ДНК для инъекции, очистка

В ряде случаев приготовление растворов для инъекций сопровождается дополнительными операциями по очистке лекарственных субстанций от примесей адсорбцией на активированный уголь, обработкой тальком и др. [c.654]

В промышленных условиях в настоящее время для получения высокоочищенной воды - воды для инъекций - используются различные установки, принцип действия которых включает комбинированные методы очистки. [c.349]

По окончании тренировки крыс усыпляли эфиром и забивали затем у них оперативным путем возможно быстрее извлекали по 1 грамму вещества из определенного участка мозга. После экстракции и весьма трудоемкой очистки от этого грамма оставалось 0,7—1,1 миллиграмма РНК (то же самое было, разумеется, проделано с девятью контрольными крысами). Наконец, РНК можно было вводить животным каждый образец РНК вводили одной крысе, причем инъекция производилась в брюшную полость — при этом РНК быстрее попадает в жидкую среду организма. Крысы, которым вводили РНК, были необученные. В течение пяти дней до инъекции их ежедневно помещали на 15 минут в клетку, в которой должен проводиться опыт,— просто для того, чтобы они постепенно к ней привыкли. За эти четверть часа дважды раздавался звонок, однако без дачи пилюль. Корм, измельченный в порошок, им просто насыпали на пол. Важно было сделать так, чтобы животные совсем не интересовались кормушкой. [c.314]

Время замочки в каждом конкретном случае подбирается индивидуально, но общей тенденцией здесь должно быть сокращение времени между операцией изготовления изделий и его замочкой. Замочка изделий может применяться также при использовании инъекции ПАВ в зону ультразвуковой очистки. Часто операцию замочки совмещают с операциями разогрева изделий и предварительной очистки. [c.66]

Хотя у некоторых типов белков до настоящего времени не обнаружено специфической биологической активности, подобной активности ферментов или гормонов, большинство белков при инъекции их соответствующим животным вызывает образование антител. Затем эти антитела, в некоторых случаях после надлежащей очистки, можно Использовать для доказательства наличия соответствующих антигенов. [c.23]

Фракционирование градиентов. Если очистке подвергают достаточно большое количество материала, то зону вируса в изопикническом градиенте можно идентифицировать визуально как голубовато-белый опалесцирующий слой. Чтобы зона была видна лучше, пробирку, расположенную на темном фоне, освещают лучом света (например, от небольшой лампы). Если при этом вирус удается четко идентифицировать, его можно извлечь из градиента, прокалывая пробирку сбоку. Если пробирка была закрыта термическим способом, сверху проделывают небольшое отверстие для обеспечения доступа воздуха. Пробирку прокалывают сбоку непосредственно под зоной вируса иглой для подкожных инъекций, надетой на шприц объемом 5—10 мл просвет иглы должен быть обращен вверх. Из пробирки медленно удаляют раствор до тех пор, пока не будет извлечена большая часть вируса. Если в градиенте видно несколько зон, то их извлекают по отдельности, начиная с верхней, и идентифицируют вирусную зону с помощью специфического теста (см. ниже). Однако при работе с патогенными вирусами прокалывание пробирки сбоку представляет слишком большую опасность, и зоны следует отбирать с помощью длинной загнутой иглы, которая вводится в градиент сверху (см. гл. 2, разд. 5.4). [c.102]

Один весьма успешный способ преодоления этой трудности заключается в отделении нужного фермента от других белков с помощью гель-электрофореза [100]. Образец фермента наносят на довольно крупнопористый гель и электрофорез продолжают до тех пор, пока фермент четко не отделится от всех сопутствующих примесей. После локализации положения фермента в геле последний разрезают и слой, содержащий фермент, растирают до получения тонкой суспензии, состоящей из полиакриламидного геля и фермента. Эту суспензию и используют затем для первой инъекции нескольких сотен микрограммов белка оказывается вполне достаточно. Иммуноглобулины, полученные таким способом, содержат до 10% антител к нужному ферменту. Остальные 90% — это относительно неспецифические иммуноглобулины, присутствующие в организме животного к моменту иммунизации. К 1 см агарозы можно присоединить десятки миллиграммов иммуноглобулина, [101]. При этом на 1 смз геля будет приходиться до 1 мг специфических антител. Но, поскольку молекулы антител присоединяются к адсорбенту таким образом, что это приводит в большинстве случаев к потере их способности связывать антиген, концентрация активных антител будет составлять, вероятно, лишь около 0,1 мг/см Если каждая молекула этих антител связывает одну молекулу антигена с близким значением молекулярной массы, то емкость такой колонки будет порядка 0,1 мг/см , это небольшая, но вполне достаточная емкость для очистки малых [c.174]

Из традиционных процессов очистки масляного сырья в существенной степени удалить ПА способны лищь глубокая селективная очистка (130% фурфурола при 93"С, возможно также использование фенола, N-мeтилпиppoлидoнa, жидкого диоксида серы), гидроочистка жесткого режима (от 5,6 до 21 МПа, до 750"С), очистка олеумом (получение белых масел). В указанных случаях раковых заболеваний у животных не отмечено. При исследовании белых масел возникновение опухолей все же имеет место ( ), но только в случае многократной внутрибрюшной инъекции. Ни депарафинизация, ни адсорбционная очистка природными сорбентами полициклические соединения не удаляют [202, 82]. [c.32]

Последняя группа фармацевтических факторов охватывает технологические стадии и процессы получения выделения) лекарственных веществ, их очистки, измельчения, сушки, смешения, просеивания, растворения и т. д., а также разнообразные случаи применения специальных технологических операций при изготовлении частных лекарственных форм, например грануляция и прессование (приготовление таблеток), выливание и охлаждение (приготовление суппозиториев), фильтрация и стерилизация (приготовление инъекций) и т. д. Только биофармацевтические исследования позволили дать научное объяснение роли технологических процессов, способов получения лекарств в развитии фармакотерапевтического эффекта. До становления биофармации этому вопросу в фармации практически не уделялось внимания. Более того, в добиофармацевтический период было бы просто невозмож-яо объяснение какой бы то ни было связи между технологическими производственными процессами и терапевтическим действием лекарств, а такая зависимость, как показано биофарма-цевтическими исследованиями, существует. [c.20]

В заводских условиях приготовление раствора для инъек- ций иногда сочетается с его одновременной очисткой. Например, нри получении инъекционного раствора глюкозы применяют активированный уголь для очистки препарата от продуктов карамелизации и пирогенных веществ, а при изготовлении раствора магния сульфата для инъекций используют магния окись для удаления соединений железа и марганца в случаях, когда отсутствует магния сульфат сорта для инъекций . [c.367]

Между 1926 и 1939 гг. Коном и сотр. Генслленом, Дэкином, Уэстом, ЛаЛэндом и Клемом были разработаны принципиальные методы выделения фактора АРА. Благодаря их усилиям лечение злокачественной анемии стало более приятным занятием. Поедание печени было заменено периодическими инъекциями водного раствора частично очищенного активного начала. Парадоксально, но этот успех задержал дальнейшую очистку этого начала, поскольку число больных злокачественной анемией, на которых должны были испытываться высокоочищенные препараты, значительно уменьшилось. [c.651]

Новый подход, позволяющий индуцировать у организма иммунный ответ без введения антигена, основан на включении в клетки животно-го-мишени гена, кодирующего белок-антиген. В первых экспериментах такого рода Е. соН-плазмиду, содержащую клонированный ген белка-антигена, транскрипция которого находилась под контролем промотора вируса животных, конъюгировали с микрочастицами золота и бомбардировали ими клетки уха мыши. Впоследствии выяснилось, что клонированную кДНК можно вводить в клетки и с помощью внутримышечной инъекции раствора с большим количеством плазмиды, несущей соответствующую ДНК. Для этого необходимо в 10 -10" раз больше ДНК, чем при бомбардировке микрочастицами. В одном из экспериментов более чем в 75% случаев ген включался в клетки мыши, и синтезированный белок-антиген индуцировал синтез антител. Этот подход позволяет избежать очистки антигена, что требует много времени и средств, или использования для соз- [c.233]

При исследовании биополимеров выбор растворителя особенно важен, поскольку основным объектом исследования обычно являются конформации цепей и их зависимость от растворителя (см. гл. 13—15). Чаще всего используются диметилсульфоксид (ДМСО), хлороформ, трифторуксусная кислота (ТФУ), ацетонитрил, гексафторацетон, метанол и вода. Усложнения спектров сигналами протонов растворителя можно избежать, используя дей-терированные производные, хотя при этом сохраняются небольшие остаточные сигналы, несколько смещенные в сильные поля (0,02— 0,05 м. д.) относительно соответствующих сигналов протонсодержащих растворителей. В спектре дейтерохлороформа остаточный сигнал является синглетом, в то время как остаточные 2-ацето-нитрил и 5-диметилсульфоксид дают характерные квинтеты, обусловленные спин-спиновым взаимодействием дейтронов с остаточным протоном. Важным моментом приготовления растворов полимеров, как и всех прочих растворов, предназначенных для исследования методом ЯМР, является очистка от мельчайших нерастворимых частиц, могущих вызвать нарушение однородности магнитного ноля при их движении внутри приемной катушки датчика. Поэтому приготовляемые растворы желательно фильтровать. Наиболее удобно выдавливать раствор в ампулу через пористую мембрану, вмонтированную в шприц для подкожных инъекций. Высокая вязкость полимерных растворов может сделать эту процедуру затруднительной. В ранних работах для повышения отношения сигнал/шум приходилось использовать высокие концентрации— до 10—15% (масс./об). Высокая чувствительность современной аппаратуры (см. разд. 1.18) и, в особенности, возможность производить накопление спектров позволяют получать хорошие спектры при концентрациях порядка 1—2%. [c.55]

Хроматографии алкалоиды наносят на колонку главным образом в виде оснований, растворенных в обычных органических растворителях полярного или менее полярного характера (ацетон и др.). За исключением анализа чистых веществ, алкалоиды обычно выделяют из растительных материалов, различных медицинских препаратов, реакционных смесей (при синтезе) или биологических материалов. Почти во всех случаях пытаются провести предварительное отделение основных анализируемых веществ от сопутствующих примесей методом экстракции. В качестве сопутствующих веществ могут быть неорганические соли и вещества липофилБного характера. При анализе растительного материала растение сушат, тонко измельчают и экстрагируют сначала петролейным эфиром для извлечения липидов. Затем материал подщелачивают и алкалоиды экстрагируют диэтиловым эфиром, хлорофор ом или другими растворителями в отличие от неорганических солей или веществ кислотного характера алкалоидные основания переходят в экстракт. Если анализируют растворы (например, растворы для инъекций, реакционные смеси или биологические жидкости), обычно достаточно подщелочить растворы и экстрагировать алкалоиды растворителями (хлороформом, диэтиловым эфиром и т. д.). В некоторых случаях предварительную очистку можно проводить ионным обменом. Для экстракции используют водные растворы минеральных кислот. Экстракты, содержащие соли алкалоидов наряду с сопутствующими примесями, пропускают через подходящий катионит алкалоиды сорбируются, и после удаления из колонки кислот их элюируют смесью низших алифатических спиртов с аммиаком. [c.101]

Конечно, куда более впечатляющим было бы, если бы каждая из подопытных крыс положительно отреагировала на все 25 звонков — однако это действительно значило бы требовать слишком многого. В процессе экстракции и очистки должно теряться значительное количество РНК оставшаяся РНК может при этом так или иначе измениться — скажем, ее молекулы могут претерпеть структурные изменения, в результате которых энграма частично стирается. Кроме того, нельзя ожидать, что после инъекции вся РНК из брюшной полости попадает в нервную систему и соответственно в мозг здесь тоже следует считаться с потерями. [c.315]

Спрашивается какое вещество фаг впрыскивает внутрь клетки Этот вопрос был поставлен и решен еще в 1952 г. Херши и Чейз с помощью радиоактивной метки. Бактериофаг Tg выращивался меченным по нуклеиновой кислоте (40% веса) и по белку (60% веса) путем заражения бактерий Е. oli, выращенных на радиоактивной среде. После очистки радиоактивный фаг использовался для заражения нерадиоактивных клеток Е. соИ. После отделения клеток от фага измерялось по радиоактивности количество перешедшей ДНК и белка. Основной факт, найденный в этой работе, — переход ДНК из фага в клетку практически без белка (0,5% примеси белка к ДНК может являться ошибкой опыта). В дальнейшем меченый белок, если и проникает в клетку, то во всяком случае не участвует в построении новых фаговых частиц. В опытах Херши и Чейз удалось констатировать инъекцию 70% меченой ДНК всех использованных фагов.Потери (30%) в подобных экспериментах вполне естественны нужно учитывать, что среди частиц фага имеется некоторое количество нежизнеспособных и, кроме того, фаги могут прикрепляться не к клеткам, а к обрывкам клеток, погибших в результате лизиса, после чего они впрыскивают свою ДНК просто в среду, и она теряется. [c.364]

Полтев [168] получил из Ba illus larvae Н-, О- и споровый антигены, которые отличаются своими свойствами. Для диагноза болезни применяется сыворотка, получаемая инъекцией кроликам щелочного экстракта из 10 мертвых личинок в физиологическом растворе после предварительной очистки центрифугированием от остатков тканей насекомых. Споры бациллы в этом случае оставались в суспензии. Агглютинация происходила при титрах 1 200 до 1 400. [c.235]

Необходимо отметить, что степень воздействия инъекции кавитационных зародышей на протекание процесса очистки зависит от температуры и состава моющей среды, харакгера загрязнений и т. п. Поэтому в ряде случаев процесс ультразвуковой очистки может даже ухудшиться при использовании инъекции кавитационных зародышей. Однако процесс развития кавитации при инъекции в жидкость кавитационных зародышей, а следовательно, и процесс ультразвуковой очистки качественно изменяются при наложении избыточного давления. [c.63]

Без инъекций зародышей в зону обработки при избыточном давлении, а также при инъекции зародышей без избыточного давления возникновение центров кавитации в объеме жидкости носит случайный характер, и, следовательно, акустическая энергия расходуется наразвитиекавитации нетолько в заданной зоне(полезная работа), но и за ее пределами (потери). Величина потерь зависит от величины заданной зоны обработки, которая в процессах ультразвуковой очистки прилегает к поверхности обрабатываемого изделия. Поскольку объем зоны обработки в этом случае невелик, потери энергии на развитие кавитации вне зоны обработки могут достигать значительной величины. Это ухудшает энергетику процесса. В процессе инъекции кавитационных зародышей в зону обработки при избыточном давлении в ней снижается прочность жидкости, что способствует созданию именно в этой зоне развитой кавитационной области. Изменяя избыточное давление и число вводимых кавитационных зародышей, легко управлять процессом кавитации, а следовательно, и процессом очистки. [c.64]

ТЫЙ оттянутый конец длиной около 25 мм. Воду и НС1 удаляют, просасывая сухой воздух с помощью длинной иглы для подкожных инъекций. Затем добавляют PS I3, и трубку охлаждают в смеси ацетона и сухого льда, чтобы предотвратить потери при запаивании потом запаивают оттянутый конец на кислородно-газовом пламени. Герметизация должна быть полной. Трубку вкладывают в железную гильзу ( на случай взрыва) и помещают в небольшую муфельную печь при указанной ниже температуре. После экспозиции трубке дают остыть, а затем ее вскрывают. Полученное меченое соединение, которое может быть использовано без очистки, вымывают в реакционную колбу тем или иным органическим растворителем. [c.402]

Анализатор, показанный на рис. 39, представляет собой ячейку замера, в которой установлена гальваническая пара никель/серебро. В межэлектродное пространство пропускается постоянный расход пробы 60 л/ч, обеспечиваемый напором воды в расходной емкости. К ячейке осуществляется тангенциальный подвод воды для лучшего пере-мешивяния пробы. С этой же целью в межэлектродное пространство помещены стеклянные шарики, одновременно служащие для очистки поверхности катода и анода от налипания взвешенных частиц. Инъекция NH l в воду осуществляется автоматически благодаря системе устройств компрессора, капилляра и распределительного сосуда, сообщающегося с расходной емкостью. Совокупность данных устройств создает постоянное давление воздуха, соответствующее глубине погружения трубки в распределительном сосуде и уровню воды в расходной емкости. Капилляр служит для ручного регулирования расхода воздуха. [c.71]

Эти опыты были проведены с четырьмя кроликами. Количество инъекций, количество введеннот о фермента и вся остальная методика были точно такие же, как в описанных выше опытах. Очистка инвертазы производилась по Эйлеру и Кульбергу Тот же автолизованный сок, который применялся в первом опыте для иммунизации, был обработан уксуснокислым свинцом. При этом большая часть белков выпадала, а фермент оставался в растворе. К отфильтрованному раствору прибавлялся спирт до содержания 48% осадок растворялся в воде, обрабатывался каолином и еи е раз осаждался спиртом. Осадок, растертый с абсолютным спиртом и отфильтрованный при помощи водоструйного насоса, дал белый порошок, который был высушен в эксикаторе над хлористым кальцием. Для иммунизации был взят раствор этого препарата, по своей активности соответствующий [c.576]

Рой [95] описал очистку бактериофага при помощи электрофореза в многокаме])ном приборе с целлофановыми мембранами. Все фаги мигрировали к аноду и прп )Том значительно очищались, что было доказано серологическими испытар иями. Инъекция кролику не давала образования бактериальных антител, но стимулировала образование антифага. [c.257]

Очистка человеческого белка после биосинтеза в клетках микроорганизмов весьма сложная задача, так как требует получения гомогенного препарата из смеси, содержанк й около 3 тыс. белков. Примеси бактериальных белков в готовом продукте недопустимы, особенно в препаратах, предназначенных для инъекции. [c.104]

При гуморальном ответе животного на эритроциты другого вида образуются IgM и IgG. Затем антиэритроцитарные антитела нагружают на эритроциты-мишени, которые при введении донору эритроцитов, вызывают образование антиглобулинов. Этот простой подход позволяет избежать очистки иммуноглобулинов и дает хорошие результаты. Например, введя кролику внутривенно 1 мл отмытых в физиологическом растворе эритроцитов барана (10%-ная суспензия, объем на объем), можно легко получить соответствующие антиэритроцитарные антитела. При взятии крови через 10 дней после первой инъекции главным образом получают IgM. Повторное введение антигена через 1 нед и 2 раза в неделю в течение последующих несколькнх недель с забором крови через 2—5 дней после последней инъекции преимущественно обеспечивает получение IgG. Сыворотки затем могут быть смешаны. [c.53]

Первое затруднение связано с обезличенностью радиоактивного излучения. Например, если в результате некоего эксперимента мы регистрируем излучение радиоактивного изотопа углерода, то само это излучение никоим образом не информирует нас о том, находятся ли атомы радиоактивного углерода в молекулах интересующего нас белка или в каких-то посторонних для данного эксперимента примесях. Природа этих примесей зависит не только от способа очистки препарата, но и от метода введения радиоактивности в интересующие нас биополимеры. Если оно осуществляется естественным путем биосинтеза в организме животного, которому с диетой или в виде инъекции ввели низкомолекулярные радиоактивные предшественники , то не во власти экспериментатора проконтролировать все процессы метаболизма, в которых эти предшественники могут быть использованы. Если же радиоактивная метка вводится в уже очищенный биологический препарат in vitro химическим или энзиматическим путем, то, помимо возможности побочных реакций, всегда существует проблема полного отделения продукта от использованных в реакции исходных радиоактивных соединений. В связи с этим методам введения радиоактивных изотопов в молекулы биополимеров и способам очистки продуктов такого введения от радиоактивных загрязнений будет уделено значительное внимание. [c.155]

Спирт этиловый марки высшей очистки используют для при-плхэвления внутривеьшых инъекций (противошоковые жидкости) в концентрации до 33%. Иногда его используют для приготовления масляных растворов некоторых противоопухолевых средств, не растворимых ни в воде, ни в маслах. Для этого лекарственное средство растворяют в минимальном количестве этилового спирта, смешивают с оливковым маслом (получают эмульсию), потом спирт отгоняют под вакуумом и получают масляный раствор. [c.156]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология