Красители для срезов

Для заполнения ячейки разъединяют пластины А и Б, сдвигая одну относительно другой. Заполняют и-образную трубку окрашенным раствором ПАВ так, чтобы жидкость чуть выступала над поверхностью пластины. Затем запирают раствор в и-образной трубке, приводя пластину А скользящим движением в контакт с пластиной Б и срезая при этом избыток жидкости. Отверстия пластин не совмещают. В трубки 2 (при закрытом кране 3) наливают исходный раствор ПАВ (без красителя), который служит в качестве боковой жидкости. Уровень должен быть чуть ниже боковых отверстий. Далее, открыв кран 3 и чуть наклонив прибор (в плоскости рисунка), в одно из расширений 4 доливают боковую жидкость в таком количестве, чтобы она, вытеснив воздух из резиновой трубки, начала перетекать в другое расширение. Доводят раствор в расширениях выше уровня соединительной трубки, после чего закрывают кран 3. Эта операция позволяет выровнять уровни боковой жидкости, без чего граница между меченым раствором и боковой жидкостью может быть в последующем размыта. [c.176]

Кратко опишем машинную выработку туалетного мыла среднего качества на парфюмерной фабрике Карабанова в Петербурге. Для основы брали сало с добавками (по 4%) кокосового масла ( для мылкости ), касторового масла ( для мягкости и сальности ) и талька омыляли едким натром в 36° Бе. Охлаждали мыло в небольших железных формах (за 2 суток), а частью в дубовых бочках за 3—4 суток. Вручную (рамкой с проволокой) резали глыбы на бруски и одни сутки подсушивали на этажерках при комнатной температуре. Затем на строгальной машине (диск с ножами) получали стружку и многократно пропускали ее через малую и большую (с тремя гранитными валами) вальцовки, добавляя один раз краситель, другой раз парфюмирующие вещества. Эти машины не только плющили мыло в ленту, но и несколько перетирали его. Следующая машина — пелотеза — формует из мыла плотные колбаски . Их вручную режут на куски, подсушивают 24—36 часов и штампуют на ножном прессе. Срезают кромки, полируют печатки фланелью и завертывают в полоску картона и в этикетки. Выход мыла — 142—143% [c.386]

Наши наблюдения, сообщенные выше, должны привести к выводу, что, в результате обработки формалином, казеин должен потерять свой заряд и перейти в изоэлектрическое состояние. Некоторые последующие наши наблюдения подтверждают этот вывод. Мы производили окрашивание пластин сырого галалита, приготовленного из технического казеина и воды, разными красителями. Наиболее под-. ходящим для этих окрашиваний оказался антрахиноновый зеленый. Пластина из казеина подвергалась окрашиваниям после различных сроков пребывания в формалине. Получалась такая картина не дубленая казеиновая пластина легко адсорбирует краситель и темно окрашивается с поверхности пластина, пробывшая в формалине сравнительно короткое время, несколько часов, с поверхности не окрашивается красителем если же в такой пластине сделать поперечный срез, то можно убедиться, что формалин не проник еще внутрь пластины. Такой срез, будучи выкрашен, имел Широкую окрашенную полосу в середине и еле окрашенные края. По мере проникновения формалина внутрь казеиновой пластины, что зависело от времени пребывания ее в дубильной ванне, окрашиваемая полоса делалась более и более узкой и наконец совсем исчезла. Это указывало на то, что процесс дубления был закончен, казеин денатурировался формалином во всей толще пластины и во всей толще стал изоэлектрическим. [c.175]

В современной гистохимии для обнаружения полисахаридов на срезах тканей наиболее широко применяются два метода 1) обработка среза раствором перйодата и окрашивание образующихся альдегидов фуксинсернистой кислотой [так называемая ШИК (шифф—йодная кислота)-реакция 2) обработка среза основными красителями. Кислые полисахариды адсорбируют молекулы красителя, при этом происходит изменение его окраски — так называемая метахроматическая реакция . [c.598]

При формовании вискозных волокон в наиболее часто применяемой кислотно-солевой ванне, содержащей ионы 2п или некоторых других поливалентных металлов, образуется структурно-не-однородное волокно, поперечный срез которого показан на рис. 7.41. Внешняя часть поперечного среза окаймлена мембраной, толщина которой не превышает 1—2 мкм. Под мембраной лежит оболочка, площадь которой составляет 20—60% от площади поперечного среза. Внутренняя часть — ядро. По оценке Михайлова [115], прочность оболочки в 3,5 раза выше, чем прочность ядра. Высокие физико-механические характеристики оболочки обусловлены рядом особенностей ее надмолекулярной структуры, которая характеризуется как мелкокристаллическая. Оболочка набухает в воде на 40% меньше, чем ядро. При добавлении красителей в первую очередь накрашивается ядро [116]. Некоторые красители только избирательно окрашивают ядро ряд красителей удерживается оболочкой значительно сильнее, чем ядром [117, 118]. На этой способности основано большинство методов идентификации ядра и оболочки [119]. [c.215]

На рис. V. 31 приведена заимствованная из работы Мора фотография среза экструдированного полиэтиленового стержня с включениями красителя (небольшое количество гранул черного полиэтилена). Поскольку исследования проводились на экструдере, червяк которого имел постоянную глубину канала, на фотографии отчетливо просматривается центральная область неэффективного смешения (рис. V. 31, а). Увеличение противодавления до В =0,1 приводит, как это следует из сказанного выше, к активизации продольного течения. В этом случае перемешиванию подвергается и центральная область потока (рис. V. 31, б). [c.283]

На микрорельеф поверхности целлофановой пленки также оказывает влияние поверхностное натяжение. При попадании жидкой пленки в осадительную ванну происходит замена поверхности вискоза — воздух на поверхность вискоза — раствор, и поверхностная энергия резко снижается. Поэтому скорость сглаживания поверхностных неровностей оказывается недостаточной, и неровности в виде продольной полосатости оказываются зафиксированными на готовом целлофане. Если слой жидкой вискозы сначала наносится на поверхность вращающегося барабана, а только потом попадает в осадительную ванну, сглаживание неровностей успевает произойти, и пленки, полученные таким способом, не имеют полосатости [14]. Микрорельеф поверхности целлофановой пленки иногда имеет следы производственных дефектов. Различные виды этих дефектов приведены на рис. III.7 (см. вклейку). Многочисленные дефекты обнаружены и на поверхности полиэтиленовой пленки (рис. III.8, см. вклейку). Методами окрашивания поперечных срезов было обнаружено, что пленка целлофана имеет очень плотный поверхностный слой — оболочку и более рыхлые срединные слои. Оболочка занимает 10—15% площади поперечного среза и обычно имеет толщину около 100 А [12, 14]. Поры в оболочке настолько мелки, что в них не могут проникнуть молекулы красителя, и оболочка остается неокрашенной [14, 15]. Сухой целлофан обладает низкой проницаемостью даже для газов и паров органических растворителей. Однако в целлофане, погруженном в воду, размеры пор достигают 50 А. [c.101]

Рассмотрим немногочисленные пока примеры приложения метода, относящиеся к области физической химии. В работе [165] описано приготовление и исследование тонких срезов лакокрасочных покрытий, позволившее определить распределение частиц красителя в лаковой пленке. Качество такого покрытия зависит от степени равномерности распределения частиц в покрытии, что можно непосредственно оценить из электронных микрофотографий. Метод срезов был с успехом применен для исследования структуры углеводородных гелей [166, 167]. Предварительно образец, например гель стеарата кальция, замораживали при помощи сухого льда и с замороженного блока получали срезы толщиной от 0,5 до 1 [х. Было показано, что гель имеет сетчатую структуру и установлено изменение этой структуры в зависимости от условий получения и обработки геля. При исследовании некоторых катализаторов были оценены размеры частиц, образующих скелет таких объектов, а также определен характер пористости катализаторов [156, 168, 169]. В последней работе было проведено сравнение эффективности методов реплик и тонких срезов и установлено, что метод срезов дает лучшие результаты при изучении сравнительно крупных пор с размерами от 0,05 до 1 Строение весьма пористых целлюлозных фильтров было изучено путем заполнения их свободного пространства осадками солей и последующего получения тонких срезов. При этом оказалось возможным зафиксировать структуру фильтров, набухших в различных жидкостях [170]. Метод тонких срезов пригоден для изучения строения синтетических волокон [171], минералов [172, 173]. Ряд работ был посвящен исследованию распределения наполнителей (прежде всего саж) в тонких срезах резин. [c.119]

Депарафинированные и промытые водой срезы помещают в раствор красителя при комнатной температуре на 48 часов. После окраски срезы споласкивают водой, обезвоживают в спир- [c.157]

Для приготовления раствора красителя 0,875 г пиронина Ж растворяют в 250 мл дистиллированной воды и к этому раствору перед употреблением добавляют равный объем 0,25 М ацетатного буфера pH 4,6—4,8. Окраска срезов длится 20 минут, затем гистологические срезы ополаскивают дистиллированной водой, высушивают, дифференцируют бутиловым спиртом (1—2 минуты), просветляют ксилолом и заключают в бальзам. [c.165]

Окрашивание срезов проводят в 0,1%-ном растворе красителя прочного зеленого, приготовленного на буфере с pH 8,5— 9,0. В качестве буферного раствора обычно берут 0,01—0,005%-ный водный раствор соды. Продолжительность окрашивания 30 минут, после чего срезы промывают буфером того же pH, дифференцируют этанолом, просветляют ксилолом и заключают в бальзам. [c.170]

Окраска липидов Суданом черным Б. Краситель применяют в виде насыщенных растворов в 70%-ном этаноле (раствор красителя необходимо готовить за 6—10 дней до употребления). Окраска длится 1—2 часа, затем срезы дифференцируют в 70%-ном этаноле, высушивают фильтровальной бумагой и заключают в глицерин-желатину. [c.173]

При окраске судаком черным Б для удаления РНК из срезов можно применять также 25%-кую уксусную кислоту или I к. НС1. Обработка срезов уксусной кислотой длится от 5 до, 30 минут, а НС1 — 2,5—3 часа в зависимости от особенностей исследуемой ткани. Из мягких, сочных и молодых тканей РНК извлекают быстрее. После удаления РНК срезы промывают в проточной, затем дистиллированной воде и помещают в раствор красителя. [c.173]

Так называется неорганический краситель, представляющий собой комплексный аммиачный хлорид рутения. Предложено несколько формул этого вещества, но ни одна из них не отражает его состава в точности. Для окраски тканей этот краситель не используют — он слишком дорог. Рутениевую красную применяют при исследованиях в анатомии и гистологии (науке о живых тканях). Раствор этого красителя нри разбавлении 1 5000 окрашивает в розовые и красные тона пектиновые вещества и некоторые ткани. Благодаря этому исследователь получает возможность отличить эти вещества от других и лучше проанализировать рассматриваемый иод микроскопом срез. [c.254]

Полученная. после высаливания основа туалетного мыла (ядровое мыло) охлаждается на холодильных вальцах или барабане, с которых срезается ножом и поступает в виде стружки на ленточную сушилку, где подсушивается до содержания 74— 75% жирных кислот. После этого мыльную стружку смешивают с щелочеустойчивыми красителями и отдушками. [c.322]

Схема двухвальцовой сушилки показана на рис. 18. Через загрузочное отверстие 1 жидкая паста поступает на валки 2. Внутрь валков подается греющий пар. Валки вращаются навстречу друг другу со скоростью 3 об/мин. При этом испаряется влага, которая отводится по трубе 3. Высушенная паста срезается ножами 4 и ссыпается в бункеры 5. Из бункеров подсушенная паста поступает в досушиватели — лотки с рубашками, обогреваемыми паром. По этим лоткам краситель медленно переме- [c.318]

Заливочные пластмассы, необходимые для электронной микроскопии, значительно тверже, чем гликол-метакрилатные пластмассы, используемые для световой микроскопии. Поэтому окрашивание эле-ктронно-микроскопических срезов толщиной 1 мкм связано с трудностями, обусловленными плохим проникновением красителя. Срезы делают на ультрамикротоме, на плаву наносят на предметные стекла, высушивают и обжигают, подогревая стекла в течение приблизительно 30 с на пламени спиртовки. Стекла погружают на 15 мин в горячий красящий раствор, промывают дистиллированной водой, а затем дополнительно окрашивают. Этот процесс иожно повторять многократно, пока не достигается удовлетворительная интенсивность окраски. Обычно для этого достаточно двух окрашиваний. В случае необходимости срезы можно обработать красителем Кернехтрота. В результате на срезе виден голубой осадок. [c.251]

При проведении биологических, микробиологических и гистохимических исследований (например, выявление активности ферментов окислительного обмена, функциональных групп белков, сульфгидрильиых групп белковой природы, их локализацию в срезах фиксированной и нефиксированной ткани и т. д.) наряду с реактивами общего лабораторного назначения применяется ряд специальных продуктов, красителей и вспомогательных веществ для субстратов. [c.2]

S. Такой же срез семядоли Lupinas albus. Белковые тельца (бт) самые крупные (от 3 до 15 мкм в диаметре). Использованный в данном случае краситель синий кумассн окрашивает периферийную часть белковы.к телец, а большая центральная часть остается бесцветной. Данное изображение представляет только один из типов белковы.х телец,. чарак-терных для этого вида (см. рис, 5.6 и 5.7) X 1600. [c.130]

Гранулы отобранной фракции методом напыления окращивали спиртовым лаком фиолетового цвета, после чего отпрессовывали таблетки при разных давлениях. Табл тки испытывали на механическую прочность одновременно готовили шлифы, с которых снимали фотографии при восьмикратном увеличении. Шлиф готовили следующим образом. Таблетку острозаточенным ножом разрезали по диаметру на две половинки. Затем с торца образовавшегося сечения таблетки лезвием бритвы срезали тонкий слой до образования гладкой поверхности, не нарушая целостности отдельных гранул и зерен. Из-за различия свойств гранул методика опыта зависела от свойств порошков. Гранулы сульфадимезина не впитывали в себя краситель и покрывались тонкой фиолетовой оболочкой. Поэтому таблетки сульфадимезина прессова ли только из окрашенных гранул. Гранулы пиперазина, уросала и фенопласта марки К-18-36 впитывали в себя краситель, и на поверхности шлифа трудно было различать четкие границы между гранулами. В связи с этим у этих порошков таблетки прессовали из смеси, состоящей из половины окрашенных и половины неокрашенных гранул и зерен. Во всех случаях диаметр таблетки был 20 мм, а высота около 9 мм. [c.151]

Добб и др. [19] прививали винилацетат, метилметакрилат и вииилпи-ридин к политетрафторэтилену. Толщину привитого слоя определяли окрашиванием его соответствующим красителем и исследованием поверхности и поперечного среза привитой пленки. Лучше всего для такого исследования пригоден привитой поливинилацетат. При степени прививки меньше 2% поверхность окрашена неполностью, но при степени прививки 6—10% получены гомогенно окрашенные поверхности. Толщина привитого (окрашенного) слоя пропорциональна степени прививки (табл. ХП-10). [c.428]

В основу методов определения состояния РНК в клетке положено представление о том, что связывание основных красителей, в частности пиронина Ж, протоплазмой обусловлено свободными фосфатными группами РНК. Блокировацные фосфатные группы РНК недоступны молекулам пиронина и могут быть обнаружены лишь после обработки гистологических срезов веществами, освобождающими эти группы от связей с другими компонентами протоплазмы [2]—[5]. [c.165]

Срезы второй партии сначала подвергают кислотному гидролизу, затем споласкивают водой и обрабатывают РНК-азой, вторично споласкивают водой и после этого окрашивают. В окрашенных срезах учитывают неспецифическое связывание красителя. Разность в интенсивности пиронинофилии между препаратами первой и второй партий соответствующих экс- [c.166]

РНК из гистологических срезов извлекают обработкой РНК-азой или 1 н. H IO4 на холоду. Затем срезы промывают дистиллированной водой 3—5 минут и помещают в раствор красителя. [c.173]

Фиксацию, заливку в парафин и последующее депарафини-рование срезов проводят согласно общепринятой гистологической технике с учетом следующего обстоятельства. Парафиновые срезы наклеивать на белок, как это принято при обычных гистохимических исследованиях, нельзя из-за сильной адсорбции красителя денатурированным белком. Поэтому готовят слабый водный раствор белка (примерно 1 капля белка на 1 мл воды), который и используется при нанесении парафиновых срезов на тщательно обезжиренное предметное стекло. Такое количество белка не вносит заметных искажений в свечение флуорохромированных препаратов. Вместе с тем его достаточно для прочного приклеивания среза к стеклу. [c.180]

Если временные препараты готовят из нефиксированных тканей, то свежие срезы сразу же флуорохромируют в растворе АО, затем отмывают от избытка красителя буферным раствором и просматривают под микроскопом. [c.181]

П ш е н и ц а и я ч м е и ь. Не у всех злаков различие люминесценции срезов семян в зависимости от их жизнеспособности выражено отчетливо. В таких случаях пользуются другим приемом люминесцентного ана лиза — окраской флуоресцентными красителями. Так, жизнеспособность семян пшеницы, р ки и ячменя определяют после предварительного окрашивания Срезов зародышей флуорохромами, увеличиваюхцимп контрастность свечения зародыша и эндосперма. Для окраски срезов зародышей пшеницы применялся водно-спиртовой раствор родамина 6 ЖДН концентрации 0,00005—0,0001 г/сл , а для окраски срезов ячменя — содовый раствор (1% N33003) акридинового оранжевого концентрации 0,0003- - [c.233]

Для люминесцентной метки белков применяют флуорохромы изоцианат и изотиоцианат флуоресцеина, некоторые производные родамина, в том числе изоцианат тетраметилродамина, хлорид диметил-нафтил-ами-но-сульфокислоты и ядерный красный прочный. Наиболее широко используется изоцианат флуоресцеина. Его растворяют в смеси диоксана с ацетоном и в таком виде соединяют с белком (обычно глобулиновой фракцией в количестве 5 мг флуорохрома на 100 мг белка) при температуре О—5° С, перемешивая в течение 18 часов. Полученный коньюгат белка с флуоресцеином освобождают от несвязавшегося красителя сначала с помощью диализа против забуференного при рН=9,0 физиологического раствора. Дальнейшая очистка от избыточного красителя производится переосаж-дением белка сульфатом аммония (4—5 раз), пока надосадочная жидкость не перестает люминесцировать. Препараты (мазки, суспензии, замороженные срезы), как фиксированные ацетоном, так и нефиксированные, приводят в соприкосновение с люминесцентно-меченым белком в течение 30 минут, промывают в физиологическом растворе (рН=7ч-7,5) и заключают в забу-ференный глицерин. Исследовать такие препараты лучше при ультрафиолетовом возбуждении. Соответствующие антигены при этом люминесцируют очень ярко светло-зеленым светом. Этот метод позволяет определять внутриклеточную локализацию чужеродных полисахаридов и белков, ферментов и гормонов, устанавливать антигенное родство тканей и клеток, быстро идентифицировать под микроскопом бактерии й вирусы. [c.317]

Применение. В микроскопии для гистологических исследований и в качестве красителя для флуоресцентной микроскопии, в том числе для окрашивания ядер по Майеру [Ромейс, 167] для грубого-дифференцирования нуклеиновых кислот [1] для определения изоэлектрической точки фиксированных спиртом тканевых срезов [2] для выявления сульфата декстрана [3] для прижизненного окрашивания гипосульфитной лейкобазой по Роскину и Масловой в смеси с эозином и оранжевым Ж для множественной окраски обзорных препаратов как заменитель тионина и метиленового голубого. [c.391]

Применение. В флуоресцентной микроскопии в качестве красителя при определении жировых включений в гистологических препаратах. Метод выявления липидов основан на появлении вторичной флуоресценции 1]г срезы, окрашенные 0,1%-ным раствором фосфяна, дают в УФ-свете серебристо-белую [c.422]

Применение. В гистохимии в качестве красителя для выявления основных и кислых белков в кислых растворах при pH 1,4—2,1 нуклеиновые кислоты окрашиваются в.синий цвет, а основные белки —в красный цвет [Пирс, 79, 290] при окрашивании депарафинированных срезов в ортофосфорной или лимонной кислоте ядер ный хроматин окрашивается в темно-синий со стальным оттенком цвет, а ацидофильные тканевые компоненты —в различные оттенки красного цвета [Пирс, 708]. В микроскопии для выявления алюминия, отложения которого окрашиваются в розоЕГ й или красный цвет [Пирс, 874]. В аналитической химии реактив на алюминий и фториды. [c.455]

Нуклеиновые кислоты как вещества с сильными кислыми свойствами обладают сродством к основным красителям — толуиди-новому синему, целестиновому голубому, пиронину, метиловому зеленому. Участки тканевых срезов, легко воспринимающие такие основные красители, получили название базофильных. [c.120]

Возможность изучения распределения нуклеиновых кислот в тканевых срезах при помощи фермента рибонуклеазы в сочетании с основными красителями, например красителем Унна — Панпенгейма, была впервые установлена Браше [26, 31] в 1940 г. В первых своих исследованиях он применял неочищенные препараты рибонуклеазы. В настоящее время принято пользоваться для этой цели только кристаллическими препаратами ферментов, свободными от примесей протеаз. [c.120]

Рибонуклеазную пробу можно, конечно, использовать при работе с любым подходящим основным красителем. Этот метод применялся многими авторами для обнаружения РНК в различных тканях [28, 29, 31—37]. Браше [38] рекомендует проводить определение следующим образом. Ткань фиксируют в реактиве Ценкера, содержащем 5% уксусной кислоты, или в жидкости Серра (спирт — формалин — уксусная кислота) и обычным путем заключают в парафин. Полученные затем срезы переносят в воду и выдерживают в течение 1 час нри температуре 37° в дистиллированной воде с pH 6, содержащей 0,1 мг кристаллической рибонуклеазы в 1 мл. Одновременно контрольные срезы выдерживают в воде, не содержащей фермента. Затем срезы окрашивают в течение 20 мин в смеси следующего состава [c.121]

Для гистохимического и цитохимического обнаружения нуклеиновых кислот в живых клетках (обзоры и монографии — см. ) используют обычно характерное УФ-поглощение нуклеиновых кислот и специфические цветные реакции, основанные на высвобождении восстанавливающих групп остатков 2-дезоксирибозы при мягком кислотном гидролизе (реакция Фельгена для ДНК) или на способности полинуклеотидов образовывать комплексы с основными красителями (реакция Браше для РНК люминесцентные методы, основанные на взаимодействии с акридиновым оранжевым). Весьма существенным признаком, который позволяет надел<но идентифицировать вещество, дающее упомянутые выше реакции на срезе ткани, как ДНК или РНК, является исчезновение характерного УФ-поглощения или цитохимической реакции после обработки среза препаратами нуклеаз — ферментов, катализирующих расщепле- [c.28]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология