Биуретовая реакция белков

БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ — цветная реакция, которую дают с солями меди в щелочной среде биурет H2N ONH ONH2, амиды и имиды кислот, полипептиды, белки и другие соединения, содержащие группировки —СО—NH—, Б. р. — цветная реакция на белок — лежит в основе его количественного колориметрического определения. Если к щелочному раствору белка прибавить раствор uSO , появляется фиолетовое окрашивание. Чувствитель-1юсть Б. р. невысока. [c.45]

Биуретовая реакция — одна из цветных реакций на белок и полипептиды. [c.99]

Белки относятся к высокомолекулярным соединениям. Молекулярная масса их 20 000 и даже 15 000 000 у. е. Они растворяются в воде, образуя коллоидные растворы (вследствие огромных размеров молекул). Белки устойчивы лишь в определенных условиях. При повышении температуры происходит необратимая коагуляция белков, а под действием электролитов — обратимая. Первая характерная для белков реакция ксантопротеиновая—реакция с азотной кислотой. Под действием азотной кислоты белок свертывается, образуя сгусток оранжевого цвета. Вторая характерная реакция на белки — это биуретовая реакция — фиолетовое окрашивание белка при взаимодействии его с гидроксидом меди. [c.371]

Вулканическая деятельность во всех ее проявлениях играла в этом отношении выдающуюся роль. Обогащая обширные зоны поверхности, в том числе и те, которые граничили с водоемами, соединениями металлов, вулканы способствовали развитию каталитических реакций. Вещества, выбрасываемые во время извержений, получаются в активном состоянии это, например, оксид кремния (IV) в форме высокопористой массы —пемзы, образующейся при застывании кислых лав (ее пористость достигает 80%) и др. Другой важной породой, которая могла функционировать и как адсорбент, фиксирующий на своей поверхности разнообразные частицы, и как катализатор, является глина. Глины относят к числу древнейших пород. Глинистые минералы (например, монтмориллонит) имеют пластинчатое строение силикатные слои, максимальное расстояние между которыми равно приблизительно 1,4 нм, разделены слоями молекул воды толщина этих слоев может изменяться в широких пределах. Глины обратимо связывают катионы и таким образом могут служить в качестве регулятора солевого состава окружающей водной среды. Скопление органических веществ на поверхности глинистых минералов, возможно, сыграло решающую роль в появлении предбиологических структур и возникновении жизни (Д. Бернал). По Акабори, из формальдегида, аммиака и циановодорода в абиогенную эру образовался амино-ацетонитрил, который подвергался гидролизу и полимеризации на поверхности глин, образуя вещества, близкие к белкам. Акабори показал, что нагревание аминоацетонитрила с кислой глиной ведет к появлению продукта, дающего биуретовую реакцию (реакция на белок). Твердые карбонаты, которые входят в большом количестве в состав земной коры, вероятно, катализировали процесс образования углеводов. Гидроксид кальция также может служить катализатором в таких процессах. Исходным веществом для синтеза углеводов служит формальдегид. Прямым опытом доказано (Г. Эйлер и А. Эйлер), что гликолевый альдегид и пентозы получаются из формальдегида в присутствии карбоната кальция. Схему образования углеводов из простейших соединений предложил М. Кальвин. [c.377]

Биуретовая реакция — образование фиолетового окрашивания при действии на белок щелочи и нескольких капель медного купороса. Биуретовую реакцию дает также мочевина (стр. 416). [c.422]

Колориметрический метод определения количества белка по биуретовой реакции. Этим методом непосредственно определяют количество белка в растительных продуктах, используя цветную реакцию белка, обработанного концентрированным раствором щелочи с USO4. Белок исследуемого образца (муки, зерна и т. п.) переводят в раствор, с которым проводят биуретовую реакцию. Эта реакция характерна для пептидной связи, она получила свое название от производного мочевины — биурета, образующего с щелочным раствором USO4 комплексное соединение фиолетового цвета. [c.54]

Биуретовая реакция является одной из цветных реакций на белок и полипептиды (см. стр. 151). [c.147]

Растворы инсулина дают характерные цветные реакции на белок биуретовую, реакцию Фоля, Миллона и др. [c.95]

Биуретовая реакция. Наиболее известная реакция на белок. Заключается в том, что к исследуемому щелочному раствору добавляют слабый раствор сульфата меди. При наличии белка развивается фиолетовая окраска. Для развития окраски должно присутствовать по крайней мере две пептидные связи. [c.332]

Во всех Случаях обнаруживалась положительная биуретовая реакция на белок. [c.113]

Биуретовая реакция является одной из цветных реакций на полипептиды, а также на белок. К осадку циануровой кислоты, оставшемуся после извлечения биурета, добавляют 2-3 капли раствора аммиака и одну каплю раствора медного купороса — образуется сиреневого цвета осадок комплексной медной соли циануровой кислоты. [c.253]

При выделении препарата мембран оценивают количественный выход белка. Метод Лоури (1951) - наиболее распространенный и высокочувствительный метод определения концентрации белка, основанный на измерении интенсивности окраски раствора, зависящей от концентрации белка. Принцип метода заключается в том, что при взаимодействии белка с реактивами, используемыми в определении, осуществляются по меньшей мере две цветные реакции на белок. Одна из них — биуретовая реакция между пептидными группами и ионами меди. Возникающая сине-фиолетовая окраска обусловлена об- [c.232]

В мерные пробирки собирают по 1 мл элюата и проверяют присутствие белка по биуретовой реакции. Для этого к каждой фракции добавляют 0,1 мл 4-%-ного раствора USO4 и 1 мл 10%-ного раствора NaOH. При наличии белка раствор окрашивается в фиолетовый цвет. Как только в 2—3 последних фракциях реакция на белок будет отрицательной, раствор из колонки выпускают, оставив над целлюлозой 0,5 см жидкости, и начинают элюирование 1 М Na l. Также собирают фракции по 1 мл и проводят качественную реакцию на белок. [c.130]

Пепсин действует на внутренние пептидные связи, расщепляя белки на пептиды. О действии пепсина на белок, например на фибрин (нерастворимый белок плазмы), можно судить, наблюдая растворение кусочков фибрина. Полученный раствор дает положительную биуретовую реакцию, указывающую на появление в растворе пептидов. [c.165]

Ф. Розе открыл биуретовую реакцию на белок. [c.549]

В яичном белке, долго стоявшем с формалином, от прибавления 17V НС1 выпадал осадок, который при дальнейшем прибавлении НС1 растворялся. Такой яичный белок продолжал показывать биуретовую реакцию, но тон окраски при этом получался как у альбумоз, обработанных пепсином. То же явление наблюдается у яичного белка при долгом стоянии его и без формалина и при прибавлений кислот или щелочей. [c.172]

Биуретовая реакция состоит в том, что при нагревании раствора белка со щелочью в присутствии нескольких капель сульфата меди появляется фиолетовое окрашивание. Ксантопротеиновая реакция отличается появлением желтого окрашивания при действии на белок азотной кислоты. Наконец, реакция Миллона дает розово-красное окрашивание при нагревании белков с концентрированным раствором нитрата ртути в азотной кислоте. [c.309]

Несмотря на все разнообразие белковых веществ, для них характерны некоторые общие реакции, позволяющие обнаружить наличие белковых веществ в исследуемом веществе. Так, например, если к раствору какого-нибудь белка прибавить концентрированной азотной кислоты, белок свертывается, а образующийся сгусток при нагревании окрашивается в желтый цвет -это ксанто-протеиновая реакция. Если к раствору какого-нибудь белка прибавить несколько капель раствора медного купороса, образуется осадок, который растворяется в избытке раствора едкого натра, причем раствор приобретает характерное фиолетовое окрашивание это биуретовая реакция. Существуют и другие цветные реакции, характеризующие белковые вещества. [c.326]

Инсулин — гормон, выделяемый островками Соболева— Лангерганса, представляет собой белок, богатый тирозином и цистином. Как и все белки, инсулин дает биуретовую реакцию, а из реакций на отдельные аминокислоты для него характерны положительные реакции на тирозин и цистин. [c.127]

Небольшой кусочек кости или зуба помещают в пробирку и добавляют 10 капель 10%-ного раствора едкого натра. Содержимое пробирки нагревают до кипения. Белки кости при нагревании растворяются в щелочи и могут быть обнаружены в растворе. Для реакции на белок пробирку охлаждают и добавляют каплю раствора сульфата меди. Возникает фиолетовое окрашивание (биуретовая реакция). Добавлять сернокислую медь в горячий раст-твор не следует, так как в этом случае выпадает осадок окиси меди, имеющий черный цвет. [c.269]

Признаком полного гидролиза белка обычно служит отрицательная биуретовая реакция гидролизата. Следует, однако, помнить, что этот признак указывает скорее на приближение окончания гидролиза, чем на его завершение, так как некоторые простые пептиды могут не давать фиолетового окрашивания при биуретовой реакции (см. стр. 9). Поэтому после констатирования отрицательной биуретовой реакции на белок гидролиз следует продолжать еще 1—2 часа и только после этого его можно считать законченным. [c.34]

Определение концентрации белка можно осуществить, используя только одну из вышеописанных реакций на белок — биуретовую. Эта реакция не отличается высокой чувствительностью, но сам метод может быть доступен для любой лаборатории. Возникающая окраска сине-фиолетового цвета осуществляется за счет пептидных связей и пропорциональна их количеству. [c.224]

Большинство белков можно распознать с помощью следующих цветных реакций. Ксантопротеиновая реакция заключается в то.м, что проба, содержащая белок, при нагревании с концентрированной азотной кислотой приобретает лимонно-желтую окраску, которая после осторожной нейтрализации разбавленным раствором щелочи переходит в оранжевую . Эта реакция основана на образовании ароматических нитросоединений из аминокислот тирозина и триптофана. Правда, подобную окраску могут давать и другие ароматические соединения. При проведении биуретовой реакции к раствору белка добавляют разбавленный раствор гидроксида калия или натрия (едкого кали или едкого натра) и затем по каплям раствор сульфата меди. Появляется вначале красноватая окраска, которая переходит в красно-фиолетовую и далее в сине-фиолетовую. [c.312]

В колбу Эрленмейера насыпают 20—25 г измельченного материала, заливают 100 мл дистиллированной воды, 1 ч взбалтывают в шуттель-аппарате, затем помещают в холодильник при 0° С на 15—18 ч. После этого раствор белка центрифугируют в течение 10 мин при 3000— 4000 об/мин. Центрифугат сливают в большой стакан. Осадок гомогенизируют с водой, наливают в колбу Эрленмейера, взбалтывают 30— 40 мин и центрифугируют. Второй центрифугат сливают в тот же стакан, что и первый. Такую экстракцию повторяют 4—5 раз до отрицательной реакции на белок (биуретовая реакция). [c.44]

В основе чувствительного колориметрического метода определения белков в элюатах лежит биуретовая реакция, а также реакция с фенольным реактивом Фолина—Чокальто [77] в модификации Лоури [78]. Таким путем определяют белок в кон- [c.454]

Для определения содержания белка в растворах широко используются фотометрические методы анализа [1, 2]. В ряде случаев возможно определение белка по собственному поглощению при длинах волн 220 и 280 нм [1]. Более селективным является фотометриро вание окрашенных комплексов белка, полученных по различным реакциям ксантопротеиновой, биуретовой и реакции Лоури [2, 3]. Среди них наиболее специфичной и чувствительной является реакция Лоури, в которой белок вступает во взаимодействие с реактивом Фолина [4] в сочетании с биуретовой реакцией. Именно сочетание этих двух фотометрических реа1кций (реакция на пептидные связи и на обязательные ароматические аминокислоты белка) делает метод высокочувствительным и избирательным, т. е. позволяет его использовать для определения белка в сложных смесях. По данным [5], метод Лоури чувствительнее метода, основанного на биуретовой реакции, в 100 раз, а в сравнении с методом определения по собственному поглощению — в 10—20 раз. [c.37]

Чувствительность качественных реакций на белок зависит от характера белка, находящихся в растворе солей и ряда других причин. Такйм образом, пределы чувствительности каждой реакции очень широки. Тем не менее обычно считают, что биуретовой реакцией можно открыть 1 часть белка в 10 ООО частях раствора осанодением концентрированной азотной кислотой — часть в 40 ООО частях железистосинеродистоводородной кислотой или сульфосалициловой кислотой — 1 часть в 50 ООО частях таннином, йодной ртутью в иодистом калии или кипячением с уксусной кислотой в присутствии средних солей — 1 часть в 100 ООО частях. [c.29]

Для обнаружения хлоридов к 5 каплям исследуемой жидкости добавляют 2 капли р. азотнокислого серебра. Белок пытаются об- прибор для наружить с помощью биуретовой реакции наблюдения (см. работу 33). диализа [c.59]

Обнаружение белка. Белок открывают биуретовой реакцией. Для этого отливают в пустую пробирку [c.75]

Белки могут давать цветные реакции а) биуретовая реакция. Появление фиолетового окрашивания при обработке белка концентрированным раствором щелочи и насыщенным раствором Си504. Реакция связана с наличием в молекуле белка пептидных связей б) ксантопротеиновая реакция — появление желтой окраски в результате действия на белок концентрированной азотной кислотой. При работе с концентрированной азотной кислотой на коже рук образуются желтые пятна. Реакция связана с наличием в белке ароматических колец. [c.313]

Цветные реакции белков. Достаточно будет учащихся ознакомить с двумя цветными реакциями белков — ксантопротеино-вой и биуретовой. Ксантопротепновая реакция заключается в действии на белок концентрированной азотной кислоты, в результате чего образуется жёлтое окрашивание. Биуретовая реакция заключается в действии на белок медного купороса в присутствии избытка щёлочи, при этом образуется фиолетовое окрашивание. Химизм этих реакций с учащимися не рассматривается. Может быть указано лишь, что при ксантопротеиновой реакции происходит нитрование бензольных ядер белковой молекулы, а биуретовая реакция характерна для группировки атомов [c.260]

При проведении этих опытов я обнаружил, что белок, обработанный формальдегидом, теряет способность коагулировать при нагревании.Вслед-ствие несоверп1енства регулировки температура бани случайно поднялась до 92° вместо 50°. Полагая, что опыт погиб вследствие коагуляции белка, я извлек одну из колб и с удивлением констатировал, что раствор остался неизменным. Тогда я вскипятил несколько миллилитров этого раствора в пробирке,— белок не коагулировал. Проверка показала мне, что жидкость давала все реакции белка фиолетовое окрашивание с сернокислой медью и едким кали (биуретовая реакция), красное окрашивание реактива Миллона, желтое окрашивание концентрированной азотной кислотой и т. д. Первая пришедшая мне в голову мысль была, что при длительном нагревании в присутствии формальдегида белок превратился в пептон. Это превращение было мало вероятно, но все же возможно. Однако при подкислении жидкости уксусной кислотой и прибавлении раствора сернокислого магния образовался очень объемистый белый осадок. Как известно, пептоны в этих условиях осадка не дают. [c.176]

Наливают 15—20 мл исследуемого раствора в целлофановый мешочек и пофужают его в стакан с дистиллированной водой таким образом, чтобы открытый край мешочка выступал над поверхностью воды. Через Гч с водой из стакана и раствором белка, содержащим примесь углеводов, проделывают биуретовую реакцию (на белок) и реакцию Феллинга (на глюкозу), чтобы убедиться в отсутствии белка и наличии глюкозы в воде из стакана. [c.57]

В описываемой ниже модификации биуретовой реакции [83] используется тартрат, образующий с медью комплексы, которые растворимы в NaOH. Белок вытесняет ион меди из комплекса, в результате чего изменяются цвет и интенсивность поглощения. [c.359]

Несколько труднее гидролизуются муравьиной кислотой истинные протеины, фибрин и яичный белок. При 10%-ной НСООН для расщепления яичного белка необходимо не менее 12 час., а при применении 50%-ной кислоты оно завершается в течение 3 час. Гидролизат окрашен в коричневый цвет и по прибавлении воды дает выделение черного смолообразного осадка. Фибрин удается гидролизовать вполне при помощи 10%-ной НСООН в течение 3-х часов, но и здесь остается значительный смолообразный осадок, не растворимый в воде и слабых кислотах, растворимый в спирте, щелочах и крепких кислотах. Этот осадок при повторном гидролизе 50%-ной муравьиной кислотой не разрушается и биуретовой реакции не дает. В ближайшем будущем мы намерены заняться исследованием природы этого осадка. [c.361]

Для белков характерны некоторые цнетные реакции, например, ксантопротеиновая и биуретовая. Ксанюпротеиновая реакция заключается в появлении желтого окрашивания при действии концентрированной азотной кислоты на белок. Эта реакция указывает на присутствие в белке бензольной группировки. Азотная кислота, действуя на содержащиеся в белке остатки ароматических аминокислот, превращает их в нитросоединения желтого цвета. Попадание на кожу капель концентрированной азотной кислоты вызывает пожелтение кожи. Это результат ксантопроте-иновой реакции с белками кожи. Название ксантопротеиновая произошло из двух греческих слов ксантос — желтый и протеин— белок. Желтое окрашивание белка, возникшее при действии азотной кислоты, переходит в оранжевое при прибавлении водного раствора аммиака или едкой щелочи. [c.287]

Б. p. обусловлена наличием в молекулах перечисленных соединений - O-NH-группировки. Образующиеся при Б. р. окрашенные соединения являются комплексами, которым приписывают строение, представленное, например, форму-ла-ми (I) — медный комплекс из амида салициловой к-ты, (II) — комплекс из биурета и (III) — комплекс из полипептида. Для медных каждого соединения характерна окраска (красная, фиолетовая, синяя) с максимумом поглощения в интервале 440—640 ммк. К медным биуретовым комплексам близки по строению никелевые биуретовые комплексы, окрашенные в желтый цвет. Б. р. используется как цветная реакция на белок и лежит в основе количественных колориметрических определений. Обычно реакцию на белок проводят, прибавляя к его раствору в NaOH разб. раствор uSOj при этом появляется фиолетовое окрашивание. Чувствительность реакции невысока. [c.222]

Инсулин дает характерные реакции на белок биуретовую, ксантопротеиновую, Фоля, Миллона (см. работу № 2). [c.399]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология