Мутанты методы выделения

Метод выделения мутанта [c.30]

Мутагенез и методы выделения мутантов [c.70]

В 1952 г. Д. Ледерберг и Э. Ледерберг ввели для непрямого отбора мутантов метод отпечатков (рис. 6). Согласно этому методу, чашки Петри засеваются с таким расчетом, чтобы на каждой из них выросло 50—200 колоний. Стерильный бархат или фильтровальную бумагу натягивают на металлический или деревянный цилиндр и закрепляют металлическим кольцом. Чашки с выросшими колониями переворачивают и прикладывают к бархату. Затем к этому же бархату (с отпечатками колоний на нем) прикладывают чистые чашки с различными средами. После соответствующей инкубации на них образуются колонии в том же расположении, что и на исходной (матричной) чашке. Если матричная чашка содержала полноценную среду, то отпечатками на минимальные среды можно выявить ауксотрофные мутанты. Различные модификации этого метода широко используются для выделения мутантов с питательными потребностями, а также мутантов, чувствительных к различным физическим, химическим и биологическим агентам (температура, антибиотики, фаги и др.). [c.73]

Рис. 6. Выделение ауксотрофных мутантов методом отпечатков

Продуктом клетки другого мут 1 с блоком на более раннем этапе (отсутствие фермента Ь). В результате таких опытов удается расположить определенных мутантов в ряд, в котором каждый предшествующий мутант будет поддерживать рост всех следующих за ним. Путем анализа накапливающихся промежуточных продуктов, выделения и очистки ферментов, а также с помощью других методов удалось уже выяснить многие пути биосинтеза. [c.256]

С помощью подобных приемов удается накапливать и выделять мутантов с разного рода дефектами с нарушениями процессов транспорта или использования субстрата, с дефектами промежуточного обмена, с повышенной чувствительностью к температуре ( условно летальные мутанты). Позднее мы опишем технику выделения других мутантов с измененной регуляцией метаболизма. В табл. 15.2 приводятся краткие сведения о методах отбора и идентификации различных типов мутантов, в том числе и мутантов с дефектами регуляции. [c.451]

Метод с применением пенициллина и (или) непосредственное выделение мельчайших (точечных) колоний. Суспензию высевают на среду, в которой субстрат, используемый диким типом, содержится в нормальной концентрации, а субстрат, доступный для желательного мутанта,- в очень низкой концентрации. После инкубации выделяют мельчайшие колонии (рис. 15.10), которые затем идентифицируют [c.452]

Выяснение механизмов, регулирующих биосинтез ферментов и их активность, стало возможным благодаря выделению мутантов с дефектами регуляции. Выделены мутанты нескольких типов, в том числе 1) не образующие функционально полноценного репрессорного белка или содержащие его в сильно повышенном количестве 2) с оператором конститутивного типа, который не способен связывать репрессорный белок 3) с аллостерической нечувствительностью, у которых определенный фермент не может распознавать эффектор. Мы опишем некоторые методы, с помощью которых выделяют таких мутантов. [c.497]

Поскольку выделение мутантов у микроорганизмов — задача относительно несложная, микроорганизмы являются очень удобным объектом при исследовании метаболических процессов и изучении физиологической роли определенных биохимических реакций, тем более что протекающие в живых организмах метаболические процессы в основном универсальны. Например, бактерии, птицы, рептилии и млекопитающие нуждаются в синтезе одинаковых низкомолекулярных соединений. Далее, различные виды организмов используют одинаковый клеточный аппарат для включения этих соединений в определенные макромолекулы. Так, оказывается, что последовательность аминокислот в некоторых белках достаточно близка у таких далеких организмов, как микробы и млекопитающие. Информацию, необходимую для решения некоторых общих проблем биохимии, можно получить при работе с любыми живыми организмами, однако бактерии обладают тем преимуществом, что при работе с ними можно использовать такие методы, которые неприемлемы при работе с другими организмами. Как отметил Дж. Уотсон [43] [c.29]

Среди индуцированных ДХЭ мутантов особое внимание заслуживает скороспелая форма, выделенная у позднеспелого сорта Многоплодный 9, сохранившая все остальные хозяйственно-ценные признаки и свойства исходного сорта. Уменьшение вегетационного периода у мутанта на 10 дней — признак, который мы долгое время не могли изменить обычными методами селекции. [c.234]

Для производства аминокислот бактерии стали использоваться с начала 50-х годов. Штаммы их постоянно улучшали генетическими методами, выделяя ауксотрофные мутанты и мутанты с измененными регуляторными свойствами. Чтобы обеспечить образование аминокислот в больших количествах, в любом случае необходимо изменить систему регуляции обмена. Для этого можно либо стимулировать потребление субстрата в некоторых путях биосинтеза и выделение аминокислот в среду [c.147]

Основными недостатками метода периодического пересева являются риск заражения, ошибки при обозначении штаммов или наклеивании неправильной этикетки, селекция вариантов или мутантов, возможная потеря культур и необходимость выделения специального места для их хранения. [c.514]

Для того чтобы использовать мутагенез в генетических экспериментах с бактериями, необходимо согласованно провести ряд последовательных этапов работы, а именно 1) определить, какой тип мутанта соответствует цели исследования 2) выбрать наиболее подходящий мутаген для индукции желаемой мутации 3) создать условия для выражения новой мутации 4) произвести обогащение по желаемому мутанту для повышения вероятности его выделения 5) обнаружить новый мутант соответствующими прямыми и непрямыми методами отбора 6) изучить свойства мутанта и 7) картировать локус новой мутации, т. е. определить ее расположение в бактериальном геноме. [c.8]

В данной главе описано также два специальных метода один из них касается выделения щтаммов, у которых мутации локализованы в определенном участке бактериального генома (разд. 13.8.1), другой служит для оценки мутагенности различных канцерогенов (разд. 13.8.2). Рецепты приготовления сред даны в разд. 13.9, список поставщиков бактериальных щтаммов, специальных реактивов и оборудования приведен в разд. 13.10. Литературные источники обзорного типа по мутагенезу и выделению мутантов перечислены в разд. 13.11.1, а ниже приведена специальная литература по отдельным методикам (разд. 13.11.2). [c.9]

Проходивший летом 1946 г. в Колд-Спринг-Харборе 11-й симпозиум по количественной биологии был посвящен Наследственности и изменчивости у микроорганизмов . Этот симпозиум стал памятным событием в истории молекулярной генетики, так как именно на этом симпозиуме было сделано сообщение о существовании пола у бактерий. (К этому вопросу мы вернемся в последующих главах.) Однако для участников симпозиума вопросом первостепенной важности были не эти совершенно неожиданные открытия, а несомненный триумф теории один ген —один фермент. Несколько докладчиков сообщили о своих исследованиях ауксотрофных мутантов у грибов и бактерий. Изложенные ими факты показывали, что рост большинства ауксотрофных мутантов действительно можно восстановить, добавляя к минимальной среде лишь один какой-нибудь метаболит. После одного из таких докладов выступил Макс Дельбрюк и указал, что, как ни убедительны на первый взгляд эти данные, они все же не доказывают правильности теории один ген —один фермент, хотя, безусловно, они и не противоречат тезису, что каждый ген контролирует образование отдельного фермента, катализирующего отдельную стадию реакции огромного метаболического ансамбля. Сам метод выделения ауксотрофов, говорил он, исключает объективность выводов, так как дает возможность обнаруживать мутанты именно такого типа, которые, судя по всему, всем хочется обнаружить. Так, если допустить, что существуют гены, контролирующие не один, а сразу очень много ферментов, то по крайней мере один из этих ферментов мог бы быть связан с незаменимой для клетки функцией. И тогда ни одно из присутствующих в полной среде относительно простых веществ не могло бы компенсировать отсутствие такой незаменимой функции. Иными словами, даже если бы допущение один ген — много ферментов было правильным, мутации в таких генах при использовании описанного метода отбора мутантов все равно бы обнаружить не удалось, так как соответствующие мутантные клетки вообще не образовывали бы колоний на агаре с полной средой. В заключение своей критики Дельбрюк предложил, чтобы поборники теории один ген — один фермент разработали такие опыты, которые бы дали возможность опровергнуть предложенную им теорию, так как если мы такими методами не располагаем, то вся масса совместимых с этим тезисом доказательств ничего не дает в его подтверждение . [c.122]

Таким образом, в распоряжении селекционеров имеется большой арсенал селективных и полуселективных методов выделения мутантов с измененной регуляцией метаболизма, позволяющий более успешно вести отбор продуктивных штаммов микроорганизмов. Тем не менее эта работа в силу указанных ранее причин требует больших трудозатрат и много времени. Недостатки ступенчатого отбора могут быть в значительной мере преодолены, если сочетать его с методами генетического обмена. [c.83]

Другой метод выделения мутантов и определения частоты мутаций со- стоит в инокуляции родительским штаммом вируса растений, которые реагируют системным заболеванием без некрозов или каких-либо других явных местных поражений. В этом случае можно выявить мутанты , вызнваюш ив некрозы, желтые пятна или другие характерные местные поражения в иноку-лированном растении. Этот прием позволяет отбирать мутанты, принадлежащие к определенному классу, причем в ряде случаев бывает трудпо даже С помощью повторных пассажей материала, выделенного из отдельного местного поражения, получить изолят, свободный от примеси родительского штамма (фото 73). [c.282]

Эффективный метод выделения термочувствительных неврологических мутантов разработал канадский генетик Дэйв Сузуки (Suzuki), получавший индуцированные мутации, подобно Бензеру, с помощью химических мутагенов. В р2 от скрещивания мутантных самцов с самками линии-анализатора отбирали нормальных по фенотипу особей и помещали в термостат при температуре 20 °С. У отдельных особей при воздействии повышенной температуры обнаруживалось состояние паралича, так что обездвиженных мух можно было отделить от остальных. Это состояние было обратимым и при температуре 22 °С восстанавливалась нормальная двигательная активность. Сузуки выделил с помощью этого метода ряд неврологических мутаций, локализованных в Х-хромосоме и в третьей паре аутосом. [c.164]

Для исследования спектра И. используют ионообменную хроматографию, гель-фильтрацию, электрофорез и изоэлектрофокусирование, а также иммунохим. методы с использованием антител. Наиб, широко используется диск-электрофорез в полиакриламидном геле. Однако применение только этого метода для поиска И. недостаточно, т. к. он не позволяет выявить генетически разл. формы ферментов, не различающиеся по заряду. В связи с этим для более полной характеристики спектра И. необходимо применять иммунохим. аиализ и сравнивать спектры И. мутантов. При выявлении И. необходимо избегать условий выделения, при к-рых возможно возникновение артефактных форм. Так, для предотвращения частичного протеолиза в процессе выделения и хранения работу часто проводят в присут. ингибиторов протеаз. При разделении мембранных ферментов необходимо максимально снижать концентрацию детергента, что позволяет избежать появления новых форм в результате образования мицелл с разным содержанием искомого мембранного фермента. Процедура выделения И. должна быть максимально сокращена по времени. [c.202]

Для отбора мутантов с дефектами экспрессии генов и регуляции обмена веществ используют эффективные кетоды селекции. Один из них состоит в получении мутантов, устойчивых к структурным аналогам целевого продукта (см. с. 35). В основе другого метода лежит выделение ревертантов из ауксотрофных мутантов. У таких мутантов восстановлена способность к синтезу конечного продукта, однако механизм ретроингибирования у них не функционирует вследствие изменения пространственной структуры ключевого фермента. [c.39]

Основой для успешной разработки технологии промышленного применения ФГ гемицеллюлоз являются работы микробиологов, направленные на подбор наиболее продуктивных микроорганизмов, продуцирующих гемицеллюлазы. К ним относятся выделение сверхпродуктивных мутантов, создание микроорганизмов с желаемыми свойствами методами генной инженерии, в том числе используя клонирование [63]. Необходимо разработать способы иммобилизации и стабилизации гемицеллюлаз или целых микроорганизмов, продуцирующих необходимый набор ферментов [37, 63]. [c.242]

Методы накопления ауксотрофных мутантов основаны на одном общем принципе для клеточной суспензии создают такие условия, при которых подлежащие выделению мутанты не растут, а растугцие прото-трофные клетки отсеиваются или уничтожаются. Существуют средства, которые действуют только на растущие клетки, а нерастунщм, покоящимся , не причиняют вреда. После удаления антимикробного агента и добавления необходимых факторов роста начинают расти ауксотрофные клетки. [c.450]

Мутанты с измененной чувствительностью к эффектору. Мутантов, у которых изменена чувствительность какого-нибудь аллостерического фермента к эффектору, можно также выделять с помощью совершенно иного принципа, а именно как ревертантов к ауксотрофии. При этом поступают следующим образом. Сначала вьщеляют мутантов с дефектом регуляции, ауксотрофных в отношении метаболита, который хотят получить как конечный продукт, накапливающийся в среде. Затем среди этих ауксотрофных мутантов отбирают таких, у которых неспособность к синтезу данного метаболита обусловлена дефектом в аллостерическом ферменте соответствующего пути биосинтеза После этого из полученной мутантной популяции выделяют прототрофных ревертантов, которые не нуждаются в этом конечном продукте, так как сами спо-собнь его синтезировать. Среди ревертантов отбирают тех, которые выделяют нужный продукт в среду. Их можно выявить биоавтографиче-ским методом (разд. 10.2.2) или распознать по росту сателлитных колоний. О таком мутанте, полученном в результате двукратного отбора, можно составить себе следующее представление. У него после первой мутации перестал функционировать каталитический центр одного из аллостерических ферментов. Вторая мутация затронула структуру (конформацию) всей белковой молекулы, в результате чего каталитическая активность фермента восстановилась, но аллостерическая чувствительность оказалась утраченной. Как в этом, так и во многих других случаях для выделения желательного мутанта необходим ряд этапов, включающих мутагенез и отбор. [c.500]

В качестве мутагена выбрали НММ как один из наиболее эффективных мутагенов, известных в настоящее время [2]. Исходным материалом для получения мутантов служил штамм ХЛ1-3, раса 1, ранее использовавшийся для получения морфологических мутантов под действием гамма-излучения [3]. Суспензию спор двухнедельной культуры гриба (1X10 спор/мл) в фосфатном буфере (pH 5,5) обрабатывали НММ (8ным = 0,04 М) при температуре 25° время обработки от 15 мин. до 4 час. Нри рассеве спор действие мутагена снимали разведением. Обработанные мутагеном споры для учета летального действия НММ и выделения морфологических мутантов высевали на среду Чапека. Выделение ауксотрофных мутантов осуществляли методом отпечатков и методом тотального пересева. Минимальной средой (МС) для выделения ауксотрофов служила среда Чапека, полной (ПС) — среда Чапека, обогащенная кукурузным экстрактом (20 г/л). Через 3—4 дня с колоний, выросших на ПС (при отсутствии ро- [c.334]

Разработан изящный метод очистки Т4-специфичной РНК и выделения информационной РНК, соответствующей ограниченному генетическому сегменту ДНК бактериофага. Денатурированную Т4-ДНК конденсировали с помощью дициклогексилкарбодиимида с фосфатом ацетилированной целлюлозы [562]. Через колонку из этого материала в разбавленном буфере при 55° пропускали суммарную РНК из зараженных клеток Es heri hia oli для осуществления гибридизации. Не связавшуюся в комплекс РНК (хозяина) элюировали, а затем буфером очень низкой ионной силы при 65° с колонки была снята Т4-информационная РНК. Состав оснований Т4-РНК этого типа (свободной от РНК Е. соН) сходен с составом оснований Т4-ДНК, связанной с фосфатом целлюлозы это еще раз подтверждает то, что адсорбция осуществляется за счет специфического образования комплементарно связанных водородными связями гибридных комплексов РНК — ДНК- Подобная обработка суммарной Т4-информационной РНК на второй колонке, содержащей ДНК из мутанта Т4, г 1272, полученного в результате деле-ции (т. е. ДНК, потерявшую специфическую последовательность [c.370]

Проведенные испытания мутантов на фоне исходного сорта по методу парного стандарта с большим числом растений в вариантах подтвердили полную константность и однородность мутантных растений в линии по выделенным признакам. Данные по урожаю красных плодов и общему урожаю, приведенные в таблице, свидетельствуют о том, что пол5пчсеиные формы превосходят исходный сорт как по отдельным показателям, так и по их комплексу. Например, мутант 7-194-1 был раннеспелым и превосходил контроль по урожаю красных плодов в конце плодоношения на 29,6%, однако по общему урожаю уступал ему на 6%. Мутанты 7-194-2 и 20-504-2 в первую неделю плодоношения превышали контрольные варианты по урожаю красных плодов в 2—2,7 раза. Урожай красных плодов в конце плодоношения и общий урожай у них были также выше контрольного. Эти мутанты превосходят исходный сорт по трем признакам — раннеспелости, одновременному созреванию урожая, общему урожаю — и поэтому являются весьма перспективными. Повышенные в сравнении с исходным сортом показатели по урожаю красных плодов и общему урожаю, полученные у мутанта 5-123-1 в нолевых условиях, подтвердились и при испытании этого мутанта в пленочной теплице, где он превосходил контроль па 11,5%. Мутант 19-495-1 в полевых условиях по урожаю красных плодов находился на зфовне исходного сорта, а по общему урожаю даже несколько уступал ему. При испытании же его под пленкой он превысил исходный сорт на 17,0% и контроль — сорт Грунтовый грибовский — на 12,9%. [c.268]

Тем же самым методом, который использовался ранее при работе с нейроспорой, можно точно установить природу недостающего фактора роста у любого ауксотрофного мутантного штамма. Для этого образны клона ауксотрофных бактерий вносят в ряд пробирок с минимальной средой, в каждую из которых были добавлены различные предполагаемые факторы роста —аминокислоты, витамины, пурины или пиримидины. Вещество, добавление которого к минимальной среде оказывается необходимым и достаточным для роста бактерии, и есть то вещество, в котором нуждается для своего роста ауксотроф. Татум не смог идентифицировать точную природу фактора роста для всех выделенных им ауксотрофных мутантов. Однако он установил, что многие из полученных им ауксотро-фов Е. ali реагируют на добавление в минимальную среду лишь одного какого-нибудь фактора. Например, один из полученных им мутантов нуждался для роста только в треонине, другой — только в пролине, третий —только в триптофане, четвертый —только в тиамине, пятый — [c.120]

Метод, использованный Татумом для выделения ауксотрофов, оказался очень сложным приходилось отбирать наугад и вновь высевать тысячи бактериальных колоний. Поэтому генетики бактерий обрадовались, когда в 1948 г. Дэвис и Ледерберг опубликовали одновременно метод, позволяющий проводить прямой отбор ауксотрофов. Предложенный ими метод основан на том, что антибиотик пенициллин убивает бактерии только в том случае, если они находятся в процессе роста. Пенициллин препятствует синтезу клеточной стенки бактерии. Поэтому бактерии, растущие в его присутствии, вырастают из своей оболочки и в конце концов лопаются. Для бактерий, которые в данный момент не растут и, следовательно, не образуют клеточной стенки, очевидно, не имеет значения, подавлен синтез их клеточной стенки пенициллином или нет. Поэтому, чтобы отобрать небольшую фракцию ауксотрофных мутантов среди всех выросших колоний, культуру бактерий инокулируют в минимальную среду, содержащую пенициллин. В этих услоьиях все содержащиеся в культуре прототрофы будут расти и, следовательно, погибнут от действия пенициллина. Но любой оказавшийся в этой культуре ауксотроф, который не может расти из-за отсутствия в минимальной среде необходимого ему фактора роста, при этом уцелеет. Когда большинство прототрофов бывает убито, пенициллин из культуральной среды удаляют, а нем ногие выжившие клетки высевают на агар с полной средой. В принципе (хотя, увы, это не всегда так) после обработки культуры пенициллином на агаре с полной средой должны появляться только такие колонии, которые образуются клонами ауксотрофов. После этого уже можно описанным ранее методом определять их потреб нссти в спеиифических факторах роста. [c.121]

Используя эти методы отбора, можно получить также и полиауксо-трофные штаммы, нуждающиеся для своего роста сразу в нескольких факторах. Например, если выделен мутант His , нуждающийся в гистидине, то можно подвергнуть этот мутант второму циклу отбора пенициллиновым методом, но при этом во время обработки пенициллином добав- [c.121]

В то время как значение флуктуационного теста и метода пересева сводится сейчас лишь к тому, что в свое время с их помощью был решен очень важный вопрос, метод отпечатков остается и сейчас одним из наиболее ценных методов в исследованиях генетики бактерий. Метод отпечатков нашел широкое применение при отборе ауксотрофных мутантов, подобных тем, которые были описаны в гл. V. При использовании этого метода для выделения акусотрофов засевают ряд исходных чашек с полной средой, содержащей бульон, так что на каждой из этих чашек после инкубации вырастает несколько сот колоний прототрофных бактерий. Затем с этих исходных чашек делают отпечатки на чашки с минимальной средой. Легко обнаружить присутствие на исходной чашке с полной средой любой редкой ауксотрофной мутантной колонии эти бактерии неспо- [c.143]

С помощью различных химических и ферментативных методов им удалось удалить из экстракта белки, полисахариды и рибонуклеиновую кислоту, не нарушив способности к трансформации R-мутантов в дикий тип S. Наконец, после дальнейшей очистки экстракта Эйвери, Мак-Леод и Мак-Карти пришли к выводу, что трансформирующим началом служит ДНК даже в том случае, если чистую ДНК из экстракта S-клеток развести 6-10 частями воды и добавить такое незначительное количество к культуре R-клеток, трансформация R- S еще будет иметь место. Более того, ДНК, выделенная из культуры S-бактерий, являющихся потомками бактерии, которая ранее сама была трансформирована из R-клетки, [c.158]

Доказав с помощью флуктуационного теста, что за плодовитость скрещиваний Р+ X Р" ответственны спонтанные Н1г- мутации , возникающие в р+-популяции, Вольман и Жакоб повторили уже предпринимав-щуюся ранее попытку обнаружить спонтанные мутанты, а именно использовали разработанный Ледербергом метод отпечатков для непосредственного выделения мутантов. С этой целью исходную чашку, содержащую полноценную среду, засевали достаточным числом клеток ауксотрофной Р+-культуры для образования сплошного газона бактерий. Затем [c.228]

Из числа умеренных колифагов наиболее подробно изучен фаг "к. Путем изучения развития вируса в ходе лизиса клетки (использовали целый ряд мутантов с супрессорно-чувствительными, условнолетальными, бессмысленными мутациями, выделенными Кэмпбеллом [60]) в геноме фага X удалось идентифицировать пе менее 18 генов. Этими методами было показано, что гены от Л до F ответственны за функции, связанные с синтезом белка фагового отростка, а гены от G до / отвечают за формирование головки. Ген i кодирует фаговый лизоцим [62]. Все эти гены, таким образом, попадают в категорию поздних генов в отличие от ранних генов , таких, как ген N, детерминирующий репликацию ДНК. Была проделана большая работа по выяснению роли этих различных генов и последовательности их транскрипции. Установлено, что разные гены транскрибируются с одного или с другого конца цепи и транскрипция таким образом идет в противоположных направлениях (фиг. 72) [496]. [c.278]

В ряде лабораторий ведутся на молекулярном уровне исследования различных процессов образования водорода, а также механизмов реакции расщепления воды. В образовании водорода принимают участие гидрогеназа и нитрогеназа. Сегодня активно изучаются свойства этих ферментов из разных организмов, в частности механизмы регуляции их синтеза и активности, а также стабильность в присутствии кислорода. Предметом важных исследований является также образование восстановительных эквивалентов и поток электронов к этим ферментам, которые при определенных условиях служат факторами, лимитирующими активность. Эти опыты позволят понять суть указанных процессов и попытаться оптимизировать выделение водорода имеющимися в нашем распоряжении генетически охарактеризованными организмами. Ряд исследователей-генетиков занят отбором мутантов с повышенной способностью к образованию водорода или аммиака. Примерами удачного применения методов генетической инженерии для создания ферментов с желаемыми свойствами может быть получение устойчивой к кислороду гидрогеназы. Удалось повысить содержание гидрогеназ в клетках и получить микроорганизмы, способные выделять фиксированный ими азот в окружающую среду в форме аммиака. [c.79]

Таким образом, рассмотренные выше подходы надежно свидетельствуют о существовании в хроматине гиперчувствительных областей ДНК. Они позволяют также выявить корреляцию между транскрипцией и возникновением гиперчувствительных участков вблизи точки инициации транскрипции. В то же время следует помнить, что обнаружение корреляции еще не означает установления точной причинно-следствен-ной связи событий. Лишь в некоторых случаях с помощью генетического анализа удалось показать, что последовательности гиперчувствительных участков ДНК действительно необходимы для инициации транскрипции. Наиболее интересен пример транскрипции гена Sgs4 Drosophila, о котором упоминалось в гл. 9. В 5 -фланкирующей и структурной областях этого гена было выявлено пять гиперчувствительных участков (рис. 16.12). Эти участки обнаруживаются только в ДНК, выделенной из ядер клеток слюнной железы в стадии развития, сопровождающейся активной экспрессией гена Sgs4. Известны мутанты, которым не свойственна экспрессия этого гена. Соответствующие мутации картируются в 5 -фланкирующей области гена. У двух типов мутантов делетированы наиболее удаленные гиперчувствительные участки ДНК (рис. 16.12). В случае наиболее отдаленной делеции (Вег) налицо практически полное отсутствие транскрипции гена Sgs 4. В хроматине клеток слюнной железы у мутантов Вег обычными методами в районе гена [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология