Оптическая плотность влияние разбавления

Факторы, вызывающие несоблюдение закона Бугера — Ламберта—Бера, могут быть как физические, так и химические. К первым относится недостаточная степень монохроматизации светового потока. Ко вторым — целый ряд причин химического характера наличие в растворах анализируемых веществ посторонних ионов, изменяющих степень ионизации (диссоциации) соединений и поглощающих лучистую энергию, что может повлиять на изменение окраски, а следовательно, и оптической плотности гидролиз веществ при разбавлении растворов в ходе анализа изменение величины pH, которое тоже оказывает влияние на целый ряд реакций, вызывающих нарушение светопоглощения температура раствора и другие. В ряде случаев с ростом pH раствора поглощение вначале увеличивается, а затем уменьшается (рис. 70). [c.438]

Техника титрования.. Метод спектрофотометрического титрования основан на измерении оптической плотности исследуемого раствора, изменяемой в процессе титрования. Для уменьшения влияния разбавления на светопоглощение применяют относительно концентрированные растворы титранта или вводят поправку на разбавление. Для работы готовят приблизительно 2,5 — 1 Ю- н. растворы анализируемого вещества (навеску 20—100 мг растворяют в 20—40 мл неводного растворителя, отбирают аликвотную часть исходного раствора и разбавляют в кювете до концентрации 2-10 3—1 10 н. Титрование проводят без кюветы сравнения. Кювету с исследуемым раствором помещают н кюветную камеру спектрофотометра. Техника работы со спектрофотометром описана в гл. VII. [c.437]

Железо, медь, олово, никель и хром также образуют комплексы с этим реагентом но эти соединения разлагаются при энергичном встряхивании органического экстракта после добавления 10 н. соляной кислоты. Таким образом удается подавить влияние железа (до 0,2%), меди, олова, никеля и хрома (при содержании каждого из этих элементов до 0,05%). Максимум светопоглощения комплексом кобальта с 2-нитрозо-1-нафтолом наблюдается при 360 нм, но при этой длине волны реагент также сильно поглощает свет. Измеряя оптическую плотность при 530 нм, можно снизить до минимума поглощение света реагентом, а содержание свободного реагента в органическом экстракте можно снизить промывкой его разбавленным раствором гидроокиси натрия. [c.40]

При выборе условий АА-анализа основными критериями являются минимум влияний и максимум соотношения сигнал/шум. Хорошим ориентиром для определения оптимальной рабочей области измерений могут служить данные о характеристических концентрациях элементов. Под характеристической в методе ААС понимается концентрация элемента в растворе, соответствующая оптической плотности А = 0,0044 (или пропусканию Т = 99 %). Обычно нижняя граница измерений должна по крайней мере на порядок превышать значение характеристической концентрации. Исходя из ожидаемого содержания определяемого элемента в твердой пробе и значения характеристической концентрации, легко оценить допустимую степень разбавления пробы при ее растворении. [c.847]

Ход определении. К 100 мм пробы, содержащей 0,005—1,0 мг марганца, или к 100 мл выпаренной или разбавленной пробы прибавляют 2 мл азотной кислоты и осаждают хлориды, вводя по каплям раствор нитрата серебра до тех пор, пока не прекратится выделение осадка. Затем прибавляют еще 1—2 мл раствора нитрата серебра и после полного осаждения хлоридов смесь фильтруют. При низкой концентрации марганца и высокой концентрации хлоридов лучше устранять хлориды выпариванием пробы с азотной кислотой (см. Мешающие влияния ). Так избегают возможной адсорбции марганца осадком хлорида серебра. К фильтрату добавляют 0,5 г персульфата, нагревают смесь и равномерно кипятят около 10 мин. Охладив пробу, доводят ее объем дистиллированной водой до 100 мл. Определяют величину оптической плотности в кюветах с толщиной слоя 2—5 см (в зависимости от интенсивности окраски) или же сравнивают полученную окраску со стандартами в цилиндрах Несслера и по калибровочной кривой находят концентрацию марганца. [c.267]

Дифференциальный метод применяется для повышения точности анализа при определении больших количеств веществ, а также для устранения мешающего влияния посторонних компонентов и исключения поглощения реактива. Этот метод, в отличие от других, может применяться еще и в тех случаях, когда из-за большой концентрации растворенного вещества нарушается основной закон светопоглощения или когда значения оптических плотностей окрашенных растворов выходят за пределы шкалы прибора, а дальнейшее разбавление анализируемого раствора нежелательно. [c.122]

Наиболее важными причинами этого являются следующие наличие в растворах анализируемых веществ посторонних ионов, изменение степени ионизации (диссоциации) соединений, поглощающих лучистую энергию, что может повлиять на изменение окраски, а следовательно, и оптической плотности, гидролиз веществ при разбавлении растворов в ходе анализа, изменение величины pH, которое оказывает влияние на целый ряд реакций, вызывающих нарушение светопоглощения, температура раствора. Существует зависимость между величиной поглощения и pH раствора. В ряде случаев с ростом pH раствора поглощение вначале увеличивается, а затем уменьшается (рис. 68). [c.421]

Фиг. 191. Влияние оптической плотности клеточной суспензии на вид световых кривых. Толстые и тонкие стрелки показывают. линейный участок кривых концентрированной и разбавленной суспензии, у —угол, который определяет максимальный квантовый выход.

Метод имеет все преимущества колориметрии выбор реактивов, поглощающих свет или образующих соединения, которые поглощают свет возможность подбора длины волны проходящего света (включая ультрафиолетовый), что значительно увеличивает селективность метода возможность устранения влияния мешающих посторонних веществ проведением холостого опыта большая точность измерения, если оно проводится в соответствующих условиях возможность очень точного сравнения оптической плотности двух растворов, особенно при применении прибора с двумя световыми пучками очень большая чувствительность метода, допускающая титрование сильно разбавленных растворов. [c.412]

Жидкая фаза пульпы. Для определения белка биомассы в жидкой фазе пульпы твердую часть отделяют центрифугированием при 1000 об/мин в течение 1 мин, а клетки концентрируют при 6000 об/мин в течение 20 мин. Осадок подсушивают опрокидыванием центрифужных стаканчиков на фильтровальную бумагу. Благодаря этой процедуре исключается влияние ионов тяжелых металлов из выщелачивающих растворов на количественное определение белка. Следовые количества их, сорбирование клетками, не вносят искажений в результаты анализов. Гидролизуют клетки в том же режиме, как и при определении белка биомассы в пульпе. Выпавший осадок окисного железа отделяют центрифугированием при 6000 об/мин. Белок в супернатанте определяют по методу Лоури. Для этого к 1 мл гидролизата добавляют 5 мл раствора С , вьщерживают 10 минут при комнатной температуре, после чего добавляют 0,5 мл раствора Фолина, разбавленного в 2 раза. Оптическую плотность измеряют через 30 мин при длине волны 750 нм. [c.79]

Для определения кобальта экстрагируют кобальт из водного раствора раствором реагента в петролейно.М эфире [592]. Реагент позволяет обнаружить кобальт при разбавлении 1 10 000 000. Окраска устойчива и не изменяется несколько часов. При определении необходимо контролировать кислотность водного раствора, так как оптическая плотность зависит от pH. Наибольшая интенсивность окраски наблюдается при pH 3,8—4,4. Реагент взаимодействует также с солями паллг дия и железа (HI), образуя с ними соединения соответственн зеленого и коричневого цвета, которые также экстрагируются петролейным эфиром. Медь, ртуть, никель, цинк, железо (II) образуют с о-нитрозофенолом растворимые в воде окрашенные соединения, однако они, в отличие от комплексов кобальта, палладия и железа, не растворимы в петролейном эфире и поэтому не мешают. Влияние трехвалентного железа можно устранить применением цигратного буферного раствора, из раствора которого железо не экстрагируется раствором реагента в петролейном эфире. [c.142]

В качестве экстрагента используют 0,01 М раствор циклоформазана в метилизобутилкетоне (МИБК). Влияние больших количеств никеля, кобальта, марганца, железа на определение меди в выбранных условиях экстракции (pH 5, = 25°С) отсутствует. Анализ проводят методом растворов сравнения. Стандартный раствор готовят разбавлением этанолом стандартного образца ГСОРМ-2, содержащего 200 мг Си/л, растворы сравнения — разбавлением стандартного раствора метилизобутилкетоном. Анализируемые экстракты проб и растворы сравнения распыляют в пламя воздух—ацетилен (расход ацетилена 65 л/ч, воздуха 460 л/ч). По градуировочному графику, построенному в координатах оптическая плотность—концентрация (мг/л), определяют содержание меди в экстракте. При содержании меди 0,03 мг/л Sr = 0,06, при содержании меди 0,2 мг/л S, = 0, )26 (я = 3, Я = 0,95), Предел обнаружения меди в экстракте 0,015 мг/л. [c.70]

Коллинс и Уоткинс [128] разработали простой, быстрый, чувствительный и точный метод для определения йодидов и бромидов в нефтяных водах. Метод сравнительно свободен от мешающих влияний. Йодиды окисляют до йода нитритом, йод экстрагируют четы-реххлористьш углеродом оптическую плотность измеряют при 517 ммк. После отделения йодидов бромиды окисляют до брома гипохлоритом и экстрагируют четыреххлористым углеродом оптическую плотность экстрактов измеряют при 417 ммк. Чувствительность и точность метода составляет для йодидов 0,2 и 0,5, а для бромидов 5 и 4,6 мг/л. Более разбавленные растворы упаривают после подщелачивания. Для предотвращения потерь галоидных соединений перед упариванием добавляют избыток нитрата серебра. Мешающие углеводороды удаляют предварительной эфирной экстракцией. Метод пригоден для анализа рассолов и применим даже в том случае, когда отношение концентрации хлоридов к концентрации других галоидных соединений велико. [c.248]

Ионы циркония со стильбазо взаимодействуют в кислом растворе,, образуя соединения фиолетового цвета при отношении К — = 3 4. Кажущаяся константа нестойкости этого комплекса равна 5,2-10 . Предельно определяемые концентрации циркония составляют 1,7-10" —8,5-10 г-ион л. В мерную колбу емкостью 50 мл вводят аликвотную часть раствора, содержащую указанное количество циркония. Разбавленными растворами НЫОз и КН40Н создают оптимальную концентрацию водородных ионов в растворе (pH 2,3—2,5), прибавляют 5 мл 0,1 %-ного водного раствора стиль базо и доводят водой до метки. Оптическую плотность измеряют на фотоколориметре с зеленым светофильтром (при 356 ммк) через 20 мин. после прибавления реагентов. Метод не проверен на каких-либо материалах. Влияние ионов других элементов, а также точность метода остались невыясненными. [c.153]

Весьма существенной характеристикой комплексного соединения является его константа нестойкости. Определение константы нестойкости окрашенных соединений, образующихся в растворе под влиянием окрашенных реактивов, обычным способом затруднительно, -поэтому константа нестойкости определялась по способу Бабко — Нилипенко, дающему ориентировочные результаты. А. К. Бабко, рассматривая изменение величины светопоглощения окрашенного комплекса с разбавлением, показал, что между константами нестойкости комплекса и изменением относительной величины светопоглощения с разбавлением существует определенная зависимость [9]. Общий объем был 7,0мл, из которого 3,0 мл составляла смесь растворов реактива и соли. Оптическую плотность растворов, pH которых 6,0, измеряли на фотометре Пульфриха в кювете с толщиной слоя 5 мм. После этого разбавляли этот же раствор буферной смесью и измеряли оптическую плотность раствора после канедого разбавления. [c.149]

Ход определения. А. Определение хлора при отсутствии мешающих влияний. В мерную колбу емкостью 100 мл наливают 5 мм раствора о-толидина и доводят до метки испытываемой водой По истечении 5 мин пребывания в темноте при температуре 20" С смесь переливают в кювету и измеряют величину оптической плотности или в цилиндрах Генера сравнивают возникшую окраску с рядом стандартов. Если окраска пробы выходит за пределы калибровочной кривой и ряда сравнительных стандартов, необходимо повторить определение при соответствующем разбавлении пробы дистиллированной водой. При анализе мутных и окрашенных проб следует провести холостое определение, при котором вместо [c.71]

Построение градуировочной кривой. В несколько чистых делительных воронок на 50 мл вводят из пипетки по 40 мл дистиллированной воды и аккуратно добавляют 0,5, 1,0, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5 мл свежеприготовленного разбавленного (10 мкг/мл) стандартного медьсодержащего раствора, что соответствует содержанию меди в приготовленных растворах от 5 до 35 мкг. Используют еще одну делительную воронку, содержащую только 40 мл дистиллированной воды без добавления медьсодержащего раствора. В ней по той же методике готовят раствор сравнения, чтобы учесть возможные примеси меди в используемых реагентах. Далее во все воронки добавляют по 10 мл цитрат-ного раствора ЭДТА и по 2 капли раствора индикатора крезолового красного, как описано в методике определения меди. Оптические плотности экстрактов в тетрахлориде углерода различных стандартных растворов измеряют в приведенных выше условиях. В кювету сравнения помещают экстракт, полученный в холостом опыте, тем самым компенсируя влияние на градуировочную кривую примесей меди в реагентах. На основе этих измерений получают градуировочный график зависимости оптических плотностей от содержания меди (мкг). Для комплекса меди с диэтилдитиокарбаматом натрия закон Бера выполняется при содержании от О до 50 мкг меди в данном объеме раствора. [c.32]

Установлено, что значительное влияние на чувствительность метода оказывает кислотность раствора. Изучение влияния концентрации кислоты на интенсивность окраски колориметрируемого раствора показало, что максимальная оптическая плотность наблЬ-дается в 0,1 М растворе НС1. С увеличением концентрации кислоты уменьшается оптическая плотность раствора. Это, по-ввдимому, связано с обратимостью реакции в сильно кислой среде. Однако для удобства работы вместо предлагаемого автором 1 мл конц. НС1 мы использовали разбавленную 1 1, увеличив соответственно ее количество в анализе до 2 мл. [c.36]

М раствора сахарозы, на котором готовили ИУК. Все растворы приготовляли перед началом работы. Общий объем растворов в кювете равнялся 3 мл. Контролем (3-я кювета) служила среда набухания. Измеряли оптическую плотность суспензии в обеих кюветах с минутными интервалами в течение 7—8 мин. После каждого измерения суспензии осторожно перемешивали стеклянными палочками. Перемешивание особенно необходимо при работе с более концентрированными суспензиями митохондрий для предотвращения оседания частиц. При изучении влияния различных концентраций ИУК, КС1, Mg , СаСЬ и ЭДТА на набухание митохондрий в одну из кювет вносили 0,1 мл того или иного раствора, а в другую — 0,1 мл растворителя (НгО), что давало возможность учесть эффект разбавления. Результаты представлены в виде графиков, показывающих изменение оптической плотности во времени. Во всех случаях отмечены конечные концентрации компонентов среды. Повторность опытов 3— [c.201]

М трис-буфере с pH 6,0 и 6,5. Видимо, отмеченное снижение оптической плотности вызвано некоторым разбавлением исходной суспензии митохондрий при внесении растворов и не связано со специфическим влиянием ростового гормона на набухание. Аналогичные результаты были получены и для растворов мИУК и 2,4-Д в концентрациях от 10 до Ю- М. [c.202]

Интенсивность окраски является функцией кислотности, концентрации реагента и, в меньшей степени, времени выдерживания. Неймайером было изучено влияние этих переменных было сделано заключение, что оптимальная кислотность составляет примерно 0,05 М (азотная кислота), а оптимальная концентрация реагента — 0,002% (с 4 об.% этилового спирта) в разбавленном растворе. При этих условиях максимальная интенсивность окраски достигается менее чем за 5 мин и остается постоянной примерно в течение 30 мин (табл. 107). Из рис. 91 следует, что зависимость между lg /о// и концентрацией серебра линейна вплоть до 1 ч. на млн. содержания Ag линейный участок кривой проходит очень близко к началу координат (когда вычтена оптическая плотность холостого раствора) Если концентрацию реагента увеличить до 0,004% (концентрация спирта 8 об.%), [c.726]

При измерениях коэффициента седиментации ДНК наблюдается значительное влияние концентрации при ее значениях до 10 мг/л. Учитывая сильное поглощение нуклеотида вблизи 260 нм, можно измерить скорость движения границы седиментации даже при столь низкой концентрации, если использовать оптическую систему в ультрафиолетовой области поглощения. В другом методе изучения таких разбавленных растворов тонкий слой раствора ДНК помещают в раствор s l с определенным градиентом плотности, и седиментация происходит под действием центробежной силы. [c.615]