Коэффициент активности экстинкции

Ввиду использования высоких концентраций НАДН, имеющих оптическую плотность выше 1,5 ед. при 340 нм, измерения проводят не в максимуме поглощения НАДН, а при другой длине волны. Для этого обращаются к спектру поглощения НАДН, приведенному в приложении на с. 501. Пользуясь тем, что коэффициент молярной экстинкции НАДН при 340 нм равен 6,22-10 см рассчитывают его значение при других длинах волн. Для измерения активности ЛДГ выбирают длину волны, при которой поглощение раствора не превышает 0,6. [c.388]

Наиболее распространенными методами определения равновесных концентраций комплекса ML ( > 1) являются спектрофотометрия и экстракция растворителями. При первом из этих методов См определяется аналитически, а [MLg] можно вычислить из оптического поглощения раствора (если известны соответствующие коэффициенты экстинкции и если коэффициенты экстинкции всех остальных веществ либо также известны, либо пренебрежимо малы при используемых длинах волн). При экстракции растворителями полная концентрация металла в органической фазе пропорциональна концентрации нейтрального экстрагируемого вещества, если только экстрагируется одно вещество и коэффициенты активности в обеих фазах остаются постоянными. Значение можно [c.21]

Если коэффициенты активности всех форм поддерживаются постоянными во всем исследовании, то измерение по крайней мере N наборов значений (а, А, В) или ([ВАс], А, В) для с>0 приводит, в принципе, к Л/ стехиометрическим константам устойчивости (см. гл. 3 и 5). Отношения концентраций можно получить также из криоскопических измерений в эвтектической точке (гл. 12). Свойства, включающие один или более коэффициентов распределения или факторы интенсивности, например коэффициенты экстинкции, также можно использовать при условии, что эти параметры остаются постоянными и что фоновый электролит не влияет на измерения. [c.43]

Промышленность выпускает ряд самозаписывающих инфракрасных спектрофотометров, но эти приборы не используются широко для количественного изучения равновесия в растворе [63]. Так как коэффициент экстинкции растворителя по сравнению с коэффициентами, экстинкции растворенных форм редко бывает настолько мал, чтобы им можно было пренебречь, то чаще всего должны применяться концентрированные растворы и вследствие этого могут происходить большие изменения коэффициентов активности. Удобно пользоваться набором кювет с различной длиной. Хотя водные растворы можно изучать, используя кюветы с окошками из нерастворимых веществ, таких, как хлорид серебра или фторид кальция, которые прозрачны для используемых длин волн, бывает трудно точно скомпенсировать интенсивность поглощения растворителя. Более того, так как многие полосы спектра растворенного вещества значительно расширяются в присутствии воды, то точные измерения интенсивности получаются редко. [c.342]

Y — коэффициент активности, если концентрация веществ выражена через моляльность 8— оптическая экстинкция %— длина волны [X — химический потенциал и — постоянная [c.66]

В данном случае /Сь — кажущаяся константа диссоциации (влияния, которые объясняются коэффициентами активности, входят в К, как обычно). Если г — экстинкция, измеренная при концентрации полимера [Р] (рис. 8), — экстинкция для правой части кривой, где весь краситель связан в комплексы, и — экстинкция для левой части, где комплексообразования фактически не происходит, тогда для величин, которые могут быть измерены экспериментально, можно написать следующее [c.88]

Первое представляет собой экранирование от фотохимически активного света посредством отражения или поглощения света стабилизатором (стабилизаторы типа А). Поглощенная стабилизатором энергия первичного света (а иногда и вторичного света люминесценции макромолекул полимера или сопутствующих компонентов) затем преобразуется им в колебательную энергию либо в излучение, не поглощаемое данным полимерным материалом. Важным условием эффективности этого пути стабилизации является как можно большее перекрывание спектра поглощения полимера спектром стабилизатора, особенно в области солнечного ультрафиолета, как за счет сходства их спектров, так и вследствие превышения коэффициентов экстинкции стабилизатора. Очевидно, стабилизаторы типа А универсальны и используются вне зависимости от природы полимеров и путей их фотодеструкции. Тем са- [c.160]

Измерения оптической активности трудно распространить на области спектра, в которых имеется поглощение, если коэффициенты экстинкции не являются достаточно малыми. Даже при работе на очень чувствительном спектрополяриметре для получения легко измеримых величин вращения требуется либо больщая длина светового пути, либо высокая концентрация. Как правило, это препятствует получению надежных результатов в пределах сильных полос поглощения. Действительно, электронные переходы в наиболее часто исследуемых хромофорах формально запрещены и, следовательно, относятся к тому типу, для которых предположения, относящиеся к случаю , по-видимому, чаще всего не выполняются. этой группе полос относятся обе длинноволновые полосы в кетонах ( 2800 А) и поглощение в видимой области для хелатов металлов [18]. В приведенном примере эти хромофоры являются внутренне симметричными, а их неактивные прототипы имеют симметрию соответственно типа Сги и Он- Но, хотя строгие правила отбора для электронных переходов нарушаются благодаря асимметричному молекулярному окружению, которое ответственно за активность, значительная часть дипольных сил для систем полос в этих хромофорах может быть обусловлена мгновенными колебательными искажениями. Характеристики таких хромофоров будут кратко рассмотрены в следующем разделе (случай И). [c.70]

В дальнейшем речь будет идти о спектрах поглош,ения оптически активных соединений. Как правило, они записываются с помощью обычного спектрофотометра и приводятся в виде коэффициента экстинкции (или молярного поглощения) е. При его определении предполагается выполнимость закона Бугера — Ламберта — Беера и лишь сравнительно недавно [8, 9] химики, по-видимому, стали осознавать, что этот закон не выполняется для оптически активных растворов в тех областях спектра, где для них наблюдается круговой дихроизм. Строго говоря, расчет г для оптически активного вещества путем деления наблюдаемого поглощения О на толщину кюветы I и концентрацию с является неправильным. Причина того, что открытие этого факта было сделано так поздно, заключается в большинстве случаев в незначительности вводимых при этом численных ошибок. [c.107]

Кроме общего явления возрастания интенсивности, вызванного тем, что коэффициент преломления среды больше единицы [29], существуют примеры значительных изменений молекулярного коэффициента экстинкции е или силы осциллятора /, вызванные адсорбцией. Таким образом, в соответствии с работами Де Бура и его сотрудников [2, 4], молекулы иода, адсорбированные из паров на сублимированные пленки СаРа (при среднем заполнении 9=0.005), проявляют аномально большое поглощение, превосходящее в 500 раз поглощение газовых молекул. В то же самое время отчетливо проявляется значительный сдвиг в коротковолновую область, а именно от 500 к 340 нм, т. е. приблизительно на 9400 см . В адсорбированном состоянии молекулы иода сильно связаны с наиболее активными ионами на поверхности, образуя, таким образом, разновидность хемосорбированных частиц с поделенными электронами, подобно аниону 1з. [c.230]

Следовательно, согласно этому методу, для определения рКщ+ требуется найти лишь коэффициенты экстинкции растворов при определенной активности ионов водорода, содержащих смесь нейтральной и протонизованной форм основания. [c.217]

Если измерения поглощения проводят в оптически активной полосе поглощения, то возникает круговой дихроизм, степень которого определяется разностью коэффициентов экстинкции для лево- и правополяризованной по кругу световой волны [c.368]

Кюветы спектрофотометра заполняют средой, содержащей фосфатный буфер (pH 7,4), 1 мМ K N, 1 мкМ ротенон, 1,5 мМ НАДН, 10—20 мкМ цитохром с. Устанавливают длину волны 550 нм (точно ). Для этого кювету помещают в кюветное отделение, устанавливают длину волны по шкале прибора на отметке 550 нм и добавляют к среде нейтрализованный (pH 7,4) раствор аскорбиновой кислоты (конечная концентрация — 5—10 мМ). Цитохром с немедленно восстанавливается, и раствор меняет цвет от красновато-оранжевого до ярко-розового. Устанавливают шкалу длин волн на 550 нм по максимальному поглощению раствора восстановленного цитохрома с, при дальнейшей работе установку длин волн не меняют. Реакцию начинают внесением препаратов в кювету, содержащую окисленный цитохром с, и регистрируют увеличение поглощения при 550 нм. Рассчитывают удельную активность препаратов в микроэлектронэквивалентах за 1 мин в расчете на 1 мг белка. Коэффициент миллимолярной экстинкции для цитохрома с Активность фермента, характерного для внешней мембраны, определяют по разнице скоростей реакций в присутствии и в отсутствие ротенона. [c.412]

Измерение сукцинатдегидрогеназной активности. В кювете спектрофотометра составляют смесь, состоящую из 0,1 М фосфатного буфера (pH 7,8), 10 мМ сукцината, бычьего сывороточного альбумина (1 мг/мл) и 2 мМ феррицианида калия. Регистрируют оптическую плотность при 420 нм (коэффициент молярной экстинкции феррицианида равен ЫО М.- -см ). В кювету добавляют раствор фермента (около 0,1 мл) и регистрируют сукцинат феррицианид-редуктазную активность, отмечая показания спектрофотометра через каждые 30 с. [c.418]

В ходе реакции Q2 постоянно регенерируется и его концентрация остается постоянной. Окисленная форма СВ окрашена в фиолетовый цвет и имеет максимум поглощения при 612 нм (коэффициент молярной экстинкции — 12 000 М см ). Восстановленная форма СВ бесцветна. Таким образом, реакцию, катализируемую СУР, можно измерить спектрофотометрически при 612 нм по падению оптической плотности раствора СВ. Перед измерением активности препарат СУР размораживают и разводят в 50 раз буфером V. Фермент инкубируют при [c.425]

Регистрация активности. А. Кювету спектрофотометра заполняют раствором, содержащим 25 мМ фосфатный буфер, 0,1 мМ ЭДТА, 20 мМ сукцинат калия и 40 мкМ цитохром с, pH 7,4. Устанавливают длину волны регистрации 550 нм, как описано на с. 412. Реакцию начинают внесением активированного препарата ( 2—10 мкг/мл среды измерения) фермента и рассчитывают его активность в микромолях окисленного сукцината за 1 мин на 1 мг белка. Коэффициент молярной экстинкции для восстановленного цитохрома с (vlsso— 55о)= 18. Б. В связи с тем что цитохром с служит акцептором электронов, но не протонов, сукцинат цитохром с-редуктазная активность при pH>6 может быть записана в виде [c.428]

Все аминокислоты, за исключением глицина, оптически активны благодаря хиральному строению. Энантномерные формы, нли оптические антиподы, имеют различные показатели преломления (круговое двулучепреломление) и различные коэффициенты молярной экстинкции (круговой дихроизм) для лево и право циркулярно поляризованных компонент линейно-поляризованного света. Они поворачивают плоскость колебаний линейного поляризованного света на равные углы, но в противоположных направлениях. Вращение происходит так, что обе световые составляющие проходят оптически активную среду с различной скоростью и при этом сдвигаются по фазе. [c.23]

Определение активности аденилатдезаминазы, КФ 3.5.4.6, основано на реакции АМФ + НгО—>-ИМФ- -+NH3. Его проводят спектрофотометрическим методом (Kalkar, 1947), измеряя прирост оптической плотности при 285 нм. Коэффициент молярной экстинкции при этой длине волны, для АМФ равен 480, для ИМФ — 730. Следовательно, при увеличении оптической плотности на 0,250 (AD=0,730—0,480=0,250) из 1 ммоля АМФ образуется 1 ммоль ИМФ в 1 л (или из 1 мкмоля АМФ — 1 мкмоль ИМФ в 1 мл). [c.42]

Для лучей с правой и левой круговой поляризацией молярные коэффициенты экстинкции бг и В/ соответственно в оптически активной среде не равны друг другу, т. е. е,гфР1. Это явление называется круговым дихроизмом. [c.278]

Хиральные молекулы проявляют оптическую активность. Они имеют различные показатели преломления циркулярно поляризованных компонент плоско поляризованного светового луча циркулярное двойное преломление), а также различные мольные коэффициенты экстинкции циркулярный, или круговой дихроизм). Вследствие циркулярного двойного преломления хиральные молекулы поворачивают плоскость колебаний нлоскополяризованного света на угол а (см. раздел 1.3.6.1). [c.91]

В случае обычного неплоского димера (рис. 19) электронные переходы из основного г зо в оба возбужденных состояния я з+ и г ) являются разрешенными и димер вполне вероятно обладает оптической активностью. Оптически активные молекулы имеют различные показатели преломления и различные коэффициенты экстинкции для лево- и правоциркулярно поляризованного света. Круговое двулучепреломление вызывает вращение плоскости линейнополяри- зованного света оптическими изомерами [5]. В лево- и правоциркулярно поляризованном свете конец вектора электрического поля излучения описывает, соответственно, левую и правую спиральную кривую. [c.1864]

Фолмен и Йетс [8] наблюдали изменение коэффициента экстинкции с заполнением поверхности для Н—Н-валентных колебаний аммиака, адсорбированного на пористом стекле. Зависимость оптической плотности полосы N—Н-валентного колебания при 3370 см" от степени заполнения поверхности (рис. 7, кривая Ь) обнаруживает уменьщение градиента с ростом заполнения, и десорбционная ветвь кривой лежит значительно выше адсорбционной. Фолмен и Йетс [8] предложили объяснение этого эффекта, исходя из неоднородности поверхности, на которой большинство активных центров представляет собой атомы кремния или кислорода, а места с ОН- [c.28]

Выше мы отмечали, что величина коэффициента экстинкции в какой-то мере связана с сорбционной активностью вещества, а изменение дискретного градиента характеризует способность электронов в атомах молекул данного вещества к повышению потенциальной энергии (переходить на более высокие энергетические уровни). Возможно, что эти свойства вещества хлороформенной фракции смол по-разному реагируют на факторы, сопутствующие изменению глубин залегания нефтей. [c.96]

За исключением влияния молекулярного веса иа вязкость, седиментацию и связанные с ними физические свойства [347—349[, транспортные рибонуклеиновые кислоты по своему поведению сходны с микросомальиыми нуклеиновыми кислотами (рис. 8-34), хотя их нуклеотидный состав совершенно различен. Изменения коэффициента экстинкции и оптического врашения с изменением температуры вновь указывают на суш,ествование структуры, связанной водородными связями [344, 349, 352], и это подтверждается низкой скоростью реакции с формальдегидом [349[. То, что их структура несколько более стабильна и более упорядочена, чем у микросомальных РНК, видно из того факта, что они имеют более высокую температуру плавления и характеризуются более резким подъемом температурной кривой (т. пл. примерно 60 в 0,1 М растворе хлористого натрия, причем возрастание оптической плотности начинается с 40 ). Повышение или понижение ионной силы увеличивает или уменьшает температуру плавления, а мочевина в высокой концентрации заметно влияет на оптическое поглощение даже при комнатной температуре, что обусловлено понижением температуры плавления [349[. Увеличение оптического поглощения в бессолевом растворе фактически достигает того же значения, что и при максимальной температуре (24%). Эти изменения вновь полностью обратимы, и действительно, при нагревании до 70° при pH 6,8 ((X = 0,2) РНК не теряет своей биологической активности [344]. Хотя остаточным гипохромизмом зачастую можно пренебречь, особенно в случае ДНК, можно заметить, что в случае растворимой РНК из печени крысы [351 [ структурный (после нагревания или прибавления 6 М мочевины) гиперхромизм составляет приблизительно 21%, а гиперхромизм при щелочном гидролизе равен 49%. Это показывает, что и в отсутствие вторичной структуры с ее водородными связями значительная часть оснований остается в таком состоянии, что их плоскости параллельны. (Ср. с соответствующими данными для рибосомальной РНК из Е. oli.) [c.622]

С одинаковой массой или поверхность , взятых до и после полоскания [47, 233]. Количество фиксированного красителя определяют измерением коэффициента экстинкции растворов промытого и непромытого образцов ткани при одной длине волны и выражают его в процентах к количеству красителя, содержавшегося в непЕОМытом образце. Незакрепленный на волокне краситель состоит из гидролизованного красителя и красителя, еще способного вступать в реакцию с волокном. Процесс фиксации считают законченным, когда кривая фиксации становится параллельной оси вре-.мени. Если крашение ведут из разбавленных растворов, такая кривая показывает, что активный краситель прореагировал полностью, но в быстро идущих непрерывных процессах фиксация может пройти до вступления всего красителя в реакцию с волокном. Особенно часто это происходит в процессах термофиксаци [280], так как при этом целлюлоза может быть пересушена до [c.279]

В тетраэдрическом комплексе (см. рис. 30, а) не имеющая центра симметрии молекулярная орбита возбужденного электрона образована комбинацией различной четности орбит комплексообразователя и лигандов. Непосредственно над ней расположена центросимметричная орбита типа е, так что первый из разрешенных переходов будет сравнительно низко энергетическим. Поэтому сильное оптическое поглощение с коэффициентом экстинкции 10 —10 л молъ -см следует ожидать в видимой или даже инфракрасной области спектра. И действительно, именно здесь наблюдаются интенсивные полосы поглощения активных частиц, возникающих при облучении воды, аммиака, спиртов, формамида, диоксана и других жидкостей квазикристаллического тетраэдрического строения, а также кристаллического льда. [c.107]

Весьма замечательным свойством этого комплекса является то, что с перекисью соединяется, повидимому, только одна из четырех гематиновых групп молекулы каталазы [70]. Качественные доказательства этого были получены тремя различными экспериментальными методами. Во-первых, спектрофотометрическим титрованием каталазы перекисью водорода обнаружено избыточное количество комплекса по сравнению с числом молей добавленной перекиси, если расчет вести исходя из предположения о том, что все четыре гематиновые группы соединяются с перекисью. Во-вторых, ингибирование активности каталазы одним только цианидом показывает, что в применявшихся условиях испытания активности каталазы не все гематиновые группы соединяются с перекисью. В-третьих, разница между коэффициентами экстинкции каталазы и этого комплекса довольно невелика и составляет 40 см - при 405 01] , что сравнимо с разницей между коэффициентами экстинкции эритроцитной каталазы с четырьмя гематиновыми группами (380 мМ ) и каталазы из печени с тремя гематиновыми группами (340 см - лЖ" ). Эта [c.216]

Вероятно, комплексы с переносом заряда (КПЗ) играют весьма ограниченную роль в катализе и во взаимодействиях биологически важных макромолекул, хотя в ряде случаев было показано существование таких комплексов. Связывание 2,4-динитротолуола с антителами на динитрофенильную группу приводит к уменьшению коэффициента экстинкции в полосе поглощения динитротолуола и появлению новой полосы поглощения динитротолуола при 300 нм, которая указывает на образование КПЗ [2]. КПЗ с участиел пиридиновых и флавиновых групп, являющихся активными центрами коферментов, участвующих в биологических окислительно-восстановительных процессах, существуют, как было показано, в довольно специфических условиях и могут принимать участие в окислительно-восстановительных реакциях [c.332]

Исследования по определению сравнительной эффективности этих растворителей при использовании в процессе экстракции элементарной серы проводились в динамических условиях фильтрованием растворителя с заданной скоростью через слой осерненного активного угля, помещенного в трубку диаметром 10 мм с тер-мостатируемой рубашкой растворитель подавался в слой угля снизу вверх. Гранулометрический состав угля — 3—4 мм, высота слоя — 100—200 мм. Контроль процесса осуществлялся путем определения концентрации серы в растворе, выходящем из реактора. Концентрация серы в сероуглероде определялась весовым методом (испарение Sj из навески раствора с последующим взвешиванием оставшейся серы). В остальных растворителях содержание серы определялось спектрофотометрически. Предварительно были найдены коэффициенты экстинкции серы в растворителях и показано подчинение оптической плотности растворов закону Ламберта—Бера. [c.145]

Количественное определение числа центров В5 в образцах представляет существенное значение для настоящей работы. На ряде изотерм экстинкции было показано [4], что экстинкция полосы поглощения азота достигает максимума уже при покрытии поверхности, значительно меньшем, чем монослой. Это совпадает с точкой зрения, согласно которой лишь ограниченное число особых центров (центров Вб) способно адсорбировать азот в ИК-активной форме. При давлении азота 20 см рт. ст. и температуре 25° С экстинкция полосы поглощения равна 80% от максимального значения. Число центров В5 в образце вычисляли по экстинкции при тех же условиях, при коэффициенте экстинкции е = 4-10- см /молъ [1] и по данным исследования образцов, приведенных в табл. 2. [c.277]

Смотреть страницы где упоминается термин Коэффициент активности экстинкции: [c.407] [c.48] [c.263] [c.447] [c.431] [c.56] [c.58] [c.59] [c.314] [c.149] [c.262] [c.170] [c.481] [c.106] [c.191] [c.117] [c.108] [c.84] [c.231] [c.72]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология