолина с рядом таких ионов металлов, как А1 , Оа +, Мд +, используются для ояределения этих ионов при концентрациях, достигающих 0,01 мкг/мл. Алюминий определяется при помощи флуоресцентных методов с 8-оксихинолином, морином или понтахромом сине-черным Р при содержании от Ы0- до 1% в различных сплавах и минералах. Флуоресцентный метод можно использовать не только для анализа растворов, но и для анализа веществ в твердой фазе. Так, уран в абсолютных количествах порядка Г-10- г можно определить при помощи-сплавления исследуемого вещества с бо-раксом или фторидом натрия до маленьких бусинок, облучения бусинок ультрафиолетовым светом и измерения вторичной эмиссии в видимой области спектра. . [c.399]

Как видно, наибольшие отклонения в результатах анализа различными методами наблюдаются при исследовании поливитаминных таблеток, содержащих рибофлавин, что мы объясняем ошибкой колориметрического метода за счет наложения естественной окраски рибофлавина. [c.184]

Соединения этого типа в большинстве случаев недостаточно стабильны на свету, поэтому все стадии анализа, включая хроматографическое разделение, следует проводить в темноте или при темно-красном свете. Определение рибофлавина и флавинов обычно основано на их флуоресценции. Однако в природных материалах присутствует много других флуоресцирующих веществ, которые необходимо удалить прежде, чем приступать к количественному определению рибофлавина. Обычно для этих целей используют хроматографические методы. [c.188]

Контрольное определение (с добавлением 0,2 у рибофлавина) дает возможность установить потери рибофлавина при проведении анализа если они велики, то анализ повторяют, используя несколько меньшее количество перманганата. [c.172]

Параллельно проводят получение окрашенного соединения, беря на анализ 1 мл стандартного раствора вместо 10 мл пробы. Содержание рибофлавина в дрожжах определяют, сравнивая окраски растворов, полученных при анализе пробы и стандартного раствора. Сравнение делают визуально в пробирках Несслера или на фотоэлектроколориметре. [c.233]

Этим явлением давно уже пользуются для капельного анализа лекарственных веществ и т. п. В последнее время флюоресцентные методы стали применяться для определения тиамина и рибофлавина. [c.670]

Нуклеотиды, как и многие другие поглощающие свет соединения, определяют количественно по их спектрам поглощения (рис. 13-11 и 13-12) 146]. Еще более чувствительным методом является флуоресцентный анализ. Например, он позволяет обнаружить на тонкослойной хроматограмме рибофлавин в количестве 3 пикомоль (1 нг) (рис. 2-34) [147]. Один из новых реагентов, флуорескамин, взаимодействует с любым первичным амином, образуя интенсивно флуоресцирующие продукты. С его помощью можно обнаружить очень малые количества аминокислот— менее 50 пикомолей (рис. 2-36) [148]. [c.180]

Особенно широкое распространение этот метод получил в анализе лекарственных препаратов, пестицидов и других веществ, находящихся в исследуемых системах в малых концентрациях. В частности, Кальводой разработаны методы анализа с адсорбционным накоплением различных алкалоидов при концентрациях порядка 10 —10 моль/дм , нейролептиков, нитросоединений, а также пестицидов — производных триазинов и карбаминатов [108] и др. Комбинируя этот прием с дифференциальной импульсной полярографией, удалось понизить предел обнаружения, например, рибофлавина до 2,5-10 моль/дм [109]. [c.82]

Разделение водой на слое силикагель + флуоресцентный индикатор (время анализа околгт 40 мин)-, снято в коротковолновом УФ-свете. / — 30 дг тиамина НС1 2 — 3 дг рибофлавина-3 — 30 дг пиридоксола-- HG1 4 — 30 дг никотиновой кислоты 5 — 30 дг амида никотиновой кислоты — 30 да 1-аскорбиповой кислоты 7—10 да цианокобаламина s — вещества и коли- [c.238]

В анализируемые растворы, склонные к пенообразова-нию, добавляют 1 каплю или, в случае необходимости, больше каприлового спирта, однако спирт нужно прибавлять в минимальных количествах, так как он может мешать определению реактивом Несслера вследствие образования белого осадка. Нужно следить за тем, чтобы спирт позднее был полностью окислен перекисью водорода при нагревании. Такое же количество каприлового спирта добавляют и в стандартные растворы. Добавляют 0,3 мл серной кислоты 1 1 и выпаривают воду на электрической нлитке. Продолжают нагревание 5 мин после появления белых паров. Снимают колбу и дают остыть 30 сек. Добавляют 0,1 мл 30%-ной перекиси водорода по стенке колбы, которую держат почти горизонтально. Нагревают еще 2 мин. Повторяют обработку перекисью водорода один, четыре или шесть раз, в зависимости от анализируемого объекта. При обычном определении азота в биологических жидкостях и экстрактах обработку перекисью водорода повторяют один раз, при анализе выделенных белков — четыре раза, а нри анализе таких стойких веществ, как рибофлавин, тиамин, фолиевая кислота, холин и никотиновая кислота,— не менее семи раз. Определения выполняют параллельно на двух пробах при обычной работе и на трех, если необходима большая точность. Охлаждают анализируемый раствор до комнатной температуры. Добавляют 20 мл дистиллированной воды, не содержащей аммиака, смывая ею стенки колбы. Помещают колбу на 5 сек в аппарат для перемешивания. Добавляют при перемешивании 5 мл [c.114]

В подавляющем числе методов, применяемых в хемилюминесцент-ном анализе, используют люминол — гидразид 3-аминофталевой кислоты и люцигенин — Л ,Ж -диметил-9,9-диакридилий нитрат. Иногда индикаторами при титровании служит лофин(2,4,5-трифенилимида-зол), редко — олеиновая кислота, пирогаллол, рибофлавин (9, 17, 18] недавно предложены и некоторые другие вещества [7, 9]. [c.286]

Несомненно, что большие успехи спектрофлуориметрии в области биохимии, биологии и медицины в значительной степени обусловлены фундаментальными работами Юденфренда и сотрудников, большинство из которых описано в нр.екрасной монографии [342]. Мы кратко остановимся на этих областях применения прежде всего для того, чтобы проиллюстрировать использование метода для анализа органических веществ. Многие биологически важные соединения флуоресцируют (правда, иногда в области довольно коротких длин волн), и наилучшие методы, основанные на природной флуоресценции, заключаются обычно в регистрации испускания при больших длинах волн, где не мешают другие соединения, присутствующие в биологическом материале. Методы, основанные на естественной флуоресценции, используются, например, для анализа витамина А, рибофлавина, лекарственных препаратов (хинин и порфирины) и растительных пигментов. [c.435]

При определении общего содержания рибофлавина в естественном материале наибольшее распространение получили микробиологический и физико-химический (флюорометрический) методы анализа. Микробиологический метод с использованием тест-организма La toba illus asei АТСС 7469 обладает достаточной специфичностью, высокой чувствительностью и точностью и применим практически ко всем объектам. В то же время исследование этим методом длительное и требует специальных условий. [c.199]

Образование люмифлавина из рибофлавина идет количественно при облучении в щелочной среде и концентрации последнего не более 2,4 мкг/мл. Поскольку при определенных условиях в люмифлавин переходит 60—70% общего рибофлавина, при проведении анализа необходимо соблюдать постоянные условия облучения, одинаковые для испытуемого и стандартного раствора. В этом случае предпочтительнее использовать способ введения внутреннего стандарта [11, 45, 55]. [c.200]

Ход анализа. В коническую колбу помещают 10 г сухих дрожжей и 50—60 мл теплой дистиллированной воды, смесь взбалтывают и в течение 15 мин выдерживают на водяной бане при температуре 60°С для полного извлечения витамина Вг- Затем смесь фильтруют через стеклянный фильтр, осадок на фильтре промывают несколько раз горячей водой. Фильтрат с промывными водами после охлаждения переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и объем раствора доводят водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 1 мл концентрированной уксусной кислоты и 0,5 мл 5%-ного раствора перманганата калия. Раствор перемещивают в течение 2 мин, добавляют к нему 0,25 мл перекиси водорода для получения бесцветного раствора и фильтруют. В пробирку Несслера помещают 5 мл фильтрата, добавляют 3 мл раствора Вингиза и объем раствора доводят до метки. В присутствии рибофлавина раствор окращивается в желто-оранжевый цвет. [c.233]

При работе с рибофлавином, как и со всеми другими витаминами, нужно соблюдать исключительную точность и тщательность, иметь безупречно чистую посуду и реактивы, так как определяемые в биологических объектах количества витаминов— особенно в крови — чрезвычайно малы и их в процессе анализа потерять совсем нетрудно. К тому же случайно внесенные загрязнения могут сделать определение витаминов невозможным. Например, органические растворители извлекают и из корковых и из резиновых пробок флюоресцирующие вещества. Значит, если уж невозможно использовать посуду со стеклянными притертыми пробками, то лучше заткнуть пробирку чисто вымытым пальцем (мыло должно быть хорошо отполоснуто, так как оно часто тоже флюоресцирует). Очень часто растворители— даже хорошего качества — сами флюоресцируют. Поэтому при получении новой порции какого-либо растворителя (для рибофлавина — метилового спирта и хлороформа) необходимо проверить ее на отсутствие флюоресценции. Если она есть, то необходимо обработать растворитель животным углем (1—2 чайные ложки на 500 мл растворителя) и оставить его стоять несколько дней, по временам взбалтывая, затем отфильтровать через не дающий флюоресценции фильтр и перегнать в перегонном аппарате, где части соединены шлифами, а не пробками. [c.393]

Все ферменты можно разделить на два типа на ферменты, не имеющие простетических групп, и на ферменты, имеющие каталитически активные небелковые группы (например, гем, рибофлавин, медь или тиаминпирофосфат). Как правило, ферменты, участвующие в окислительно-восстановительных реакциях, принадлежат ко второму типу, тогда как гидролитические ферменты не содержат, повидимому, простетических групп. Впрочем, в отношении последнего заключения необходимо быть очень осторожным. Хотя аминокислотный анализ этих ферментов показал, что они состоят, по крайней мере, на 99% из аминокислот, однако это еще не дает права с категоричностью утверждать, что данные ферменты не имеют того или иного рода простетической группы. Если молекулярный вес молекулы фермента равен 50 ООО, то 1 % составляет 500, а это означает, что в молекуле фермента может содержаться какая-то до сих пор еще неизвестная простетическая группа. Исследования над пептидазами, повидимому, подтверждают то мнение, что даже очень чистые препараты [c.275]

Для разделения соединений с низкими молекулярными массами (менее 200 000) можно применять гели с более высокой (5—6%) концентрацией [391]. И наоборот, для еще более высокомолекулярных (больше 500 000) соединений следует использовать более разбавленные гели. Флорини и сотр. [393] при анализе миозина применяли 2,6 %-ный гель. Однако если инициатором полимеризации служит рибофлавин, такие разбавленные гели получают слишком мягкими, и потому указанные авторы пользовались для этой цели 0,1 %-ным (масса/ объем) раствором персульфата аммония. Гель следует отмыть от избытка персульфата, так как он может окислять легко окисляющиеся соединения. Робинсон [394] промывал гели в проточной дистиллированной воде в течение часа. [c.173]

Мы уделили проблеме определения мол. весов столько места и внимания, что в заключение главы имеет смысл оценить возможности разных методов в сравнительном аспекте. Из методов, перечисленных в табл. 7.4, мы не обсуждали лишь методы химического определения мол. веса. Химические методы сводятся к колориметрическому, титрометрическому и другим видам анализа, позволяющим оценивать наличие или отсутствие тех или иных конкретных химических групп и компонентов, составляющих макромолекулу. Если известно число таких групп, приходящееся на одну молекулу, то химический анализ дает нам возможность производить оценку путем пересчета молекул и, следовательно, дает среднечисленное значение мол. веса. К сожалению, арсенал приемов, которые можно было бы использовать для изучения белков, углеводов и других природных полимеров, невелик. Можно, в частности, указать на метод периодатного окисления, который был применен при изучении крахмала, на способ определения железа в железосодержащих белках, на метод определения рибофлавина применительно к флавопротеи-дам, содержащим известное число простетических групп. [c.448]

Люминесцентный анализ витаминов. Витамин В2(С17Н2оН40б), носящий название рибофлавина, или лактофлавина, интенсивно люминесцирует в растворе. Он содержится в печени, молоке, яйцах, зеленых овощах и играет важную роль в обмене веществ организма человека. Его спектр люминесценции имеет вид размытой полосы с максимумом У Какс =535 М 1. [c.463]

Природа люциферина светляка. Активный экстракт люциферина был получен Стрелером и Мак-Элроем методом распределительной хроматографии. Результаты анализа этого вещества в инфракрасной области, а также его общие физические свойства заставляют предположить, что люциферин светляка близок по своей химической природе к рибофлавину. [c.178]

Для одновременного определения тиамина и рибофлавина в последние годы наибольшее признание получил метод ВЭЖХ [58, 99]. Он имеет много преимуществ по сравнению с другими общепринятыми методами позволяет одновременно разделять, идентифицировать и количественно определять витамины группы В при значительном сокращении времени, затрачиваемого на анализ. Метод ВЭЖХ с успехом используют для определения тиамина и рибофлавина в обогащенных этими витаминами пищевых продуктах [33, 57, 65]. [c.294]

Существуют микробиологические методы для определения почти всех витаминов группы В (тиамин, рибофлавин, ниацин, витамины Вб и Bj2 5 фолацин, пантотеновая кислота, биотин). Из них при анализе пищевых продуктов в настоящее время сравнительно редко используются микробиологические методы определения тиамина и рибофла- [c.305]

Биологические функции митохондрий удалось установить только после того, как их научились отделять от других клеточных компонентов путем дифференцированного ультрацентрифугирования. Выделенные таким образом эти органеллы могут быть очищены от солей посредством диализа, высушены и подвергнуты химическому анализу. Митохондрии состоят из липо-протеидов, значительная часть которых представлена фосфолипидами (до 95%), небольшого количества РНК (от 1—3%) и ДНК. Кроме того, в их состав входят ряд витаминов (А, Вб, B 2, К, Е), фолиевая и пантотеновая кислоты, рибофлавин и кофермент А, дыхательные ферменты (цитохромоксидаза и сукцинатдегидрогеназа), ферменты цикла трикарбоновых кислот и ряд ферментов, участвующих в сопряженном с дыханием фосфори-лировании (аденилаткиназа, аденозинтрифосфатаза). Отсюда становится понятным обязательное присутствие митохондрий во всех клетках с аэробным дыханием, а также и то, что при изъятии ядра из клетки отдельные компоненты ее продолжают дышать . В то же время замечено, что при переходе клетки от аэробного образа жизни к анаэробному, т. е. когда перестает функционировать окислительный цикл трикарбоновых кислот, митохондрии исчезают и взамен их возникает мощно развитая система мембран эндоплазматической сети. Подобные наблюдения были сделаны при изучении дрожжевых клеток и чашелистиков канатника (Abutilon), помещенных в атмосферу азота. От числа митохондрий в клетках зависит интенсивность дыхания. [c.52]

Животную ткань хорошо измельчают и отмывают водой до получения прозрачных промывных вод. Для извлечения флавина измельченные и промытые ткани экстрагируют 10-кратным объемом 75%,-ного метанола в течение Зб—48 час. при температуре 20—36°. После центрифугирования полученного экстракта, содержащего все- фла-вины данной ткани, прозрачную жидкость сливают и обрабатывают равным объемом хлороформа для удаления загрязняющих веществ (метаноловая фракция должна быть совершенно прозрачной). Слои разделяют в делительной воронке хлороформенный—удаляют, а желтый метаноловый—сравнивают в колориметре со стандартным раствором КдСгО окраска раствора, содержащего 0,1 мг КгСгО, в 1 мл, соответствует по окраске содержанию 2,37 у рибофлавина в 1 мл испытуемого раствора. Этот метод применен Кравчиной для анализа драже и других изделий с витамином Ва. [c.101]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология