Хроматографическая система градиентная

Применяя различные элюенты, можно изменять параметры удерживания и селективность хроматографической системы. Возможно использование градиентного элюирования. Селективность в ЖХ в отличие от ГХ определяется не одним, а двумя факторами — природой подвижной (элюент) и неподвижной фаз. [c.307]

Для разделения блоксополимеров можно использовать осадительную тех. Тогда в плохом для одного из блоков растворителе будет наблюдаться селективное осаждение блоксополимера, обогащенного этим блоком, в принципе, в таких условиях на основе селективного растворения гомополимера в стартовом пятне можно разделить гомополимер и блоксополимер с малым содержанием второго компонента. В этой связи большой интерес представляет градиентная хроматографическая система, в которой содержание селективного для гомополимера растворителя изменяется по мере подъема элюента по хроматографической пластинке. Подобные свойства пластинки реализуются в осадительной ТСХ ПММА и ПС при использовании системы хлороформ — метанол (1 3), где селективный для этих полимеров растворитель (хлороформ) более летуч и преимущественно испаряется с пластинки в ненасыщенной С-камере [55]. Поскольку в системе хлороформ — метанол по мере уменьшения содержания хлороформа вначале высаживается ПС, а затем ПММА (рис. УП1.22), блоксополимер имеет худшую растворимость, чем ПММА, и остается на старте, а ПММА движется по пластинке. При этом для разделения блоксополимера и ПММА по мере увеличения их молекулярных масс и изменения вследствие этого порога растворимости следует снижать концентрацию метанола (с 80 до 72%). [c.311]

Для разделения сополимеров близкого состава использовались слабо градиентные хроматографические системы, содержащие серный эфир, ме-тилкетон (рис. 21, 6). Эффективность ТСХ сополимеров столь высокая, что позволяет установить появление неоднородности у сополимеров азео-тропного состава при увеличении глубины конверсии. При ТСХ сополимеров СТ — ММА концентрационная зависимость формы хроматографического пятна имеет тот же характер, что и у ПС. [c.157]

Эти соединения сильно отличаются по растворимости и структуре, и поэтому для их разделения необходимы различные жидкостные хроматографические системы. После того как станут доступны новые типы колонок и появится возможность широко использовать метод градиентной подачи растворителя, метод жидкостной хроматографии будет чаще использоваться для разделения красителей. [c.293]

Для питания колонки промывающими растворами установка снабжается одной нли несколькими емкостями, которые для градиентного промывания должны быть оборудованы смесительным устройством. Растворы подаются в колонку через регулятор скорости, которым может служить как обыкновенный кран, так н Специальная насосная система в том случае, если сопротивление столба смолы нельзя преодолеть простым гидростатическим давлением жидкости. На выходе колонка имеет две системы систему контроля за результатом разделения и фракционирующий прибор для вытекающего раствора. В настоящее время известно очень много приборов, сконструированных специально для обслуживания хроматографического процесса. [c.93]

Исходные сахара и получаемые из них сложные эфиры обычно имеют различные хроматографические характеристики, так что разделение их хроматографией в системе жидкая фаза— твердая фаза не представляет больших трудностей в отличие от смесей, содержащих продукты неполного ацилирования сахаров. Проблему количественного разделения продуктов ацилирования сахаров (полностью ацилированных производных, не полностью ацилированных производных и непрореагировавших исходных сахаров) решают с помощью градиентного элюирования. [c.114]

К хроматографу дополнительно придаются блок циркуляции, позволяющий путем переключения кранов осуществлять циркуляцию смесп в системе хроматографических колонок до нужной степени разделения компонентов, и блок подачи градиентного [c.354]

В некоторых случаях два или более пиков образца будут разрешены не полностью даже после оптимизации активности растворителя. Для многокомпонентных смесей это может быть связано с основной проблемой элюирования , обсуждающейся в разд. 3 данной главы. Проблема эта состоит в том, что различным компонентам образца соответствуют самые разные значения к, так что с одним растворителем к не будет оптимальным для всех компонентов. Общая проблема элюирования требует изменения хроматографической активности растворителя в процессе разделения (т. е. градиентной подачи растворителя) или некоторых эквивалентных изменений в условиях разделения. Это усложняет выбор системы растворителя, но принципы отбора подобны тем, которыми руководствуются при выборе одного растворителя нужной активности. [c.98]

Начинать хроматографирование следует наименее полярным растворителем, обычно петролейным эфиром. Скорость отбора фракций зависит от типа и масштаба хроматографического процесса. Обычно скорость течения, измеренная в мл/ч, должна быть численно равна массе (г) использованного адсорбента. Большинство адсорбентов не затрудняет течение элюента по колонке. При применении некоторых особо тонкодисперсных адсорбентов, например оксида магния, может потребоваться введение вспомогательного фильтра, например кизельгурового. Для отбора элюата пригодны сборники фракций любого типа (см. гл. 8). Объем одной фракции устанавливают в соответствии с характером задачи и регулируют или с помощью переключателя с часовым механизмом при сборнике фракций, или путем изменения (притом только уменьшения) скорости потока элюента. Отобранные в течение определенных интервалов фракции анализируют методами ТСХ или ГЖХ, разработанными для данной методики разделения, и объединяют идентичные по составу фракции. Из объединенных фракций отгоняют растворитель посредством обычной или вакуумной перегонки в роторном испарителе при низкой температуре. Элюирование продолжают до тех пор, пока не перестанет элюироваться хроматографируемая проба. После этого элюирующую способность смеси увеличивают, повышая содержание более полярного компонента системы, который подают или в несколько порций, или постепенно (градиентное элюирование описание аппаратуры для градиентного элюирования см. в разд. 8.4 или в работе [45а]). Основное преимущество градиентного элюирования — это подавление образования хвостов сильно адсорбируемых [c.196]

В хроматографе предусмотрено использование колонок двух типов стеклянных с внутренним диаметром 1—1,5 мм, рассчитанных на работу при давлении до 1,5 МПа и создание полностью инертной хроматографической системы, и из нержавеющей стали длиной 60 и 120 мм с внутренним диаметром 2 мм. Все соединительные линии в хроматографе выполнены из толстостенных фторопластовых капилляров, на конце имеющих развальцовку, по которой и производится уплотнение при низком давлении используются капилляры из полиэтилена. Шприцевой насос Милихром имеет привод от шагового двигателя, что позволяет не только обеспечить высокую воспроизводимость времени удерживания и количества вводимой пробы, но и формировать при необходимости в камере насоса градиент растворителя заданной формы и осуществлять градиентное элюирование сложных по составу смесей веществ. Предусмотрена также работа Милихрома с микроколлектоРОМ фракций, обеспечивающим сбор микрофракций для последующей идентификации другими физико-химическими методами. [c.64]

Большинство современных насосов снабжено указателями и ограничителями нижнего и верхнего пределов рабочего давления. Давление в хроматографической системе является исключительно важным параметром, и его необходимо контролировать. Для этой цели обычно используют указатель давления с проточными тензодатчиками. Объем датчиков очень мал, поэтому не возникает затруднений при замене растворителя в градиентном элюировании. Ограничители давления автоматически отключают насос при выходе давления из установленного диапазона, что существенно повышает безопасность работы. Ограничитель верхнего предела также очень полезен для предотвращения порчи колонок с некоторыми сороентами, которые могут разрушиться при превышении допустимого для них рабочего давления. [c.141]

Компьютерные системы обработки данных являются наиболее сложными и дорогими. Они делятся на две группы. Устройства первой группы предназначены только для обработки данных и представляют собой малогабаритные вычислительные машины с большим объемом памяти, которые выполняют разнообразные сложные расчеты (например, в эксклюзионной хроматографии) и представляют результаты в цифровой и графической форме. Устройства, относящиеся ко второй группе, кроме обработки данных, осуществляют управление различными элементами хроматографической системы. К тагим элементам относят, в частности, установку параметров процесса (температура, скорость потока, условия детектирования и др.) и состав подвижной фазы в изократическом и градиентном элюировании, режим работы автоматического дозатора и т.п. Все необходимые параметры постоянно контролируются, что гарантирует их стабильность в процессе разделения. [c.160]

Образование фронтальных хроматографических зон в подвижной фазе, известное как явление расслоения подвижной фазы [1], наблюдается во всех хроматографических системах при изменении состава подвижной фазы. Обычно расслоение считается нежелательным явлешем, отрицательно влияющим на результаты разделения при градиентном элюировании, принимают меры для нейтрализации этого отрицательного эффекта [3, 4]. [c.41]

Хорваш и Липский [23] отмечают, что емкость пика для газовой или жидкостной хроматографической системы можно значительно повысить при использовании одного или нескольких градиентных [c.36]

В простейшей системе градиентного элюирования раствор в сосу де, дозирующем элюат на хроматографическую колонку, пополняется с той же самой скоростью из второго сосуда, содержащего тот же элюирующий раствор другой концентрации. Таким способом создается линейный градиент концентрации. При увеличении числа сосудов в сериях и изменении исходных концентраций раствора в каждом может быть получен весь диапазон градиентных профилей. Петерсон и Собер [13] разработали и математически описали девятикамерную систему ("Vaгigrad") и продемонстрировали универсальность такой системы. [c.293]

При осуществлении элюентной хроматографии в верхнюю часть хроматографической колонки, наполненной, например, катионитом в водородной форме (Н-ф9рме), вводится смесь разделяемых ионов. Для получения компонентов в чистом виде элюирование проводят раствором кислоты или другим элюентом при постепенно возрастающей его концентрации (градиентное элюирование). Если исследуют смесь элементов разных групп периодической системы, то разделение при помощи элюирования растворами электролитов облегчается тем, что элементы разной валентности обладают различным сродством к иониту. Сорбируемость ионов возрастает от одновалентных к двух- и трехвалентным. Приблизительную закономерность сорбируемости ионов с одинаковой валентностью MOHiHO представить в виде сорбционных рядов [c.285]

Для создания определенного pH и поддержания на необходимом уровне готовят соответствующий буферный раствор. Если это возможно, то буферный раствор подбирают таким образом, чтобы его функциональная группа была похожа на функциональную группу образца. Так, ацетатный буферный раствор приемлем для анализа карбоновых кислот, фосфатный — для люирования нуклеотидов. Большое значение имеет чистота буферного раствора, так как он не должен детектироваться выбранным детектором, что особенно важно при работе в режиме градиентного элюирования. Чистота буферного раствора зависит от фирм-производителей, и даже разные партии одной фирмы могут различаться по составу. Каждая новая партия буферного раствора тестируется двумя холостыми хроматографическими опытами перед использованием. Второй опыт показывает, существуют ли вещества, отложившиеся в колонке в процессе регенерации или в течение последних стадий предыдущего градиента. Хотя большинство разделений проводят в водных буферных растворах, иногда добавляют органический растворитель (метанол, этанол) в количестве 3-10% для повышения селективности и улучшения растворимости образца. При этом концентрация растворителя не должна быть велика, чтобы не выдать осаждения буферной соли, о чем будет свидетельствовать появление течи в системе и увеличение сопротивления в колонке. [c.38]

В самом общем виде суммарная погрешность результата измерений складывается из случайной и систематической состав Л 1ющих. Источниками погрешностей результатов хроматографических измерений являются факторы, которые можно разбить на три группы 1) поддающиеся количественной оценке 2) не поддающиеся количественной оценке 3) неизвестные. Если исключить грубые промахи, то в хроматографии имеют место следующие причины возникновения погрешностей возможная, неоднородность анализируемой пробы невоспроизводимость работы системы дозирования потеря части пробы (негерметичность разделительной системы, потери в дозаторе, необратимая адсорбция, каталитические превращения,, деструкция) образование ложных пиков ( память шприца, мембраны испарителя или других частей аппаратуры, реакция на броски давления при переключении кранов, эффект режимов градиентного элюирования, программирования температуры или давления) колебания условий разде- [c.394]

Установлено [16], что хроматографическая подвижность сополимеров стирола и метилметакрилата связана с их структурой (длиной блока). Так, в системе хлороформ — этилацетат сополимеры, содержащие 49% СТ, ведут себя следующим образом блоксополимер остается на старте, альтернирующий сополимер (с регулярно чередующимися сегментами) находится посредине пластинки, а статистический сополимер движется с наибольшей скоростью. В градиентных системах метилэтилкетон — четыреххлористый углерод Bf увеличивается в ряду двухблочный > трехблочный > статистический сополимеры СТ — ММА. Эти различия, так же как и различия в адсорбируемости стереорегу-лярных ПММА, вначале объяснили [16] разной адсорбируемостью триад мономерных звеньев, рассматривая их как адсорбционные единицы полимерной цепочки. Без сомнения, ближайшее окружение адсорбирующихся групп ответственно за степень адсорбции полимера, однако триадная модель адсорбции макромолекул [161 выглядит упрощенно и от нее впоследствии отказались [17]. [c.288]

Разделение а-ПММА й с-ПММА может быть осуществлено [30] с помощью адсорбционной ТСХ в системе этилацетат — изопропилацетат (рие. УП1.19а) и градиентной ТСХ в системе ацетонитрил — метанол (рис. VIII.196). При использовании этих хроматографических систем обнаруживается зависимость не только от содержания синдиотактических триад Т , но и от М . Для системы ацетонитрил — метанол [c.307]

Для разделения последних используется градиентная ТСХ на силикагеле в системе четыреххлористый углерод — метилэтилкетон с увеличивающимся содержанием метилэтилкетона. При этом разделяются статистические, двух- и трехблочные сополимеры одинакового состава. В этих условиях М сополимеров не влияет на их хроматографическое поведение (т. е. на величину Щ) (рис. VIII.21). Rf сополимеров СТ и ММА одного состава уменьшается в ряду статистический трехблочный двухблочный. [c.310]

Например, длительность хроматографического разделения 18 аминокислот, обычно присутствующих в протеинах, при использовании дьухколоночной системы с катионообменной смолой дауэкс 50 и градиентного элюирования с цитратным буфером была [c.232]