Нуклеотиды бактериальной клетки

Все процессы, протекающие в бактериальной клетке, - образование аминокислот, нуклеотидов и других важных метаболитов, репликация, транскрипция, трансляция, катаболизм, высвобождение энергии, реакции на внешние воздействия - требуют участия белков. Однако энергетических ресурсов клетки не хватает для одновременного осуществления транскрипции и трансляции (экспрессии) всех структурных генов. Поэтому постоянно экспрессируются толь- [c.41]

Значение РНК для синтеза белков доказывается следующим опытом. Если разрушить бактериальные клетки ультразвуком и удалить из полученной бесклеточной взвеси нуклеиновые кислоты, то синтез белков, несмотря на наличие аминокислот, не происходит. Добавление к этой взвеси РНК восстанавливает синтез белков. Установлено, что в биосинтезе белка участвуют рибонуклеиновые кислоты трех типов 1) РНК—переносчик аминокислот 2) рибосомная РНК 3) информационная РНК (и-РНК). РНК-переносчик представляет собой относительно короткую цепь, содержащую 50—100 нуклеотидов. Находясь в клетках в растворенном состоянии, она способна присоединять к себе аминокислоты и доставлять их к месту, где происходит синтез белков. Для каждой из 20 аминокислот имеется особый вид РНК-переносчика. [c.123]

Установлено, что информационная РНК отличается от других РНК, в частности от растворимой РНК и от высокополимерной РНК, входящей в состав рибосомальной частицы. Молекулярный вес и-РНК достигает 1 млн. следовательно, и-РНК состоит из многих сотен и даже тысяч нуклеотидов. Предполагается, что существует большое разнообразие и-РНК как по составу, так и величине молекулы. Достаточно сказать, что одна бактериальная клетка содержит в среднем около 2000 различных белков, а каждый белок при синтезе требует особой матрицы, т. е. своей и-РНК. [c.80]

Рассмотрим теперь, каким образом молекула ДНК донора, поступившая из среды, включает свою нуклеотидную последовательность в клетку бактерии-реципиента. Мы не станем рассматривать здесь те молекулярные процессы, которые ответственны за это событие, так как мы еще не подготовлены к этому. Ограничимся лишь утверждением, что по своей природе это событие представляет собой случай генетической рекомбинации. Иными словами, экзогенной молекуле ДНК, несущей гены S или Sir " бактерии донора, удается найти гомологичную ей эндогенную молекулу ДНК, несущую R- или Str -гены в клетке реципиента. Согласно теории об информационной роли ДНК, рассмотренной в этой главе, гомологичность экзогенных S- или Str -генов донора соответствующим эндогенным R-или Str -генам реципиента представляет собой соответствие в последовательности нуклеотидов в каждой такой паре гомологичных молекул ДНК. Иными словами, последовательность оснований гомологичных молекул ДНК донора и реципиента совершенно одинакова, за исключением тех ограниченных участков, где мутация изменила последовательность оснований в одном из двух гомологов и, следовательно, индуцировала появление белка с измененной аминокислотной последовательностью. После того как экзогенная молекула ДНК нашла своего эндогенного гомолога, обе молекулы вовлекаются в процесс генетического обмена. Такой обмен приводит к интеграции экзогенной молекулы и исключению гомологичной эндогенной молекулы ДНК из набора генов бактерии-реципиента и, следовательно, к генетической трансформации этой бактерии R-формы в S-форму или из Str -типа в Str -тип. Включившись в генетические структуры бактерии-реципиента, экзогенная молекула ДНК реплицируется вместе со всеми другими молекулами трансформанта и, следовательно, передается всем потомкам бактериальной клетки, из которых она может быть впоследствии выделена для дальнейших трансформаций. [c.167]

Биосинтез цитозина происходит путем модернизации молекулярной структуры нуклеотидов урацил превращается в цитозин под действием ЦТФ-синтетазы аминированием УТФ (в качестве донора аминогруппы в организмах птиц и млекопитающих выступает ННз, а в бактериальных клетках — аминогруппа глутамина) [c.345]

У многих бактерий обнаружены внехромосомные генетические элементы — плазмиды. Это кольцевые ковалентно замкнутые молекулы. ДНК, содержащие от 1500 до 40 ООО пар нуклеотидов, реплицирующиеся автономно как единое целое. К настоящему времени плазмиды описаны у 135 видов, принадлежащих более чем к 40 родам, располагающимся в разных группах Определителя бактерий Берги. Обычно о присутствии плазмид в бактериальной клетке судят по проявлению определенных признаков, которые присущи этим структурам, т. е. кодируются их генетическим материалом. К таким признакам относится устойчивость к некоторым лекарственным препаратам, способность к переносу генов при конъюгации, синтез веществ антибиотической природы, способность использовать некоторые сахара или обеспечивать деградацию ряда веществ. Большую группу составляют плазмиды с нерасшифрованными функциями такие плазмиды выявляют с использованием фи-зико-химических методов. [c.127]

Чтобы обеспечить образование непрерывной цепи ДНК из многих таких фрагментов, в действие вступает особая система репарации ДНК, удаляющая РНК-затравку и заменяющая ее на ДНК. У бактерий РНК-затравка удаляется нуклеотид за нуклеотидом благодаря 5 -> З -экзонуклеазной активности ДНК-полимеразы. При этом каждый отщепленный рибонуклеотидный мономер замещается соответствующим дезоксирибонуклеотидом (в качестве затравки используется З -конец синтезированного на старой цепи фрагмента). Завершает весь процесс фермент ДНК-лигаза, катализирующий образование фосфодиэфирной связи между группой З -ОН нового фрагмента ДНК и 5 -фосфатной группой предыдущего фрагмента. Образование этой связи требует затраты энергии, к-рая поставляется в ходе сопряженного гидролиза пирофосфатной связи кофермента-никотинамидадениндинуклеотида (в бактериальных клетках) или АТФ (в животных клетках и у бактериофагов). [c.253]

Фаг М13 — это одноцепочечная циклическая ДНК длиной около 6500 нуклеотидов. После инфицирования бактериальной клетки одноцепочечная ДНК фага превращается в двуцепочечную репликативную форму (RF), которая подобна плазмиде. Фаговая ДНК содержит, кроме того, короткий участок из 500 нуклеотидов, названный как МП (межгенная последовательность), не существенный для ее жизнедеятельности. Именно в этот участок МП репликативной формы ДНК после расщепления ее с помощью лигазы вставляют чужеродную ДНК. Введение рекомбинантной двуцепочечной молекулы в клетку Е. соИ приводит к ее репликации, синтезу (+) цепи, упаковке последней в белковый чехол и вьщеле-нию фага в среду. Инфицированная нитевиднь фагом клетка продолжает делиться, вьщеляя в окружающую среду большое количество фага. Этот фаг содержит в вирионе одноцепочечную циклическую ДНК, в которую встроена одна из цепей чужеродной ДНК. [c.120]

Важную группу векторов, широко используемых прн установлении первичной структуры ДНК, составляют нитевидные бактериофаги, такие, как М13, fd и fl. Фаг М13 представляет собой одно-цепочечиую циклическую ДНК длиной около 6500 нуклеотидов. После инфицирования бактериальной клетки одноцепочечная ДНК фага превращается в двухцепочечную репликативную форму (RF), которая во всех отношениях подобна плазмиде. Кроме того, фаговая ДНК содержит короткий участок (500 нуклеотидов), названный межгенной последовательностью (МП), несущественный для ее жизнеспособности (рнс. 250). [c.432]

К настоящему времени выяснено, что ДНК несет в себе тот генетический рецепт, на основе которого в ряде последовательных клеточных делений образуются идентичные клетки. В процессе воспроизведения ДНК воспроизводится информация, необходимая для синтеза специфических ферментов и других клеточных белков. Генетическая информация, содержащаяся в ДНК, заключена в последовательности четырех типов оснований (А, Т, Г, и Ц) вдоль фосфатноуглеводного остова (т. е. последовательности расположения четырех типов нуклеотидов, из которых построена ДНК). Таким образом, последовательность А—Г—Ц в каком-либо участке цепи несет иную информацию, чем последовательность Г—А—Ц. Последовательность оснований в ДНК может быть модифицирована химически путем обработки ДНК in vitro (вне клетки) или in vivo (внутри клетки) азотистой кислотой, под действием которой первичные аминогруппы аденина, цитозина и гуанина превращаются в группу ОН. Результатом этого оказывается изменение генетического кода, поскольку модифицированная таким образом ДНК вызывает мутации в организме, из которого она первоначально была получена. Резкие изменения могут произойти в тех случаях, когда ДНК бактериофага (который весь состоит из нити ДНК, заключенной в белковую оболочку) вводится в бактериальную клетку. Фаговая ДНК действует в качестве затравки и вызывает в бактериальной клетке синтез новой ДНК и белков по своему образцу , что в конце концов приводит к разрушению клетки, в которую внедрился бактериофаг, и выходу во внешнюю сферу новых фаговых частиц. [c.139]

Двойная спираль ДНК состоит из 160 000 пар нуклеотидов и достигает поразительной длины — 50 мкм (то есть 0,05 мм). Кроме того, фаг обладает хвостовой частью, с помощью которой он прилипает к стенке бактериальной клетки. На месте прикрепления фага под действием фермента клеточная стенка растворяется и через образовавшееся отверстие ДНК выстреливает внутрь бактерии. Белковая оболочка фага остается вне бактериальной клетки. Теперь внутри бактериальной клетки фаговая ДНК действует как матрица для сни-теза соответствующей ей мРНК, используя 1 5 [c.165]

Векторные молекулы. Трансформация. Ключевой операцией в генетической инженерии является введение в клетку и стабильное поддержание генетической информации, содержащейся в рекомбинантных молекулах ДНК. Это достигается при помощи так называемых векторных молекул, или векторов. Дело в том, что при обычном введении ДНК, например, в бактериальную клетку, она, как правило, подвергается атаке ферментов, которые гидролизуют ее на составные компоненты — нуклеотиды. В некоторых случаях ДНК выживает в клетке, однако в процессе деления клеток она не наследуется и теряется. Для того чтобы рекомбинантная ДНК стала составной частью генетического аппарата клетки, она должна либо встроиться в ее геном (интегриройаться в хромосому) и реплицироваться за ее счет, либо быть способной к автономной репликации. [c.35]

Состояние компетентности определяется способностью бактериальной клетки включать ДНК из окружающей среды. Это было продемонстрировано в эксперименте с использованием трансформирующей ДНК, меченной Р (в фосфодиэфирных мостиках, связывающих последовательные нуклеотиды), выделенной из 51г -пневмококков, которые были выращены в среде, содержащей Р. Насыщающие количества такой меченной Р ДНК добавляли к несинхронизированной немеченой 51г -куль-туре реципиента. После довольно продолжительного контакта с донорной ДНК клетки реципиента осаждали центрифугированием и отделяли от свободной ДНК. Затем определяли количество связанной Р-метки в осадке и подсчитывали число возникающих 81г -трансформантов. Этот эксперимент был выполнен еще в двух вариантах. В первом использовали меченную по Р донорную 51г -ДНК, к которой добавляли 10-кратный избыток немеченой 3 г -ДНК, во втором использовали реципиентные Str -бaктepии из синхронизированных культур, находящихся в максимальной и минимальной стадиях компетентности. Результаты трех экспериментов можно суммировать следующим образом количество меченной Р ДНК, приходящееся на одну реципиентную клетку в культуре при использовании чистой меченной донорной ДНК, было выше, чем в случае использования донорной ДНК, смешанной с немеченой 51г -ДНК. Кроме того, это количество было выше в случае использования синхронизированной реципиентной культуры в фазе максимальной компетентности, чем при использовании несинхронизированной культуры, причем включение в несинхронизированную культуру в свою очередь [c.166]

Изложенные данные о структуре, составе и внутриклеточном размножении Т-четных фагов распространяются на многие другие типы фагов, которые заражают не только Е. oll, но и другие виды бактерий. Несмотря на то что эти типы фагов могут довольно значительно отличаться некоторыми деталями структуры (одни фаги имеют отросток меньших размеров и более просто устроенный, чем у Т-четных фагов, другие имеют цилиндрические или сферические головки в отличие от многогранных головок Т-четных фагов, третьи содержат в ДНК цитозин вместо гликозилировапного ОМЦ Т-четных фагов), все они имеют двухцепочечную молекулу ДНК, содержащую от 10 до 3-10 пар нуклеотидов. Молекула ДНК всегда инъецируется в бактериальную клетку, где происходит ее репликация по механизму, постулированному Уотсоном и Криком, для обеспечения генетическим материалом сотен частиц потомства фага. [c.273]

Теперь мы уже вполне подготовлены к тому, чтобы приступить к вопросу, поставленному в гл. VU, а именно к вопросу о молекулярном механизме возникновения тех изменений в последовательности нуклеотидов ДНК, которые приводят к мутациям. Действительно, исследование характера возникновения мутаций Т-четных фагов с использованием методов генетического анализа с высоким разрешением дает большие возможности для проникновения в природу мутационного процесса. Использование фагов имеет еще одно важное преимущество по сравнению с ис-лользованием бактерий. Мутации фаговой ДНК можно изучать как в том случае, когда она находится в состоянии покоя вне клетки в составе инфекционной фаговой частицы, так и когда она находится в реплицирующемся, внутриклеточном, вегетативном состоянии. Уже самые первые исследования Херши и Лурия показали, что частота спонтанных мутаций в покоящейся ДНК очень мала — столь мала, что в течение многих лет считалось (как потом оказалось, ошибочно), что внеклеточные фаговые частицы вообще не мутируют месяцами и даже годами. Таким образом, новые мутации появляются в основном во время вегетативного размножения фага в клетке-хозяине. Рассмотрим следующий пример. Культуру Е. oli заражают препаратом фага Т2/- с титром 10 частица/мл. Фагу дают размножиться в течение нескольких циклов, пока все бактерии в культуре не подвергнутся лизису, а титр фага не достигнет величины 10 частица/мл. Оказывается при этом, что с каждым циклом размножения доля г-мутантов во всей популяции фагов увеличивается (примерно с 10" в начале до 10 в конце). Следовательно, мутанты фага возникают в результате ошибок копирования при внутриклеточной репликации его генетического материала. Репликация ДНК родительского фага является очень точным процессом. И все же при репликации иногда происходит ошибка, порождающая в одной из вегетативных реплик изменение последовательности нуклеотидов, или мутацию. Мутантная реплика генетического материала включается затем при созревании в инфекционную фаговую частицу, которая в свою очередь заражает новую бактериальную клетку. В этой клетке очень точно копируется уже измененная информация, содержащаяся в мутантной частице поэтому все потомство такой частицы оказывается тоже мутантным. Поскольку репликация ДНК вегетативного фага происходит в соответствии с постулированным Уотсоном и Криком полуконсервативным механизмом, размножение фагового генома можно рассматривать как процесс бинарного деления и с точки зрения статистического анализа совершенно аналогичным процессу размножения генома бактерий. Следовательно, уравнение, связывающее долю мутантных особей п среди общего числа N потомков одного исходного родителя, возникших после g генераций, с частотой мутаций а [c.315]

Репарация короткими последовательностями используется в 99% случаев репарационных событий, включающих вырезание. Остаюпдийся 1% приходится на замещение протяженных последовательностей ДНК, содержащих в основном около 1500 нуклеотидов меньшая часть протяженных последовательностей включает приблизительно 9000 нуклеотидов. Этот способ требует участия генов uvr и ДНК-полимеразы I. Различие между двумя способами репарации состоит в том, что репарация короткими последовательностями представляет собой конститутивную функцию бактериальной клетки, тогда как репарация длинными последовательностями - это процесс, индуцируемый повреждениями. Мы еще не охарактеризовали различия между этими способами репарации [c.439]

Один из важнейших инструментов генной инженерии—эндонуклеазы, ферменты, расщепляющие ДНК по специфическим последовательностям нуклеотидов внутри цепи (в противоположность экзо-нуклеазам, которые расщепляют ДНК с концов молекулы). Эти ферменты получили название рестрик-таз, поскольку их присутствие в бактериальной клетке ограничивает рост определенных бактериальных вирусов, называемых бактериофагами. Рестриктазы расщепляют ДНК на относительно небольшие фрагменты в участках последовательности строго определенной структуры. Этим их воздействие отличается от большинства других ферментативных, химиче- [c.36]

Структура частицвирионовразных бактериофагов различна (рис. 9.1). В отличие от вирусов эукариотов бактериофаги часто обладают специализированным органом прикрепления к поверхности бактериальной клетки, или хвостовым отростком, устроенным с разной степенью сложности, но некоторые фаги не имеют хвостового отростка. Капсид содержит генетический материал фага, его геном. Генетический материал разных фагов может быть представлен разными нуклеиновыми кислотами. Некоторые фаги содержат ДНК в качестве генетического материала, другие — РНК. Геном у больншнства фагов — двупитевые ДНК, а геном некоторых относительно редких фагов — одноните-вые ДНК. На концах молекул ДНК некоторых фагов присутствуют липкие участки (однонитевые комплементарные последовательности нуклеотидов), у других фагов липкие участки отсутствуют. У некоторых фагов последовательности генов в молекулах ДНК уникальны, тогда как у других фагов выявлены пср-мутации генов. У одних фагов ДНК линейная, у других замкнутая в кольцо. У некоторых фагов на концах молекулы ДНК имеются концевые повторы нескольких генов, у других фагов такая концевая избыточность обеспечивается присутствием относительно коротких повторов. Наконец, у некоторых фагов геном представлен набором из нескольких фрагментов нуклеиновой кислоты. [c.168]

Крика. По этой модели молекула ДНК состоит из двух очень тош<их длинных цепей, закрученных правильными витками вокруг одной общей для них оси в двойную спираль (она похожа на электрический шнур, состоящий из двух переплетающихся проводов). В 1969 г. в Калифорнийском университете (США) при огромном увеличении удалось получить электронно-микроскопический снимок, на котором хорошо видны обе сппрали молекулы ДНК (рис. 54). В бактериальной клетке длина молекул ДНК достигает 1 см, а в клетке человеческого тела более 1 м. Каждая из двух цепочек представляет собой полинуклеотид, т. е. полимер, в котором остатки сахара двух соседних нуклеотидов связаны фосфатными группами. Между собой такие полинуклео-тидные цепочки соединены азотистыми основаниями. При этом пуриновые основания, состоящие из двух колец, связаны слабыми водородными связями с пиримидиновыми основаниями, состоящими из одного кольца. Этими же связями удерживаются вместе две цепи всей молекулы. [c.143]

В последние годы разработана техника сайт-специфического мутагенеза, позволяющего вводить мутации в точно определенный участок гена. Другое название этого метода — олигонуклео-тиднаправленный мутагенез. Суть метода сводиться к следующему. Фрагмент ДНК, в котором желают получить мутацию, переводится в однонитевую форму, например, на векторе фага М13. Синтезируется олигонуклеотид размером 14—21 п.о. комплементарный области, в которую должна быть введена мутация. В центре олигонуклеотида располагают нуклеотид, не комплементарный исходной последовательности ДНК. Производят отжиг олигонуклеотида с кольцевой однонитевой ДНК. Затем с помощью ДНК-полимеразы и лигазы достраивают вторую цепь и замыкают кольцо (рис. 30, I). Чтобы облегчить получение кольцевых двуспиральных замкнутых форм ДНК, часто используют второй олигонуклеотид, что сокращает путь ДНК-полиме-разе. Кольцевые замкнутые формы ДНК затем очищаются и ими трансформируются бактериальные клетки. После трансформации такой кольцевой ДНК и раунда репликации в потомстве должны находиться формы, несущие родительскую и мутантную ДНК, в соотношении 1 1. Далее, отдельные колонии бактерий или негативные колонии фага используют для скрининга мутантных форм. [c.162]

Рестриктазы, впервые открытые благодаря их действию nat чужеродную ДНК, попавшую в бактериальную клетку, пред ставляют собой основной рабочий инструмент молекулярного-биолога. К настоящему времени охарактеризованы многочисленные ферменты рестрикции, но наибольшее внимание уделяется ферментам типа II, поскольку именно они узнают определенные последовательности нуклеотидов внутри или окола-сайта их действия и разрезают обе нити двухцепочечной молекулы ДНК определенным образом. Обычно за единицу (ед.) активности рестриктазы принимают активность, при которой- [c.278]

Бактериальная клетка Е. соИ содержит одну крупную молекулу ДНК и несколько мелких. Крупная молекула ДНК состоит приблизительно из 4,5 МЛ1Г. пар нуклеотидов . В молекуле такого раз мера может быть что-нибудь около 5000 генов. [c.27]

Сайт-специфическая рекомбинация. Геном фага к проникает в бактериальную клетку в линейной форме, однако на концах линейной молекулы ДНК есть так называемые липкие концы — однонитевые участки по 12 нуклеотидов, комплементарные друг другу. В клетке ДНК к замыкается в кольцо. В таком виде она интегрирует в геном бактерии. Принцип этой интеграции предло- [c.212]

Бактериофаги, или вирусы бактерий, весьма разнообразны. Лучше всего изучены мелкие мужские бактериофаги Е. ali. Они представляют собой фаги, содержащие РНК R17, f2, MS2, Q6. Их геном включает всего 4—5 генов и упакован в белковую оболочку в форме многогранника. Такую же форму имеют частицы бактериофагов фХ 174, генетическим материалом которых служит одно-нитевая ДНК размером в 5375 нуклеотидов. Эти вирусы имеют всего 10 генов. Другие однонитевые (ДНК) фаги — fl, fd, М13 — имеют нитевидную форму. Крупные бактериофаги — Л, Т2, Т4 — содержат двунитевую ДНК, на которой располагается около 100 генов. Молекула ДНК фага X состоит из около 49 тыс. п. н., а ДНК так называемых Т-четных фагов (Т2, Т4) состоит из 182 тыс. п. н. Они имеют многогранную головку и хвостовой отросток, на конце которого находится аппарат адсорбции и впрыскивания ДНК в бактериальную клетку (рис. 9.10). [c.216]

Приведенные примеры четко демонстрируют роль двух основных факторов, оказывающих влияние на уровень экспрессии чужеродных клонированных генов, находящихся в составе экспрессирующих векторов в бактериальных клетках. Этими факторами являются, во-первых, оптимальная транскрипция клонированных генов и, во-вторых, эффективная трансляция транскрибированной мРНК. В обоих случаях наилучшие результаты могут быть получены при объединении в составе вектора структурной части клонированного чужеродного гена с генетическими элементами, регулирующими транскрипцию и трансляцию (промоторы, SD-последовательности и т.п.) бактериальных клеток-хозяев или их вирусов. Знание главных принципов, лежащих в основе регуляции транскрипции и трансляции, позволяет конструировать новые регуляторные последовательности (например, промотор Taq) путем объединения известных регуляторных элементов или использования искусственно синтезированных последовательностей нуклеотидов, представляющих собой усредненные канонические регуляторные последовательности, учитывающие особенности большого числа природных регуляторных элементов. Однако этими важными факторами не исчерпывается возможность оптимизации экспрессии рекомбинантных генов в чужеродном генетическом окружении. [c.114]

Проблема внутриклеточной стабильности рекомбинантных белков больше связана с деградацией небольших пептидов, поскольку крупные нативные белки более стабильны в бактериальных клетках. Один из подходов, позволяющих стабилизировать короткие чужеродные пептиды в клетках Е. соН, - включение требуемого пептида в состав гибридного белка. В этом случае последовательность нуклеотидов, кодирующую гибридный белок, соединяют в составе экспрессирующего вектора в одной рамке считывания с бактериальным геном, кодирующим белок (например, геном -галактозидазы). Образующийся в результате экспрессии такого рекомбинантного гена гибридный белок в своем составе содержит в N- или С-концевой части требуемый пептид, защищенный основным белком-носителем от протеолитической деградации. Для отделения пептида от белка-носителя их соединяют друг с другом последовательностью аминокислот, по которой можно провести специфическое расщепление полипептидной цепи. В том случае, если пептиды не содержат метионина, соединение белка-носителя и пептида осуществляют через эту аминокислоту, и отщепление пептида производят с помощью бромистого циана. Такой подход был использован, например для получения рекомбинантного соматостатина, а также А- и В-цепей инсулина. [c.117]

Вторичные сайты инициации трансляции. Иногда в результате экспрессии рекомбинантного гена в бактериальных клетках образуется укороченная форма рекомбинантного белка, что связывают обычно с протеолитической деградацией исходной полипептидной цепи. Однако наличие сайта вторичной инициации трансляции в мРНК также может быть причиной этого явления [141]. Последовательность внутри мРНК, напоминающая сайт связывания рибосом AAGGAGG, которая расположена за 5-13 нуклеотидов перед AUG-кодоном, может стать причиной такой ошибочной инициации синтеза белка. [c.118]

Смотреть страницы где упоминается термин Нуклеотиды бактериальной клетки: [c.165] [c.169] [c.279] [c.299] [c.165] [c.169] [c.537] [c.105] [c.113] [c.73] [c.211] [c.408] [c.317] [c.277] [c.242] [c.29] [c.377] [c.35] [c.72] [c.73] [c.81] [c.89]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология