Ферменты определение

С другой стороны изучение ферментативных реакций в стационарном режиме имеет ряд существенных недостатков. Наиболее важным из них является то, что стационарная кинетика дает весьма ограниченную информацию о детальном кинетическом механизме ферментативной реакции. Стационарная кинетика, отражая лишь лимитирующие стадии процесса, практически не дает информации о быстрых , нелимитирующих стадиях превращения субстрата в активном центре фермента. Определение элементарных констант скорости многостадийной ферментативной реакции из данных стационарной кинетики не представ-ляется.возможным. Действительно, кинетика каталитической реакции, включающей п промежуточных соединений (схема 5.16), описывается 2 п + 1) константами скорости. Стационарная же скорость этой обратимой реакции независимо от числа промежуточных соединений, принимающих участие в механизме реакции, дается уравнением (см. гл. VI) [c.174]

В настоящее время установлено, что специфичность и каталитические свойства многих ферментов обусловлены наличием в молекуле фермента определенных активных центров или активных участков полипептидной цепочки. В ряде случаев установлен характер и порядок чередования остатков аминокислот в этих функционально наиболее важных участках. Так, особенно важную роль играет фрагмент полипептидной цепи, имеющий строение аспарагиновая или глютаминовая кислота —серин — глицин или аланин (холинэстераза, трипсин, тромбин и др.). От некоторых ферментов оказалось возможным отщепить часть молекулы без существенного снижения их каталитической активности. К числу таких ферментов принадлежат, например рибонуклеаза и ряд протеолитических ферментов. [c.124]

Молекулярная сорбция некоторых ферментов определенными ионитами может быть резко повышена за счет процесса высаливания (адсорбция высаливанием), что, как будет показано ниже, проявляется при сорбции амилазы силикагелем и крахмалом. [c.86]

Так как сайты 6 и 7, прилегающие к активному центру, обязательно заняты при всех продуктивных способах связывания субстрата с ферментом, определение относительных [c.68]

Наследственные болезни чаще всего связаны с недостатком одного или нескольких ферментов в результате подавления их синтеза. Это приводит к нарушениям тех или иных обменных процессов и, как следствие, развитию различных заболеваний. Из-за отсутствия какого-либо фермента определенные звенья метаболических путей, состоящих из последовательно протекающих реакций, оказываются блокированными. При этом метаболиты, образованные до дефектного звена, накапливаются в патологических количествах, а метаболиты, синтез которых связан с последующими этапами, не образуются вовсе. Это вызывает развитие физиологически не обоснованных биохимических реакций, затрагивающих многие жизненно важные функции живого организма. Рассмотрим отдельные примеры. [c.88]

Образование активного центра (АЦ). АЦ называют совокупность остатков АК, расположенных в молекуле фермента определенным образом, так, что именно эти аминокислоты участвуют в связывании субстрата и образовании продукта реакции. В АЦ различают участок связывания и каталитический участок. В образование АЦ могут быть вовлечены даже очень отдаленно расположенные в полипептидной цепи АК, связанные нековалентными связями водородными, ионными, диполь-дипольными. Их энергия не более 4-40 кДж/моль, но таких связей в молекуле фермента очень много, и они играют решающую роль в механизме действия ферментов. [c.29]

Алифатические альдегиды дают в этих условиях не ацилоины, а альдоли, образования ацилоинов из этих соединений можно добиться, используя ферменты определенных видов дрожжей. [c.356]

Таким образом, установив, что вследствие индивидуальной структуры фермента определенные группы в полипептидной цепи расположены специфическим образом, мьт можем представить образование активного центра, который в дальнейшем и предопределяет природу превращений, приводящих к образованию того или иного продукта реакции. Сама же ферментативная реакция протекает в составе активного комплекса, который образуется при взаимодействии фермента и субстрата, при этом связывание с активным центром фермента происходит в результате образования специфических нековалентных связей, в том числе гидрофобных, и электростатического взаимодействия. Влияние специфических групп фермента за счет кооперативности дестабилизирует связи субстрата, который превращается в более реакционноспособное соединение. В соответствии с этим можно дать определение активного центра как участка белка фермента, который включает все специфические группы, участвующие в образовании активного комплекса [25]. [c.165]

Таким образом, установив, что вследствие индивидуальной структуры фермента определенные группы в полипептидной цепи расположены специфическим образом, мы можем представить образование активного центра, который в дальнейшем и предопределяет природу превращений, приводящих к образованию того или иного продукта реакции. Сама же ферментативная реакция протекает в составе активного комплекса, который образуется при взаимодействии фермента [c.204]

Можно определять активность АХЭ или ХЭ. Для определения активности АХЭ в большинстве случаев подвергают гемолизу эритроциты ХЭ определяют в сыворотке крови. При использовании цельной крови можно путем выбора специфического субстрата (ацетил-р-метилхолина для АХЭ и бутирилхолина для ХЭ) или применяя определенные концентрации субстрата достигнуть дифференцирования ферментов. Последний из указанных способов основан на уже описанном ингибировании АХЭ более высокими концентрациями субстрата. Так, при концентрации ацетилхолина 10 М определяется преимущественно АХЭ, при концентрации же 10 М — ХЭ, однако в каждом случае в определенной степени (примерно на /б) проявляет активность и другой фермент. Определение активности осуществляют либо по установлению скорости ферментативного расщепления субстрата (кинетический метод) или путем определения конечных продуктов" и не вступившего в реакцию субстрата. [c.165]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ ФЕРМЕНТОВ Определение амилазы [c.347]

Высокая активность и специфичность действия биологических катализаторов издавна привлекали внимание химиков, которые более 60 лет назад предприняли первые попытки создания моделей ферментов. Эти работы в настоящее время получили дальнейшее развитие и ведутся по двум дополняющим друг друга направлениям. Одно из них состоит в изучении состава и строения природных ферментов, определении количества и расположения активных групп в их молекуле и расшифровке механизма их действия. Полученная при этом информация используется для искусственного воссоздания таких же ферментов или конструирования подобных им модифицированных систем, иногда более эффективных, чем природные. [c.261]

Главная задача изучения влияния pH на кинетику реакции, катализируемых ферментами,— определение констант диссоциации ионогенных групп ферментов, участвующих в элементарных актах процесса, и выяснение механизма их участия. [c.104]

Дополнение 9-4. Структура некоторых ферментов, определенная с помощью дифракции рентгеновских лучей. [c.250]

Образование анаболических ферментов регулируется путем репрессии. С точки зрения той же экономии выгодно, чтобы ферменты определенного биосинтетического пути не синтезировались, если его конечный продукт имеется в среде. Поэтому в присутствии такого конечного продукта или при его накоплении снижается скорость синтеза всех ферментов, специфичных для данного биосинтетического пути. [c.473]

В настоящее время не подлежит также сомнению, что и наиболее сложные окислительные процессы, протекающие в клетках живых организмов (тканевое дыхание), осуществляются при участии целого набора различных ферментов, определенным образом организованных во внутриклеточных структурах (в основном, митохондриях). Этот вопрос подробно рассматривается в главе Тканевое дыхание . [c.114]

Процесс минерализации можно ускорить добавлением к септическому илу, содержащему большую массу микробов и ферментов, определенного количества свежего осадка, тщательным перемешиванием этих осадков, а также повышением температуры. [c.304]

Регулирование конечным продуктом активности аллостерического фермента определенного биосинтетического пути обеспечивает мгновенную реакцию, приводящую к изменению выхода этого продукта. Если последний оказывается ненужным, отпадает надобность и в ферментах, участвующих в его синтезе. Проявлением максимальной экономичности клеточного метаболизма служат выработанные клеткой механизмы, регулирующие ее ферментативный состав. Очевидна целе- сообразность синтеза только тех ферментов, которые необходимы в данных физиологических условиях. Показано, что у прокариот в одних условиях фермент может содержаться в количестве не более 1—2 молекул, в других — составлять несколько процентов от клеточной массы. [c.116]

Наконец, активность некоторых ферментов регулируется путем химической модификации их молекулы, в основе которой лежит ковалентное обратимое связывание с ферментом определенной группировки, что приводит к изменению его активности. У прокариот известны две ферментные системы, активность которых регулируется таким путем. Глутаминсинтетаза Е. oli, катализирующая синтез глутамина, существует в двух формах, различающихся присутствием в одной из них остатка адениловой кислоты. Присоединение его с помощью ковалентной связи, [c.113]

Бывают случаи, когда требуется создать ферменты определенного назначения. Это может случиться, например, когда клетке угрожает голод вследствие истощения запаса пищи в окружающей среде. Клетка должна усваивать вещества, которые в нормальных условиях она не использует. Вот тут-то и начинается срочный синтез катализаторов, которые помогают справиться с этой задачей. В таких случаях говорят об индукции синтеза ферментов. [c.145]

Для опытов употреблялся 0.2%-ный раствор фермента. Определение ферментативного действия раствора производилось следующим образом [c.613]

Следует отметить, что для вирусов и ряда ферментов размер чувствительного объема , определенный радиационным методом из уравнения (3), хорошо совпадает с величиной частиц вируса или молекул ферментов, определенной другими методами. Эти данные явились одним из наиболее убедительных доводов в пользу реального смысла примене- [c.119]

Как уже упоминалось в 1 главы VI все гидролазы, значительная часть трансфераз, лиаз и изомераз относится к катализаторам с активными центрами кислотно-основного типа, однако во многих случаях непосредственное участие имидазола в активном центре не доказано, а для некоторых ферментов определенно известно, что в составе их активных центров нет имидазола. Именно такие ферменты будут рассмотрены в этой главе, хотя механизмы их действия изучены менее детально, за исключением лизоцима, для которого имеется почти исчерпывающая картина его каталитического действия. [c.179]

При очистке ферментов от сопутствующих белков используют также метод избирательной адсорбции — либо в объеме , добавляя к раствору фермента определенное количество адсорбента, либо на колонке. В качестве адсорбентов применяют главным образом каолин, гидроксилапатит [Са5(Р04)д0Н] и др. Избирательная адсорбция ферментов может осуществляться двумя путями адсорбент может связывать неактивные белки, оставляя фермент в растворе, или же сорбируется фермент, а в растворе остаются неактивные белки. Адсорбцию обычно проводят при 0° С. Адсорбированный фермент элюируют с предварительно промытого водой или буфером адсорбента ацетатными, фосфатными или боратными буферами. [c.200]

Многие из ферментативных функций, связанных с метаболизмом ДНК, характерны как для прокариот, так и для эукариот. Обсуждение процессов репликации, репарации и рекомбинации в соответствующих разделах опирается на рассмотрение участия в них определенных типов ферментов, что позволяет выявить биохимические основы организации этих процессов у прокариотических и эукариотических организмов. Некоторые из этапов метаболизма ДНК удается однозначно интерпретировать в рамках действия фермента определенного типа. В то же время в некоторых организмах данная функция может реализоваться при участии более чем одного фермента, и наоборот-один и тот же фермент может участвовать в нескольких различных процессах. Судя по всему, эволюция породила целый ряд различных механизмов, обеспечивающих метаболизм ДНК и поддерживающих сохранность наследственной информации, закодированной в ДНК. [c.104]

Ферменты определенного пути метаболизма могут различаться по субстратной специфичности. Например, может оказаться, что первые три фермента способны [c.423]

Химотрипсина определение. Ферментные препараты малоустойчивы, и поэтому непосредственно перед использованием такого препарата в нем обязательно необходимо установить содержание активного фермента. Определение химотрипсина основано на его реакции с дифенилкарбамилфторидом и последующем [c.137]

Первый фермент определенной феригентной системы, способный ингибироваться, называется регуляторным, или аллостерическим, ингибирующий метаболит — вффектором, или модулятором. Ингибирующий эффектор называют отрицательным эффектором, или отрицательным модулятором. Регуляторный фермент может находиться в точке разветвления мультиферментных систем. Простейшим типом регуляторной ферментной системы является мультиферментная система, катализирующая превращение 1-треонина в Ьизолейцин. [c.126]

Актиномицет Streptomy es hydrogenans продуцирует 20р-оксистероид-дегидрогеназу, катализирующую взаимные превращения 20-кето- и 20р-оксистероидов. Этот фермент был получен в кристаллическом состоянии с выходом около 12% от содержания его в исходном бесклеточном экстракте молекулярный вес фермента, определенный седиментационным методом, имеет величину порядка 118 000 [5,140—144]. В последнее время удалось получить также частично очищенные препараты 20р-оксистероид- [c.119]

В случае, когда большая многоатомная система катализатора содержит незаполненную валентную зону (металлы, большие сопряженные полимерные молекулы, ак гивные группы ферментов), определение [c.86]

Ферменты. Задачей многих работ являлась оценка способности к биосинтезу различных ферментов определенными группами, видами или штаммами ми1<роорганизмов. Много работ посвящено изолированию ферментов и их характеристике. Специальные научные центры занимаются выяснением локализации некоторых ферментов в клетках. [c.45]

Взаимодействия между фагами и плазмидами, подвергнутыми генно-инженерным операциям in vitro. В приведенных выше примерах описаны взаимодействия между природными плазмидами и фагами. В последнее время выявляется много случаев взаимодействия между плазмидами, утратившими после обработки in vitro рестрицирующими ферментами определенные участки или, напротив, получившими фрагменты чужеродной ДНК, и разными фагами. Опять-таки взаимодействие во всех описанных случаях имеет высокоспецифичный характер. [c.205]