Красители, хроматографическое разделение

Схема другого устройства с оптическим блоком детектирования представлена на рис. 15.3-1. В своей основе он состоит из устройства ввода с делением потока (контролирующего порции пробы, вводимой в колонку), самой колонки, специальной прокладки, удерживающей наполнитель в колонке, и ячейки детектора. Для достижения удовлетворительной чувствительности при детектировании, основанном на флуоресценции пробы, необходимо, чтобы длина оптического пути была порядка 1 мм. В связи с этим световой поток пропускают по всей длине канала детектора (для чего на внешнюю стенку наносят отражающее алюминиевое покрытие) и направляют в фотоумножитель через оптическое волокно. При общем объеме колонки 490 нл объем детектора составляет 2,3 нл. На рис. 15.3-3 представлен пример хроматографического разделения двух флуоресцентных красителей (флуоресцеина и акридинового оранжевого), реализованного менее чем за 1 мин. [c.643]

ПРЕПАРАТИВНОЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ НА КОЛОНКАХ (КРАСИТЕЛИ, ПИГМЕНТЫ ЗЕЛЕНЫХ ЛИСТЬЕВ] [c.98]

Опыт 100. Хроматографическое разделение смесей различных красителей [c.215]

Опыт 104. Хроматографическое разделение красителей на бумаге [c.220]

Хроматографическое разделение смеси красителей [c.237]

Применение хроматографии особенно важно для разделения веществ, близких по своему составу и свойствам и имеющихся в распоряжении экспериментатора в очень малом количестве. Во многих случаях, например при разделении некоторых природных веществ, в особенности природных красителей, стеринов, аминокислот и т. п., хроматография является практически единственным пригодным способом. При этом оказывается возможным выделить вещества, содержащиеся в смеси в ничтожно малом количестве. Так, при хроматографическом разделении каротинов удалось изолировать - -каротин, содержавшийся в исходной смеси в количестве около 0,1 %. [c.227]

Другую сторону мембраны в течение 5—10 с обрабатывают 4,5 %-ным раствором соляной кислоты. На стороне целлофановой пленки, обращенной в сторону силикатного раствора, сразу образуется тонкая пленка силикагеля. Мембрану с пленкой силикагеля промывают водой и спиртом, затем разрезают на полоски нужных размеров. Мембраны можно укрепить желатином или фиксировать па твердой бумаге. При хроматографическом разделении на таком слое длина пробега фронта растворителя составляет 2—3 см. На таких микрослоях хорошо разделяются некоторые стероиды и красители. Приготовление высокоэффективных пластинок с силикагелем описано также в работе [179]. [c.114]

Работа 1. Хроматографическое разделение красителей [c.62]

Условия хроматографического разделения красителей, выделенных из различных природных и синтетических материалов [c.264]

Основная проблема при хроматографическом разделении — выбор метода наблюдения за ходом процесса. Таких методов имеется несколько. Разделение окрашенных веществ, образующих в колонне отдельные цветные полосы, наблюдается непосредственно. То же относится к бесцветным флуоресцирующим веществам в этом случае колонну время от времени просматривают в свете кварцевой лампы с фильтром, пропускающим только ультрафиолетовые лучи. Недавно в практику хроматографии были введены флуоресцирующие сорбенты, получаемые либо подкрашиванием обыкновенных сорбентов флуоресцирующим красителем либо добавкой к сорбенту небольшого количества тонкоизмельченного флуоресцирующего неорганического соединения . В этом случае адсорбированные вещества, поглощающие ультрафиолетовые лучи, тушат флуоресценцию и наблюдаются в виде темных полос на светящемся фоне. Этот метод найдет, повидимому, широкое применение [89, 100, 102—104, 157, 158, 182, 192, 204, 471, 473, 474]. [c.206]

Чашку с пластинкой помещают в вытяжной шкаф (с большой скоростью движения воздуха). После того как раствор испарится почти полностью, дважды промывают пластинку спирто-водным раствором (14 1). В результате капиллярного поднятия раствора происходит хроматографическое разделение красителей, которые располагаются в виде окрашенных полос в следующем порядке нижняя окрашенная зона Прямой черный 3 (серо-зеленого цвета), вторая зона Кислотный черный С (черного цвета с синим оттенком), верхние две зоны Ярко-оранжевый и Кислотный фуксин (малинового цвета). Зоны черных красителей располагаются близко друг к другу . Для количественного определения красителей окрашенные зоны окиси алюминия переносят количественно в разные колбы объемом 50—100 мл. В колбу, содержащую адсорбент с Кислотным фуксином добавляют небольшими порциями дистиллированную воду, перемешивают, окрашенный раствор фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу объемом 25 мл. Количественно перенесенный в колбу раствор разбавляют до метки дистиллированной водой. Аналогично выделяют краситель Ярко-оранжевый . Краситель Прямой черный 3 элюируют с адсорбента таким же образом спиртоводным раствором (2 1), к которому добавлено несколько кристаллов углекислого натрия. Кислотный черный С извлекают спиртоводным раствором (1 1), к которому добавлено несколько капель разбавленной (1 1) соляной кислоты. Полученные растворы красителей колориметрируют на фотоколориметре с соответствующими светофильтрами (максимум поглощения для Кислотного фуксина находится в области 530 мкм, для Ярко-оранжевого —в области 510 мкм, для черных красителей — в области 580—600 мкм). Калибровочные графики строят по стандартным растворам препаратов красителей концентрацией 0,01 мг/мл. Для построения берут порции 2,5 5 10 13,5 и 20 мл, разбавляют каждую до 25 мл и измеряют оптическую плотность. [c.116]

Разработаны теоретические основы выбора стационарной и подвижной фаз при хроматографии красителей [8, 9]. Для получения точных и воспроизводимых результатов необходима определенная хроматографическая бумага. Целлюлоза хроматографической бумаги существенно отличается от целлюлозы чистой хлопковой ваты. Она изменена в результате механических, окислительных и гидролитических процессов и содержит различные функциональные группы, которые из-за своей активности могут участвовать в хроматографическом разделении. Разные типы хроматографической бумаги отличаются по степени полимеризации и содержанию аморфной целлюлозы. Средняя степень полимеризации целлюлозы составляет от 1400 до 500 (определена нитрационным методом). Содержание аморфной целлюлозы, [c.70]

Гидрофобные бумаги значительно меньше сорбируют полярную фазу из системы растворителей и поэтому дают более высокие значения Яр для гидрофильных красителей. Эти бумаги представляют интерес для хроматографического разделения гидрофобных красителей. [c.71]

При выбранной хроматографической бумаге и системе растворителей хроматографическое разделение зависит от образования водородных связей. Взаимодействие происходит между тройным комплексом (целлюлоза — вода — органический растворитель), подвижной фазой, состоящей из смеси свободной воды и органического растворителя, и красителем. Адсорбция обычно подавлена, потому что находящаяся на поверхности целлюлозы вода оказывает сильное сольватирующее действие. Ионный обмен на обычных бумагах маловероятен. [c.72]

Разработаны надежные методы хроматографического разделения. На основании хроматографического анализа индивидуальных групп установлены соотношения между хроматографическими свойствами красителей и их строением [2, 10, 11]. Были найдены также некоторые правила относительно связи между Яр некоторых групп водорастворимых красителей и их колористическими свойствами, в особенности между Яр и субстантивностью [12—17]. [c.74]

Некоторые проблемы возникают в связи с устойчивостью активных красителей в условиях хроматографического разделения. Поэтому всегда необходимо сначала исследовать, как влияет хроматографическая система на их активность и субстантивность. Почти во всех случаях при выборе системы растворителей приходится идти на компромисс между стабильностью активных красителей и эффективностью разделения [24, 35—37]. Реакционной способности и кинетике гидролиза этих красителей посвящено множество теоретических исследований [35, 36, 44—49, 51—63, 66] и опубликованные результаты подтверждают трудность выявления оптимальных условий для хроматографии активных красителей. [c.79]

Часто высказываются мнения, что многие выводы (аналогичные представленным в книге) делаются по результатам разделения красителей, а подобные ситуации "не типичны для реального хроматографического анализа". Несомненно, окрашенные вещества приходится иссдедовать не столь часто, но я ие нахожу никакой принципиальной разницы между бесцветными соединениями (способными поглощать свет только в ультрафиолетовой области спектра) и окрашенными (которые могут поглощать и в ультрафиолетовой, и в видимой областях). В том и в другом случаях применимы те же самые химические (или физические) законы, значит, могут использоваться и одинаковые способы хроматографического разделения при кдентичности молекулярных масс поведение молекул в хроматографической системе будет кдентичным. Так или иначе, для [c.22]

На приведенных ниже диаграммах сравниваются некоторые хроматографические характеристики линейного и кругового разделения. В качестве основы для сравнения взяты различные величины 2/ элюента. Разделение проводили восходяш,им способом в N-кaмepe с насыщенной атмосферой или в чашке Петри, подавая растворитель к перевернутой пластинке через подводящий фитиль диаметром 2 мм. На рис, 6.1.5 сравнивается разрешение двух пар красителей при разделении линейным и круговым методами с помощью липофильного элюента. В круговом методе пробу наносили в центр пластинки. В обоих случаях величину измеряли от точки подвода растворителя. При разделении двух веществ с высокими значениями например фиолетового и зеленого красителей, разрешение i s (изменяется от 20 до 50 мм) значительно увеличивается в линейном варианте и в меньшей степени в круговом методе. Только при = 20 мм оба метода дают равноценную эффективность разделения. При = = 50 мм соотношение разрешений составляет 5,1 3,4, причем большая величина относится к линейной хроматографии, что соответствует относительному улучшению разделения на 50%.. Этот результат получен при сравнении эффективности разделения двух веществ с меньшими величинами например зеленого и голубого красителей. В последнем случае значительное улучшение разрешения с возрастанием длины пути разде.пения наблюдается в обоих методах. Когда 2/ = 20 мм, разрешение, полученное круговым методом, на 24% выше, чем линейным, но при 2/ -= 50 мм эта величина уменьшается до 3%. Приведенные результаты нодтверн дают хорошо известный факт, что круговую хроматографию лучше использовать для разделения веществ с более низкими значениями [c.140]

Неионообменная порошковая целлюлоза применяется в качестве носителя при распределительной хроматографии и электрофорезе на колонках и в слоях. Целлюлоза используется для хроматографического разделения сахаров, глицеридов, спиртов, фенолов, аминов, карбоновых и аминокислот, пептидов, белков, нуклеиновых кислот, уроновых кислот, липидов, алкалоидов, антибиотиков, гормонов, ферментов, витаминов, гербицидов и инсектицидов, неорганических ионов, красителей, углеводородов и других веществ. Применяется также для электрофореза белков, пептидов, аминокислот, нуклеиновых кислот, нуклеотидов. [c.127]

Влияние толщины слоя на воспроизводимость разделения доказано в работах 69, 86]. В этих же работах показано, что точное соблюдение одинаковых условий при нанесении, сушке и активировании слоев в одинаковой степени сказывается на воспроизводимости значений Яр. Зависимость воспроизводимости хроматографического разделения от толщины слоя показана такл<е и в других работах [21, 33, 34, 40, 41, 98, 99]. Другие авторы изучали влияние зернения силикагеля на воспроизводимость значений Яр и характер разделения веществ [2, 132, 141, 157, 169, 181]. Важным фактором, определяющим воспроизводимость результатов, является активность слоя и соответственно ее контроль [174]. Контроль активности заключается в проведении простой и быстрой операции — в хроматографировании некоторых азокрасителей по их расположению на хроматограмме непосредственно определяется активность [49, 138, 139]. Однако активность слоев еще не является той величиной, которая однозначно определила бы их ад- opбциoннyip способность. Попытка классифицировать отдельные сорбенты по их адсорбционной способности [ИЗ] оказалась безуспешной, поскольку отдельные типы сорбентов отличаются друг от друга величиной поверхностной энергии. Поэтому на основе значений Яр стандартных красителей нельзя сравнить, например, активности силикагеля и окиси алюминия. Активность слоев, на которых компоненты смеси делятся по принципу адсорбции, математически рассчитал Снайдер [133]. Влияние влажности сорбента на воспроизводимость величин Яр изучали многие авторы [6, 29, 50]. Влажности воздуха в момент нанесения образца на хроматограмму приписывают большое значение Даллас [21] и другие авторы [6, 42, 173]. [c.78]

Определение чистоты красителей и разделение их смесей тесно связано с историей хроматографии и развитием ее техники. Впервые БХ была использована в пищевой, фармацевтической и косметической промышленности для контроля чистоты применявшихся нетоксичных красителей. В судебной химии хроматографический анализ стал важным средством идентификации чернил подписей и печатей. Хроматографические методы тщательно разработаны практически для всех групп текстильных красителей, для определения их чистоты, идентификации различных торговых марок и составов смесовых красителей. Имеются также методы идентификации красителей, извлеченных с текстильных волокон. БХ используется для изучения некоторых свойств красителей (субстантивность, эгализация, реакционная способность активных красителей и т. д.) и их деградации или изменений в ходе производства (гидролиз, восстановительное расщепление, термическая деструкция, стереоизомеризация) или после нанесения на тек-стильный субстрат (влияние света, дымов, окончательной отделки текстильного материала). В сочетании со спектроскопическими и другими физико-химическими методами хроматография [c.69]

Большое распространение для оценки активности оксида алюминия получил метод, предложенный Брокманом и Шоддером [16]. По этому методу проводят разделение на данном етрбенте смеси шести различных красителей. Определяется пять степеней активности оксида алюминия, соответствующих содержанию 0 3 6 10 и 15% воды, в зависимости от того, удерживается ли в начале колонки с оксидом алюминия или проходит до конца слоя тот или иной краситель. Подобная схема стандартизации предложена и для силикагеля [17]. Однако такие схемы позволяют лишь отнести адсорбент к той или иной группе активности и не позволяют оценить его активность с точностью, необходимой для стандартизации условий хроматографического разделения нефтепродуктов. [c.27]

Использование хроматографии на бумаге в ее первоначальном виде для разделения встречающихся в природе сложных смесей липидов не было возможным вследствие гидрофильной природы применяемого инертного носителя и неподвижной фазы. Хроматографическое разделение липидов могло быть осуществлено лишь после введения Рамсаем и Паттерсоном [1] в 1948 г. принципа обращенных фаз . В этом методе хроматографируемые вещества растворены в неподвижной гидрофобной фазе и разделяются вследствие непрерывного распределения между нею и подвижной гидрофильной фазой. В 1950 г. Болдинг [2] употребил для разделения метиловых эфиров высших жирных кислот обработанную вулканизованным латексом бумагу и смесь равных объемов ацетона и метанола в качестве растворителя однако после погружения хроматограммы в растворы липофильных красителей пятпа были плохо различимы на интенсивно окрашенном фоне. Высшие жирные кислоты этим методом не могли быть разделены. Ранние работы по хроматографии липидов на бумаге приведены в обзоре Хольмана [3]. [c.347]

Эндрес и соавт. [359] попытались выявить закономерности сорбции красителей, отличающихся числом сульфогрупп, на полиамиде в условиях колоночной хроматографии. Ими было отмечено, что с увеличением числа сульфогрупп в молекуле красителя увеличивается его подвижность на полиамиде в водной системе. Этот факт послужил основанием для вывода о том, что сульфогруппы не являются ответственными за сорбционное связывание с полиамидом. Однако в последующих работах Ванг [708] и Давидек [334] постоянно отмечают, что именно эти группы участвуют в образовании водородных связей с полиамидом. По-видимому, вывод Эндреса и соавт. [359] действителен для случая, когда используется в качестве подвижной фазы вода, и тогда хроматографическое разделение происходит не как адсорбционный, а как обращенно-фазовый распределительный процесс. Замена водной системы менее полярными органическими растворителями приводит к преимущественному проявлению роли сульфогрупп в адсорбции на полиамиде. [c.117]

Работы по тех активных красителей посвящены хроматографическому разделению свободных красителей, т. е. в несвязанном состоянии. До сих пор непреодолимые трудности стоят на пути выделения активных красителей с текстильных волокон. Обычно для разделения активных красителей метод ТСХ более эффективен, чем хроматография на бумаге. Вследствие субстантивности активных красителей к целлюлозе их миграция по бумаге затруднена, но это не мешает их движению при ТСХ. Условия для тех активных красителей на силикагеле Г приведены в табл. 2.6. Элюент 1 применяли для разделения проционов (I I), [c.48]

Хроматографическое разделение анионных красителей более эффективно на сильно- или умеренноосновных анионообменных бумагах типа ватман ОЕ 20 и ЕТ 20, чем на немодифицированной целлюлозной бумаге. [c.71]

Механизм хроматографического разделения дисперсных красителей в водном пиридине можно объяснить адсорбцией или распределительной хроматографией, где имеет место разделение на две водные фазы. Здесь имеется аналогия с системами на основе водных спиртов [1а]. Консден также объяснил механизм действия однофазной водной системы растворителей образованием двух фаз — см. Мартин, Моот и Штайн в [5]. Симметричная форма пятен разделенных красителей на хроматограмме и независимость Яр от концентрации красителей, когда используются пиридиновые системы растворителей, согласуются с принципами распределительной хроматографии. [c.86]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология