Метод гель-хроматографии

Работа 10. РАЗДЕЛЕНИЕ СМЕСИ ПОЛИМЕРА И МИНЕРАЛЬНОЙ СОЛИ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ ПОЛИМЕРОВ МЕТОДОМ ГЕЛЬ-ХРОМАТОГРАФИИ [c.58]

Полученные гидролизаты анализируют различными методами гель-хроматографией, ионообменной хроматографией, электрофорезом и хроматографией на бумаге и в тонком слое, электрофорезом в полиакриламидном геле, методом пептидных карт на бумаге или в тонком слое (в одном направлении пептиды подвергаются электрофорезу, в другом — хроматографии) и др. При этом пептиды, содержащие остат ки аргинина, триптофана и гистидина, могут быть открыты с помощью специфических цветных реакций (с. 129). Выбор метода диктуется величиной (молекулярной массой) и характером пептидов гидролизата. [c.139]

Определение молекулярной массы белков методом ультрацентрифугирования требует много времени и сложной и дорогостоящей аппаратуры. Поэтому в последние годы разработаны два более простых метода (гель-хроматография и электрофорез). При использовании гель-хроматографии в первую очередь требуется откалибровать колонку. Для этого через колонку с сефадексом пропускают несколько белков с известными молекулярными массами и строят график, откладывая значения логарифмов молекулярной массы против их элюционных объемов, которые находят, как показано на рис. 1.9. [c.45]

Большое значение имеют сорбенты на основе пористого стекла с привитыми углеводами. Они сочетают гидрофильный характер поверхности с высокой механической прочностью и предназначаются для разделения методом гель-хроматографии смесей высокомолекулярных соединений в водных растворах. [c.231]

В чем заключаются особенности метода гель-хроматография [c.64]

МЕТОД ГЕЛЬ-ХРОМАТОГРАФИИ [c.106]

Работа 66. Очистка белков методом гель-хроматографии [c.235]

ТСХ применяется также и при разделении смеси веществ методом гель-хроматографии. Для этого готовят слой декстран-геля (сефадекса). Сефадекс взбалтывают в дистиллированной воде и дважды декантируют. Полученную суспензию наносят на пластинку обычным способом слоем толщиной 0,2 мм. Пластинку сушат на воздухе при комнатной температуре до появления явной структуры геля. [c.138]

Метод гель-хроматографии [9, гл 5], [10] (гельфильтрации) основан на том, что макромолекулы в зависимости от их размеров и формы обладают различной способностью диффундировать из раствора в микропоры сшитого геля (сефадекс, сшитые сополимеры акриламида, стирола и т д), находящегося в колонне При этом макромолекулы, проникшие в гель, задерживаются в колонне [c.551]

Однако разделение смеси веществ методом гель-хроматографии возможно и в том случае, когда молекулы компонентов разделяемой смеси обладают небольшим различием в размерах и, следовательно, в молекулярных массах. Тогда следует подбирать гель с такими размерами пор, чтобы они были доступны для всех молекул веществ смеси. Очевидно, что при прочих равных условиях разделение в этом случае становится более полным при достаточно больших длинах колонок. Можно использовать гели, поры которых не доступны молекулам лишь одного вещества, а для остальных веществ они проницаемы, но в разной степени. [c.226]

Метод гель-хроматографии выполняется в двух вариантах колоночном и в тонком слое. [c.226]

Разделение смеси веществ методом гель-хроматографии возможно и тогда, когда молекулярные массы анализируемых веществ очень близки или даже равны. В этом случае используется взаимодействие растворенных веществ с гелем. Это взаимодействие может оказаться столь значительным, что сводит на нет различия в размерах молекул. Если природа взаимодействия с гелем для разных веществ неодинакова, это различие можно использовать для разделения интересующей смеси. [c.233]

Теоретическое пояснение. Разделение веществ методом гель-хроматографии проводят в колонках, заполненных гелем (рис. [c.235]

Декстрановые гели широко применяются для разделения, очистки и идентификации различных органических соединений методом гель-хроматографии Наиболее распространены Ь гидрофильные декстрановые гели, сшитые эпихлоргидрином (гели типа Сефадекс ). Мы проверили и уточнили условия получения подобных гелей. [c.56]

Методом гель-хроматографии проводят два типа разделения групповое разделение и фракционирование. В первом случае компоненты смеси делят на две группы по их молекулярной массе. При фракционировании разделяют сложные смеси сходных соединений, различающихся по интенсивности их диффузии внутрь геля. Они элюируются последовательно в соответствии с их коэффициентами [c.361]

МЕТОД ГЕЛЬ-ХРОМАТОГРАФИИ НА КОЛОНКАХ [c.116]

Анализ остатков методом гель- хроматографии (рис.4) и балансовые характеристики процессов висбрекинга позволили получить молекулярно -массовое распределение в сырье и продуктах. Как видно из полученных дан- [c.15]

Изменение фракционного состава целлюлозы характеризовали методом гель-хроматографии. Дифференциальные кривые распределения представлены на рис. 3.7. Начальное отношение среднемассовой и среднечисловой молекулярной массы равнялось 2,65, [c.74]

Подученную композицию дозируют в атмосфере аргона (0,2 атм) в ампулы, которые помешают для полимеризации в термостат с температурой 60°С. По окончании реакции определяют степень полимеризации методом гель-хроматографии на приборе " М-200" (см,табл.I). [c.121]

Фракция 1 состоит преимущественно из звеньев S, средняя длина боковых цепей превышает четыре атома углерода Для фракции 1 характерно очень высокое содержание фенольных и спиртовых групп ОН Количество арил-алкильных и арил-арильных простых эфирных связей ниже, чем в исходном ДЗС, а количество связей Сдр—С незначительно — 0,855 на одно ароматическое кольцо (см табл 2 26), т е даже меньше одной связи С,—С на ароматическое кольцо, не говоря уже о связях, характеризующих степень конденсированности препарата Следовательно, фракция 1 при очень высоких и Л/,, не является высококонденсированным лигнином По-видимому, она имеет сложную надмолекулярную структуру, которая и обусловливает высокие значения и Л/ при определении их методом гель-хроматографии [c.156]

Рис. 172. Метод гель-хроматографии а — схема разделения Ьравннтельно небольшие макромолекулы J, проникая внутрь гранул набухшего геля (, гадерживакяся в них. более крупные частицы 2, не способные проникать в гранулы, проходят между ними), б — фракционирование полистирола (фракция /, =

Гель-хроматография олигомеров находит широкое применение в анализе сложных систем, образующихся в процессе получения смол путем поликонденсации и полиприсоединения. Большое внимание уделено изучению продуктов взаимодействия фенола с формальдегидом. Методом гель-хроматографии были проанализированы резолы — продукты, получающиеся при конденсации фенола с избытком формальдегида в присутствии щелочи [96]. Низкомолекулярные фракции, содержащие моно- и диметилолфенолы, были разделены на отдельные соединения и идентифицированы при помощи модельных соединений. Детектирование осуществляли на дифференциальном рефрактометре. Количественный анализ был затруднен, поскольку различные соединения, присутствующие в резолах, сильно различаются по показателям преломления. Для изучения влияния различных катализаторов, времени и температуры реакции на конечный состав резолов продукты реакции разделяли гель-хроматографически и исследовали методом ЯМР-спектроско-пии. Показано, что в процессе каталитического гидроксимети-лирования фенола в разбавленных водных растворах начальная скорость реакции пропорциональна концентрации едкого натра и формальдегида [142]. Путем интегрирования уравнений скорости реакции гидроксиметилирования фенола (2- и 4-метил-фенола) можно построить кинетические кривые и рассчитать оптимальные значения констант скоростей всех стадий этой реакции. [c.303]

На основании уравнения Марка-Куна-Хаувинка [т]] = КМ, связывающего характеристическую вязкость с молекулярной массой, мы для арабиногалактана получили частное уравнение [52], позволяющее через величину характеристической вязкости определять молекулярную массу полимера, сопоставимую с таковой, определяемой методом гель-хроматографии. [c.337]

Т. к. раств. в воде, для выделения из клеточной стенки их обычно Экстрагируют 10%-ной трихлоруксусной к-той при 2-4 °С в течение 24 ч с послед, осаждением этанолом или ацетоном. Более продолжит, экстракция может приводить к частичному гидролизу фосфодиэфирных связей или потере О-ацильных заместителей. Иногда Т.к. экстрагируют водным р-ром NaOH или диметилгидраэином, но в этих условиях более вероятна частичная деструкция полимера. Ли-по-Т. к. выделяют обработкой разрушенных клеток водным фенолом. Дальнейшую очистку Т.к. проводят методами гель-хроматографии, ионообменной хроматографии, высоковольтного электрофореза на бумаге и аффшшой хроматографии на лектинах. [c.510]

Метод гель-хроматографии, описание которого будет дано ниже, также может быть использован для препаративного фракционирования, однако в этом случае необходимо наличие больших объемов растворителя. [c.219]

Методом гель-хроматографии в принципе можно фракционировать такие олигомерные соединения, которые в силу низкой летучести не удается анализировать методом газовой хроматографии. Члены гомологических рядов олигомеров часто так незначительно различаются по химическим свойствам, что их бывает трудно разделить методом ЖЖХ. Тем не менее за последние три года интерес к гель-хроматографии олигомеров постоянно растет. [c.298]

Свойства сульфатных лигнинов зависят от их молекулярной массы, полимолекулярного состава и функциональных групп. Общие гидроксильные группы в лигнине определяются методом ацетилирования общие кислые — барий-хлоридным методом, сильнокислые (карбоксильные)—хемосорбционным методом, карбонильные — методом оксимирования. Молекулярные массы сульфатных лигнинов можно установить методом неустановив-шегося равновесия на ультрацентрифуге в пиридине, полимоле-кулярный состав — методом гель-хроматографии, дробного осаждения и т, д. Для определения молекулярных масс методом гель-хроматографии необходимо знать зависимости между объемом выхода и молекулярной массой. В табл. 6.5 приведен контроль производства сульфатного лигнина-пасты. [c.193]

Гель-хроматография является новым методом разделения. Бурное развитие метода началось в 1959 г. с получения первого декстранового геля> (Порас, Флодин). Поэтому теоретические вопросы разделения в гель-хроматографии находятся в стадии развития. Основные теоретические концепции этого метода — представление геля в виде геометрической модели, затруднение процессов диффузии и концепция распределения [16]. Существенное отличие метода гель-хроматографии от методов адсорбции и распределения заключается в том, что концентрация вещества в стационарной фазе никогда не превышает концентрацию вещества в подвижной фазе. Отклонения от этого правила могут происходить в случае взаимодействия между растворенным веществом и гелем. [c.351]

Разработан общий метод разделения антибиотиков группы стрептотрицина, заключающийся в хроматографировании на СМ-целлюлозе в градиенте концентраций хлорида натрия [47]. Этим методом было показано, что все антибиотики данной группы представляют собой смеси из шести стрептотрицинов, которые отличаются между собой числом остатков L-p-лизина. Стрептотрицины разделяли также на СМ-целлюлозе в пиридинацетатном буферном растворе и методом гель-хроматографии на сефадексе LH-20 [48, 49]. Таким путем было показано, что раце-момицины А, С, В и D идентичны стрептотрицинам F, Е, D и С [c.219]

Методы гель-хроматографии, седи.ментации и центрифугирования щироко используются в научных исследованиях и хим. технологии ультрацентрифугировапие - один из наиб, распространенных методов определения молекулярно-массового распределения в р-рах полимеров. [c.434]

Гель-хроматография применяется для анализа тяжелых нефтяных остатков, кипящих при температурах выше 400°С, котельных топлив, для анализа которых другие методы непригодны. В 1965 г. К. Альтгельт обнаружил возможность фракционирования асфальтенов методом гель-хроматографии. Разделение на фракции по молекулярной массе тяжелых нефтепродуктов, прежде всего битумов, позволяет получать более надежные данные при последующем исследовании их другими методами, например ЯМР. [c.133]

Известно, что степень образования ассоциатов возрастает с увеличением сродства полимеров, однако лигнин и ГМЦ являются несовместимыми полимерами [22]. По мнению авторов работы [22], невозможность разделения смеси на компоненты при помощи гель-хроматографип не может служить неоспоримым доказательством существования ковалентных лигноуглеводных связей. Можно отметить, что обсуждение результатов гель-хроматографии ЛУК всегда вызывает оживленную дискуссию. Сложилось мнение, что один только метод гель-хроматографии, ири котором лигнин и ГМЦ выходят из геля одновременно, т. е. не происходит разделения комплексов на компоненты, не может быть доказательством химической связи между ними. Поэтому гель-хроматографию комбинируют с другими методами или модифицируют ЛУК, нанример, воздействуют на него реагентами, разрушающими водородные связи и ассоциаты [28, 64], [c.178]

При определении молекулярной массы арабиногалактана, в частности, методом гель-хроматографии, необходимо учитывать его полиэлектролитные свойства и использовать в качестве элюен-та системы, подавляющие его полиэлектролитные эффекты, например, системы, включающие добавки метанола, фосфорной кислоты, бромистого лития. Распределение молекул по молекулярным массам арабиногалактана лиственницы сибирской, определенное нами методом гель-хроматографии, в условиях, исключающих проявление полиэлектролитного эффекта, наблюдается в интерва- [c.336]

Рис. 45.2. Разделение методом гель-хроматографии на колонке (1,0X39 см) с сефадексом G-10 пенициллинов, 6-АПК и продуктов деградации 6-АПК [12].

При хранении в водных растворах антибиотики этой группы частично полнмеризуются. Кроме того, 6-АПК образует димер, по-видимому, за счет нуклеофильной атаки р-лактамного кольца одной молекулы аминогруппой второй молекулы. Пенициллины, 6-АПК и продукты деградации 6-АПК разделяли методом гель-хроматографии (рис. 45.2) [12]. Полимеры 6-АПК> [c.206]

Гель-хроматография характеризуется чрезвычайной простотой технических приемов, а мягкие условия разделения позволяют применять ее для очистки весьма лабильных соединений (в частности, многих ферментов). Если учесть к тому же, что здесь разделение осуществляется на основании совсем иных принципов, чем при других хроматографических методах, то становится вполне понятным появление за короткий срок большого числа публикаций, так или иначе касающихся гель-хроматографии. В связи с этим, естественно, возникла необходимость обобщить накопленные данные, чтобы облегчить исследователю ориентировку в столь обширном потоке литературы. Эта задача успешно- выполнена в небольшой книге Г. Детермана Гель-хроматография , перевод которой предлагается советскому читателю. В книге про- 10 и ясно изложены метод гель-хроматографии, его [c.5]

Однако в подавляющем большинстве случаев метод гель-хроматографии оказывается очень полезным и заслуживает широкого применения. Мы надеемся, что появление на русском языке книги Г. Детермана будет способствовать распространению этого метода в нашей стране. [c.6]

Смит и Коллмансбергер [12] изучали поведение низкомолекулярных алифатических и ароматических углеводородов на сравнительно малопористом стирагеле при различных скоростях потока. Они установили, что наблюдаемые при этом изменения объемов выхода (которые в первую очередь определяются размерами молекул) связаны с обратной величиной коэффициента диффузии. Такая закономерность свойственна исключительно методу гель-хроматографии и не имеет аналогии в газовой или ионообменной хроматографии из этого следует, что принцип ограниченной диффузии вполне достоверен. [c.121]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология