Каталаза определение

Рис. 29. Прибор для определения активности каталазы

Опыт 42. Определение силы каталазы в листьях растений газоволюметрическим методом [c.97]

Величина константы скорости реакции перекиси с каталазой, определенная на основании точного решения, к= 1,7-10 моль -л-сек , соответствует значению, найденному прямыми измерениями. [c.368]

Абсолютная специфичность — это действие каждого фермента на вещество строго определенного химического состава. Например, фермент уреаза катализирует только гидролиз мочевины, фермент пепсин — только расцепление белков, каталаза действует лишь на пероксид водорода. [c.167]

Ферменты обладают высокой специфичностью. Каждый фермент катализирует только определенный химический процесс или определенную группу превращений. Так, фермент каталаза разлагает перекись водорода, но не действует на белки пепсин разлагает белки, но не влияет на скорость окислительных процессов. [c.251]

Так, при нормальной кислотности желудочный сок имеет pH 1,7 pH крови человека равен 7,4 слюны — 6,9. Каждый фермент функционирует при определенном значении pH каталаза крови при pH 7,0 пепсин желудочного сока — при pH 1,5—2 и т. д. [c.195]

Определение каталазы (по А. Н. Баху и А. И. Опарину). К классу оксидоредуктаз относится каталаза, которая катализирует разложение пероксида водорода по уравнению [c.109]

В заключение приведем результаты недавно выполненной работы Ю. М. Азизова с соавторами [95], исследовавших влияние давления на скорость разложения перекиси водорода каталазой. Определение велось конкурентным методом в качестве конкурентной реакции служило окисление аскорбиновой кислоты перекисью водорода в присутствии пероксидазы. Ранее Азизовым было показано, что давление в 1000 атм практически не влияет на скорость пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты. [c.241]

Проведение опыта. Как видно из рис. 29, прибор для определения каталазы состоит из конической колбы 1 на 50 мл, бюретки 2 на 50 мл и стеклянной груши 3. Все эти части соединены каучуковыми трубками и стеклянным тройником, один из выходов которого закрыт с помощью зажима 4. Прибор наполняют водой до нулевого уровня [c.98]

Катализ термического разложения. Этот процесс часто называют каталазным , так как он является модельным для определения активности некоторых ферментов, в частности каталазы. [c.344]

Помимо учета близости исследуемого вещества к тем или иным ингибиторам ферментных систем, следует обратить внимание на возможную близость его к субстратам действия энзимов. Ряд химических веществ, с которыми имеет дело токсиколог, являются субстратами действия определенных ферментов, что позволяет при установлении нх пороговых концентраций выбрать в качестве критерия исследование активности именно данной ферментной системы. Примером могут служить опыты Л. А. Тиунова н Т. И. Соколовой (1957). Эти авторы при изучении действия на организм белых крыс и мышей паров перекиси водорода в качестве критерия токсического действия яда избрали исследование каталазы — фермента, для которого перекись водорода является субстратом. [c.232]

Для определения каталазы на поверхность 24-часовой культуры на скошенном агаре наливают 0,5— 1,0 мл 3%-го раствора перекиси водорода (нельзя использовать кровяной агар, так как катал аза эритроцитов может дать ложноположительную реакцию). Появление пузырьков газа расценивают как положительную реакцию. В качестве контроля следует параллельно исследовать культуру, заведомо содержащую каталазу. [c.33]

Промышленные катализаторы по своей структуре, строению и принадлежности к определенным типам твердых тел резко отличаются от биохимических катализаторов-ферментов, действуюш их в живой природе. Ферменты — микрогетерогенные катализаторы ускоряют при температуре 20— 40° С разнообразные типы химических процессов как разложения, так и сложнейшего синтеза. Активность и избирательность их действия, как правило, превышает активность и избирательность синтезированных, наиболее активных из известных гетерогенных катализаторов. Интенсивное изучение биохимических катализаторов-ферментов, проводимое в последние годы, показало, что активность их в процессах окислительно-восстановительного типа обязана присутствию металлов, связанных с белковой частью фермента хелатной связью [1—4], В ряде работ для гомогенных катализаторов удалось получить модель фермента-каталазы на основании использования комплексных хелатных -соединений меди [5—7]. В последние годы химиками-органиками осуществлен синтез хелатных полимеров, которые содержат в цепочке полимера различные атомы металлов, связанные хелатной связью с атомами-аддендами в хелатном узле единичного звена полимера [8—11] [c.219]

По характеру действия ферменты обладают строгой специфичностью, которая обусловлена структурным соответствием между молекулами субстрата ш фермента. Каждый из них катализирует определенную химическую реакцию. На течение последних влияют условия среды (температура, pH, наличие химических соединений, облучение) и присутствие других ферментов [26]. Под действием факторов среды могут синтезироваться и новые ферменты. Их называют адаптивными, так как они позволяют микроорганизмам приспосабливаться к новым условиям. Ферменты, которые участвуют во внутриклеточных процессах,, называют эндоферментами, а ферменты, выделяемые микроорганизмами в окружающую среду, — экзоферментами. Последние могут являться биоцидами для других микроорганизмов или стимулировать процессы коррозии и биоповреждений материалов техники и сооружений. Каталитическая активность ферментов во много раз превышает неорганические катализаторы. Например, 1 мг железа, входящего в состав фермента каталазы, эквивалентен каталитическому действию 10 т железа в составе неорганического соединения прн разложении перекиси водорода, а 1 г амилазы может превратить 1 т крахмала в сахар при соответствующих условиях. [c.14]

Ферменты, выделяемые грибами, являются мощным фактором биоповреждений металлоконструкций. К таким ферментам относят оксидоредуктазы (каталаза, пероксидаза, полифенолоксидаза) и эстеразы (фосфаталазы, липазы). Ряд материалов и покрытий разрушаются продуктами преимущественно определенного вида ферментов резины, битумы, — продуцентами липазы, строительные материалы — продуцентами дегидрогеназы, каталазы, пероксидазы, фенопласты — фосфатазы. Разрушение многих полимерных материалов происходит в результате комплекса реакций окислительновосстановительных процессов, декарбоксилирования, этерефикации, гидролиза и др. Алканы, входящие в состав нефтепродуктов, разрушаются в результате терминального окисления алкены — гидратацией двойной связи с образованием эпокси-групп, этанолов и диолов. [c.54]

Среди них наибольший интерес вызывают датчики на основе кислородного электрода. В качестве ферментных меток обычно применяют глюкозоксидазу или каталазу. На этом принципе, например, работает иммуноферментный амперометрический датчик для определения инсулина. Антитела инсулина иммобилизуют на капроновой сетке и закрепляют ее на поверхности кислородного электрода. При внесении электрода в анализируемый раствор антитела взаимодействуют с инсулином, к которому пришита глюкозоксидаза, с образованием комплексов АТ-инсулин-Е, где Е - фермент. Когда в растворе, наряду с меченым инсулином, присутствуют молекулы инсулина без фермента, то количество фермента на электроде будет тем меньше, чем выше концентрация инсулина. При внесении электрода в раствор глюкозы изменение величины тока будет соответствовать концентрации инсулина в анализируемом растворе. Кислородный электрод используется также для определения альбумина в сыворотке крови человека. Основные характеристики некоторых иммуноферментных электродов приведены в табл. 14.3. [c.506]

Настоящий метод широко применяют в лабораторной практик Кроме того, известны еще газометрические методы определения акти] ности каталазы специальными приборами. В основу газометрически определений положен принцип измерения объема кислорода, выдел [c.110]

Анаэробное дыхание. При анаэробном дыхании у микроорганизмов происходят различные биохимические и окислительные процессы органических веществ, основанные на дегидрировании (отнятии водорода) без участия свободного кислорода. Акцептором водорода являются промежуточные продукты процесса окисления субстрата (например, органические молекулы, имеющие ненасыщенные связи). Этот процесс происходит по следующей схеме 1) окисляемый субстрат — Нг + фермент дегидраза = окисленный субстрат + дегидраза — Нг 2) дегидраза — Нг -1- акцептор водорода (органическая молекула) =дегидраза-I-акцептор — Нг. При таком окислении выделяется определенное количество энергии, которое необходимо для жизнедеятельности анаэробных микробов. Последние не могут использовать для окисления органических соединений молекулярный кислород, так как у них дыхательными ферментами являются только дегидразы, а для использования молекулярного кислорода микроорганизмы должны иметь и другие ферменты. Например, несмотря на наличие кислорода в среде, молочнокислые бактерии (В. Ое1Ь-гйск ) совершенно не могут им пользоваться, так как у них нет фермента каталазы, которая разлагала бы перекись водорода, образующуюся в процессах дыхания и являющуюся ядом для микробов, и пероксидазы, которая вовлекала бы перекись водорода в окислительный процесс. [c.528]

Молочнокислыми бактериями в направлении защиты от молекулярного кислорода сделан определенный шаг вперед. Эти бактерии — единственная группа прокариот, не имеющих гемсодер-жащей каталазы, способных расти в присутствии воздуха. Поиски механизмов нейтрализации Оз и его производных привели к обнаружению у них помимо супероксиддисмутазы и высокой внутриклеточной концентрации ионов Мп , осуществляющих разложение 05, псевд окатал азы, а также каталазо- и пероксидазопо-добной активности. У отдельных представителей молочнокислых бактерий просматривается более четко выраженная степень при- [c.340]

Если при вовлечении молекул субстрата в комплекс мы часто встречаемся с комплексами, содержащими кислород в координационной сфере, то комплексы интересующего нас типа, как правило, характеризуются наличием азота. Это касается не только природных биокатализаторов хлорофилла, порфириновых соединений и т. п., но и тех моделей активных групп окислительных ферментов, которые изучались в нашей лаборатории за последнее десятилетие. Так, активными моделями про-стетической группы каталазы являются комплексы меди со всевозможными аминами [3]. Амины определенного типа позволяют построить модели полифенолоксидазы (Р. Д. Корпусова и Л. А. Николаев [4]), комплекс медь-—гистидин моделирует аскорбиноксидазу, причем адсорбция этого комплекса иа инсулине дополнительно активирует его [5] и т. д. Наоборот, во всех этих реакциях кислородсодержащие комплексы оказываются мало или вовсе неактивными. В частности, комплексы медь — аминокислоты в десятки тысяч раз менее активны в каталаз-ном процессе, чем комплексы медь — амин . [c.241]

Определение каталазы. На предметное стекло наносят каплю 10%-й (из-за низкой каталазной активности гемофилов) перекиси водорода, вносят культуру и растирают круговыми движениями. При положительной реакции возникает пенообразование. [c.178]

В наших исследованиях соотношение активности различных ферментных систем при воздействии химических веш,еств изучалось применительно к ферментным системам,, связанным в определенном метаболическом цикле. Например, при действии некоторых ядов регистрируются нарушения в обмене биогенных аминов. Для оценки активности энзимов данных метаболических циклов исследовался набор из трех ферментов моиоаминоксидазы, каталазы и альдегиддегидро-геназы (ксантиноксидазы). Опыты Н. А. Качуриной показали возможность производить оценку действия химических веществ на организм по изменению активности ряда ферментов одного метаболического цикла. Такие исследования позволяют иногда обнаружить изменения, ускользающие от экспериментатора при изучении активности отдельных ферментных систем. [c.242]

Метаболическая активность различных организмов может сопровождаться образованием перекисей, которые в определенных случаях могут быть мутагенами Более того, перекиси выступают как бы связующим звеном между химическим и физическим мутагенезом (в частности, лучевым), учитывая факт их образования во время облучения клеток или тканей При этом перекиси оказываются мутагенами первого порядка, а например, калия цианид — мутагеном второго порядка Это связано с тем, что K N блокирует фермент каталазу (антимутаген) и, как следствие, клетка лишается защиты против мутагенного действия Н2О2 [c.224]

Дрожжи, использующие метанол, могут быть источником флавинов и каталазы. Алкогольоксидазу дрожжей предлагают использовать в аналитических целях для определения содержания этанола. [c.152]

Хотя кинетические исследования определенного типа были проведены со многими известными в настоящее время ферментами, только некоторые из них детально и широко изучены. К их числу относятся [3] пептидазы пепсин, трипсин, химотрипсин и карбо-ксипептидаза эстеразы холннэстераза и аденозинтрифосфатаза уреаза фумараза лактикодегидраза пероксидаза и каталаза. [c.109]

Активность ферментов как катализаторов выражали многими способами. Одним из часто используемых способов является выражение ее через число оборотов Т.М. Последнее определяют [1] как число циклов, претерпеваемых во время каталитической реакции одной простетической группой фермента в одну минуту, т. е. как число молекул субстрата, реагирующих в минуту на одном активном центре фермента. Однако применялись и некоторые другие определения числа оборотов при любом способе измерения Т. N. следует указывать концентрацию субстрата и то, была ли она достаточной, чтобы дать максимальную скорость. Другой мерой [8, 3] является начальная константа скорости к реакции при низких концентрациях субстрата, где V = к [8]о[Е]о для реакции с одним субстратом, или к [8]о[Е]о[Т]о для бимолекулярной реакции. Эта характеристика имеет преимущество, являясь доступной мерой для многих реакций, катализируемых ферментами, и, кроме того, для тех же самых реакций в присутствии других катализаторов, которые не могут, например, дать предельно максимальную скорость. Однако, возможно, огромное преимущество может дать отнесение к к числу активных центров в молекуле фермента, точно так же как в кислотно-основном катализе константу скорости каталитической реакции делят на число доступных протонов кислотного катализатора. Аналогичным образом при сравнении фермента каталазы с коллоидальной платиной для реакции разложения перекиси водорода каждая частица может оказаться такой же активной, как и отдельная молекула фермента [8]. Однако каждая частица с радиусом 500 А имеет на поверхности приблизительно 3-10 атомов металла, каждый из которых, возможно, является самостоятельным активным центром, так что, относя к одному центру, можно видеть, что фермент оказывается намного более активным. Как показано в табл. 2, ферментативные реакции характеризуются более низкой энергией активации приблизительно на 10 ктл/моль, это может легко объяснить различие в активностях. В табл. 8 некоторые ферменты сравниваются с другими каталитически действующими ионами. [c.139]

Далее зерна силикагеля, несущие на себе фермент, помещались в каталазники,. где к силикагелю прибавлялись строго определенные концентрации 2,4-дихлорфенокси-уксусной или 2-метил-4-хлорфеноксиуксусной кислоты. Определение активности каталазы производилось газометрическим методом [2] при 20° С в каждом опыте расходовалось 5 мл 3%-ного раствора Н2О2. [c.339]

Постоянными компонентами изучаемых систем были силикагель, адсорбированная им каталаза и перекись водорода, количества которых во всех случаях оставались одинаковыми. Переменными компонентами являлись только концентрации хлорфенокси-уксусных кислот, которые варьировались в пределах от 0,005 до 0,5% к весу силикагеля. Определение активности каталазы с использованием адоорбента-носитеЛя Давало хорошую воспроизводимость результатов. [c.339]

Этот тип соединений привлек наше внимание своим сходством с положением и типом связи металла с полимерной белковой молекулой, осуществляющейся, согласно последним биохимическим исследованиям, в ферменте. Исследование каталитических свойств, проводившееся в Институте катализа СО АН СССР совместно с синтетической лабораторией МГУ, показало, что хелатные полимеры действительно обладают чрезвычайно интересными каталитическими свойствами [12—15], а именно высокой активностью в ряде модельных реакций окислительно-восстановительно-го типа. Так, скорость гетерогенного разложения перекиси водорода в расчете на один центр на поверхности приближается для медных полихелатов определенной структуры к скорости, наблюдаемой для наиболее активного фермента-каталазы [15]. [c.219]

В качестве экспрессного теста для быстрого, за 1—5 мин, отделения псевдомонад, аэромопад, вибрионов от бактерий семейства Euteгoba teriaef ae рекомендовано определение оксидазной активности бакгерий. Такой же экспрессный тест определения каталазной активности применяют при исследовании па наличие энтерококков. Тест позволяет в течение минуты отделить энтерококки от прочих грамположительных кокков, которые обладают активной каталазой. [c.68]

Первым ферментом, выделенным в чистом кристаллическом виде, была уреаза (Ж. Б. Сумнер, 1926 г.). Она была получена из одной разновидности фасоли экстрагированием водой и осаждением экстракта ацетоном. Затем были выделены в кристаллическом виде высаливанием из водных растворов сернокислым аммонием или сернокислым магнием при определенном pH пепсин и трипсин (И. X. Норсроп и М. Куниц, 1929 г.), а также и другие ферменты, в том числе желтый окислительный фермент, папаин, карбоксипептидаза, тирозиназа, каталаза и несколько дегидраз. [c.793]

При определении характера и стенени токсического действия СТЭКа изучались динамика веса тела, морфологический состав крови, гликемические кривые при сахарной нагрузке галактозой, активность холинэстеразы и каталазы, общий белок и соотношение белковых фракций сыворотки крови, секреторная функция желудка, нервно-мышечная возбудимость и показатели электрокардиограммы. [c.25]