Методы определения молочной кислоты

Реактивы для определения молочной кислоты с /г-оксидифенилом (с. 27) или энзиматическим методом (с. 28). [c.51]

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЛОЧНОЙ КИСЛОТЫ [c.26]

Первый раздел Практикума должен помочь студентам освоить методические приемы и основы аналитической биохимии. Он содержит описание основных принципов и методов концентрационного анализа, принятых в биохимии (спектрофотометрического, колориметрического, манометрического), в частности, для количественного определения гликогена, глюкозы, неорганического фосфата, фосфорных эфиров углеводов, молочной и пировиноградной кислот. В раздел включены работы, посвященные анаэробному превращению углеводов. Каждая задача, выполняемая студентом, предусматривает анализ чистоты исходного препарата углевода или его фосфорного эфира, получение ферментного препарата (гомогената или экстракта ткани), постановку биохимического эксперимента, количественную оценку результатов. Количественное определение веществ проводится несколькими методами, результаты сопоставляются. Так, выполняя задание по теме Превращение фруктозо-1,6-дифосфата в молочную кислоту , студент анализирует фруктозо-1,6-дифосфат по фруктозе и по фосфату, молочную кислоту определяет спектрофотометрическим и колориметрическим методами. Подобным образом выполняются работы, связанные с превращением других фосфорных эфиров углеводов, гликогена, глюкозы. [c.5]

Молочная кислота. Наиболее распространенным методом определения молочной кислоты является метод, основанный на количественном окислении (обычно перманганатом) ее до ацетальдегида [2] и определении последнего бисуль-фитным методом [3, 4, 7]. Рекомендуется перед определением молочной кислоты при использовании водных вытяжек освободиться от белков с помощью фосфорно-вольфрамовой кислоты, а от углеводов — осаждением сернокислой медью и окисью кальция [7]. [c.222]

Другие методы определения молочной кислоты [c.239]

На дифференцирующем действии ацетона разработан метод определения примесей серной кислоты в технической молочной кислоте. Вполне возможно определение примесей минеральных кислот и в других органических кислотах уксусной, лимонной и т. д. [c.456]

Быстрый колориметрический метод определения молочной кислоты. [c.208]

Если не считать колориметрических определений, то описанный выше метод является в настоящее время единственным методом, дозволяющим определять молочную кислоту в количествах порядка нескольких микрограммов. Однако известны также другие методы, с помощью которых можно определять молочную кислоту в несколько больших количествах. Одним из них является диффузионный метод Винника [63], описанный также Конвеем [4]. При определениях с помощью этого метода исходят из 1 мл крови. Белок и глюкозу осаждают и отделяют по методу, описанному выще. Прозрачный раствор вводят во внешнюю камеру диффузионной кюветы Конвея. Во внутреннюю камеру помещают требуемое количество раствора бисульфита натрия (в методе Винника объем этого раствора составляет 1—1,5 мл). К анализируемому раствору добавляют насыщенный раствор сульфата церия в 2 н. серной кислоте, после чего кювету немедленно плотно закрывают. Выдерживают кювету в течение 5 час. при комнатной температуре или в течение 2 час. при -Ь50°, после чего проводят титрование раствора бисульфита, как это описано выше. Вполне возможно, что если использовать небольшого размера стеклянную диффузионную кювету типа Конвея и соответственно уменьшить количества анализируемого раствора и реактивов, то этот метод может оказаться вполне подходящим для определения молочной кислоты в количествах порядка нескольких микрограммов. Однако экспериментальная проверка этого предположения еще никем не произведена. [c.239]

Усовершенствованный метод определения молочной кислоты в пробах сухого обезжиренного молока [1384]. [c.284]

Пробы 3—6 после добавления экстракта ставят в водяной термостат при 37°С на инкубацию. После 30 мин инкубации их помещают в лед и приливают равный объем (3 мл) ССЬСООН. Осадок белка удаляют. В безбелковом растворе каждой пробы определяют содержание гликогена и молочной кислоты с /г-оксидифенилом. При определении молочной кислоты энзиматическим методом (с. 27) белки осаждают равным объемом 0,5 н. раствора хлорной кислоты. Из безбелкового раствора хлорную кислоту удаляют в виде перхлората калия (с. 29). Полученный раствор используют для определения молочной кислоты и гликогена. [c.51]

При определении молочной кислоты энзиматическим методом безбелковый фильтрат нейтрализуют 5 н. раствором КОН и перхлорат калия удаляют (с. 29). В полученном растворе определяют фруктозодифосфат и молочную кислоту. [c.58]

Для того чтобы определение молочной кислоты по описанному методу можно было проводить с помощью спектрофотометра, окрашенный раствор нужно разбавить концентрированной серной кислотой до требуемого объема и перевести в капиллярную кювету. Область максимального поглощения расположена приблизительно при 580 Ш(х. Метод достаточно быстр и обладает высокой специфичностью, однако следует иметь в виду, что проведению реакции мешает присутствие углеводов . [c.314]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЛОЧНОЙ КИСЛОТЫ МЕТОДОМ ИОННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ [c.185]

Определение молочной кислоты в соках животных тканей. Количественное определение молочной кислоты в соках животных тканей производится по следуюш,ему методу [90, 91] испытуемый материал, например экстракт из мышечной ткани, обрабатывают для удаления белков хлоридом ртути (II) и в фильтрате после удаления ртути осаждают углеводы при помощи сульфата меди и окиси кальция. В профильтрованном растворе молочную кислоту окисляют в уксусный альдегид, действуя перманганатом калия, и отгоняют уксусный альдегид, улавливая его в титрованный 0,02 н. раствор бисульфита калия остаток бисульфита определяют иодометрическим титрованием. 1 мл 0,02 н. раствора бисульфита, израсходованного на связывание уксусного альдегида, соответствует 0,00045 г молочной кислоты. Окисление проводят с 0,002 н. раствором перманганата калия, титрование бисульфита—0,01 н. раствором иода. Этот метод дает удовлетворительные результаты только при точном соблюдении всех предписанных условий определения. См. также [92—95]. [c.250]

Определение молочной кислоты в вытяжках из органов животных. Для определения молочной кислоты в вытяжках из органов животных и в моче разработаны многочисленные методы. Во всех этих методах молочную кислоту предварительно извлекают этиловым эфиром. Далее молочную кислоту можно подвергнуть разложению при действии концентрированной серной кислоты и определить выделяющуюся при реакции окись углерода в нитрометре [96]. [c.250]

Для определения молочной кислоты в пищевых продуктах предложен [40] метод с 9 мМ НгЗО в качестве элюента и УФ детектированием при 210 нм. Сигнал детектора линеен в области концентрации молочной кислоты 0,2—2,5 мг/мл, относительное стандартное отклонение 2,0—4,9%- [c.150]

Разработан ионохроматографический метод определения молочной кислоты, позволяющий анализировать растворы, содержащие молочную кислоту в концентрации от 0,5 мг/л до 1г/л, без предварительной подготовки проб. [c.199]

Полярографический метод определения молочной кислоты основан на окислении ее до ацетальдегида смесью перманганата калия—фосфорной кислоты—сернокислого магния . Для полярографического определения 17-оксистероидов предложено окислять их предварительно трет.-бути л атом алюминия до соответствующих 17-кетосоединенийзз зз9 Смесь этилен- и 1,2-про- пиленгликолей определяют после окисления их до формальдегида и уксусного альдегида . [c.49]

Кроме различных колориметрических ультрамикрометодов определения молочной кислоты [62], известен только один объемный ультрамикрометод, позволяющий определять молочную кислоту в количествах порядка нескольких микрограммов. Этот метод основан на титровании. Следует отметить также метод определения молочной кислоты по Виннику [63], основанный на впервые предложенной Гордоном и Куастелем [64] реакции окисления с помощью сульфата церия с использованием кюветы Конвея. Этот метод позволяет определять молочную кислоту в количествах порядка долей миллиграмма. Объемный ультрамикрометод определения молочной кислоты описали Мак-Креди, Митчелл и Кирк [65]. Этот метод возник в результате усовершенствования объемных методов Фридмана, Котонио и Шас ера [66], а также Фридмана и Грезера [67] с целью снижения количества анализируемой молочной кислоты до нескольких микрограммов. Метод был испытан для образцов, содержащих от 1 до 25 у молочной кислоты. Было показано, что с его помощью удается определять больше 98% молочной кислоты, содержащейся в образце, с точностью 2%. Лишь в отдельных анализах авторы получали меньшую точность. Таким образом, несмотря на уменьшение количества анализируемой молочной кислоты на два-три порядка, точность описанного здесь ультрамикрометода не уступает точности микрометода, на основе которого он был разработан. [c.234]

Метод определения молочной кислоты с помощью ступенчатого фотометра, описанный Миллером и Мунтцем [23], был применен ими для определения этого компонента в количествах до 0,1 у. Было показано, что максимальная точность может быть достигнута, когда количество молочной кислоты лежит в пределах 2—10 у. Объемы измеряемого раствора немного превышали 1,5 жл, а толщина поглощающего слоя составляла 5 мм. Применение капиллярной кюветы емкостью 1 жл и длиной 5 см должно обусловить повышение чувствительности больше чем в 10 раз. Кроме того, реакцию можно проводить с меньшими количествами веществ так, чтобы окончательный объем составлял приблизительно 200 X. Это приведет к еще большему повышению чувствительности и даст возможность определять молочную кислоту в количествах порядка 5—50 ту. [c.313]

Реактивы для определения молочной кислоты с п-оксидифени-лом (с. 27) или энзиматическим методом с лактатдегидрогеназой (с. 28). [c.50]

Приведенный нил<е метод является модификацией метода, применявшегося Баркером и Саммерсоном [3] для определения молочной кислоты в биологических материалах, Стоцем [4] — для определения ацетальдегида в крови и Джайангом и Смитом для определения метальдегида (тетрамера ацетальдегида) н растительных материалах. Вещество подвергают гидролизу серной кислотой, образующийся ацетальдегид отгоняют в водный раствор бисульфита и затем его вводят в реакцию с /г-фенилфенолом в присутствии концентрированной серной кислоты и иона двухвалентной меди. Образуется соединение, окрашивающее раствор в фиолетовый цвет, максимум поглощения при 572 нм (рис. 10.2). [c.400]

Так как метод бихроматометрии имеет преимущества перед другими методами, особенно при определении некоторых солей указанных кислот, мы решили усоверщенствовать этот метод, в частности, ускорить окисление и повысить точность анализа. Определение муравьиной кислоты и оксикислот проводили при оптимальной концентрации серной кислоты, обеспечивающей максимальную точность при затрате минимального количества времени. На основании предварительных опытов установлено, что окисление лучше проводить в 12—13 н. растворе серной кислоты двойным избытком 0,1 н. раствора бихромата калия (это не относится к определению молочной кислоты). Эти условия способствуют быстрому и полному окислению веществ. Нагревание колбы с реакционной смесью проводили на кипящей водяной бане в течение 5—15 минут. Лимонная кислота окисляется труднее, поэтому окисление ее приходится проводить с обратным холодильником при легком кипении реакционной смеси. [c.332]

Применение описанного колориметрического метода с использованием п-фенилфенола для структурных исследований требует знания всех факторов, мешающих определению частично такая информация есть. Баркер и Саммерсон [3] приводят перечень 71 соединения, не мешающих определению молочной кислоты, даже если их количество в 50—100 раз превышает количество кислоты. Они указывают также те вещества, которые мешают определению, и предлагают способы, как обойти затруднения. Этанол, ацетилметилкарбинол, ацетон и бутиленгликоль-2,3 не оказывают влияния на определение ацеталей и виниловых эфиров [3, 4]. Диацетил дает зеленое окрашивание. Влияние диацетила можно устранить предварительной обработкой анализируемого образца йодной кислотой [4]. Молочная и пировиноградная кислоты мешают анализу, и их, несомненно, следует удалить, пропуская образец через ионообменную смолу, подобно тому, как рекомендует Маркус [14] для удаления мешающих катионов. Генри и др. [15] сообщают, что уксусная кислота также дает окрашивание с п-фенилфенолом, следовательно, ее также следует удалить с помощью ионитов. [c.404]

Определение молочной кислоты методом ионной хроматографии А. М. Долгоносов. ....................... 185 [c.189]

Долгоносов А. М. Определение молочной кислоты методом ионной хроматографии//Определение нормируемых компонентов в природных и сточных водах. М. Наука, 1987. [c.199]

Молочная кислота является паталогической составной частью желудочного сока. Она пояачяется в нем при некоторых заболеваниях, например, при раке желудка. Определение молочной кислоты в желудочном соке необходимо не только для диагностических целей, но и для правильного выбора методов определения связанной соляной кислоты. [c.264]

Колориметрическое определение. Основной метод колориметрического определения молочной кислоты в крови [99] подвергался некоторым изменениям [100]. Исследуемую кровь освобождают от белков, действуя метафосфорной кислотой, и от углеводов, действуя сульфатом меди остаток медных солей осаждают окисью кальция. Полученный раствор молочной кислоты обрабатывают чистой концентрированной серной кислотой и по охлаждении приливают к нему 0,125-процентный раствор вератрола в абсолютном спирте. Появляющаяся в присутствии молочной кислоты красная окраска колориметрируется через 20 мин. Требуется строгое соблюдение разработанных условий особенно приходится заботиться о тщательной очистке всех применяемых пипеток и стаканчиков (очистка серной кислотой), так как в загрязненной посуде вместо прозрачного светлокрасного раствора можно получить грязносерый или зеленый раствор, см. также [101, 102]. [c.250]

Третий метод перемешивания, который с успехом применяется при работе с объемами растворов, несколько большими 0,2 мл, может быть назван методом. пульсирования . В раствор погружают один конец тонкого капилляра, на другом конце которого имеется небольшая резиновая груша. Такой капилляр имёет вид обычной медицинской капельницы. Перемешивание производят, нажи])лая и разжимая резиновую грушу, в результате чего раствор, попеременно входит в капилляр и выходит из него. Этот метод особенно полезен для перемешивания жидкостей, находяш ихся в замкнутых сосудах в атмосфере инертного газа. Иногда он может применяться также при титровании внутри прибора для дестилля-ции, как эго имеет место, например, в случае объемного определения молочной кислоты [27]. Капилляр, в котором пульсирует перемешиваемый раствор, обычно является составной частью всего прибора. Иногда же для перемешивания можно использовать какой-нибудь капилляр, предназначаемый для другой цели. [c.52]

Чувствительный газохроматографический метод для определения молочной кислоты. (Определение до 0,5 v в виде ацетальдегида НФ карбовакс 20М.) [c.72]

РЖХим,1973,I6P33I. Быстрый метод газохроматографического определения молочной кислоты в мелассе. (Сравнение метода ГХ с колориметрическим). [c.181]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Колориметрическое определение пантотеновой кислоты и ее солей в результате гидролитического расщепления и обработки 2,7-дигидроксинафталином в концентрированной серной кислоте — см. [74]. Спектрофотометрическое определение пантотеновой кислоты и ее солей после окисления р-аланина 2,4-динитрофенилгидразином— см. [75]. Предложен также микробиологический метод, который основан на определении молочной кислоты, образуемой при действии La toba illus arabinosus [76]. [c.490]

Сопоставляя полученные данные, можно прийти к следующим выводам. Прежде всего, молекулярная формула уксусной кислоты не может быть меньше, чем С2Н4О2, а молекулярная формула молочной кислоты — меньше, чем СзНеОз, так как совершенно ясно, что в любой молекуле соли не может содержаться меньше одного атома серебра. Однако это соображение еще не указывает верхнего предела для величины молекул обеих кислот уксуснокислое серебро, например, могло бы иметь молекулярную формулу С4Нб04Ад2, а молочнокислое серебро— СбНюОбАдг, что точно так же соответствовало бы результатам анализа. Таким образом, посредством подобного определения молекулярного веса химическим путем мы можем, следовательно, точно установить только наименьшие размеры молекулы, но не определить ее максимальную величину. Последнюю задачу можно разрешить, лишь определив величину молекулярного веса с помощью физических методов — по плотности паров или по величине осмотического давления. Однако эти результаты, в свою очередь, тоже не вполне однозначны, так как устанавливают для величины молекул исследуемого вещества лишь верхние границы, не исключая возможности существования также молекул меньших размеров. Так, например, для веществ, молекулы ко- [c.12]

Молекулярные формулы 11. Молекулярный вес, определение 11, 12 Молекулярных орбит метод 55 Л1олиша реакция 424 Молочная кислота 1,12,135,138,323,324 борниловый эфнр 138, 139 соли 324 )-Молочная кислота 373 -Молочная кислота 372, 373, 403. 427 Молочный сахар 414, 415, 441, 445, 451 Монарденн 688 [c.1186]

Используя метод оптического сравнения, Фрейденберг установил [44], в частности, конфигуративную связь окси- и аминокислот, что в то время было невозможно сделать прямым химическим превращением, поскольку оно идет с затрагиванием асимметрического центра, а сведения о механизмах зеакций были тогда еще не столь надежны, как теперь. 3 табл. 7 приведены величины оптического вращения ряда производных молочной кислоты (как вещества с известной конфигурацией) и двух антиподов аланина, задача определения конфигурации которых стояла в данной работе. [c.206]