Молекулярные массы ферментов

Удельная активность - активность фермента, отнесенная к 1 мг фермента. Пример определения активности фермента дана молекулярная масса фермента, равная 120 ООО г/моль. Концентрация фермента равна 1,0 мМ. Собственно значения активности определяют экспериментально и в данном примере активность равна 2800 мкмоль/мин. Удельная активность равна 2800 12 10" = 2,3 Ю ед/мг. [c.32]

Молекулы белков очень большие, поэтому и молекулярная масса ферментов обычно превышает миллион. Однако есть ферменты, молекулярная масса которых составляет 1000. Часть молекулы белка фермента, определяющая его специфичность, термолабильна. Под специфичностью надо понимать способность фермента воздействовать только на определенный субстрат, например сахараза гидролизует только сахарозу, уреаза — только мочевину, не воздействуя даже на ее производные. Фермент- [c.28]

Окисление сахара в организме происходит в результате сложной реакции, состоящей более чем из двух дюжин биохимически катализируемых стадий. Катализатор каждой такой стадии называется ферментом. Ферменты образуются в живых клетках и по своей природе являются белками. Молекулярная масса ферментов колеблется от сравнительно небольших значений порядка 10000 до величин порядка [c.450]

Молекулярная масса фермента — 159 000 Да. Молекула состоит из двух субъединиц диссоциация на субъединицы происходит при понижении концентрации белка в растворе. [c.279]

Таблица 4.1. Молекулярная масса ферментов

Относительная молекулярная масса ферментов имеет значения от 10 до 10 . По своему размеру ферменты попадают в область коллоидных частиц, что не дает возможности отнести их ни к гомогенным, ни к гетерогенным катализаторам. Поэтому их и выделяют в самостоятельный класс катализаторов. [c.478]

Для сопоставления каталитической эффективности разных ферментов определяют молекулярную активность, которая соответствует числу единиц в 1 мкмоль фермента (Е/мкмоль) или, иначе говоря, соответствует числу молекул субстрата, превращаемых одной молекулой фермента за 1 мин. Молекулярную активность можно определить лишь в том случае, если известны молекулярная масса фермента и его молекулярная концентрация в растворе. Как правило, такие измерения возможны только для ферментов, полученных в чистом (гомогенном) состоянии. [c.45]

Возможно два объяснения. Первое увеличилась молекулярная масса фермента, либо в результате полимеризации, либо в результате связывания ионов ртути с мономерным ферментом. Второе уменьшилось фрикционное отношение при постоянной молекулярной массе. [c.236]

Молекулярная масса фермента составляет 109 000. Он активируется Mg + с оптимумом концентрации около 7 мМ. Активность зависит и от концентрации одновалентных катионов. Ингибиторами фермента служат антибиотики, блокирующие матричный синтез ДНК. Удельная ферментативная активность продажных препаратов составляет 3000—5000 ед./мг-1 ед. фермента, включает 10 нмоль нуклеотидов (суммарно) за 30 мин при 37° в находящуюся в избытке активированную ДНК или поли (АТ). Хранить фермент рекомендуется растворенным в 0,05 М [c.259]

Гта, выражаемую числом Е на 1 мг белка. При наличии данных о числе в 1 мг чистого фермента говорят об удельной активности фермента. Если известна молекулярная масса фермента, то легко рассчитать число Е на [c.107]

Ферменты — высокомолекулярные белковые соединения, состоящие из аминокислот, связанных пептидными связями. В составе природных белков встречается около двадцати аминокислот. Молекулярная масса ферментов лежит в пределах от 10 до 10 . Молекула фермента в своем составе имеет чередующиеся полярные группы СООН, ННа, МН, ОН, 5Н и другие, а также гидрофобные группы. Первичная структура фермента обуславливается порядком чередования различных аминокислот. В результате теплового хаотического движения макромолекула фермента изгибается, свертывается в рыхлые клубки. Между отдельными участками полипептидной цепи возникает межмолекулярное взаимодействие, приводящее к образованию водородных связей другие участки могут взаимодействовать за счет электростатических или ван-дер-ваальсовых сил [c.632]

Клеточные белки, способные катализировать различные биохимические реакции, называют ферментами или энзимами. Ферменты по химическому строению, могут быть трех видов состоящие только из сложных белковых соединений содержащие, кроме белковых молекул, ионы одного из металлов (меди, железа, цинка и др.) содержащие активные группы, без которых белковая часть молекулы становится инертной. В образовании ферментов могут участвовать витамины. Молекулярная масса ферментов колеблется от нескольких тысяч до 500 000 (изомеразы). Клетки микроорганизмов имеют большой набор ферментов, например грибы рода Aspergillus содержат до 20 различных ферментов. [c.14]

Молекула киназы фосфорилазы состоит из субъединиц четырех типов ар б. Молекулярная масса фермента — 1,3-10 Да — отвечает формуле (аРуб)4- Киназа фосфорилазы играет, как показано, ключевую роль в регуляции обмена гликогена и в сопряжении гликогенолиза и мышечного сокращения. В скелетной мускулатуре она существует в двух молекулярных формах нефосфорилированной ( неактивированная ) и фосфорилированной ( активированная ). Первая активна лищь при pH 8,2, вторая — при pH 6,8 и 8,2. При активации фермента отнощение активностей, измеренных при pH 6,8/8,2, возрастает от 0,05 до 0,9—1,0. Активация киназы достигается фосфорилированием а- и р-субъединиц, которое катализирует цАМФ-зависимая протеинкиназа. Каталитическую роль выполняет -субъединица б-субъединица идентична a +- вязывaющeмy белку — кальмодулину. Ферментативная активность киназы фосфорилазы полностью зависит от ионов На р-субъединице фермента имеется регуляторный центр, обладающий высоким сродством к АДФ. Константа Михаэлиса для АТФ равна [c.223]

Глицерол-З-фосфатдегидрогеназа — димер, состоящий идипали вых субъединиц. Молекулярная масса фермента из мышц кролика составляет 78000 Да. Глицерол-З-фосфатдегидрогеназа угнетается 5Н-реа-гентами, а также ионами тяжелых металлов. Константы Михаэлиса для НАДН — 11,9 мкМ, глицерол-З-фосфата — 0,18 мМ, НАД+ — [c.267]

Все разнообразные обратимые окислительно-восстановительные реакции субстратов осуществляются почти исключительно при участии двух кофакторов — НАД и НАДФ. Высокая специфичность фермента к субстрату обусловливается почти исключительно структурой бе,тка —последовательностью соединения -аминокислот и их пространственного расположения. Молекулярная масса ферментов составляет от 84 ООО для алкогольдегидрогеназы из печени до 1 000 000 для глутаматдегидрогеназы из митохондрий печени быка. [c.317]

Окисление p-D-глюкозы в D - г л ю к о и о-б-л а к-т о н. Эту реакцию катализирует глюкозооксидаза (нотатин, пенициллин В), содержащая ФАД (2 моля на моль фермента) [438]. Молекулярная масса фермента 154 ООО он содержится в плесневых грибах Peni illium notatum и др. [439, 4401. Механизм ферментного окисления изучен с помощью Н , меченной 0 [4411, при этом оказалось, что кислород, выделяющийся при разложении перекиси водорода под действием каталазы, не содержит О, т. е. глюкозооксидаза катализирует перенос водорода от глюкозы в газовой фазе, акцептором водорода служит газообразный кислород. По радикальному механизму в первой ступени реакции (З-Л-глюкопираноза (а) теряет протон и электрон с образованием свободного радикала (б), который, теряя второй электрон, образует оксониевый ион (в). Прототропная реакция между оксониевым ионом и перекисным анионом завершает окисление с образованием D-глюконо-б-лактона (г). [c.563]

Интенсивное изучение биологических катализаторов дало возможность составить целостное представление об этих, по сути, наиболее важньгх структурах живой материй. В частности, было установлено, что все ферменты являются макромолекулами белковой природы. (Каталитическая активность специфичных полинуклеотидов, принимающих участие в сплайсинге РНК, является исключением, подтверждающим общее правило.) Первостепенное значение для функций ферментов имеет первичная структура, определяющая тип катализируемых реакций. Гидролиз пептидных связей трипсином или пепсином необратимо инактивирует ферменты. Для проявления каталитического действия большое значение имеет также нативность высших белковых структур (гл. 3). Обратимая денатурация является фактором подавления или восстановления ферментативной активности. Физико-химические свойства ферментов соответствуют таковым для белков, причем заряд играет существенное значение для каталитического акта. Молекулярные массы ферментов лежат в пределах от 10 до 1000 kDa и более, т. е. в большинстве случаев фермент по размерам гораздо больше, чем субстрат. [c.61]

Соединение А - чаще всего хинон. Молекулярная масса фермента 230 ООО Да. Функционирование этой ферментной системы связано с электронотранспортной цепью и с цитохромами. [c.161]

Молекулярные массы ферментов, как и всех остальных белков, лежат в пределах от 12 ООО до 1 ООО ООО, так что их размеры намного превьппают размеры их субстратов или функциональных групп, на которые они действуют (рис. 9-2). Некоторые ферменты состоят только из полипептидных цепей и не содержат никаких других химических групп, кроме тех, которые входят в состав аминокислотных остатков к подобным ферментам относится, например, рибонуклеаза из поджелудочной железы. Однако для [c.228]

Сукцинатдегидрогеназа прочно связана с внутренней митохондриальной мембраной. Молекулярная масса фермента, выделенного из митохондрий бычьего сердца, равна приблизительно 100000. Одна молекула этого фермента содержит один остаток ковалентно связанного FAD и два железо-серных центра в одном из этих центров находятся два атома железа, а в другом-четыре. В сукцинатдегидрогеназной реакции эти атомы железа изменяют свою валентность [Fe(II) — Fe(III)], и это позволяет [c.489]

Молекулярная масса ферментов достаточно велика и может изменяться в пределах 10 —10 Да, что также отличает ферменты от традиционных катализаторов (табл. 2.4). Возникает вопрос почему функции ферментов могут выполнять только высокомолекулярные вещества Дело в том, что активный центр фермента должен иметь определенное, высокоупорядоченное строение. Иллюстрацией может служить рис. 2.3, на котором схематично показано строение двух нротеаз. Все аминокислотные остатки, ответственные за связывание и каталитическое превращение субстрата, в активном центре фермента располагаются так, чтобы создать оптимальные условия для катализа. Такие особенности накладывают на систему жесткие энтропийные требования, которые могут быть компенсированы за счет изменения энтропии в другой, более упорядоченной области биополимера. [c.100]

Каталаза (КФ 1.11.1.6) ускоряет процесс двухэлектронного восстановления пероксида водорода до воды, используя Н2О2 как донор электрона. Молекула каталазы состоит из четырех идентичных субъединргц и четырех групп гематина. Молекулярная масса фермента из различных источников составляет 225 — 250 кДа. Каталаза локализована преимущественно в пероксисо-мах клеток, где ее концентрация достигает 10 моль/л. Максимальное содержание фермента обнаружено в эритроцитах, печени и почках. Разложение пероксида водорода каталазой осуществляется в два этапа [c.116]

На практике механического разрушения мицелия не проводят ввиду больших энергетических затрат. Установлено, что извле-каемость ферментов значительно выше из сухих культур (10—12% влажности), что связано с лучшей проницаемостью воды в подсушенные клеточные структуры. Ввиду большой молекулярной массы ферменты медленно диффундируют в экстрагирующую жидкость, а из-за их лабильности процесс надо проводить при температурах не выше 30°С. Выход из этого положения — только в увеличении времени контакта культуры с водой. [c.126]

В случае ферментативных реакций, если известна молекулярная масса фермента, в размерность константы скорости входит концентрация фермента. Если молекулярная масса фермента не известна или препарат фермента не является чистым, скорость реакции часто относят к концентрации белка (миллиграмм белка на миллилитр или миллиграмм белкового азота на миллилитр). Согласно международному соглашению, одна единица любого фермента есть такое количество фермента, которое в определенных условиях катализирует превращение субстрата со скоростью 1 моль/с. Одна единица соответствует очень большому количеству фермента для характеристики активности обычно используют нано- и пикоединицы. [c.248]

Значения молекулярных масс ферментов колеблются в широких пределах от нескольких тысяч до нескольких миллионов. В природе насчитывается несколько десятков ферментов, обладающих сравнительно небольшими молекулами (до 50 тыс.). Строение некоторых из них показано на рис. 34. Однако большинство ферментов представлено белками более высокой молекулярной массы, построенными из субъединиц (рис. 46). Так, каталаза (М=252 ООО) содержит в молекуле шесть протомеров с М=42000 каждый. Молекула фермента, ускоряющего реакцию синтеза рибонуклеиновых кислот (РНК-по-лимераза, М=475 ООО), состоит из 5 неравных субъединиц. Полная молекула глутаматдегидрогеназы, ускоряющей процесс окисления глутаминовой кислоты (М=336 ООО), построена из 6 субъединиц с М = 56000. [c.100]

Обмен глюкозо-6-фосфата. Епокозо-6-фосфат образуется в организме разными путями. Во-первых, он может синтезироваться путем фосфорилирования глюкозы за счет ее взаимодействия с АТФ. Во-вторых, он образуется в результате реакции изомеризации фосфорных эфиров других изомерных ему гексозофосфорных эфиров. В-третьих, он получается из глюкозо-1-фосфата, который представляет собой продукт фосфоролиза олиго-и полисахаридов. Две первые реакции рассмотрены в предьщущем разделе. Что касается преобразования глюкозо-1-фосфата в глюкозо-6-фосфат, то эта реакция протекает в два этапа при участии фермента фосфоглюкомутазы. Молекулярная масса фермента из мышц кролика равна 62000 молекула фосфоглюкомутазы состоит из двух субъединиц с М = 31 ООО каждая. Активный центр ее включает в свой состав остаток фосфосерина, с которого [c.339]

Дальнейший путь синтеза углеводов из 3-фосфоглицеринового альдегида, так же как и только что рассмотренная реакция восстановления 3-фосфоглицериновой кислоты, представляет обращение дихотомического пути распада углеводов фосфоглицериновый альдегид переходит в фосфодиоксиацетон при каталитическом воздействии альдолазы из упомянутых фосфотриоз синтезируется фруктозо-1,6-дифосфат, переходящий далее в глюкозо-6-фосфат. На этом этапе биосинтеза углеводов действует особый фермент—фруктозо-1,6-дифосфатаза (молекулярная масса фермента из растений и фото- и хемосинтезирующих организмов—130000—190000 две субъединицы отличается абсолютной специфичностью), обеспечивающая переход от фруктозо-1,6-дифосфата к фруктозо-6-фосфату, так как реакция [c.362]

Пример 11-3. Измерение изменений величины мутантного фермента. Многие методы, применяемые для определения молекулярных масс ферментов, требуют образцов с высокой степенью очистки (например, метод седиментационного равновесия, который будет описан позже) или при использовании не очень чистых образцов дают массы субъединиц (например, ДСН-гель-электрофорез, гл. 9). Использование зональной седиментации позволяет определить молекулярную массу активного фермента непосредственно в неочищенном лизате при применении в качестве метода контроля анализа ферментативной активности. Например, ДНК-полимераза I Е. oli седиментирует при 5 = 5,4. Зоны полимери-зующей и 5 —З -экзонуклеазной активности, связанные с этим белком, седиментируют вместе, поэтому для локализации фермента в градиенте сахарозы можно использовать любую из них. Мутантная форма фермента не обладает полимеразной активностью, однако сохраняет 5 —З -экзонуклеазную. Как следует из рис. 11-26, мутантный фермент обладает значением s = 2,8. Поскольку данная мутация является терминирующей цепь белка, пониженное значение 5 указывает на то, что данный фермент является лишь небольшим фрагментом белка дикого типа и имеет только 0,4% активности. [c.314]