Электрофорез боратных комплексов

Предложено несколько других методов разделения олигосахаридов, получивших меньшее распространение адсорбционная хроматография на катионитах , анионообменная хроматография , электрофорез боратных комплексов и некоторые другие. [c.425]

При высоких значениях pH гидроксильная группа может быть ионизирована в виде несущего заряд полианиона. В боратных буферных растворах полисахариды образуют отрицательно заряженный комплекс, который, как правило, должен двигаться к аноду. Однако при электрофорезе на твердых носителях (бумага, волокно, стеклянный порошок) при pH 9,3 возможно перемещение боратных комплексов к катоду. [c.48]

Важнейшей областью применения электрофореза является анализ биоколлоидов, например анализ смесей белков в клиническом анализе. Белки, как амфотерные полиэлектролиты, обладают собственными зарядами, зависящим от pH среды. Регулируя значение pH, можно в широких пределах менять их подвижность и даже изменить направление движения в процессе электрофореза. Для каждого белка при определенном значении pH общее число положительных зарядов равно общему числу отрицательных зарядов. Эта изоэлектрическая точка, при которой отсутствует движение частиц, является характерной величиной для определенного белка. Растворимость белка в этой точке минимальна. Подбирая соответствующие буферные растворы для установления определенной скорости движения и растворимости веществ, можно приспособить процессы электрофореза для решения разных проблем разделения веществ. Таким образом, электрофорез превосходит метод бумажной хроматографии. Кроме того, при помощи электрофореза, особенно при высоком напряжении, можно проводить разделение неионогенных веществ (например, сахар в виде боратного комплекса) [79]. Методом электрофореза можно также определять изоэлектрические точки амфотерных веществ или заряды коллоидных частиц (по направлению движения). [c.387]

Однако при pH 10 ионы борной кислоты легко образуют комплексы с гликолями, причем степень комплексообразования зависит от величины двугранного угла. Электрофорез в боратном буфере является простым (хотя и неточным) способом определения [c.502]

Для электрофореза использовали раствор полученного комплекса в бикарбонате натрия. Электрофорез проводили в приборе ЭФА-1 па медленно фильтрующей бумаге марки М (производства ленинградской фабрики им. Володарского) при напряжении 500 в и силе тока 40—45 ма, pH буферного раствора (боратная смесь) 8,6. [c.278]

Поведение при электрофорезе в боратном буфере. Как известно, анион бората образует комплекс с диолом подходящей стереохимиче-ской формы по схеме [c.57]

Арабогалактан лиственницы, выделенный из ядровой древесины, не был гомогенным. Фракционированным осаждением боратных комплексов гидроксидом цетилтриметиламмония были получены д,в,а компонента А и В, отличающиеся скоростью передвижения niivH электрофорезе в боратном буфере, скоростью седиментации и [c.194]

Эфиры борной кислоты и ее производных. При взаимодействии моносахаридов и их производных, содержащих г<ис-а-гликольные группировки, с борной кислотой или ее солями образуются устойчивые отрицательно заряженные комплексы. Это свойство нашло широкое применение для разделения сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге а также методом ионообменной хроматографии на смолах и угле Борные эфиры сахаров были в свое время успешно использованы для установления конфигурации аномерного центра (см. стр. 34). Несмотря на то что комплексы сахаров с борат-анионом известны давно, строение их было выяснено только недавно Было показано, что существуют два типа боратных комплексов монокомплекс XXVII и дикомплекс XXVIII [c.148]

Определение моносахаридного состава проводится анализом продуктов кислотного гидролиза или. чаще, мета-нолиза сахарида. Состав продуктов кислотного гидролизата анализируется с помощью хроматографии или электрофореза на бумаге. Нередко используется коммерческий углеводный анализатор, разделение осуществляется на ионообменных смолах методом распределительной хроматографии в водно-спиртовой смеси или в виде боратных комплексов сахаров. Скорость гидролиза гликозидных связей, образованных остатками нейтральных, амино- и дезокси-сахаров, различна. Легче всего отщепляются остатки сиаловых (N-ацетилнейраминовой, N-гликолилнейраминовой) кислот, труднее всего расщепляются свяэи, образованные остатками амино-сахаров и уроновых кислот. Фуранозиды гидролизуются значительно быстрее пиранозидов. В итоге при гидролизе олигосахарида может иметь место неполное расщепление связей или кислотная деструкция образующихся моносахаридов, что искажает результаты анализа. Лучшие результаты дает метанолиз в присутствии газообразного хлористого водорода (1.7 н. H l, 80 С, 18 ч) — в этом случае образуются метилгликозиды, устойчивые к кислотной деструкции. Качественный и количественный состав продуктов метанолиза определяется методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных или трифторацетильных производных. [c.463]

Электрофорезе различных модификациях применяется в химии полисахаридов, хотя и в меньшей степени, чем хроматография. Кислые полисахариды могут быть разделены по степени их кислотности (например, сульфатированные полисахариды и полиурониды). Нейтральные полисахариды разделяют в боратном буфере. Маннаны, обладающие соседними цыс-гидроксилами, легче образуют боратные комплексы, чем глюканы эти комплексы обладают большей прочностью и подвижностью. [c.56]

Для разделения смеси полисахаридов, а также установления их однородности можно использовать электрофорез в боратном буфере на хроматографической бумаге. Поскольку полисахариды в значительной степени отличаются по химическому составу, способности образовывать комплексы с боратами, величине молекулярного веса и растворимости, подвижность их в электрическом поле не одинакова и условия электрофореза для разделения различных смесей не являются стандартными. Например, скорость миграции глюкоманнанов в боратном буфере при pH 9,3 значительно выше, чем глюкуроноксиланов. Эти полисахариды легко разделяются в течение 4—6 ч при напряжении 20—25 в/см. Смесь, состоящая из 4-0-метилглюкуроноарабоксилана, галактуроноарабогалак-тана и арабана, вследствие близких значений подвижности разделяется с большим трудом в этом случае электрофорез занимает [c.50]

С помощью электрофореза удалось осуществить немногочисленные разделения нуклеозидов, однако обычно этот метод используется для контроля за протеканием реакций. Метод особенно полезен для определения N-замещенных в ядре пирймидиновых нуклеозидов, но интервал pH, при которых исключаются какие-либо существенные миграции, довольно узок, что ограничивает возможности метода. Одно частное применение в области нуклеозидов— это проведение электрофореза рибонуклеозидов в боратном буфере при pH 10. В этих условиях образуется стабильный комплекс между боратом и ис-диольными группами, что приводит к миграции рибонуклеозидов к аноду [30]. [c.74]

Электрофорез не заменяет хроматографию, но дает очень ценную дополнительную информацию, так как разделение при электрофорезе основано на других свойствах молекул (заряд, размер, форма). Высоковольтный электрофорез на бумаге применен для разделения не только моно-, но и олигосахаридов. Этот метод может быть использован не только для производных углеводов, содержащих заряженную группу (как, например, гексуроновые кислоты, аминомоносахариды, сульфаты и фосфаты моносахаридов), но и для нейтральных соединений, способных образовывать заряженные комплексы с такими электролитами, как борат, арсе-нит или молибдат натрия. Относительные подвижности углеводов зависят от природы комплексообразователя [57]. Правильный выбор электролита часто позволяет идентифицировать углевод. Разделение кислых полисахаридов [58] проводят с помощью высоковольтного электрофореза на бумаге, нейтральные полисахариды предварительно превращают в боратные производные [59]. [c.226]

Для анализа смесей кислых полисахаридов может с успехом применяться электрофорез в аппарате Тизелиуса. Таким путем, например, отделяют сульфированные полисахариды от полиуронидов водорослей при низких рН . Разделение нейтральных полисахаридов проводят в боратном буфере в условиях, при которых полисахариды различаются по способности образовывать комплексы с борной кислотой . Таким способом удалось легко отделить маннан от глюкана в водорастворимой фракции полисахаридов andida albi ans . [c.487]

Молекулы органических веществ, которые остаются нейтральными при любом значении pH, можно разделить после того, как эти молекулы образуют соединения с заряженными частицами. Например, при использовании боратного буфера можно с помощью электрофореза выделить сахара, так как они образуют устойчивые боратные анионные комплексы. Спирты стероидного и тритерпеноидного рядов разделяют в виде кислых эфиров серной и янтарной кислот. [c.467]

Определить скорость движения жидкости можно, наблюдая за перемещением при электрофорезе незаряженного вещества глюкозы, декстрана, нейтральной аминокислоты в изоэлектрической области и т. д. Для удобства это вещество мон1но окрасить (например, декстран — йодом). Следует иметь в виду, что нейтральное вещество может в некоторых случаях приобретать заряд, образуя комплекс с ионами буфера (например, сахара образуют комплекс с боратными ионами). [c.83]

С помощью электрофореза в присутствии ионов металлов, способных образовывать комплексы с пирокатехином и его производными, можно отделить эти соединения от родственных им монофенолов. С этой целью использовали щелочные боратные буферы, однако достаточно хорошего разделения можно достичь также в присутствии молибдата натрия при pH 5,2, дополнительное преимущество которого заключается в том, что с ди-оксибензолами он образует окрашенные в коричневый цвет комплексы [32]. Обнаружению диоксибензолов на электрофо-реграммах мешают только фенолкарбоновые кислоты, которые [c.253]

При электрофорезе в аппарате Тизелиуса (в боратном буфере) были обнаружены два компонента быстро движущийся,, составляющий главную часть препарата и медленно движущийся. Оба содержали глюкозу и маннозу и давали окрашивание с йодом. Осажденный в виде медного комплекса и затем регенерированный эремуран содержал глюкозу и маннозу в отношении 1 2. Выделенный из медного комплекса, он терял свою растворимость в воде, однако его хлопья, суспендированные в воде, окрашивались йодом в темный красно-бурый цвет. Слюнная амилаза и 3-амилаза не расщепляют эремуран. [c.216]

Приготовление пробы. По мнению Дэвиса [281], включение исследуемой пробы в стартовый гель препятствует тепловой конвекции диффузии веществ, что приводит к более эффективному разделению. Однако некоторые белки повреждаются в результате полимеризации геля [1407] или под действием флуоресценции [975]. Кроме того, белки могут подавлять полимеризацию геля [570]. Если есть подозрение, что флуоресценция или персульфат (см. ниже) приводят к возникновению артефактов, вместо стартового геля желательно использовать суспензию сефадекса 0-200, гл1ицв рин, сахарозу или мочевину. В то же время эти материалы сам и способны при определенных условиях стать причиной артефактов. Так, сефадекс 0-200 может задерж1И1вать движение белков [173], а сахароза — взаимодействовать с 8-аминогруппой лизина [455] или боратом с образованием отрицательно заряженного комплекса. Поэтому присутствие сахарозы в боратном буфере может привести к эффекту усеченного конуса и боковому распространению белков в процессе электрофореза [759]. С другой стороны, мочевина вызывает диссоциацию белков на субъединицы, препятствует затвердению агарозы в агарозно-полиакриламидных гелях [574] и влияет на активность водородных ионов. [c.97]

В некоторых случаях при использовании боратного буфера или буферов, содержащих аминокислоты (глицин, аланин), возможно образование комплексов компонентов буфера с белками. Их электрофоретическая подвижность может оказаться несколько иной, чем у чистых белков, и соответствующие белковые полосы раздвоятся. Проверить такого рода. %ртефакт можно повторным электрофорезом. В силу равновесного характера процесса образования комплексов каждая из двух полос дублета при ее повторном электрофорезе в том же буфере даст снова две полосы. [c.46]