Гидролазы определение

В самой общей форме характер действия металлических ионов на ферментные системы можно разделить на следующие виды 1) образование специфической структуры активного центра 2) образование структуры в системе активный центр-субстрат 3) поляризация групп активного центра и субстрата. Благодаря этому могут осуществляться процессы 1) воздействия на определенные группы субстрата — атаки молекул воды и других у ферментов типа гидролаз и фосфорилаз 2) процессы переноса (электронов и групп атомов) 3) процессы фиксации и переноса без глубоких изменений в переносимой молекуле (перенос кислорода гемоглобином). [c.363]

С одной стороны, в таких исследованиях удобнее использовать реагенты обратимого действия (в том числе Н+-ионы),чем необратимо инактивирующие вещества, поскольку это позволяет кинетически изолировать реакцию, в которой принимает участие та или иная группировка фермента. С другой стороны, необратимые реагенты дают возможность с большей определенностью идентифицировать группировку, подвергающуюся воздействию, особенно в тех случаях, когда образовавшаяся связь ингибитора с ферментом устойчива к гидролизу, благодаря чему удается изолировать модифицированный остаток. Примером такой реакции служит высокоспецифическое взаимодействие фосфорорганических соединений с остатком серина в активном центре многих гидролаз. [c.212]

Гидролазы относятся к ферментам, у которых активная группа образована в результате особой конформации белковой молекулы. При изгибах полипептидной цепи белка некоторые аминокислотные остатки сближаются и их сочетание образует активный центр биологического катализатора. Высказывалось мнение, что строгая специфичность фермента (его узкая специальность — настроенность только на определенную реакцию) зависит от окружения активной группы. [c.98]

Как уже упоминалось в 1 главы VI все гидролазы, значительная часть трансфераз, лиаз и изомераз относится к катализаторам с активными центрами кислотно-основного типа, однако во многих случаях непосредственное участие имидазола в активном центре не доказано, а для некоторых ферментов определенно известно, что в составе их активных центров нет имидазола. Именно такие ферменты будут рассмотрены в этой главе, хотя механизмы их действия изучены менее детально, за исключением лизоцима, для которого имеется почти исчерпывающая картина его каталитического действия. [c.179]

I) различные гидролазы и трансферазы играют важную роль в определении типа образующихся [c.308]

Отмечена определенная связь между липофусцином (в частности, его образованием) и лизосомами важную роль при этом играют кислые гидролазы—например, кислая фосфатаза и неспецифическая эстераза (рис. 6). Липофусцин, меланин и гемосидерин накапливаются в остаточных тельцах и вместе с ними идентифицируются. [c.248]

Определение фосфатазы. Одни из наиболее распространенных ферментов, участвующих в расщеплении сложных органических соединений, — гидролазы. К ним относятся фосфатазы, гидролизующие эфиры фосфорной кислоты. В процессе дыхания фосфатазы расщепляют фосфорные эфиры сахаров. Наиболее и вестные фосфатазы — это рибонуклеаза и дезоксирибонуклеаза, Выявляют фосфатазы на свежем материале. В качестве фиксаторов берут 10%-й раствор формалина или 90%-й— спирта. [c.110]

В активный каталитический центр входят группы, которые могут ориентировать молекулы субстрата в определенном положении по отношению к активному центру. Активный центр фермента имеет строго определенную структуру. Он подобен матрице, в которую может войти молекула только определенного строения. Обычно в ферменте на участок цепи с молекулярной массой 30 000—80 ООО приходится один активный центр. В настоящее время известно около тысячи ферментов. Отдельные группы ферментов катализируют окислительно-восстановительные реакции (оксидоредуктазы) реакции с переносом групп (трансферазы) реакции гидролиза (гидролазы) реакции отщепления групп атомов негидролитическим путем с образованием двойной связи или присоединением по двойной связи (лиазы) реакции изомеризации (изомеразы) реакции присоединения двух молекул (синтетазы). Приведенный перечень реакций, катализируемых ферментами, показывает, что при температурах 0—40° С в живом организме синтезируются высокоэффективные катализаторы практически для всех реакций, связанных с жизнедеятельностью организма. [c.632]

О биостойкости материалов можно судить по действию на них ферментов тех микроорганизмов, которые идентифицированы в данных условиях эксплуатации. Коррозию металлов в этом случае называют микробиогенной (или ферментативной). Целесообразно проверять стабильность материалов относительно определенных классов ферментов (дегидрогеназы, оксидазы, гидролазы и др.). Эти испытания можно отнести к ускоренным или экспресс-методам. Так как ферменты действуют на материалы быстрее, чем микроорганизмы, возможно увеличение концентраций ферментов для интенсификации процесса возможно моделирование условий ферментативных реакций и выявления действительного характера процесса (при сравнении с протекающими в реальных условиях) возможна оценка ингибиторного действия биоцидных веществ [7, с. 68]. [c.76]

ПЕПСИН, фермент класса гидролаз. Мол. масса П., выделенного из желудка свиньи, ок, 35 ООО, р1 2,08 (для де-фосфорилиров. белка), оптим. каталитич. активность прн pH ок. 2,5—3. Активный центр включает карбоксильные группы, к-рые специфически реаг. с ингибиторами, содержащими зпокси- или диазогруппу. Ингибируется пепстати-ном, образуется в желудке позвоночных из предшественника (пепсиногена) отщеплением N-концегвого 42-членного пептида. Катализирует гидролиз белков и пептидов, участвует в процессах пищеварения. Специфичен к пептидным связям, образованным хотя бы одной гидрофобной аминокислотой, расщепляет также депсипептиды. Входит в состав лек. ср-в, применяется в сыроделии, а также для определения первичной структуры белков. [c.428]

Определение активности глюкозо-6-фосфатаэы. а. Гидролаз-ная активность по отношению к глюкозо-6-фосфа-ту. Активность фермента определяют по количеству образовавшегося в ходе реакции Фн. [c.372]

Для кинетического разделения ряда органических соединений вместо препаратов внеклеточных липаз могут быть использованы целые клетки микроорганизмов, обладающие энантиоселек-тивными внутриклеточными гидролазами Однако, на практике такие биокатализаторы пока еще применяются редко, вероятно, из-за опасения возможных побочных трансформаций субстрата и целевого продукта под действием других клеточных ферментов, а также из-за необходимости транспорта субстрата и продукта через цитоплазматическую мембрану и клеточную стенку. Вместе с тем, клеточные катализаторы могут иметь определенные преимущества перед очищенными ферментами, связанные, прежде всего, с более низкой стоимостью катализатора и возможностью многократного использования. [c.444]

Таким образом, код каждого фермента содержит четыре цифры, разделенные точками, и составляется по определенному принципу. Первая цифра указывает номер одного из шести главных классов ферментов. Вторая цифра означает подкласс, характеризующий основные виды субстратов, участвующих в данном типе химических превращений. Например, у трансфераз вторая цифра указывает на природу той группы, которая подвергается переносу, у гидролаз —на тип гидролизуемой связи и т.д. Эти подклассы в свою очередь делятся на более частные подгруппы (подпод-классы), отличающиеся природой химических соединений доноров или акцепторов, участвующих в данной подгруппе реакций. Номер (цифра) подподкласса ставят на 3-е место в шифре фермента. У гидролаз, например, эта цифра уточняет тип гидролизуемой связи, а у лиаз—тип отщепляемой группы и т.д. Первые 3 цифры кода точно определяют тип фермента. Наконец, все ферменты, относящиеся к данному подподклассу, получают порядковый номер в алфавитном порядке, который ставят на 4-е место в шифре. [c.162]

В настояще время изучаются модели следующих групп ферментов дегидрогеназ, оксидаз, некоторых гидролаз и, пожалуй, наиболее часто моделировавшегося фермента — каталазы. Все они (за исключением гидролаз) представляют собой комплексы (соединения) белка с определенной простетической группой изучение их шло по пути моделирования ее. Ряд ферментов содержит в своем активном центре атом металла, например каталаза — железо (в геме), полифенолоксидаза — медь. Естественно, что многие исследования были направлены на изучение каталитических свойств различных соединений металлов. Были получены модели каталазы — комплексные соединения кобальта, свинца, марганца, но наиболее эффективной при разрушении перекиси водорода оказалась медь. Известно, что некоторые комплексные соединения ее с азотистыми веществами, сравнительно простые по своему составу, типа, скажем, комплекса с диамином [c.329]

Гидролазы. К этому классу относятся протеолитические ферменты, расщепляющие пептидные связи в белках и пептидах пепсин желудочного сока, трипсин и химотрипсин, получаемые из поджелудочной железы, аминопептидаза кищечника, папаин из сока дынного дерева и др. Специфичность действия этих ферментов зависит от их способности разрывать лищь те пептидные связи, которые находятся в определенном для каждого фермента окружении . Так, некоторые ферменты разрушают только концевые связи в белках (экзопептидазы), другие (эндопептидазы) действуют на пептидные связи, лежащие далеко от концов молекулы. Кроме того, имеет значение наличие вблизи от разрываемых связей полярных групп аминных, сульфгидрильных или оксигрупп. Протеолитические ферменты действуют только на -формы белков и совсем не действуют на Д-формы. [c.59]

Тщательное исследование рН-функций оказалось весьма ценным при изучении механизма действия гидролаз. Возможность изолировать индивидуальные кинетические стадии с помощью методов остановленного потока, стационарной кинетики и релаксационной техники позволила получить вполне четкие результаты. Наиболее определенные данные при использовании некоторых субстратов были получены для трипсина и химотрипсина [2,3]. Именно с помощью такого подхода впервые было уста-йовлено участие остатков гистидина в механизме действия химотрипсина на стадиях ацилирования и деацилирования. Некоторые данные стационарной кинетики привели к полезным выводам о механизме действия негидролитических ферментов. Можно думать, что этот метод анализа механизмов ферментативных реакций будет быстро развиваться. Группа Альберти [4] провела очень тщательное измерение величин р/С и энтальпии ионизации связывающих группировок фумаразы. Данные о [c.217]

Большинство ФОС, имеющих практическое применение, кроме военных газов, должно быть предварительно активировано . Эти вещества обладали очень слабым антихолинэстеразным действием до тех пор, пока они не подверглись окислению под действием определенных ферментных систем. Во всех случаях, когда вещество обладает слабым антихолинэстеразным действием in vitro, но способно вызвать гибель животных вследствие угнетения холинэстеразы, можно быть уверенным, что процесс активирования играет существенную роль. К сожалению, наши знания об активирующих системах in vitro очень ограничены, что частично можно объяснить сложностью природы этих ферментов по сравнению с простыми гидролазами, обеспечивающими разрушение ФОС. [c.139]

Примерами ферментов, обладающих специфичностью по отношению к определенным типам реакций, могут служить гидролаза эфиров карбоновых кислот (карбоксилэстераза) и аминопептидаза, гидролизующая многие пептиды. Эти ферменты взаимодействуют, вероятно, лишь с тем участком молекулы субстрата, который непосредственно примыкает к связям, 5П1аствующим в реакции. [c.222]

Определение креатинкиназной активности используется при диагностике некоторых заболеваний. Интересно, что уже в первые часы после инфаркта миокарда в крови резко нарастает содержание креатинкиназы Рибонуклеаза. Различают два основных вида нуклеаз эндонуклеазы и экзонуклеазы. Экзонуклеазы по своему действию относятся к классу гидролаз. Они катализируют реакцию последовательного гидролитического отщепления нуклеотидов от полинуклеотидной цени путем разрыва фосфодиэфирной связи. Эндонуклеазы катализируют расщепление фосфодиэфирных связей внутри молекулы нуклеиновой кислоты, проявляя определенную специфичность к одному из двух типов нуклеиновых кислот в соответствии с этим различают рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, рассматриваемые в разделе Гидролазы . [c.296]

Для того чтобы легче ориентироваться в массе ферментов, встречающихся в живых организмах, прибегают к их классификации. Название ферментам дается по веществам, на превращение которых они действуют. При этом к латинскому корню названия вещества добавляется окончание аза . Ферменты, катализирующие гидролитический распад белков, крахмала, мочевины, соответственно носят название протеиназы, амилазы (amylum — крахмал), уреазы (urea — мочевина) и т. д. Наряду с этим ферменты получают также названия по химическим процессам, в которых они участвуют. Ферменты, катализирующие реакции гидролиза, носят название гидролаз, участвующие в реакциях глубокого расщепления органических веществ,— десмолаз определенные ферменты, участвующие [c.177]

Рис. 8-73, Один из возможных механизмов, позволяющих направлять окаймленные транспортные пузырьки к определенной внутриклеточной мембране. В этой гипотетической модели молекулы груза - это лизосомные гидролазы. а приемщик груза -это белок-репептор мапнозо-6-фосфата Изображенные здесь молекулы маркера стыковки и приемщика пока еще не охарактеризованы. Однако недавно открытые клатрип-связывающие белки, которые также связывают цитоплазматические хвосты некоторых мембранных белков, удовлетворяют данному

Под непрерывными методами определения ферментативной актиБности подразумеваются такие методы, которые позволяют непрерывно следить за ходом реакции, начиная от нулевого времени и до ее завершения, причем обычно производится мгновенная регистрация данных. Есть довольно большая группа ферментов, у которых образование продукта реакции или убыль субстрата можно наблюдать непосредственно вследствие того, что существует различие в спектре поглощения между продуктом и субстратом. Кроме того, суммарным результатом реакции может быть образование кислоты или основания, изменение вязкости или даже выделение тепла. Эти явления также можно регистрировать непосредственно. К важнейшим ферментам этого типа относятся дегидрогеназы, использующие NAD или NADP, многие гидролазы, расщепляющие синтетические [c.294]

В разработанных несколькими группами исследователей [4, 37, 57] ферментных электродах для определения свободного холестерина использовали холестериноксида-зу (СОВ, ЕС 1.1.3.6), иммобилизованную на поверхности коллагеновой мембраны или на найлоновой сетке. Концентрацию свободного холестерина определяли с погрешностью 5-25%. Для определения общей концентрации холестерина сыворотку выдерживают в растворе Тритон Х-100 или дезоксихолатсодержащих растворах с добавкой гидролазы эфиров холестерина (СЕН, ЕС 3.1.1.13). Ту же реакционную схему используют в липидном анализаторе 1СА-ЬО 400 фирмы Тоуо 1ого (Япония). Для получения свободного холестерина пробу сыворотки (30 мкл) предварительно обрабатывают 7,5 мкл раствора СЕН в течение 11 мин при 37 °С. Концентрацию холестерина находят с помощью СОВ, иммобилизованной на кислородном электроде. Быстрый отклик электрода (всего 15 с) обусловлен использованием скоростного метода измерения расхода кислорода. В получаемую величину вносят поправку на сигнал кислородного датчика без фермента. Одновременно с холестерином определяют также концентрацию триглицеридов и фосфолипидов (см. ниже). Производительность анализатора-40 проб в час. Аскорбиновая кислота и билирубин не мешают определению. Уравнение корреляции с данными неспецифического стандартного метода анализа для общего содержания холестерина имеет вид у = 1,03х — 0,15 ммоль/л г = 0,985 (и = 50). [c.272]

Анализ распределения ферментов во фракционируемых тканях основан на двух общих принципах. Первый из них заключается в том, что все частицы данной субклеточной популяции содержат одинаковый набор ферментов. Второй предполагает, что каждый фермент локализован в каком-то определенном месте внутри клетки. Если бы это положение было верно, то ферменты могли бы выступать в роли маркеров для соответствующих органелл например, цито-хромоксидаза и моноаминооксидаза служили бы ферментами-маркерами митохондрий, кислые гидролазы — маркерами лизосом, каталаза — маркером пероксисом, а глюкозо-6-фосфатаза — маркером мембран микросом. Оказалось, однако, что некоторые ферменты, например малатдегидрогеназа, Р-глюкуронидаза, НАДФ Н-цитохром-с-редуктаза, локализованы более чем в одной фракции. Поэтому к выбору ферментов-маркеров субклеточных фракций в каждом конкретном случае следует подходить с большой осторожностью. Более того, отсутствие фермента-маркера еще не означает отсутствия соответствующих органелл. Вполне вероятно, что при фракционировании происходит потеря фермента органел-лами или он ингибируется или инактивируется поэтому для каждой фракции обычно определяют не менее двух ферментов-маркеров. [c.56]

Кроме того, значительные совпадения первичной структуры характерны для белков, выполняющих сходные биологические функции. Это показано, например, для семейства ферментов, ускоряющих реакции дегидрирования разнообразных субстрактов, а также для многих гидролаз, у которых последовательность аминокислотных остатков вблизи активного центра крайне близка и стандартна. Особенно высоким структурным подобием отличаются белки, выполняющие у разных видов одну и ту же функцию, что наглядно выявляется при сопоставлении первичных структур инсулина (табл. 8), а также цитохро-мов, гистонов, гипофизарных гормонов и других белков. У цитохромов, выделенных из синезеленых, красных и бурых водорослей, первичные структуры совпадают на 48—67%. Таким образом, видовая специфичность первичной структуры гомологичных белков сводится к ограниченному числу аминокислотных замен в полипептидной цепи в строго определенных положениях. [c.64]

Пептид-гидролазы. Ферменты этого подкласса ускоряют гидролиз пептидных связей в белках и пептидах, а при определенных условиях также и образование пептидных связей, хотя этот путь синтеза белка не является физиологическим. Химизм процесса гидролиза белков и пептидов при участии пептидгидролаз можно выразить следующей схемой [c.130]

Смотреть страницы где упоминается термин Гидролазы определение: [c.289] [c.4] [c.139] [c.244] [c.607] [c.118] [c.161] [c.202] [c.151] [c.139] [c.244] [c.158] [c.404] [c.302] [c.95] [c.68] [c.72] [c.277] [c.12] [c.308] [c.50] [c.131]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология