Моча, хроматографический анализ

Аминокислоты следует по возможности освободить от сопутствующих примесей. Если проводят контрольный опыт для сравнения величин то применяют набор чистых аминокислот, который в настоящее время имеется в продаже , и готовят из них растворы, содержащие в 1 мл по 1 мг каждого из исследуемых веществ. Растворителем служит преимущественно вода с добавкой около 10% к-пропанола такие растворы сохраняются в холодильнике и даже при комнатной температуре в течение 2—4 недель. Труднорастворимые аминокислоты тирозин и цистин растворяют в 0,1 н. соляной кислоте. Наносят 0,5 или 1 цл раствора, что соответствует 0,5 или 1 лг аминокислоты. При применении солянокислых эталонных растворов рекомендуется подкислять также неизвестные анализируемые пробы и перед хроматографическим анализом в течение 15—20 мин обдувать пластинку воздухом для удаления избытка соляной кислоты. В методе хроматографии на бумаге обычно принято соляную кислоту нейтрализовать парами аммиака. При этом, однако, необходима осторожность. Аммиак сравнительно легко удерживается силикагелем, в результате чего при применении нейтральных растворителей возникает опасность проведения анализа в более или менее щелочной среде. Аминокислоты в кислом белковом или пептидном гидролизате (см. ниже) почти всегда существуют в виде гидрохлоридов. Их раствор в воде соответствует приблизительно 0,1 н. раствору соляной кислоты. Аминокислоты в экстрактах из животных и растительных тканей и в таких жидкостях, как моча, сыворотка и т. д., перед нанесением необходимо отделить от примесей и осуществить хроматографический анализ в виде ДНФ-ами- [c.395]

Хроматографический анализ аминокислот, выделяемых с мочей [250]. [c.219]

При экстракционно-хроматографическом анализе суточного количества мочи (около 1250 мл) для уменьшения объема пропускаемой через- колонку жидкости можно использовать соосажде-ние радиоактивных элементов с фосфатами кальция и магния. В некоторых случаях для уменьшения объема образца мочи ее в течение необходимого времени кипятят с азотной кислотой. [c.366]

ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОГО АНАЛИЗА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ В КРОВИ И МОЧЕ [c.341]

Соответственно с накоплением знаний о метаболизме аминокислот для нужд клинического анализа появляется необходимость не только в увеличении скорости хроматографического анализа, но и в накоплении количественных данных о содержании аминокислот в цереброспинальной жидкости человека [72], свободных аминокислот в спинномозговой жидкости [73], свободных аминокислот в крови п моче [6, 74, 75] и свободных аминокислот в плазме крови новорожденных [76]. [c.13]

В моче человека, соприкасающегося с бензидином, обнаружено методами хроматографического анализа более 50 продуктов метаболизма, представляющих собой ароматические амины или их производные. [c.9]

Методы регистрации профилей метаболитов рассмотрены в обзоре [245 Хроматографические методы, которые применя лись ранее, последовательно заменяются методом ГХ—МС и, в конечном счете, методом ГХ—МС—ЭВМ Профили для боль шого числа метаболитов были определены при анализе мочи с применением методов ГХ—МС—ЭУ и ГХ—МС—ХИ [246] Описанная в работе [247] система ГХ—МС—ЭВМ позволя ет получить информацию о 500—800 метаболитах в образцах, выделенных из сыворотки крови и мочи Эта скрининговая си стема служит для определения профилей метаболитов В основе лежит использование 8 различных ГХ систем, обеспечивающих разделение смеси на 600—800 хроматографических пиков, ана лизируемых масс спектрометром соединенным с компьютером, в памяти которого хранится более 25 000 спектров, причем вре мя выбора полного аутентичного масс спектра составляет 7 с Разработанная система позволяет определять около 40 известных врожденных нарушений обмена Некоторые из них были откры ты с помощью данной системы и затем подтверждены клиниче скими методами (табл 3 3) [c.187]

Этот хроматографический метод был первоначально разработан для анализа мочи, плазмы крови, тканевых экстрактов и Других физиологических жидкостей. Однако данный метод можно использовать и для других объектов, содержащих подобные [c.33]

Одновременно разрабатывалась методика анализа аминокислот и других чувствительных к нингидрину соединений в физиологических жидкостях. Гамильтон [8] разработал систему высокого разрешения для таких жидкостей и получил более 175 хроматографических пиков чувствительных к нингидрину компонентов в одном образце мочи хроматографирование длилось около двух дней. [c.233]

Метод мол<ет быть использован в анализе любых животных тканей. При анализе мочи или крови возможны значительные упрощения. Не требуется производить хроматографической очистки на колонке с окисью алюминия. Достаточно осадить белки трихлоруксусной кислотой, экстрагировать фильтрат бензолом, упарить раствор и произвести хроматографию на бумаге, как описано. [c.239]

Диамантштейн и Эрхарт [5] использовали этот метод для обнаружения в моче продуктов обмена триптофана, например у больных хронической миелозой, которым давали триптофан. Они наносили 50—80 мм пробы мочи и проводили хроматографический анализ, используя в большинстве случаев восходящий метод и кислый растворитель (Зр, см. стр. 298). Предварительное концентрирование мочи не требуется. Природные неорганические и органические компоненты мочи не оказывают влияния на величины Rf. [c.303]

Ин виво можно обнаружить метаболиты введенных в организм лекарственных веществ и ядов, выделяемых с мочой и калом, а также выделяемых в кровь. Хроматография позволяет выполнять и количественные определения, однако с погрешностью от 10 до 15%. Хроматографический анализ позволяет судить о патологических изменениях и биохимических функциях поврежденных и здоровых органов. Например, было установлено, что терапевтическое действие сульфамидных препаратов зависит также и от быстроты десорбции продуктов их расщепления в кровеносной системе. При колориметрическом определении какого-либо органического вещества часто мешают другие сопутствующие и балластные вещества , имеющие иногда ту же окраску. В этом случае хроматография позволяет пространственно разделить все эти вещества, что значительно повышает специфичность анализа, позволяя определять выделенное хроматографически индивидуальное соединение колориметрированием или полярографированием. [c.341]

Для хроматографического анализа катехинов мочу насыщали Na l, извлекали этилацетатом и этилацетатный экстракт после сгущения и растворения остатка в этаноле наносили на бумагу. На радиоактивность исследовали следующие органы или ткани печень, почки, надпочечники, селезенку, сердце, щитовидную железу, грудную мышцу, кожу (с уха и лапок), а также кровь. Ни в одном из опытов не удалось найти значительного накопления радиоактивности в какой-либо из проб. При 8-часовой экспозиции незначительная активность была обнаружена в селезенке (около 0,5% от введенной), при 20-часовой экспозиции — в надпочечниках и в крови (0,1—0,2%). [c.240]

Метод хроматографического анализа ыа фильтровальной бумаге позволяет достаточно быстро произвести качественную и грубоколичественную оценку аминокислот в моче. Было показано, что в ы оче нормального человека содержится около 30 различных аминокислот и столько же их производных (вероятно, пептидов). При некоторых поражениях печени и почек количество аминокислот, выделяемых с мочой, сильно меняется (Дэнт). [c.461]

Поскольку в физиологических жидкостях (кровь, моча, тканевые экстракты) содержится значительно большее разнообразие нингидринположительных веществ по сравнению с белковыми гидролизатами, приходится применять иные, более напряженные условия хроматографического анализа на 150-сантиметровой колонке для разделения кислых и нейтральных аминокислот, [c.135]

Метод АРП устраняет недостатки прямого введения в хроматографическую колонку анализируемых образцов крови и в настоящее время является общепринятым [28—30]. Следует заметить, что принцип АРП для определения спирта в крови и моче был использован в сочетании с химическими методами анализа в работах Харгера с соавторами еще в 1950 г. Хотя предложенная методика с появлением газовой хроматографии утратила свое значение, измеренные значения коэффициентов распределения этилового спирта между воздухом и водой, цельной кровью, мочой представляют определенный интерес и в настоящее время. Эти величины приведены в табл. 3.2, из которой следует, что коэффициенты распределения для цельной крови на 25%. а для мочи на 8—9% меньше, чем у воды, причем отношение значений К в изученном интервале температур сохраняется неизменным. Особый интерес представляют данные Харгера с соавторами по измерению коэффициентов распределения этилового спирта в различных образцах цельной крови, в том числе с отклонениями от нормы. В результате таких измерений показано, что изменение значений К не превышает 5—10%. [c.123]

Для хроматографического разделения следовых количеств и(VI) и ТЬ(1У) использовали систему ТОФО — минеральная кислота. ТОФО, нанесенный на стеклянный порошок, использовался для сорбции урана (VI) из раствора мочи, подвергнутой частичному ферментативному разложению [53] ТОФО вместе с ураном элюировался спиртом. Аналогичный метод использован в улучшенной модели полуавтоматического прибора для анализа мочи на содержание урана [54]. Опубликована серия статей [55—57], посвященных методам выделения тория и урана из биологических объектов и их разделению на основе разной способности ТОФО экстрагировать эти актиноиды из сернокислого раствора [55]. После разложения (минерализации) мочи при помощи перекиси водорода и азотной кислоты торий и уран сорбируют из 4 М раствора НЫОз на колонке с ТОФО, нанесенным на микротен (микропористый полиэтилен) с размером зерен 100—170 меш США. Торий(1У) элюируют 0,3 М Н2304, уран(У1) —1 М НР [56, 57]. Извлечение при помощи ТОФО на микротене в статических условиях особенно удобно при серийных анализах мочи, поскольку этот метод очень прост и требует мало времени при выполнении анализа раствор минерализованной мочи перемешивают с твердым экстрагентом, а затем переносят полученную суспензию в хроматографическую колонку для последующего элюирования. Методика подробно описана в гл. 10. [c.270]

Примеры аналитической хроматографии в системе твердое тело—жидкость (с высокой, средней и низкой скоростью анализа) приведены в разд. П1 данной главы. Здесь же хотелось бы упомянуть многоколоночную хроматографическую систему с высокой разрешающей способностью, разработанную Вестергаар-дом с сотр. [13]. Анализ по методу Вестергаарда проводится со средней или низкой скоростью, однако высокая разрешающая способность, большое число автоматизированного вспомогательного оборудования позволяет применять этот метод для большого числа ежедневных серийных анализов стероидов, содержащихся в моче (более 100 анализов в день). Для этого метода [c.215]

Серийные анализы 17-кетостероидов мочи были успешно проведены Вестергаардом и Якобсеном [17] с применением многоколоночной хроматографической системы, описанной в разделе, посвященном хроматографии стероидов в системе жидкость— жидкость. [c.230]

В отношении анализа мочи О. С. Лобахиной были изучены возможности хроматографического варианта определения мочевины, мочевой кислоты, белков, тирозина, уробилина как на хроматографической бумаге, так и на колонках из окиси алюминия и силикагеля, по тем же реакциям. Вполне однозначные результаты были получены для реакций на белок с п-диметиламинобензальдегидом, на тирозин по реакции Милона, на уробилин по альдегидной реакции. [c.344]

Сведения о реакциооно-хроматографическом определении оксидов азота можно найти также в обзорах [207—209]. Анализ материала, изложенного в этой главе, позволяет считать реакционную газовую хроматографию наиболее предпочтительным методом для определения примесей оксидов азота. Высокая селективность, низкий предел обнаружения и высокая точность позволяют использовать методики подобного рода для определения оксидов азота в самых различных объектах (газах, воздухе, крови, слюне, моче, воде и др.). [c.370]

Одним нз основных объектов хрОхматографии на бумаге явились с самого начала различные аминокислоты, пептиды и белки. На примере разделения аминокислот была разработана техника распределительной хроматографии отбор проб для анализа, получение и проявление хроматограммы, состав растворителей, и установлена определенная зависимость между структурой аминокислоты и их хроматографическими характеристиками при различном химическом составе и соотношении растворителей в их смеси. Было изучено разделение различных производственных аминокислот, комплексных соединений с катионами металлов, определение аминокислот в микробиологическом материале, после гидролиза, в растительном материале, в тканях животных, в крови, плазме, сыворотке крови, кровяных тельцах, моче, лимфе, эксудатах, спинномозговой жидкости, жидкости глазной камеры, желудочном соке, сперме, молоке, в органах, мускулах, в насекомых, животных, хромозомах, нуклеопротеинах, гисто-нах, протаминах, кератине, при различиях в группах крови и в других объектах. Хроматография помогла также при изучении энзиматических реакций и метаболизма аминокислот, галогени-рованных аминокислот и в других случаях. [c.202]

Комбинированный метод ГЖХ—МС высокого разрешения менее развит, чем метод ГЖХ—МС низкого разрешения. При необходимости получить масс-спектр высокого разрешения в настоящее время обычно собирают соответствующее вещество, выходящее из хроматографической колонки, и затем уже проводят его масс-спектрометрический анализ. Такая процедура описана, например, в работе Тама и сотр. [86]. Авторы этой работы выделяли некоторое вещество из мочи больных, получивших сильные ожоги. С помощью комбинированного метода ГЖХ—МС они установили, что молекулярный вес этого вещества (в форме метилового эфира) равен 143. Для получения более определенной информации они очищали это вещество с помощью ГЖХ и затем проводили его анализ с помощью масс-спектрометрии высокого разрешения. В результате для метилового эфира этого вещества эмпирически была установлена формула СбНдЫОз. Это, а также другие данные, полученные с помощью ГЖХ и ТСХ, позволили идентифицировать неизвестное вешество как пироглутаминовую кислоту. [c.295]

На рис. 9.16 представлены результаты применения этого метода к анализу экстрактов мочи собаки, которая получала с пищей меченый гистидин. Основная радиоактивность и масса разделенных веществ сосредоточены в хроматографической полосе имидазолуксус-ной кислоты (МУК). Хроматографические полосы 1,4-МИУК и [c.320]

Анализ химических соединений биологического происхождения, в частности в биологических жидкостях (кровь, моча и др.) и тканях, требует для их выделения, очистки, разделения, идентификации и количественной оценки применения комбинированных методов. Одним из таких комбинированных методов является сочетание различных вариантов хроматографической техники (жидкостной и газовой хроматографии) со спектрофлуорометрией, названное хро-мато-спектрофлуорометрией. [c.100]

Хроматографическое разделение различных бензодиапинов было проведено Скоттом [9]. Такой анализ был необходим для исследования метаболизма наркотиков. Вещества экстрагировали из мочи этилацетатом. После того, как концентрация этилацетата становилась равной Vio первоначального объема, вводили пробу в колонку, в качестве наполнителя которой использовали DuraPak OPN. Для анализа необходима колонка из нержавеющей стали длиной 100 см и внутренним диаметром 1 мм за- [c.217]

Особенно успешно применяют газовую хроматографию для определения следов металлов после экстракции их трифторацетилацетоном. Применение высокочувствительных детекторов, таких, как ПФД, ЭЗД и масс-спек-трометр, позволяет проводить надежное определение пикограммовых количеств бериллия,, хрома и алюминия. Особенно плодотворным оказалось применение для этой цели ЭЗД, обладающего феноменальной чувствительностью к галогенированным соединениям. Ультрамалые количества Вс (Ю- —10- г) в виде Ве (ТФА)2 определяли экстракционно-хроматографическим методом в различных биологических средах [130, 155, 156, 173], в атмосфере и промышленном воздухе [142, 153, 154], в образцах лунной пыли и метеоритах [157]. Применение ЭЗД позволяет с неменьшей чувствительностью определять содержание хрома в плазме крови, физиологических сыворотках, моче и других биосредах [J50, 151, 158. 174, 175]. Разработан газохроматографический метод определения следов А] в уране [152], чувствительность которого в 500 раз выше чувствительности спектрального анализа. Соколов и др. [148] обнаружили в навеске 50 мкг полиэтилена 2-10- % А1, галогеналкильные производные которого являются одним из главных катали.заторов полимеризации этилена. Алюминий, растворенный в морской и пресной воде, можно количественно экстрагировать 0,1 М раствором ТФА в толуоле, а затем определить с помощью ЭЗД после отделения комплекса от растворителя при 118°С на колонке, содержащей две жидкие фазы — силикон и карбовакс 20 М [176]. [c.164]

Перед хроматографическим разделением природных аминокислот, чтобы предотвратить размывание задней границы пятен и ее деформацию, иногда приходится удалять мешающие анализу вещества. Это в особенности относится к пробам мочи и гидролизатов белков или пептидов, содержащих большие количества солей. В настоящее время разработан и опробован ряд методов обессоливания а) электрофорез [3—5] б) обработка ионообменными смолами [6—11], сефадексом [12—14], нейтральными полистирольными смолами (поропак Q) [15—16], ионоудерживающими смолами [17, 18] и в) экстракция растворителями [19, 20]. Хискот и др. [18] сравнили степень извлечения аминокислот из ионоудерживающих смол био-рад АО 11А [c.478]

Быстрое обнаружение и идентификация наркотиков в биологических материалах —задача чрезвычайно важная во многих случаях это необходимо для спасения жизни. Идентифицировать наркотики методом ТСХ можно достаточно быстро, но из-за присутствия в пробе других наркотических и даже не наркотических соединений можно получить ложный ответ. Поэтому следует помнить, что определенная величина Rf или данная цветная реакция — такой показатель, который еще необходимо подтвердить. Способы подтверждения могут быть различными параллельный анализ с использованием различных хроматографических систем, спектрофотометрический анализ, ГХ, определение температуры плавления, микрокристаллогра-фический анализ, методика многократного опрыскивания различными реагентами, иммунологические испытания и т. д. В качестве обязательного контрольного испытания должна применяться не ТСХ, а другой метод. Однако ТСХ весьма эффективна в тех случаях, когда необходимо исследовать большое число проб, как, например, при анализе мочи на наличие в ней наркотиков. Проводя разделение, можно очень быстро отсортировать пробы, не содержащие наркотиков, и одновременно получить некоторое представление о составе проб, давших положительные результаты. На сложных дорогостоящих установках для газовой хроматографии и высокопроизводительной жидкостной хроматографии одновременный анализ многих проб провести невозможно. [c.185]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология