Протеиназы бактериальные

Атомы многих металлов также стабилизируют пространственную конформацию ферментных и иных белков. Таким действием обладают катионы Са, 2п, Мп, Mg, Со, Сп, Ре + 2, иногда Ва и также трехзарядные катионы. Они обеспечивают сохранение третичной и (или) четвертичной структуры ферментов. Особенно часто встречается стабилизирующее действие иона кальция, который защищает конформацию а-амилазы, предохраняет от денатурации (и автолиза) трипсин, защищает лизоцим, бактериальные и грибные протеиназы, некоторые пептидазы. Металл, по-видимому, может стабилизировать фермент двумя путями входя в состав его активного центра (у истинных метал-лоэнзимов) или присоединяясь к различным иным участкам на поверхности белковой частицы. При стабилизации апоферментов, например ионами Са, вероятно образуются клешневидные связи между металлом и СОО-группами. [c.166]

Протеазы. Среди бактериальных протеаз смешанных микробных ценозов встречаются протеиназы, пептидазы и эластазы. Активность ферментов увеличивается под действием ионов Fe и особенно ионов Mg , содержащихся в зольной части осадков и илов [13]. Оптимум pH этих ферментов находится в пределах 7—8. [c.55]

Фаговый дисплей в исследовании ферментов. С 1991 г. с помощью фагового дисплея было исследовано более 30 ферментов 97]. Поскольку перед встраиванием в фаговую оболочку гибридные белки должны быть как минимум перенесены в периплазматическое пространство бактериальных клеток, наибольшей эффективности фагового дисплея удается достичь с секретируемыми белками протеиназами, бактериальными секретируемыми и периплазматическими ферментами, антителами и др. Помимо этого ограничения имеется немало и других узких мест, которые мешают эффективному использованию системы для изучения полноразмерных полипептидных цепей ферментов. [c.345]

Другая возможность состоит в том, что группа, имеющая высокое значение рКа, принадлежит второму гистидину фермента — Н з-40. Однако этот гистидин отсутствует в бактериальной сериновой протеиназе, имеющей тот же самый тип рН-зависимости. Н з-40 расположен вблизи от остатка Азр-194 и связан водородной связью с пептидным карбонилом. Считают, что он может играть определенную роль во взаимопревращениях зимоген — активный фермент. [c.112]

С другой стороны, известны молекулы белков, которые резко отличаются друг от друга первичной, вторичной и третичной структурами, но несмотря на это, обладают сходной биологической активностью. Классическим примером могут служить химотрипсин и бактериальная протеиназа субтилизин. Несмотря на существенные различия в структурах, основные аминокислоты активных центров этих ферментов идентичны и осуществляют свои каталитические функции по сходному механизму. По-видимому, такие белки являются результатом пересечения путей эволюции. [c.282]

Бактериальная протеиназа -Галактозидаза [c.229]

Протеиназы микроорганизмов. Из бактериальных источников бьшо выделено большое количество различных протеолитических ферментов. Среди них встречаются как эндопептидазы, так и экзопептидазы. Все эти ферменты характеризуются поразительно широкой специфичностью или даже полным отсутствием какой бы то ни были специфичности. Некоторые бактериальные протеиназы расщепляют до 80% всех пептидных связей в белках. Широкой субстратной специфичностью обладают также протеиназы актиномицетов, гидролизирующие как глобулярные, так и фибриллярные белки. [c.370]

Из бактериальных источников было выделено много протеолитических ферментов. Среди них встречаются как эндопептидазы, так и экзопептидазы. Все эти ферменты характеризуются поразительно широкой специфичностью или даже полным отсутствием какой бы то ни было специфичности. Некоторые бактериальные протеиназы расщепляют до 80% всех пептидных связей, имеющихся в белке. [c.431]

Пивоварение. В этой области протеиназы применяют для стабилизации пива от помутнения, чтобы предупредить развитие в нем нежелательных газов, и для иных целей. Помутнение пива, изменение его коллоидно-химической устойчивости происходит потому, что имеющиеся в нем растворимые белки постепенно денатурируются и вместе с другими веществами выпадают в осадок. Ферменты расщепляют белки, и продукты распада не осаждаются. Ферментные стабилизаторы пива содержат пепсин, папаин, бромелин, грибковые или бактериальные протеиназы иногда в различных комбинациях и достаточно гидролизуют белки, чтобы предотвратить, с одной стороны, помутнение пива, с другой — образование в нем вредных газов. При этом стойкость [c.245]

Весьма полезные гидролизаты приготовляют из неиспользуемых материалов рыбной промышленности. Так, бактериальные протеиназы применяются в производстве, где несъедобная рыба и рыбные отходы перерабатываются для получения жира, рыбной муки и растворимых рыбных концентратов. Два последних продукта высоко оцениваются как кормовые средства. Метод обработки был обычно следующим. Рыбу отваривали и затем отпрессовывали из нее жир. Оставшиеся твердые вещества высушивали и перерабатывали на рыбную муку, а водный раствор выпаривали до 50%-ного содержания сухих веществ и выпускали как растворимый рыбный концентрат. Прибавление протеолитических ферментов перед выпариванием повышает эффективность выпаривания, так как уменьщается вязкость. Если протеиназы добавляют к концентрату, содержащему 50% сухих веществ, то можно получить такой продукт, который не загустевает в холодную погоду. [c.302]

Наиболее точные данные о содержании азота в белке получают при работе с образцами, не содержащими липидов и углеводов. Примесь липидов сравнительно легко удалить путем экстракции органическими растворителями удаление примеси углеводов представляет более сложную проблему. Возможно, что в ближайшем будущем для полного расщепления белков до аминокислот будут применяться бактериальные протеиназы. Затем аминокислоты можно отделить от углеводов адсорбцией на ионообменных смолах. Чистый белок обычно содержит 15—16% азота и имеет влажность 10—12%. [c.271]

Сигнальные пептиды обнаружены во многих секретируемых белках различных клеток. Так, кишечные бактерии типа Е.соИ секретируют в периплазму животных клеток щелочную фосфа-тазу. Этот фермент существует в бактериальной клетке в виде предшественника, от которого ассоциированная с мембраной протеиназа отщепляет сигнальную последовательность, после чего фермент секретируется в периплазму. [c.68]

Рузен и Пильник [93] изучали также пептиды, высвобождаемые гидролизом белков соевого изолята (промин D) в процессе ультрафильтрации с повышенной пропускной способностью при ограничении молекулярной массы до 6000 Да. Под действием разных протеаз, таких, как панкреатин, протеиназа бактериального происхождения, либо различных коммерческих протеолитических препаратов из промина D высвобождаются пептиды с промежуточными молекулярными массами, не имеющими вкуса конских бобов или горького привкуса. Предлагается применять эти пептиды в производстве фруктовых соков. Куннингам с соавторами [33] с помощью электрофореза показали, что определенная доля остаточных пептидов при гидролизе белков хлопчатника пепсином в камере ультрафильтрации устойчива к гидролизу. [c.609]

Ферментативные методы гидролиза основаны на избирательности действия иротеолитических (вызывающих распад белков) ферментов, расщепляющих пептидные связи, образованные определенными аминокислотами. В частности, пепсин ускоряет гидролиз связей, образованных остатками фенилаланина, тирозина и глутаминовой кислоты, трипсин-аргинина и лизина, хпмотрипсин-триптофана, тирозина и фенилаланина. Ряд других ферментов, например папаин, субтилизин, проназа и другие бактериальные протеиназы, также используется для неполного гидролиза белков. В результате полипептидная цепь расщепляется на мелкие пептиды, содержащие иногда всего несколько аминокислот, которые отделяют друг от друга сочетанными электрофоретическими и хроматографическими методами, получая своеобразные пептидные карты. Далее определяют чередование аминокислот в каждом индивидуальном пептиде. Завершается работа воссозданием первичной структуры полной полипептидной цепи на основании определения последовательности аминокислот в отдельных пептидах. [c.56]

В настоящее время известно около 2000 ферментов, более 100 из них получены в кристаллическом состоянии [3]. Наиболее развита ферментная промышленность в США, Японии, Великобритании, Германии, Дании, Нидерландах и Франции. Ежегодный прирост объемов производства ферментов за последние 25 лет составлял от 5 до 15 %. Основными ферментными препаратами являются грибные и бактериальные амилазы и протеиназы, глюкоамилазы, глюкозоизомераза, целлюлазы и гемицеллюлазы, липазы, р-галактозидаза, реннин и некоторые другие [4, 5]. Наибольший удельный вес (до 65 % выпускаемых препаратов) имеют протеиназы для производства синтетических моющих средств и амилазы для переработки крахмала. До 10 % вьтускаемых ферментов потребляет виноделие и производство соков по 5 % приходится на производство сыра, хлеба и спирта 4%— на пивоварение и 6 %—на остальные отрасли промьппленности [6, 7]. Доля ферментов для медицинских целей и научных исследований в общем объеме производства невелика. Они отличаются высокой степенью очистки, сложной и энергоемкой технологией, необходимостью использования дорогостоящих материалов. [c.160]

Следует учитывать, что мягчение (придание нежности) мяса чрезвычайно важно при производстве различных мясопродуктов, например мясокопченостей. Мясопродукты, обработанные протеиназами, гораздо выше по своему качеству. После мягчения можно использовать для получения ценных мясопродуктов такие сорта мяса, которые обычно не применялись для этой цели. Обработкой ферментами можно сделать мягкими различные шкурки ( футляры ) в мясопродуктах, которые обычно жестки и снижают качество изделий. Возможно ускорить созревание колбасных и иных фаршей, сделать их мягкими и усвояемыми, если они изготовляются из сравнительно жесткого сырья. В технологических процессах мясной промышленности используют протеолитические ферменты растительного происхождения (папаин, бромелаин, фицин) и все больше грибного и бактериального. [c.242]

При терапии злокачественных новообразований используют бактериальную L-аспарагиназу, превращающую L-аспарагин, необходимый лейкозным клеткам, в L-аспарагиновую кислоту, в результате чего рост опухоли значительно замедляется. Тромболитическими свойствами обладают протеиназы террилитин и стрепто-киназа, имеющие микробное происхождение. [c.63]

ФЕРМЕНТЫ, ОБРАЗУЕМЫЕ БАКТЕРИЯМИ РОДА BA ILLUS. Из Вас. subtilis (различные штаммы) производят, например в Японии, в Англии и в США, протеолитические ферменты. Готовый продукт бактериальная протеиназа в порошке чаще выпускается с сахарозой или крахмалом как наполнителем. В виде самостоятельных препаратов ферменты применяются в медицинской практике, а также в виде добавок их вносят в моющие средства. Широко используют их в кожевенной и пищевой промышленности. Известны амилолитические энзимы из этого же вида. [c.125]

Проназа Р, лиофилизированная Протеаза бактериальная, кристаллическая сг-Протеаза Протеиназа К а-/>-Рпбозо-1 -фосфат, ДЦГА-соль [c.409]

Известны также случаи конвергентной эволюции, хотя, по-видимому, они встречаются значительно реже. Бактериальная протеиназа субтилизин имеет совершенно отличную от протеи-наз млекопитающих трехмерную структуру, однако активный центр у этих ферментов одинаков —в него входит сериновая система с переносом заряда, от которой зависит катализ (см. также с. 750). Фруктозобисфосфат-альдолаза, по-видимому,, представлена двумя разными классами белков, имеющих в. Списке ферментов один и тот же номер — 4.1.2.13. Фермент класса I катализирует альдольное расщепление, которое протекает с образованием в качестве промежуточного продукта шиффова основания с остатком лизина активного центра, в то-время как фермент класса II нечувствителен к боргидриду (реагенту на присутствие шиффова основания), а в качестве-простетической группы содержит металл. Ферменты класса I распространены у высших организмов, а класса II —у бактерий и грибов, но имеются данные, что Е. oli и некоторые одноклеточные зеленые водоросли содержат ферменты обоих типов. Оба этих класса ферментов сходны только специфичностью, а в остальном они мало похожи друг на друга более того, метал-лоферменты бактерий и грибов тоже различаются [1952, 2042]. [c.105]

Гидралазы, фосфатазы, протеазы, трансферазы и другие ферменты представлены в клетке множественными формами (изоферментами), оказывающими одинаковое воздействие па субстрат, но отличающимися, в частности, по электрофоретической подвижности и некоторым кинетическим характеристикам. Существование изоферментов связано с дифференциацией клеточной структуры в различных условиях среды. При этом бактериальные клетки синтезируют, например, набор ферментов, действие которых проявляется при кислой или щелочной реакции среды (в частности, протеиназ, фосфатаз). [c.55]

КОЛЛАГЕНАЗА — протеолитич. фермент бактериального происхождения, гидролизующий белки группы коллагена, к-рые не расщепляются в природном состоянии другими протеиназами. К. — белок, мол. в. ок. 100 ООО оптимум действия при pH 6,5— 7,8, изоэлектрич. точка при рП 9. К. гидролизует пептидные связи мен5ду теми двумя аминокислотами, рядом с к-рыми в полинентиднои цени стоят остатки аминокислот иролина или оксипролина [c.321]

Многие ферменты стабилизируются коферментами, субстратами и специфическими неорганическими ионами. Например1, де-гидраза фосфоглицеринового альдегида, полученная из мышцы кролика, становится гораздо менее стабильной после удаления ее кофер мента — дифосфопиридиннуклеотида (ДФН) [103]. Было найдено, что гексокиназа дрожжей стабилизируется при очистке добавлением 1% субстрата — глюкозы [184]. Имеются указания на то, что ионы кальция предохраняют бактериальную протеиназу от термической денатурации они в то же время существенно важны для проявления максимальной ферментативной активности протеиназы [185]. Инвертаза, полученная недавно Фишером и его сотрудниками [171] в чистом виде из дрожжей, связана с полисахаридом. Удаление последнего адсорбцией на бентоните понижает стабильность этого фермента. [c.40]

Процессы, необходимые для выбора лизогенного пути развития, контролируются динамикой N-зависимой транскрипции генов сП в правом опероне и с1П в левом опероне. Мутации, инактивирующие какой-либо из этих генов, предотвращают лизогению и, подобно мутациям с1, проявляются в том, что соответствующие мутантные фаги образуют не мутные, а прозрачные бляшки. Белок сП является еще одним позитивным регулятором, избирательно активирующим транскрипцию генов, необходимых для развития по пути образования профага и подавления транскрипции левого и правого фаговых оперонов. Этот белок активирует транскрипцию с двух промоторов-Pr (промотор установления репрессии) и Р/ (промотор интегразы, см. гл. 14). Транскрипт, образующийся с первого из них, обеспечивает высокий уровень синтеза основного репрессора фага X, белка с1. Второй транскрипт направляет синтез интегразы, необходимой для встраивания ДНК фага в бактериальную хромосому. Эти транскрипты отмечены на рис. 15.13 волнистыми стрелками. Белок сШ необходим только для защиты белка сП от клеточных протеиназ, которые в отсутствие сШ быстро инактивируют сП. [c.187]

Альтернативные методы скрининга космидных библиотек, описанные в гл. 3, предполагают селекцию космидных клонов с использованием феномена гомологичной рекомбинации in vivo. Остальные главы книги посвящены вопросам, связанным с экспрессией клонированных генов. Для многих белков млекопитающих удалось осуществить высокопродуктивную внутриклеточную экспрессию в Е. oli. Однако гетерологические белки, локализующиеся в цитоплазме, часто образуют трудно растворимые агрегаты, что значительно осложняет получение нативного продукта. В гл. 4 описаны эффективные способы выделения активных растворимых продуктов из нерастворимых белков цитоплазмы Е. соИ. Вероятность деградации специфическими бактериальными протеиназами многих эукариотических белков, синтезируемых в Е. oli, может быть существенно снижена, если их экспрессировать в виде гибридных белков. Такие составные белки, в которых бактериальный компонент обычно представлен -галактозидазой, можно использовать в качестве иммуногенов для получения антисыворотки и моноклональных антител к клонированному эукариотическому белковому домену. Эти вопросы >ассматриваются в двух главах — одна посвящена получению поликлональной антисыворотки, а другая — методам гибридной технологии. В последующих главах книги описаны современные эукариотические экспрессирующие системы в гл. 7 — дрожжевая, далее в трех главах — системы на основе культивируемых клеток млекопитающих и трансгенные животные. В частности, описана система экспрессии с использованием векторов, которые несут гены, обеспечивающие возможность их индуцибельной амплификации это позволяет снимать токсическое действие антибиотиков, введенных в культуральную среду. Клонированные в таком векторе гены также [c.8]

Бактериальные и грибные протеиназы используются для расщепления белков, причем расщепление может быть фрагментарным. Например, субтилизин при коротком воздействии на рибо-нуклеазу расщепляет только одну пептидную связь этого белка. Карбоксидопептидаза дрожжей постепенно расщепляет белки, отделяя одну за другой аминокислоты с карбоксильного или аминного конца. [c.376]

Рис. п.2. Пример неправильного приготовления образцов, А. Некоторые образцы бактериальной ДНК загрязнены белками, . Диффундирующий материал, вероятно белок, не отдиализован из образцов ДНК S. erevisiae. В. Рестрикция бактериальной ДНК проведена не полностью (либо из-за остаточной ферментативной активности протеиназы К, либо из-за малого времени инкубации образцов в растворе ESP перед рестриктазной обработкой). [c.85]

В качестве примера рассмотрим определение активности NPT-II в тканях моркови, трансформированной nos-npt-II, и тканях табака, трансформированных ШС-npt-II. В тканях моркови, трансформированных nos-npt-II, выявляется небольшое количество NPT-П, которая обычно обладает той же подвижностью, что и нормальный бактериальный фермент (рис. 6.15, фильтр А, дорожки 3, 4 и 1 соответственно). В тех же образцах присутствуют и другие фосфофилазы, которые в результате реакции обусловливают появление радиоактивных белков. Некоторые из этих белков обладают сильным сродством к бумаге Р81 и связываются с ней, что дает на радиоавтографе неспецифические пятна. Такие пятна до отмывания можно удалить с бумаги Р81, обработав ее протеиназой (стадия 10), после чего выявляется лишь фос-форилирующая активность, обусловленная NPT-П (рис. 6.15, фильтр Б). [c.355]

Смотреть страницы где упоминается термин Протеиназы бактериальные: [c.114] [c.39] [c.394] [c.503] [c.237] [c.178] [c.148] [c.431] [c.316] [c.556] [c.332] [c.196] [c.145] [c.20] [c.196] [c.218] [c.126] [c.35] [c.110] [c.145] [c.187]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология