Выход (к. п. д.) при препаративном хроматографическом разделении

Детальное обсуждение достоинств различных методов, используемых для фракционирования полимеров, выходит за рамки данной книги. Большинство этих методов достаточно сложно и требует длительного времени, причем число получаемых при разделении фракций в значительной степени зависит от продолжительности фракционирования. Следует различать препаративное фракционирование, когда осу-щ,ествляется разделение полимера на фракции с последующим определением молекулярной массы каждой фракции, и аналитическое фракционирование, при котором определяется молекулярно-массовое распределение без выделения каждой отдельной фракции. В первой группе методов следует упомянуть новую быструю методику фракционирования с помощью гель-проникающей хроматографии. В этом методе разделения используется хроматографическая колонка, в которой в качестве стационарной фазы применяют пористый набухший полимер сетчатого строения. По мере прохождения полимерного раствора по колонке молекулы полимера диффундируют через гель в соответствии с их размерами. Молекулы небольшой длины глубоко проникают в гель, и, следовательно, для их прохождения через колонку тре- [c.239]

Выход (к.п.д.) при препаративном хроматографическом разделении. Рассчитывается по формуле [c.174]

Современное развитие химических и биологических наук истребовало более глубокого проникновения в существо изучаемых процессов, детального анализа химического состава разнообразных смесей и биологических объектов. Кроме того, для химического и биотехнологического ироизводства, в том числе для промышленности лекарственных средств, характерны постоянное возрастание требований к чистоте выпускаемых продуктов, ужесточение методов контроля, тенденция к использованию количественных критериев ири оценке качества. Поэтому помимо оценки интегральных характеристик, присущих объекту исследования в целом, часто требуется детальное изучение содержания отдельных компонентов, определяющих состояние биологических систем либо качество химических продуктов. Рещение этих задач, как правило, невозможно без применения достаточно эффективных методов разделения сложных смесей. Среди таких методов доминирует хроматография. Бурно развиваясь в последние десятилетия, этот метод открыл возможности разделения смесей, содержащих десятки и сотни компонентов, их качественного и количественного анализа, препаративного выделения индивидуальных веществ. Принципы хроматографии весьма универсальны, благодаря чему она оказалась пригодной для изучения объектов самой различной природы — от нефти и газов атмосферы до белков, нуклеиновых кислот и даже вирусов. Этим объясняется огромный интерес представителей различных научных и технических дисциплин к хроматографическим методам. Только в пяти специализированных международных журналах по хроматографии ежегодно выходит в свет свыше 2000 публикаций ио различным вопросам теории и применения метода, общее же их число в несколько раз больше. [c.5]

Препаративная хроматография имеет своей целью получить некоторые или все компоненты разделяемой смеси в очищенном виде для дальнейшего исследования или использования. В этом случае каждая из разделенных зон после выхода из хроматографической системы должна попасть в отдельный приемник. При наличии непрерывного контроля за выходящей из системы подвижной фазой можно менять приемники после окончания выхода из системы каждой зоны. При жидкостной хроматографии, особенно при разделении очень сложных смесей биополимеров, для обнаружения компонентов приходится проводить специальный анализ проб выходящего из колонки элюата. В этом случае целесообразно собирать элюат в отдельные небольшие фракции и после анализа содержимого каждой из фракций объединять те, которые содержат интересующие экспериментатора вещества, и подвергать их последующей обработке. [c.343]

В некоторых хроматографах поток газа-носителя отсасывают непосредственно из детектора или ловушки вакуумным насосом. При этом можно работать с пониженным или повышенным давлением у входа в колонку. Использование вакуума удобно при хроматографировании термически нестойких веществ, так как пониженное давление в колонке позволяет работать при более низких температурах. При препаративном разделении высококипящих веществ применением вакуума можно предотвратить конденсацию фракций в промежутке между колонкой и ловушкой. Условием успешного применения вакуума является очень малое сопротивление хроматографической колонки току газа-носителя и полная герметичность всей аппаратуры. Источником вакуума может служить водоструйный или масляный насос. Для поддержания постоянного вакуума при входе в колонку служит маностат или игольчатый вентиль. Давление у входа в колонку и у выхода из колонки обычно измеряют ртутными манометрами, которые включают перед колонкой и за детектором или ловушкой. Соединение входа в колонку с выходом из колонки посредством и-образного ртутного манометра позволяет непосредственно отсчитывать перепад давления в колонке. Расход газа-носителя контролируют расходомерами, которые при работе под вакуумом обычно помещают перед входом в колонку. Следует отметить, что применение вакуума, не улучшая существенно условий хроматографического разделения, значительно усложняет конструкцию прибора. [c.508]

При экстрагировании диэтиловым эфиром азотнокислого раствора нитратов суммы редкоземельных элементов в эфирную фазу переходит только церий с выходом 90—95% от содержания церия в исходной смеси. Церий, извлеченный из эфирной фазы, является спектрально чистым. Простота и быстрота выполнения операций экстрагирования, вместе с возможностью получения таким способом спектрально чистого продукта, позволяют рекомендовать данный метод для препаративных целей. С другой стороны, экстракционное извлечение церия из суммы редкоземельных элементов значительно упрощает хроматографическое разделение оставшейся смеси. [c.126]

В некоторых препаративных газовых хроматографах перенос образца из резервуара в инжектор осуществляется автоматически. Для этого обычно либо используют поршневой насос, либо отбирают пробу определенного объема из сосуда, в котором она содержится, с помощью давления. Однако в большинстве случаев лабораторных разделений в распоряжении исследователя имеется достаточное количество разделяемого материала и можно обойтись ручным вводом с помощью шприца. При этом существуют два способа быстрое предварительное испарение образца и ввод непосредственно в колонку. С точки зрения теории предпочтительным является импульсное введение с предварительным быстрым испарением пробы. Однако практические соображения приводят часто к необходимости ввода пробы прямо в колонку. При увеличении объема пробы испаритель обычного типа не может за короткое время сообщить пробе количество тепла, достаточное для ее полного испарения. В результате зона образца на выходе из инжектора имеет примерно экспоненциальный характер. Применение давления в обратном направлении часто вызывает остановку потока. Все эти факторы приводят к тому, что хроматографическая полоса на входе в колонку расширяется больше, чем при введении пробы [c.91]

Основным элементом препаративного хроматографа является хроматографическая колонна, от эффективной работы которой зависит успех разделения. В подавляющем большинстве хроматографов в качестве колонн используют прямые цилиндрические металлические трубки, заполненные насадкой, которые соединяются между собой У-образными пустыми переходами меньшего диаметра. Для предотвращения заполнения насадкой переходов в нижней части колонн размещают металлические сетки. Соединительные переходы являются перераспределителями, облегчающими выравнивание концентраций в радиальном направлении и повышающие эффективность колонны. Поэтому длину отдельных секций колонн целесообразно брать не больше 1 м. Нет никаких точных рекомендаций относительно диаметра переходов, однако в большинстве случаев он составляет Д—7в от диаметра колонны. Прямые участки колонн диаметром 15 мм и более заканчиваются конусными переходами, причем угол конуса не оказывает существенного влияния на эффективность (во всяком случае при изменении его от 30 до 90°). Конус на выходе следует заполнять насадкой, чтобы избежать большого мертвого объема , тогда как входной конус лучше заполнять лишь частично (приблизительно на 80%). Кроме такой, наиболее распространенной конструкции колонн, в литературе описаны и другие конструкции. Спиральные и П-образные колонны большого диаметра использовать не рекомендуется, так как в них возникает дополнительное размывание полосы вследствие неодинакового пути движения и разной скорости компонента по наружной и внутренней части изгиба [c.127]

Времена выхода компонентов, отсчитываемые от момента ввода пробы до момента регистрации верщины пика, или, иначе, объемы подвижной фазы, затраченные на перенос через колонку каждого компонента, дают качественную характеристику анализируемых веществ. Сопоставление площадей (или высот) хроматографических пиков позволяет с высокой точностью выполнять количественные определения. Кроме качественных и количественных определений рассмотренная методика позволяет проводить препаративное выделение и очистку любого содержащегося в анализируемом образце вещества, поскольку имеется принципиальная возможность осуществить полное разделение всех компонентов смеси. [c.22]

В случае разделения смесей вещесгв, обладающих достаточной летучестью, чтобы их можно было зафиксировать детектором в момент их выхода из хроматографической колонки, пробу исследуемой смеси вводят в колонку в парообразном состоянии или жидком с помощью шприца или специального дозирующего устройства. Объем пробы зависит от чувствительности детектора. Для аналитических целей он колеблется в пределах 0,01—10 мкл. Для препаративных целей, т. е. когда используют газовую хроматографию для получения индивидуальных веществ в чистом виде, объем пробы зависит от размеров колонки и составляет 0,1 г и более вплоть до килограммов и тонн, как об этом сообщается в новейшей оригинальной и патентной литературе. Предел температур кипения веществ, которые можно разделять методом газовой хроматографии, составляет практически от —200 до 400° С. С развитием техники газовой хроматографии и по мере появления ее новых вариантов этот предел продолжает расширяться. [c.22]

Этот способ синтеза представляет собой, по существу, метод Картера и Веста [1], который выбран с целью оценки возможности хроматографического разделения двух диастереоизомеров. Если вместо кротоновой кислоты в методе Веста, Крум-мела п Картера [3] применять изокротоновую кислоту, то выход треонина [2] возрастает от 30—33% До 52—55%. С чисто препаративной точки зрения получение аллотреонина [4] с последующим его превращением [5] в треонин, по-видимому, более удобно. [c.197]

ЩИМИ ВЫХОД в данном разделении, служат нагрузка и время. Подобно многим другим переменным, которые рассматривались до сих пор, они являются взаимозависимыми с точки зрения компромисса, необходимого при оптимизации системы разделения (рис. 1.2). Если скорость потока подвижной фазы (объем в единицу времени) и объем системы остаются постоянными в ходе разделения, то, как было показано в разд. 1.3.1 и проиллюстрировано рис. 1.4, объем можно выразить непосредственно через время удерживания. Важно отметить вышеуказанное условие, так как, например, может изменяться подача насоса или сжиматься или набухать (как ионообменные слои при градиенте соли) слой в хроматографической колонке. В любом случае в крупномасштабной препаративной ЖХ время, необходимое для осуществления разделения и полного элюирования всех интересующих нас компонентов и приготовления колонки для последующего использования (путем промывания, установления равновесия и так далее), вносит вклад по крайней мере в два [c.40]

При аналитической ректификации на достаточно эффективной колонне можно успешно разделить большую часть фенолов, кроме особо близко кипящих. Между собой фенолы не образуюг азеотропных смесей и поэтому принципиальные ограничения длят ректификации смеси фенолов не существуют. Узкие фракции фенолов подвергаются хроматографическому разделению при использовании газо-жидкостной хроматографии с препаративной приставкой. В этом случае снимаются инфракрасные спектры веществ, отвечающих отдельным пикам. Эффективно также использование хроматографов, объединенных с масс-спектрометра- ми. В этом случае идентификация отдельных фенолов осуществляется по сопоставлению времени выхода фенола и его масс-спектра. [c.59]

Чтобы Проиллюстрировать эффективность этого метода можно привести данные о разделении 1 г смеси цис- и транс-гептенов-3 (разница т. кип. изомеров равна 0,2 °С) при 75 ""С в колонке с алюминием, обработанным нитратом серебра [13]. Через 27 мин после ввода пробы из колонки в течение 30 мин выходил транс-изоыер чистотой более. 99%, а затем в течение такого же времени выходил 1 мс-изомер. В работе [14] сообщается об успешном хроматографическом разделении в двухметровой колонке смеси нафтенов, - и изопарафинов. В настоящее время трудно указать ограничения для применения препаративной хроматографии. Практически любое вещество можно выделить из смеси, подобрав соответствующие неподвижную фазу, газ-носитель и длину колонки, если количество этого вещества в разделяемой пробе достаточно (не ниже 0,05—0,1 г). [c.208]

Сравнение метода ловушек (рис. XI. 3, а) с методами, в которых используют растворитель (рис. XI. 3, б) и газовые кюветы (рис. XI. 3, в), ясно показывает, что сочетание хроматографического разделения и препаративной техники инфракрасной спектроскопии повышает выход улавливания продуктов на 30—40% при лучшей воспроизводимости результатов измерений [17]. При применении для улавливания растворителей или газовых кювет достигается экономия как в продуктах разделения, так и во времени. [c.257]

Развитие методов улавливания хроматографически разделенных веществ значительно повысило полезность препаративной ГЖХ в изучении жиров, парафинов и фосфолипидов. Примеры получаемых при этом веществ приведены в работе Хаммарстранда с сотр. [129]. Так, средний выход для 1-метилпальмитата- С был равен 92%, [c.313]

Схема изготовленной нами препаративной установки представлена на рис. 1. Регистрирующей основой установки являлся хроматограф ХТ-2МУ. Хроматографическое разделение конденсата циркуляционного газа производства нитрила акриловой кислоты осуществлялось на колонне длиной 6 Л4 и диаметром 32 мм, состоящей из шести стеклянных секций длиной 1 м каждая, соединенных последовательно и-образными трубками диаметром 4 мм. Колонна заполнялась диатомито-вым кирпичом ИНЗ-600 (фракция 0,25—0,50 мм) с нанесенным на него дибутилфталатом в количестве 20% от веса кирпича. В качестве газа-носителя использовался азот, скорость которого на выходе из колонны составляла 50 л/час. [c.152]

Как и газовый, жидкостный аналитический хроматограф представляет собой совокупность взаимодействующих систем, предназначенных для проведения анализа в оптимальном режиме хроматографического разделения. Блок-схема прибора представлена на рис. III.1. Резервуар с подвижной фазой и система подачи элюента, а также насос, который должен обеспечивать поток подвижной фазы со скоростями от нескольких мкл/мин для колонок малого диаметра до 10 мл/мин для наполненных колонок, обычно объединены в один блок. Насос подает подвижную фазу в колонку через кран-дозатор с объемом сменных дозирующих петель от 0,1 до 100 мкл и более. Разработаны модели с автоматизированной системой ввода пробы. На входе в колонку, как правило, устанавливается дополнительный узел ввода пробы для дозирования порции анализируемого образца микрощприцем типа МШ-10. В состав многих моделей жидкостных хроматографов последних лет выпуска входят системы термостатирования колонок. Выход колонки соединен с детектором и коллектором фракций. Особенностью жидкостной хроматографии является то обстоятельство, что она почти всегда сочетает разделение с препаративным выделением разделенных фракций. [c.174]

Для того чтобы хроматограф ХЛ-2 мог быть использован для препаративных работ, должны быть увеличейы размеры хроматографических колонок (см. стр. 61). Кроме того, необходимо предусмотреть приспособление для удаления из бюретки фракции чистого газа, время выхода которого из колонки известно при постоянных услобиях разделения газовой смеси на колонке. - [c.71]

В этом варианте в колонку или па стартовую линию хроматографической пластинки наносят определенную порцию раствора исходной смеси веществ, а затем ведут элюцию раствором вещества, обладающего заведомо большим сродством к неподвижной фазе хроматографической системы, чем любой из компонентов смеси. Происходит вытеснение их пз неподвижной фазы, причем в первую очередь тех, которые обладают меньшнм сродством к сорбенту, а затем и всех остальных. Элюеит выталкивает все компоненты смеси впереди себя наподобие поршня. Так как они выходят в подвижную фазу концентрированными, то между ними также идет конкуренция за связь с неподвижной фазой. Компоненты, уступающие другим в силе сродства к этой фазе, оттесняются еще вперед, где сорбируются, но только до тех пор, пока их опять не вытеснят компоненты, обладающие большим сродством к сорбенту. В результате такого чередования сорбции и вытеснения компоненты смеси будут выходить из колонки один за другим в порядке возрастания силы их связи с неподвижной фазой. Ясно, что при этом зоны соседних компонентов будут соприкасаться или даже немного перекрываться друг с другом. Для аналитического фракционирования метод непригоден, но хорош для препаративного или полупромышленного разделения веществ, поскольку емкость колонки здесь используется очень эффективно. [c.12]

ГО разделяемого материала крайне необходима в промышленных процессах. Но использование метода ЖХ для разделения больших количеств сопряжено с определенными трудностями. Довольно ограниченная емкость хроматографических сорбентов означает, что чрезмерное увеличение нагрузки колонки ухудшает ее разделительную способность. В то же время размеры хроматографической колонки нельзя увеличивать до бесконечности, поскольку это приводит к возникновению других проблем, таких как проблема нанесения пробы, появление нежелательных мертвых объемов и т. д. В хроматографии всегда необходимо находить компромиссные решения. Изложенная ситуация часто изображается схемой, приведенной на рис. 9.1. Этот треугольник показывает, что если мы хотим увеличить емкость, то жертвуем скоростью и(или) разрешением. В общем случае, для того чтобы работать в линейной области изотермы сорбции, количество вещества, вводимого на колонку с обычной емкостью, не должно превышать 1 мг на 1 г сорбента. Следовательно, на препаративной колонке, содержащей 1 кг сорбента, можно разделить без заметного ухудшения ее разделительной способности пробу, масса которой не превышает 1 г. Вводимое количество можно увеличить, но только до такого уровня, при котором эффективность колонки и ее разрешение еще обеспечивают необходимый выход продукта желаемой оптической чистоты. Табл. 9.1 дает представление о величине пробы для колонок различных размеров. [c.226]

Циркуляция служит приемом, который используют в препаративной ЖХ для того, чтобы увеличить длину хроматографического слоя и избежать затрат на покупку и использование длинных колонок или дополнительных секций для колонок. На практике этого достигают путем добавления крана в гидравлическую систему, который позволяет направлять элюент или некоторые его определенные части из выхода колонки назад, на вход колонки (см. разд. 1.7.2.2). Сложные образцы, особенно содержащие сильноудерживающиеся компоненты, для элюирования которых может потребоваться ступенчатый или непрерывный градиент, обычно не подходят для использования метода циркуляции. Образцы такого типа лучше всего фракционировать на ранних стадиях методами, позволяющими разделять соединения по классам, как отмечено в разд. 1.2.3. Затем на более поздних стадиях выделения очень мощным средством разделения соединений может быть метод циркуляционной ЖХ, позволяющей проводить разделение при низких а (<1,3), когда в образце содержится много соединений, присутствующих в небольших количествах. [c.42]

Полное обсуждение вопросов автоматизации препаративных ЖХ-систем выходит за рамки этой главы. Имеются коммерческие системы, которые позволяют автоматизировать подачу растворителя, создание градиента, введение образца, контроль разделения и сбор фракций (в том числе и компаний, перечисленных в табл. 1.9). Была проведена большая работа по масштабированию ЖХ-систсм, особенно в областях конструирования непрерывных хроматографических процессов, перекрывающегося дозироваиия и других альтернативных систем (для более детального ознакомления ом. [31, 188, 198—212], гл. 3 в этой книге и приведенные в ней ссылки). Следующее поколение мощных персональных компьютеров и компьютерных станций, несомненно, даст мощный толчок развитию методов управления и контроля препаративным ЖХ-системам, включая извлечение образца и регенерацию растворителя, и даже приведет к дистанционному управлению из мест, удаленных от опасной среды, лабораторий и заводов, аналогично полному управлению приборами аналитических лабораторий, которое сейчас становится обычным. [c.120]

Не меньшее значение имеют методы ТФХБТ для получения высокоочищенных веществ из продуктов микробного синтеза. Попытка ограничить эту задачу и рассматривать ее в качестве дополнительной химической очистки на основе использования известных, традиционных методов и процессов препятствовала получению больших выходов высокоочищенных препаратов, свободных от близких к основному продукту побочных, часто токсичных, веществ. Создание общих теоретических концепций препаративного разделения сложных смесей веществ и развитие современных методов ТФХБТ позволили как улучшить степень очистки, так и удешевить препаративные методы и технологические процессы. В связи с этим методы ТФХБТ, в том числе рассматриваемые здесь сорбционные и хроматографические методы, приобрели в последнее время исключительно большое значение в области получения как лекарственных веществ, так и биохимических препаратов, предназначенных для аналитических целей, а также для проведения исследовательских работ. [c.7]

Очистку изопропилового спирта проводили на фазах разной избирательности (табл. 3). Ни на одной из них, даже на оптимальной ТЭГ, не удалось получить хроматографически чистого продукта. При этом на ТЭГ достигли наиболее благоприятных условий для препаративного разделения — все примеси выходят до основного компонента (рис. 5— 7). Степень чистоты спирта удалось повысить на, нем до 0,008% лишь за счет отбора более узкой фракции, т. е. применить метод, более пригодный для неселективных фаз. На остальных фазах, включая наименее избирательный к спиртам апиезон-Ь, достигнута степень очистки, превышающая квалификацию ос. ч. . [c.28]

Смотреть страницы где упоминается термин Выход (к. п. д.) при препаративном хроматографическом разделении: [c.293] [c.325] [c.4] [c.215] [c.115] [c.115] [c.124] [c.173] [c.176] [c.109] [c.74] [c.229] [c.229] [c.212] [c.16] [c.198] [c.25] [c.115] [c.198] [c.121]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология