Очистка и фракционирование

В результате дальнейшей очистки и фракционирования можно получить микрокристаллические церезины и петролатум, но [c.525]

ОЧИСТКА И ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ МАКРОМОЛЕКУЛ [c.137]

В этом разделе были высказаны общие соображения и приведены примеры, относящиеся к очистке и фракционированию нативных белков. Полная денатурация белков производится при оценке их молекулярной массы методом гель-фильтрации. Особенности хроматографии денатурированных белков рассмотрены ниже, в соответствующем разделе. [c.141]

ОЧИСТКА И ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ БЕЛКОВ [c.301]

Белки, регулирующие матричную активность, осуществляющие репликацию, транскрипцию и трансляцию НК, а также их репарацию и процессинг, являются сейчас объектом столь многочисленных исследований, что это оправдывает выделение методов их очистки и фракционирования методом аффинной хроматографии в отдельный раздел. [c.420]

Получение Н.к. В клетках Н.к. связаны с белками, образуя нуклеопротеиды. Выделение Н.к. сводится преим. к очистке их от белков. Для этого препараты, содержащие Н.к., обрабатывают ПАВ и экстрагируют белки фенолом. Послед, очистка и фракционирование Н.к. проводятся с помощью ультрацентрифугирования, разл. видов жидкостной хроматографии и гель-электрофореза. Для получения индивидуальных Н.к. обычно используют разл. варианты последнего метода. [c.299]

Число концевых групп обычно определяют исходя из предполагаемого механизма реакции и из допущения, что они не претерпевают изменения в ходе реакции образования, выделения, очистки и фракционирования полимера. [c.110]

Применяют для хроматографического выделения, очистки и фракционирования порфириновых пигментов, например хлорофиллов, каротиноидов, и других веществ — как неполярный сорбент или носитель гидрофобных неподвижных жидкостей в распределительной хроматографии с обращенными фазами. [c.49]

Очистка и фракционирование олиго- и полинуклеотидов. [c.16]

Огромное количество работ по очистке и фракционированию ферментов выполнено с применением сульфата аммония, который чрезвычайно эффективен в качестве осаждающего агента и в первую очередь вследствие своей хорошей растворимости, которая к тому же мало изменяется нри снижении температуры. Соль не только не оказывает денатурирующего действия на ферментные белки, но, наоборот, стабилизирует большинство из них. Поэтому при ее использовании нет надобности вести фракционирование системы при низкой температуре. Даже самые чистые препараты сульфата аммония имеют слабокислую реакцию и во всех случаях при использовании его необходим тщательный контроль pH в растворах. Обычно для того чтобы не увеличивать объемов при высаливаниях, вводят сухую соль или пользуются наиболее концентрированными, насыщенными растворами ее. Характеризуя концентрацию сульфата аммония при осаждении ферментных белков, ее часто выражают десятичной дробью, считая полное насыщение за 1,00. Иногда ту же величину показывают [c.147]

Процессы очистки и фракционирования вещества через полупроницаемые перегородки могут быть значительно ускорены применением электродиализа. Здесь, однако, надо всегда иметь в виду лабильность ферментов, возможность их больших потерь вследствие инактивации. В любом случае процесс должен протекать при точно заданных оптимальных для данного конкретного фермента или ферментного комплекса условиях — температуры, pH среды, плотности тока, материала мембраны. Условия для каждого случая применения электродиализа должны быть особо тщательно проверены с обязательным выявлением денатурационных потерь после проведения процесса. Особенно важно предотвращать имеющее место при электродиализе подкисление растворов, в том числе местное. В частности, амилазы грибов чрезвычайно чувствительны к подкислению, например до pH 2,5—3,0. [c.188]

У авторов была счастливая возможность одновременно решать фундаментальные и прикладные проблемы при изучении систем, включающих синтетические полимеры (особенно полиэлектролиты) и органические физиологически активные вещества (особенно ионы), а также принимать участие в выполнении научных и прикладных исследований по выделению, очистке и фракционированию антибиотиков, ферментов, гормонов, аминокислот, нуклеотидов и многих других групп органических веществ. [c.3]

При решении задач выделения веществ, их очистки и фракционирования смесей на компоненты концентрационные соотношения являются мерой эффективности процессов. Концентрирование на стадиях сорбции и десорбции для препаративных и производственных процессов — одно из важнейших требований. Б связи с этим возникает необходимость использовать уравнения, связывающие концентрации компонентов в растворе и в ионите при постоянной температуре (и постоянном давлении), — уравнения изотермы ионного обмена [167, 168]. [c.78]

Третья глава посвящена физико-химии очистки и фракционирования ферментов. Вначале даются общие приемы фракционирования белков и излагается теория процесса диализа белковых растворов. Обращается внимание на влияние распределения электролитов при диализе, а также на освобождение от балластных веществ путем изменения pH вытяжек (экстракт культур плесневых грибов), и обесцвечивание ферментных растворов некоторыми ионитами. Здесь же приведены принципиальные схемы получения высокоочищенных ферментных препаратов. [c.3]

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ОЧИСТКИ И ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ ФЕРМЕНТОВ [c.59]

Очистка и фракционирование биологически активных веществ основаны на методах, широко применяемых в физико-химии полимеров и химии белковых веществ. [c.59]

Кратко рассмотрим современные методы очистки и фракционирования белков. [c.59]

Некоторый интерес представляет применение ионообменных смол при извлечении сахара из сульфитного щелока [64]. Сульфитный щелок является важным потенциальным источником сахара, однако требуется тщательная очистка и фракционирование для того, чтобы продукт был хорошего качества. [c.554]

Жидкие продукты выделяются при очистке и фракционировании газов пиролиза в нескольких узлах технологической схемы. Вначале при охлаждении газа водой или тяжелой смолой выделяется пиролизная смола. При сжатии газа в компрессорах с последующим охлаждением выделяется так называемый межступенча-тый конденсат — легкая смола пиролиза (или пиролизный бензин, П фоконденсат), который включает жидкие компоненты, выкипающие до 180—200°С. Из ароматических углеводородов здесь сосредоточиваются в основном углеводороды бензольного ряда в первую очередь бензол. В зависимости от состава сырья и условий процесса количество бензольных углеводородов при пиролизе может составлять от 1,5 до 45% по отношению к получаемому этилену, в том числе бензола от 20 до 25%. [c.183]

Всякому структурному исследованию ДНК или РНК предшествуют выделение их из клеток, очистка и фракционирование. Поскольку в клетке нуклеиновые кислоты практически всегда находятся в комплексес белками (т. е. в вил, нуклеопротеидов), их выделение сводится в основном к очистке от белков (депротеинизации). Чаще всего нуклеиновые кислоты экстрагируют из гомогенатов клеток или очищенных клеточных органелл смесью фенол — вода В присутствии ионных детергентов (например, додецилсульфата натрия). При этом белки (и ряд других клеточных компонентов) переходят в органическую фазу, а нуклеиновая кислота остается в водной фазе. Из водного раствора ДНК или РНК осаждают спиртом. [c.10]

Неподвижная фаза может быть твердой или жидкой, подвижная — жидкой или газообразной. В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают <<жидкостную и газовую хроматографию. Для очистки и фракционирования белков, нулеиновых кислот и их компонентов используется почти исключительно жидкостная хроматография, поэтому (в соответствии с названием книги) мы ограничились рассАЮтрением только этого вида хроматографии во всех его вариантах, каждому из которых посвящена отдельная глава. Варианты жидкостной хроматографии различаются по природе сродства фракционируемых молекул к хроматографическим фазам в соответствии с этим при изложении мы опираемся на классификацию по принципу фракционирования. Бурно развивающиеся в последние годы методы хроматографии при высоком давлении включены в состав каждой главы в виде особых разделов. Тонкослойную хроматографию, ввиду ее технического своеобразия, имеет смысл выделить в отдельную главу, хотя в рамках этой главы и приходится рассматривать различные варианты взаимодействия веществ с хроматографическими фазами. [c.4]

Окись магния, силикаты магния (например, Florisil ), карбонат кальция, а также полистирол и полиамиды имеют свои области применения в адсорбционной хроматографии, главным образом в неполярных растворителях, но в процессах очистки и фракционирования белков и НК они практически не используются. [c.224]

Очистка и фракционирование длинных олигонуклеотидов (до 17 остатков) методом ионообменной ЖХВД требует принятия мер, предотвращающих образование локальных вторичных структур за счет комплементарных участков. Для этой цели было предложено вести элюцию с колонки Partisil 10-SAX линейным градиентом концентрации фосфатного буфера (О—0,3 М), pH 6, в 30%-ном (а в некоторых случаях 60%-ном) растворе формамида при комнатной температуре [Newton et al., 1983]. [c.322]

Перед использованием колонки с аффинным сорбентом ее имеет смысл промыть раствором бычьего сывороточного альбумина (2 мг/мл). Было замечено, что в результате этого улучшается качество очистки и фракционирования методом конкурентной элюции целого ряда ферментов. По-видимому, БСА блокирует на сорбенте места неспецифической сорбции ферментов [Ramadoss et al., 19831. [c.368]

Число концевых группировок обычно определяют, исходя из предполагаемого механизма реакции и из допущения, что они не претерпевают изменения в ходе реакции образования полимера, а также при выделении, очистке и фракционировании его. Так, например, принято считать, что при поликонденсации оксикислот или аминокислот (или при полимеризации лактонов и лактамов) полученные полиэфиры и полиамиды обязательно должны содержать на одном конце макромолекулы карбоксильную группу, а на другом — гидроксильную или аминную. Или, например, предполагается, что при полимеризации, инициированной перекисями, каждая молекула содержит два (при рекомбинационном механизме обрыва цепи) или один (при обрыве путем диспропорционирования) остаток молекулы перекиси. Однако такое допущение является весьма грубым, ибо в процессе реакции может происходить потеря или изменение природы концевых групп вследствие их неустойчивости при высокой температуре. Может иметь место также более сложный механизм образования полимера (попутное образование циклических и разветвленных полимеров, передача цепи, наложение различных механизмов обрыва и т. д.). В случае поликонденсации двух бифункциональных соединений (например, ди-карбоновой кислоты и гликоля) может иметь место нарушение эквивалентного соотношения компонентов в результате улетучивания одного из реагентов, и, таким образом, в образце полимера каких-то групп может оказаться больше, чем предполагается, исходя из экви-молекулярности соотношения компонентов реакции. [c.256]

В нашей работе было также обнаружено уменьшение плотности упаковки элементов структуры полипропилена в пристенном слое по сравнению с плотностью упаковки в объеме. Очевидно, структурообразование в пристенном слое затруднено не только вследствие уменьшения подвижности элементов структуры, но и из-за более рыхлой их упаковки. Нами показано, что характер зависимости структурообразования от толш,ины пленки для всех исследованных полимеров один и тот же однако критическое значение толщины прослойки А) различно для различных полимеров. Эти значения А трудно сравнивать между собой, так как молекулярные веса исследованных нами полимеров различны. Между тем известно [19, 25, 32], что с повышением молекулярного веса увеличивается адсорбция молекул полимера па поверхности раздела полимер—твердое тело. В табл. 3 приведены значения А ж с для трех фракций изотактического полипропилена разного молекулярного веса образец 2 — это нефракционированный изотактический полипропилен фирмы I I, образцы 1 и 3 — фракции, полученные очисткой и фракционированием этого полимера по методике, описанной в [33]. [c.205]

Установка пиролиза этана состоит из печи с конвекционно-ради-антным нагревом, служащей одновременно реактором, и из системы скоростного оросительного охлаждения после пиролиза производят очистку и фракционированное разделение газов на установке, работа которой основана на том же принципе, что и установка аутотермического пиролиза (см. рис. 9). [c.28]

Слабосшитые и МП карбоксильные катиониты применяют для очистки и фракционирования пептидов, белков, ферментов, антибиотиков и других высокомолекулярных оснований. Смолу Bio-Rex 70 в u-, Ni- или d-форме применяли для разделения амфетаминов методом лигандной хроматографии (de Hernandez С. М., W а 1 t о п Н. F., Anal. hem., 1972, v. 44, No. 6, p. 890—894). [c.106]

П о б у л ь Л., Ф о м и н а А. Очистка и фракционирование смесей насыщенных дикарбоновых кислот, полученных окислением керогена сланца-кукерсита. Изв. АН Эст. ССР, серия физ.-матем. и техн. наук, 1962, № 3, стр. 203—211. [c.244]

Поскольку прочность связывания с адсорбентом определяется многими физико-химическими особенностями фермента, характером и расположением заряженных групп, степенью их диссоциации при данных условиях, размерами молекул, нельзя заранее выбрать условия очистки и фракционирования фермента и сопут- [c.151]

Хроматографический метод очистки и фракционирования белков на карбоксильной смоле Амберлит ШС-50 успешно применен к следующим белкам цитохрому С, рибонуклеазе, лизоциму, химотрипсиногену, химотрипсипу, гиалуронидазе, гемоглобинам, адренокортикотропному гормону, инсулину и др. Среди этих работ следует отметить обнаружение двух хроматографически активных белков, обладающих активностью рибонуклеазы, доказательство распада индивидуального лиофилизованного лизоцима при комнатной температуре и лиофилизованной рибонуклеазы при 0° С. Наибольшее значение тонкая хроматографическая очистка белка имеет при изучении первичной его структуры и физикохимических констант, характеризующих вторичную и третичную структуры. [c.200]

Для оценки возможности применения электродиализа в процессах очистки и фракционирования растворов аминокислот практический интерес представляют исследования диффузионного переноса аминокислот через ионообменные мембраны. Известно, что диффузия из электродиализуемой камеры в рассольную приводит к увеличению, а обратная диффузия— к снижению эффективности процесса электродиализа [1, 2]. [c.309]

Ультрафильтрация обычно используется для очистки и фракционирования растворов веществ, как синтетических, так и биологического происхождения. При ультрафильтрации примеси с низкой молекулярной массой (микрорастворенные вещества) проникают через мембрану, в то время как макромолекулы задерживаются. В этом случае ультрафильтрация по существу является диализом, движущей силой в котором является разность концентраций. Фракционирование заключается в разделении макромолекул различных размеров. [c.65]