Приготовление е-ДНФ-лизина

Приготовление посевного материала. Посевная культура продуцента может быть приготовлена двумя способами периодически и непрерывно, В настоящее время на биохимических заводах, выпускающих лизин, приготовление посевной культуры преимущественно ведется периодическим методом. [c.33]

Жидкий концентрат лизина (ЖКЛ) хорошо сохраняется в течение 3-4 мес. Считается, что он обладает большей биологической ценностью, чем сухой ККЛ. Для получения сухого концентрата (ККЛ) жидкий концентрат высушивают на распылительных сушилках до влажности 5-6%. Такой концентрат (ККЛ) содержит до 15-20% лизина в виде монохлоргидрата, около 15-17% белка, до 14% других аминокислот, 10-13% бетаина и около 20-25% зольных веществ. Но сухой концентрат (ККЛ), получаемый высушиванием стабилизированной и сконцентрированной культуральной жидкости, имеет недостаток, он очень гигроскопичен (его гигроскопическая точка при 20°С равна 20-22% относительной влажности воздуха) и при хранении слеживается крупными комками, которые затрудняют его дальнейшее продуктивное использование и при приготовлении комбикормов, и непосредственно на животноводческих фермах. Есть несколько способов ликвидации этого недостатка. По-видимому, большая гигроскопичность сухого препарата связана с высоким содержанием сахаров и органических кислот. Их процентное [c.38]

Известен метод выращивания на готовой культуральной жидкости, содержащей лизин, специальных видов дрожжей, усваивающих углеводы и органические кислоты. Из культуральной жидкости исчезают нежелательные компоненты (сахара и органические кислоты), и она дополнительно обогащается кормовым белком (дрожжи). ККЛ получается при такой технологии менее гигроскопичным и более сыпучим. Жидкий и сухой концентрат лизина приблизительно одинаков по своему составу, если он приготовлен без наполнителя. Если же дан наполнитель, то к сумме сухих веществ культуральной жидкости прибавляются еще сухие вещества наполнителя. Химический состав кормового препарата лизина сложен и содержит очень большое количество самых различных соединений [c.39]

О качестве буферного раствора с pH 3,25 судят по положению пика цистеина, который должен находиться посредине между пиками аланина и валина. О качестве буфера с pH 5,28 судят по положению пика гистидина, который должен располагаться ровно посредине между пиками лизина и аммиака. В качестве стандартного раствора при приготовлении новых партий буфера следует использовать ранее приготовленный, хорошо проверенный буферный раствор, хранившийся в холодильнике под толуолом. [c.335]

Хлеб. Применение молока и дрожжей при приготовлении хлеба значительно повышает содержание в нем лизина, а вместе с тем и его питательную ценность по сравнению с мукой. [c.81]

Ход анализа. Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Для приготовления стандартной шкалы берут 15 пробирок. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые — по 1 мл раствора лизина (10 мкг/мл) и по 4 мл воды, в третьи — по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые — по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые — по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37°С. Через 24 ч выращивание бактерий [c.222]

Приготовление и стерилизация питательной среды, аппаратов и коммуникаций. Питательная среда для выращивания продуцентов лизина состоит из мелассы, кукурузного экстракта или другого источника ростовых веществ, мела и пеногасителя. Питательная среда готовится и стерилизуется в две стадии с учетом свойств компонентов, входящих в ее состав. Стадия подготовки и стерилизация среды состоят из смешивания компонентов питательной среды в определенной пропорции с помощью специальных дозаторов в реакторе, растворения солей при перемешивании, нагрева до температуры стерилизации, выдержки при этой температуре и охлаждения [c.392]

ККЛ получается при такой технологии менее гигроскопичным и более сыпучим. Жидкий и сухой концентрат лизина приблизительно одинаков но своему составу, если он приготовлен без наполнителя. Если же дан наполнитель, то к сумме сухих веществ культуральной жидкости прибавляются еще сухие вещества наполнителя. [c.398]

Этот метод не приспособлен еще для количественного анализа, но, вероятно, степень превращения аминокислот, выраженная в процентах, в N-ацетил-н-амиловые производные имеет величину одного порядка для большинства аминокислот, поскольку сигнал детектора для производных, приготовленных стандартным методом, почти одинаков. Кроме того, величина сигнала составляет примерно 85% величины сигнала, полученного для растворов чистых производных. К сожалению, гистидин и аргинин этерифицируются при указанных условиях с плохим выходом, а ацетилирование не протекает гладко. Следовательно, вероятно, необходима усовершенствованная методика анализа этих аминокислот. Лучшие результаты получены при уменьшении продолжительности нагрева во время этерификации до 5 мин и при кипячении с обратным холодильником с уксусным ангидридом в течение 10 мин. Полученные производные обладают большими удерживаемыми объемами на второй колонке, чем лизин (см. фиг. 196). Вероятно, перед этерификацией имеет смысл превращать аргинин в орнитин, поскольку это производное имеет время удерживания на первой колонке всего лишь 33 мин. При указанных условиях производные триптофана не элюируются. [c.534]

Приготовление и стерилизация питательной среды, технологического оборудования и коммуникаций. Процесс биосинтеза в производственных условиях начинают с получения посевного материала в инокуляторах и (или) посевных аппаратах. Питательная среда для культивирования продуцентов лизина содержит в качестве основного источника углерода мелассу, уксусную кислоту или их смеси. Среди источников азота наиболее часто используют соли аммония и мочевину, а также кукурузный экстракт, гидролизаты кормовых, пекарских дрожжей и казеина. Последние играют, кроме того, роль ростовых факторов содержат в себе дефицитные для ауксотрофного мутанта аминокислоты и витамины. Нормальное течение процесса биосинтеза обеспечивается добавками солей макроэлементов калия, фосфора, магния. Добавок микроэлементов, как правило, не производят, они содержатся в достаточном количестве в кукурузном экстракте и гидролизатах дрожжей. [c.32]

Однако производимый по данной технологии ККЛ очень гигроскопичен, при хранении слеживается крупными комками, что затрудняет приготовление из него комбикормов. Устранение данного недостатка достигается введением в упаренную культуральную жидкость наполнителей в виде костной муки, негашеной извести, бентонита, пшеничных отрубей. Применение последних имеет наибольшее распространение. Для этого к сконцентрированной до -35—40% АСВ культуральной жидкости добавляют отруби из такого расчета, чтобы влажность смеси была около 70% и образовалась масса, способная к формированию в гранулы. Полученная таким образом паста высушивается конвективным способом на вальцово-ленточной сушилке до гранул необходимого размера. Произведенный с этими наполнителями ККЛ содержит до 7—10% лизина, он сыпуч и негигроскопичен. [c.40]

Смесь I —для инкубации проб с меченой аминокислотой— не содержит аминокислоты, аналогичной меченой (лизина), имеет в своем составе буфер и соли. В табл. 32 дано приготовление смес на 100 проб, объемом по 0,1 мл. [c.362]

Если содержание белков в растительном корме ниже нормы, то во избежание перерасхода кормов и повышения себестоимости животноводческой продукции количество белка в корме компенсируют введением белковьк добавок в виде препаратов незаменимых аминокислот либо белковой массы с более высоким содержанием ряда аминокислот по сравнению с эталоном. Незаменимые аминокислоты наиболее сбалансированы в белках семян сои. Относительно высокую биологическую цеьшость имеют также белки зерна риса и гороха. В белках зерна пшеницы и ячменя очень мало лизина, метионина и изолейцина, а в белках кукурузы еще и триптофана. Для балансирования кормов (в которых основной компонент — зерно злаковых культур) по белку и незаменимым аминокислотам применяют концентрированные белковые добавки — комбикорма. Для их приготовления используют мясокостную и рыбную муку, отходы мясной и молочной промышленности, жмыхи масличных растений, отруби, шроты зернобобовых культур. [c.9]

Выбор подходящего препарата трипсина и его предварительная очистхаЛрутст является наиболее изученным высокоспецифн-ческим протеолитическим ферментом, который способен избирательно расщеплять пептидные связи, образованные остатками лизина и аргинина. Однако имеющиеся в продаже препараты трипсина, приготовленные из экстрактов поджелудочной железы, могут быть загрязнены другими протеазами, поэтому необходимо тщательно подбирать подходящийдля конкретных целей препарат трипсина. Лучше всего пользоваться препаратом, классифицированным как свободный от химотрипсина . Если в распоряжении исследователя нет такого препарата, то рекомендуется очистить имеющийся трипсин следующим образом фермент растворяют в 0,01 н. НС1 и инкубируют при 37°С в течение 16 ч, затем раствор фильтруют и доводят pH до 7,8. [c.168]

Большинство приготовленных нами аминокислотных производных колхицина были исследованы на противоопухолевое действие. Однако данные этих исследований не опубликованы. Для колхицидил-А -лизина в колхшшдил-/ -орнитина Н.ЯЛОрченко (Лаборатория экспериментальной химиотерапии ОЩ АМН СССР) установил, что у этих соединений соотношение активности против злокачественных новообразований и токсичности менее благоприятно чем у их метиловых эфиров. [c.202]

Диколхицидил- Ь -лизин очищали трехкратным переосаждением из бикарбонатного раствора. Для анализов и приготовления натриевой соли, кроме того, его очищали хроматографией ( / 0 , активность П), вымывая примесь смесью хлороформ-спирт (95 5). Примесь на тонкослойной хроматограмме ( 0 , тот же растворитель) показала около 0.7. Окись алюминия обрабатьгоали 1-2 МаИСО , Диколхицидил-// "ЛИЗИН осаждали подкислением. Он легко растворим в спиртах и хлороформе, несколько трудней в ацетоне и диоксане, трудно в этилацетате, не растворим в эфире, бензоле, диоксане и воде. [c.253]

В отличие от производства кормовых дрожжей промьнн.тенное полу чение лизина и других аминокислот осуществляется в строго асептических условиях, на стерильных питательных средах с использованием чистой ку льтуры продуцента. Принципиальная технологаческая последовательность процесса получения лизина след тощзя приготовление посевного материала приготовление и стерилизация питательной среды, всей аппаратуры и коммуникаций культивирование прод) -цента в промышленньк ферментаторах (ферментация) выделение целевого продукта (L-лизина). [c.33]

Приготовление питательной среды д.п я культивирования продуцентов лизина осуществглется в две стадии. Свекловйч ная меласса приготовляется отдельно от других компонентов среды. Ее разогревают и транспортируют в смеситель, где при перемешивании и разогреве она растворяется в горячей воде. Питательные соли и все другие компоненты среды растворяются в смесителе, но с таким расчетом, чтобы при последующем совмещении этих растворов получились требуе.мые регламентом концентрации компонентов в среде. Затем приготовленные смеси поступают в нагревательную колонку 3, в выдерживатель и на охлаждение в теплообменник З.Стерильная охлажденная питательная среда далее поступает в ферментатор, заполняя его на 70-75%. Для начала ферментации необходимо ввести в среду посевной материал. Исходная культура подготавливается в микробиологической лаборатории завода. И если приготовление посевного материала идет периодически, то после выращивания в качалочных колбах культура передается на первую 8 и затем на вторую 9 ступени инокуляторов, где получают необходимые объемы посевной культуры. Стерилизация питательной среды осуществляется в самих посевных аппаратах, предварительная же гомогенизация среды осуществляется в специальном посевном смесителе 7, так как в инокуляторах первой ступени, а часто и во второй нет перемешивающих устройств. [c.40]

Среда для определения лизин(орнитин)декарбокси-лазной активности. Гидролизата казеина 0,5 мл, дрожжевого экстракта 0,3 мл, глюкозы 0,1 г, лизина или орнитина в 1-форме 0,5 г (в ВЬформе 0,75 г, в В-форме 1 г), дистиллированной воды 100 мл. Все ингредиенты смешать, добавить около 2,25 мл 0,4% водно-ш елочного индикатора бромтимолового синего. Стерилизовать однократно текучим паром 30 мин (не автоклавировать). После охлаждения среда должна приобрести желто-зеленый цвет pH 6,6—6,8. Исправить pH можно 20% раствором едкого натра или хлористоводородной кислоты. Разлить в маленькие пробирки по 2 мл. Прокипятить на водяной бане 5 мин. Приготовление индикатора. Бромтимолового синего 0,1 г, 0,05 н. едкого натра 3 мл, дистиллированной воды 22 мл. [c.234]

Альбумины и глобулины сыворотки представляют очень сложную смесь белков, состав которой изменяется в зави9имости от метода приготовления. Серумальбумины являются превосходным источником для получения лизина. Отсюда логически следует, что в тех случаях, когда в организме происходит восстановление альбумина сыворотки, пищ,а должна быть богата лизином. [c.74]

Так силилировались ОН- и SH-группы, а также имидазольная группа гистидина [105]. Лучшие выходы для нескольких ТМС-аминокислот составляли 75% [И4]. С помощью ГХ с применением силиконового масла в качестве жидкой фазы [106] были разделены производные аланина, валина, лейцина, глутаминовой кислоты и фенилаланина. Хроматографированию подвергались также этиловые эфиры N-ТМС-аминокислот наряду со свободными основаниями ТМС-эфиров, приготовленными реакцией аминокислот с ГМДС или же удалением лабильной N-TM -группы аммиаком [107]. Авторы утверждают, что получены пики аргинина, гистидина и лизина, но не приводят для них времен удерживания. [c.101]

Наряду с соответствующими производными ряда простых аминокислот получены также -( -метоксифенилазо)-бензил-оксикарбонильные производные ь-аргинина (ацилирование в смеси едкого натра с бикарбонатом натрия), р-метилового эфира ь-аспарагиновой кислоты, у-метилового эфира ь-глутамино-вой кислоты и Ы -бензил-г-гистидина [2037]. Ы -Защищенный лизин синтезирован через медный комплекс, а соответствующий метиловый эфир получен с помощью Ы-карбоксиангидрида, приготовленного из Ы -защищенного лизина и фосгена [2033]. Благодаря окраске, присущей такого рода Ы-защищенным аминокислотам и пептидам, оказывается возможным их непосредственное обнаружение и количественное определение при [c.63]

Для улучшения органолептических показателей мясных и рыбных продуктов, придания им специфического приятного вкуса, аромата и сообщения мягкости используют аргинин, гистидин, лизин, цистин. Такие аминокислоты, как цистеин, цистин, в сочетании с -моноглу-таматом натрия создают имитацию запаха и вкуса мяса, что очень важно при приготовлении приправ, концентратов и особенно при создании новых видов пищи. [c.362]

В производстве лизина используется меласса, содержащая термолабильный компонент — сахарозу. Поэтому ее стерилизуют отдельно. В реактор, снабженный мешалкой, подают мелассу и нагревают ее при постоянном размешивании до температуры 80° С, смешивая ее с водой согласно имеющейся рецептуре, затем ее быстро разогревают глухим паром до температуры 120—122° С в специальном аппарате и выдерживают при этой температуре определенное время, необходимое для полной гибели всей микрофлоры. Остальные компоненты среды также в реакторе с перемешиванием смешивают и растворяют в воде с подогревом, нагревают в специальном аппарате до температуры стерилизации, выдерживают при ней и охлаждают. Длительность стерилизации значительно меньше, но температура выше. В нелом же схема приготовления среды и стерилизации ее аналогична той, что приводилась ранее в части П. [c.393]

Метод Бергдолла и Доти [14]. Приготовление гидролизата к 10 мл солянокислого (0,3 н. H I) водного раствора аминокислот, содержащего 1—О мг лизина, 1—4. мг гистидина и 1—8 мг аргинина, добавляют 30—50 мг цинковой пыли. Восстановление цистина происходит при 80° в течение нескольких минут. [c.304]

Применение ионитов для разделения основных аминокислот может итти по двум направлениям приготовление смесей для концентрирования в технических масштабах аргинина, гистидина II лизина и разделение основных аминокислот для целей анализа. [c.305]

В процессе приготовления питательной среды для культивирования производственных штаммов ауксотрофных мутантов, обладающих способностью к сверхсинтезу аминокислоты лизина, в качестве источника углерода обычно используют смеси, включающие уксусную кислоту и свекловичную мелассу, в качестве источника азота — соли аммония, мочевину, кукурузный экстракт, гидролизаты дрожжей. Кроме дефицитных аминокислот, которые не синтезируются клетками мутантов, в питательную среду также добавляют необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов макро- и микроэлементы (Р, Mg, Ре, Са, Мп и др.) и витамины (витамины группы В, биотин и др.). В процессе культивирования микроорганизмов обеспечивается подача стерильного воздуха с помощью специальных турбинных мешалок, для предотвращения вспенивания субстрата и клеточной суспензии в среду культивирования добавляется пе-ногаснтель. Схема технологической линии по производству лизина показана на рис. 7.4. [c.277]

Меняли деревянный ящик, разделенный на три камеры двумя мембранами, приготовленными из льняной ткани, вымоченной в 30%-ном растворе желатины и задублен-ной в формальдегиде в течение ночи. Электродами служили угольные пластины. Во время опыта Фостер и Шмидт поддерживали в центральной секции pH, равное 7,5, я щелочность катодного отделения понижалась добавлением серной кислоты.. Лргинин и лизин мигрировали к катодной секции, если же pH поддерживалось при 5,5, там концентрировался даже гистидин. Католит содержал около 15% неосновного азота, который мо1 быть удален при повторном пропускании раствора. Пигмент, образованный при 1идролизе,. мш рирует в анодное отделение и не влияет на анализ основных а.мино-кислот. [c.241]

Приготовление пробы. По мнению Дэвиса [281], включение исследуемой пробы в стартовый гель препятствует тепловой конвекции диффузии веществ, что приводит к более эффективному разделению. Однако некоторые белки повреждаются в результате полимеризации геля [1407] или под действием флуоресценции [975]. Кроме того, белки могут подавлять полимеризацию геля [570]. Если есть подозрение, что флуоресценция или персульфат (см. ниже) приводят к возникновению артефактов, вместо стартового геля желательно использовать суспензию сефадекса 0-200, гл1ицв рин, сахарозу или мочевину. В то же время эти материалы сам и способны при определенных условиях стать причиной артефактов. Так, сефадекс 0-200 может задерж1И1вать движение белков [173], а сахароза — взаимодействовать с 8-аминогруппой лизина [455] или боратом с образованием отрицательно заряженного комплекса. Поэтому присутствие сахарозы в боратном буфере может привести к эффекту усеченного конуса и боковому распространению белков в процессе электрофореза [759]. С другой стороны, мочевина вызывает диссоциацию белков на субъединицы, препятствует затвердению агарозы в агарозно-полиакриламидных гелях [574] и влияет на активность водородных ионов. [c.97]

Райзнер и др. [1073] разработали очень простую и быструю методику окрашивания, не требующую обесцвечивания фона. Она основана на том, что кумаоси яркий синий 0-250 изменяет свой цвет в разбавленной хлорной кислоте и вновь приобретает исходную окраску при связывании с белками. Для приготовления окрашивающего раствора указанный краситель (конечная концентрация 0,04%) добавляют к 3,5%-ной хлорной кислоте, и эту омесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученный раствор фильтруют сначала через фильтровальную бумагу ватман № 1, а затем через миллипоровый фильтр с размером отверстий 0,45 мкм. Реактив сохраняется при ком натной температуре неограниченно долго. Гели инкубируют в нем 2 ч при 37 °С или 4 ч при комнатной температуре, после чего их хранят в пробирках, заполненных 0,04%-ны М pa твiapoм кумасси яркого синего 0-250 в 2,5%-ной хлорной кислоте. Данный реактив позволяет избирательно выявлять гистоны с высоким содержанием аргинина, так как гистоны,. богатые лизином, растворяются в хлорной кислоте. [c.157]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология