Величина пробы и способ ввода ее в колонку

Влияние других факторов. Величина пробы (количество исследуемого газа) и способ ввода ее в хроматографическую колонку влияют на качество разделения компонентов и на чувствительность прибора. Последняя пропорциональна величине пробы при одинаковых условиях анализа. Объем пробы газа ограничивается обычно величиной примерно 10 мл, поскольку дальнейшее ее увеличение приводит к перегрузке колонки и значительно ухудшает разделение. Конечно, максимально допустимая проба зависит от диаметра и длины колонки. Чем меньше колонка, тем при меньшем объеме пробы наступает заметное ухудшение разделения. Без ущерба для разделения пробу можно, увеличивать пропорционально корню квадратному из длины колонки. Так, увеличив пробу в два раза, колонку надо удлинить в четыре раза. [c.70]

Ввод пробы. Для получения идеальной хроматограммы необходимо, чтобы перед началом элюирования проба находилась в колонке в виде весьма узкой полосы. Эти условия накладывают ограничения как на допустимую величину пробы, так и на способ ее ввода. Значительный объем пробы вызывает перегрузку колонки, а малое количество введенной пробы требует повышения чувствительности детектирующего устройства. [c.237]

Концентрации определяемых примесей часто так малы, что их невозможно измерить даже при перегрузке колонки, когда величина смакс незначительно уменьшается с изменением Z,. Поэтому применяют различные способы концентрирования примесей. Для этого в качестве насадки колонки целесообразно использовать вещество, сорбирующее основной компонент гораздо сильнее, чем примесь (Г01 > Га). В этом случае проба при вводе в колонку сжимается в Г01 раз и соответственно повышается концентрация как основного компонента, так и примеси. Тогда для примеси после элюирования [c.285]

Ввод пробы. Величина пробы влияет па разделение компопентов. Существует определенный максимум объема пробы, для которого эффективность колонки близка к оптимальной. Увеличение объема приводит к возрастанию не только высоты Г по и ширины пиков, что вызывает их взаимное перекрывание. Чем труднее разделяются компоненты, тем меньше должна быть проба, так как небольшая проба дает более симметричные пики и лучшее разделение. Минимальная величина пробы определяется способом ее ввода в прибор, ограничениями, которые накладываются чувствительностью детектора, количественными соотношениями компонентов в анализируемой газовой смеси. Практически объем пробы, разделяемой методом газовой хроматографии (насадочные колонки), для газа 0,2—20 Особое внимание следует уделить воспроизводимости условий ввода проб, так как это может существенно повлиять на точность хроматографического анализа. [c.136]

В дальнейшем будет рассмотрен ряд факторов, влияющих на разделительную способность колонки к которым относятся температура, природа, скорость и давление газа-носителя, величина исследуемой пробы и способ ее ввода в колонку, а также тип и конструкция детектора. При хроматографическом анализе имеется возможность изменять в определенных пределах большинство указанных факторов, добиваясь необходимых или по крайней мере лучигих результатов разделения компонентов пробы. При изменении их почти всегда будут меняться и другие параметры хроматографа его чувствительность, точность, время анализа и др. [c.49]

III. ВЕЛИЧИНА ПРОБЫ И СПОСОБ ВВОДА ЕЕ В КОЛОНКУ [c.85]

Радиальные и продольные градиенты температуры в колонках диаметром около 2,5 см изучали Розе с сотр. [76]. Эти градиенты сильно зависели от способа нагревания колонки. Наибольшие продольные градиенты в колонке диаметром около 1 м составляли 4—6°С. Радиальные градиенты уменьшались по мере удаления введенной пробы от входа в колонку. При использовании проб больших величин изменения температуры в начальной части колонки у ее оси составляли около 35 °С, а у стенок — около 10 °С, причем эти изменения сильно зависели от способа ввода пробы. [c.146]

Поведение исследуемого вещества в колонке можно охарактеризовать различными способами. Простейший заключается в определении так называемого времени удерживания ц данного компонента. Эта величина представляет собой время, прошедшее от момента ввода пробы в колонку до момента появления на хроматограмме максимума пика компонента. Величина п зависит от объемной скорости потока газа-носителя а>. Поэтому принято ха- [c.289]

Поведение исследуемого вещества в колонке можно охарактеризовать различными способами. Простейший заключается в нахождении так называемого времени удерживания данного компонента. Эта величина представляет собой время, прошедшее от момента ввода пробы в колонку до момента появления максимума хроматографического пика компонента. Очевидно, что величина будет зависеть от объемной скорости потока газа-носителя. Поэтому принято характеризовать хроматографические пики величиной удерживаемого объема V [c.140]

Таким образом, при вводе пробы без деления потока происходит огромное (но временное) уменьшение величины р, характеризующей колонку, если считать сконденсировавшийся растворитель неподвижной жидкой фазой. Если сродство разделяемых веществ к выбранному растворителю не слишком сильно отличается от их сродства к неподвижной жидкой фазе, то соответствующие им величины Ко остаются примерно постоянными. Поскольку величина Ко для каждого из компонентов разделяемой пробы примерно одна и та же для выбранного растворителя и для неподвижной жидкой фазы, а величина р очень мала, то значения к очень велики. Следовательно, каждый компонент пробы сильно связан с жидкой фазой, а число молекул в потоке газа-носителя относительно невелико [выражения (1.1), (1.7), (1.9) и (1.10)]. Перемещающийся в колонке передний фронт хроматографической зоны разделяемой пробы встречает на своем пути жидкую фазу все увеличивающейся концентрации и поэтому удерживается сильнее, чем задний фронт этой зоны в результате при правильной реализации этого способа происходит сужение зоны разделяемой пробы. После удаления из колонки растворителя, чего обычно можно добиться повышением температуры колонки, восстанавливается обычное для данной колонки значение р, обычные значения к для компонентов разделяемой пробы и начинается процесс хроматографического разделения. [c.62]

Малая сорбционная емкость капиллярных колонок определяе предельно допустимую величину вводимых проб, равную 0,001 — 0,005 мг, что соответствует объему примерно 0,001—0,005 мм жидкостей или менее 0,1 мм газов или паров. Надежных, хорошо апробированных и воспроизводимых способов измерения и ввода в колонку хроматографа столь малых количеств веществ пока не существует. Поэтому в практике капиллярной хроматографии применяются методы дозирования, при которых дозирующие устройства отмеряют в 100—1000 раз большие количества веществ, а затем уже введенная в хроматограф проба разделяется тем или иным способом в отношении 1/100—1/1000, и лишь меньшая часть направляется в капиллярную колонку. [c.129]

Предположим, что в колонку дозируется п молей вещества, которое после испарения занимает объем В системе ввода пары разбавляются газом-носителем до некоторой начальной концентрации Со, так что объем парогазовой смеси, поступающей в колонку, будет равен произведению КтУ , где Kvl — степень разбавления пробы газом-носителем. В зависимости от способа ввода можно представить себе две крайние ситуации. При первой концентрация Со не превышает область линейной изотермы сорбции, а объем КтУв соответственно велик. Предположим, что этот объем не перемешивается дополнительно с газом-носителем, который как паровую пробку или поршень проталкивает его в колонку. Если расход газа-иосителя равен W, то время ввода Тв составит величину В течение этого времени [c.259]

Величина пробы (количество исследуемого газа) и способ ввода ее в хроматографическую колонку влияют на качество разделения компонентов и на чувствительность прибора. Иослед-яяя пропорциональна величине пробы нри одинаковых условиях 1нализа. Объем пробы газа при анализе ограничивается обычно велн-1ИН0Й примерно 10 мл, поскольку дальнейшее ее увеличение приводит к перегрузке колонки и значительно ухудшает разделение. Конечно, величина допустимой максимальной пробы зависит от размера (диаметра и длины) колонки. Чем меньше колонка, тем при леньшем объеме пробы наступает заметное ухудшение разделения. [c.79]

Хроматограмма, приведенная на рис. 9.1, не только иллюстрирует препаративное разделение и связь между молекулярным весом вещества и характеристиками его удерживания на неселективной неподвижной фазе, но и показывает значение программирования температуры колонки при таком разделении. Как в аналитической, так и в препаративной ГЖХ очень важен способ ввода пробы в колонку. Очень желательно получить поршень пробы в потоке газа в колонке, но для этого требуется быстрое введение пробы и быстрое испарение компонентов разделяемой смеси. Этого нетрудно добиться в аналитической ГЖХ. В препаративной ГЖХ величина пробы больше и обеспечить ее быстрое введение в колонку и быстрое испарение труднее, особенно при разделении относительно малолетучих веществ. Однако с помощью программирования температуры колонки эту трудность можно преодолеть. Программирование температуры позволяет относительно медленно вводить в колонку раствор пробы в подходящем растворителе с помощью непрерывного или повторного введения. Дело в том, что начальная температура колонки при программировании температуры относительно низка, вследствие чего низкокинящий растворитель быстро испаряется, а менее летучие анализируемые вещества удерживаются в начале колонки в виде концентрированной зоны или поршня . Этот поршень задерживается в начале колонки и разделение не начинается до тех пор, пока не начнется программирование температуры. [c.303]

Газовую хроматографию (ГХ) можно использовать для количественного определения липидов, разделенных методов ТСХ. Виоке и Холман [138] анализировали методом ГХ эфиры жирных кислот после хроматографирования их на силикагеле G с различными смесями диэтилового эфира и гексана. Зоны затем элюировали диэтиловым эфиром, объем полученного раствора доводили до определенной величины, отбирали аликвотную часть его и вводили в газовый хроматограф. Бойер и др. [182, 183] таким же методом определяли липиды крови, но сначала эти авторы экстрагировали примерно 5 мг липидов из крови и наносили пробу на слой кремневой кислоты. После разделения пятна обрабатывали 10 %-ной серной кислотой (масса/ /объем) и этерифицировали, добавляя безводный метанол и нагревая 1 ч при 80 °С (сфингомиэлин нагревали 16 ч). К смеси на этой стадии добавляли кристалл гидрохинона, выполняющий роль антиксиданта. После метилирования к пробе добавляли воду и экстрагировали сложные эфиры петролейным эфиром (40—60°С). Экстракт петролейного эфира сушили над смесью безводного сульфата и бикарбоната натрия (4 1), концентрировали и вводили в колонку газового хроматографа. Неподвижной фазой служил полиэфир янтарной кислоты и этиленгли-коля. При разделении указанным способом не следует применять для обнаружения иод, поскольку это приводит к частичной потере ненасыщенных кислот [184]. Аналогичным методом анализируют и стероиды [185, 186]. В этом случае трнметилсили-ловые эфиры можно получить при взаимодействии с гексаме-тилдисилазаном. Описанным способом в суточной пробе мочи определили 15 мкг тестостерона с точностью 7% [185]. [c.338]

Способ 2. Использование относительных значений вре-ме.чи удерживания для выражения результатов эксперимента наиболее популярно, так как можно быстро и надежно оценить относительную разделяющую способность растворителей для данной смеси. На эту величину не влияет или /. Для точности измерения вводят поправки лишь на мертвый объем и возможное колебание температуры при подаче пробы, а также производят экстраполяцию данных на работу незагруженной колонки. Следует отметить, что получаемые значения относительной разделяю-тмеи та особности растворителей пе всегда свответетвуют действи— тельным. Это объясняется тем, что два различных растворителя могут дать для компонентов данной смеси близкие значения отношений времени удерживания, тогда как его действительные значения могут сильно отличаться. В табл. 1 приведены данные по элюированию при ЮО " спиртов из колонок, заполненных силиконом-702 и тритолилфосфатом. [c.27]

Как уже упоминалось при обсуждении уравнения Ван Деемтера, на эффективность колонки может влиять большое число параметров. Вполне очевидным было влияние размера частиц насадки, эффективной толщины слоя неподвижной фазы и скорости потока газа-носителя. Также ясной была и роль диаметра препаративной колонки. Менее очевидным, но тем не менее важным является значение длины колонки, объема пробы и способа ее ввода в колонку, природы твердого носителя и газа-носителя, а также температурного режима колонки. В аналитической ГХ эти факторы выбирают так, чтобы получить минимальное значение величины ВЭТТ. Часто подобную минимизацию можно осуществлять и в препаративной хроматографии, однако существует и другой подход, связанный с максимизацией полного количества вещества, проходящего через колонку в единицу времени. Ниже обсуждается выбор параметров в этих двух случаях оптимизации. [c.81]

Эксперименты Халаша и Хорвата [51] были более успешными (рис. 31). Эти авторы наносили статическим способом на стенки капилляра слои графитированной сажи. Вначале 15 г графитированной сажи суспендировали при очень энергичном перемешивании в смеси 220 мл трифтортрихлорэтанола и 30 мл четыреххлористого углерода. Полученной суспензией заполняли капиллярную трубку и далее закрывали один ее конец и удаляли растворитель, медленно вводя капилляр открытым концом в термостат, нагретый выше температуры кипения растворителя. Благодаря высокой адсорбционной способности и очень однородной поверхности графитированной сажи удалось получить отличное разделение ряда углеводородов и других соединений при значительно большей величине вводимых проб, чем допускают обычные капиллярные колонки. [c.91]

Перевод фракции на вторую колонку. Фракция сложной смеси, выделенная в результате разделения на первой колонке, может быть либо непосредственно переведена на вторую колонку, либо собрана в ловушке с последующим вводом во вторую колонку. Первый способ [1, 20, 24—28, 31] более прост и требует меньше времени для проведения апализа. К его недостаткам следует отнести возможное ухудшение эффективности второй колонки и трудности определения величин удерживания на ней из-за конечного врелгеии ввода пробы. Однако первый недостаток в значительной лтере может быть устранен тщательным выполнением ком- [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология