Ионообменная хроматография сахаров

Продолжая поиски оптимальных условий для ионообменной хроматографии сахаров в форме боратных комплексов Флори-ди [75] предложил вернуться к ступенчатому элюированию. Рекомендуемая им система содержала только два буфера и обеспечивала разделение смеси, содержащей двенадцать сахаров (включая сахарозу, мальтозу, лактозу, мелицитозу и раффинозу, а также обычные моносахариды), за б ч. Разделение проводили на колонке (1,1 мХб мм) со смолой дауэкс 1-Х4 (200— 400 меш) при температуре 55 °С. Колонку промывали в течение 90 мин буфером с pH 8,40 (0,025 М тетраборат калия — 0,125 М борная кислота, pH устанавливали путем добавления 1 н. КОН) со скоростью 45 мл/ч, а затем буфером с pH 8,80 (0,11 М тетраборат калия — 0,125 М борная кислота) со скоростью 60 мл/ч. [c.22]

Приложение ионообменной хроматографии к нуклеотидам, аминокислотам, сахарам и другим веществам [208]. [c.217]

При хроматографическом разделении ионы анализируемого вещества конкурируют с ионами, содержащимися в элюенте, стремясь вступать во взаимодействие с противоположно заряженными группами сорбента. Отсюда следует, что ионообменную хроматографию можно применять для разделения любых соединений, которые могут быть каким-либо образом ионизированы. Можно провести анализ даже нейтральных молекул сахаров в виде их комплексов с борат-ионом [c.31]

Идентификацию и количественное определение сахаров можно осуществить различными хроматографическими методами хроматографией на бумаге [202, 204, 213, стандарт TAPPI Т 250 рт-7Ъ тонкослойной хроматографией [235] газовой хроматографией частично в комбинации с масс-спектроскопией [18, 102, 204, 244, стандарт TAPPI Т 249 ргп-75]. Позднее для определения полисахаридного состава древесины и технических целлюлоз применили автоматизированный анализ сахаров методом ионообменной хроматографии через боратные комплексы [73, 75, 76, 200]. Описан быстрый спектроскопический метод определения сахаров [192, 193, 194], основанный на измерении поглощения при 322 и 380 нм продуктов дегидратации сахаров (производных фурана), образовавшихся после полного гидролиза древесины или технической целлюлозы. [c.30]

Быстрому развитию науки в этой области способствовало широкое применение новейших методов анализа и разделения смеси веществ, основанных на использовании бумажной, колоночной и газожидкостной хроматографии, фракционного осаждения, инфракрасной спектроскопии, электрофореза, ионообменной хроматографии, гельфильтрации и др. Большое значение в этой области также имел накопленный опыт по синтезу специальных свидетелей для количественной хроматографии, особенно частично метилированных сахаров с известным расположением метоксильных групп. [c.6]

Отработанные сульфитные щелока можно использовать непосредственно Б разбавленном или концентрированном состоянии, а также в виде сухого остатка. Для многих целей предпочитают получать очищенные продукты — выделенные лигносульфоновые кислоты или чаще их соли. Для очистки от сопутствующих веществ применяют несколько способов. Углеводы удаляют с помощью процессов брожения (см. 18.5), после чего остаются сравнительно чистые лигносульфонаты. Для получения лигносульфонатов кальция, не содержащих сахаров, с высоким выходом (90—95 %) используют двухступенчатый процесс Говарда—осаждение лигносульфонатов известью [96, 1361. Сахара и другие низкомолекулярные вещества сульфитных щелоков можно удалять ионообменной хроматографией [53, 137], гель-проникающей хроматографией [103], ультрафильтрацией [151 или электродиализом [39]. [c.419]

Количественный анализ сахаров в растительных экстрактах ионообменной хроматографией [2402]. [c.326]

Разделение и анализ сахаров и родственных им веществ ионообменной хроматографией [2445]. [c.327]

Разделение боратных комплексов сахаров и родственных им веществ ионообменной хроматографией [2446]. [c.327]

Способность к образованию эфиров борной кислоты используют при разделении сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге, методом ионообменной хроматографии на смолах и угле. [c.53]

Рефрактометрия широко используется в производстве сахара с целью измерения концентрации растворов сахарозы [54]. За последнее время были описаны многочисленные примеры применения в гель-проникающей хроматографии дифференциальных, автоматических регистрирующих рефрактометров [39]. Дифференциальный рефрактометр также использовался для регулирования режима разделения нейтральных сахаров в виде бо-ратных комплексов при ионообменной хроматографии [55]. Однако чувствительность прибора к изменениям концентрации буферного раствора, наряду с наличием ложных пиков, вызывает некоторые затруднения при его широкой эксплуатации. [c.72]

Рис. 22.9. Схема потоков четырехканального анализатора, применяемого при ионообменной хроматографии кислотных производных сахаров, в которой в качестве подвижной фазы используют уксусную кислоту или водный раствор ацетата натрия (первый канал — хромовая кислота, второй канал — карбазол, третий и четвертый каналы — перйодат) [75].

Как и для других производных сахаров ионного характера, ионообменная хроматография является наиболее подходящим методом анализа смесей фосфатов сахаров и их выделения из природных источников. [c.120]

Ионообменная хроматография позволила проводить адсорбцию органических катионов, нанример алкалоидов, разделение смесей кислых, нейтральных и основных аминокислот, анионов различных органических кислот, антибиотиков, очистку сахаров, углеводородов, многоатомных спиртов и антибиотиков от катионов и анионов, разделения пептидов и белковых веществ. [c.197]

Отдельные сахара можно определить количественным методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных производных [15, 22], или ионообменной хроматографией [22] с предварительным качественным определением их бумажной хроматографией. [c.219]

В современных окислительных условиях свободные сахара составляют менее 1% от всех сахаров. Наоборот, в восстановленных осадках большая часть сахаров находится в свободной форме. Этим можно объяснить неравномерность распределения содержаний сахаров. Во время естественного уплотнения осадка свободные сахара выделяются по принципу ионообменной хроматографии, как и соот-ветствуюш ие им свободные аминокислоты. Из-за низкой активности [c.167]

Эфиры борной кислоты и ее производных. При взаимодействии моносахаридов и их производных, содержащих г<ис-а-гликольные группировки, с борной кислотой или ее солями образуются устойчивые отрицательно заряженные комплексы. Это свойство нашло широкое применение для разделения сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге а также методом ионообменной хроматографии на смолах и угле Борные эфиры сахаров были в свое время успешно использованы для установления конфигурации аномерного центра (см. стр. 34). Несмотря на то что комплексы сахаров с борат-анионом известны давно, строение их было выяснено только недавно Было показано, что существуют два типа боратных комплексов монокомплекс XXVII и дикомплекс XXVIII [c.148]

Фенол-сернокислотный метод был использован в автоматическом анализаторе сахаров рядом авторов [48, 49 и др.]. Природные сахара, элюируемые из анионообменной смолы буфером в боратной форме, непрерывно смешивали с 5%-ным водным раствором фенола и концентрированной серной кислотой. Поглощение потока полученной смеси измерялось колориметром с фильтрами при 480, 486 и 490 нм. Скорости потоков фенола и серной кислоты, которые прибавлялись к потоку элюата, были 0,6 и 3,05 мл/мин соответственно [49]. Основанный на этом методе детектирования углеводный анализатор МагкП является прототипом анализатора, который использовался в высокоэффективной ионообменной хроматографии сахаров. Его устрой- [c.74]

Так, при очистке так называемого маннитол-специфичного фермента II Е. oli (входящего в состав системы фосфорилирования сахаров, переносимых через мембрану) для извлечения фермента из мембраны использовали 0,5%-ный раствор ДОХ. В его присутствии фермент сажали на колонку гексилагарозы. При элюции в раствор ДОХ добавляли еще и Луброл РХ до 0,5%. Этот детергент не только способствует элюции, но и необходим для проявления активности фермента, поэтому дальнейшую очистку — путем ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе — вели тоже в присутствии [c.185]

Ионообменная хроматография незаменима при разделении вы-сокополярных веществ, которые без перевода в производные не мог/г быть проанализированы методом ГЖХ. К таким соединениям относятся аминокислоты, пептиды, сахара. [c.32]

Применение. Процессы И. о. используют в аналит. химии и в пром-сти. С помощью И. о. концентрируют следовые кол-ва определяемых в-в, определяют суммарное солесодер-жание р-ров, удаляют мещающие анализу ионы, количественно разделяют компоненты сложных смесей (см. Ионообменная хроматография). И.о. применяют для получения умягченной и обессоленной воды (см. Водоподготовка) в тепловой и атомной энергетике, в электронной пром-сти в цветной металлургии-при комплексной гидрометаллургич. переработке бедных руд цветных, редких и благородных металлов в пищ. пром-сти - в произ-ве сахара, при переработке гидролизатов в мед. пром-сти-при получении антибиотиков и др. лек. ср-в, а также во мн. отраслях пром-сти-для очистки сточных вод в целях организации оборотного водоснабжения и извлечения ценных компонентов, очистки воздуха. Разрабатываются ионообменные методы комплексного извлечения из океанской воды ценных микрокомпонентов. [c.262]

Реакция Биаля наименее специфична и дает хорошие результаты только после предварительного удаления других сахаров с помощью, например, ионообменной хроматографии. [c.338]

Ионообменная хроматография продуктов неэнзиматической реакции сахара с аминокислотой и наблюдение за этой реакцией в экстрактах печени [411]. [c.229]

Ионообменная хроматография карбоновых кислот в растворах ацетата натрия и уксусной кислоты имеет широкое использование. Этим методом оказывается возм[ожным разделять даже очень сложные смеси оксикислот, что особенно важно для химии сахаров. Раствор ацетата натрия является подходящим элюентом для разделения ионов различных монокарбоновых кислот. Альдоновые и уроновые кислоты элюируются в порядке увеличения молекулярной массы. Если сравнить поведение при элюировании кислот с равным числом углеродных атомов, но с различным числом гидроксильных групп, то оказывается, что силы взаимодействия со смолой увеличиваются с уменьшением числа таких групп. Это дает возможность разделять ряд стереоизомеров, различающихся по степени гидратации и по силе ионного взаимодействия. Однако некоторые изомеры кислот не разделяются путем элюирования раствором ацетата натрия, и в таком случае более выгодно использовать уксусную кислоту. При элюировании уксусной кислотой наиболее важным фактором является кислотность разделяемых кислот. Слабые кислоты элюируются легче, чем сильные кислоты. Если кислоты элюируются буферными смесями, составленными из уксусной кислоты и ацетата натрия, влияние состава элюирующей смеси на удерживаемые объемы легко оценить, применив закон действующих масс. Было найдено также, что элюционную хроматографию органических кислот на анионообменных смолах в ацетатной среде можно успешно использовать для анализов некоторых кислот, содержащихся во фруктовых соках. Гуди и Риман [27] количественно разделили смесь 4—9 мг яблочной, винной и лимонной кислот, находящихся в фруктовых соках, и отделили их от сахаров с помощью 2,0 М раствора уксусной кислоты и 0,4 М [c.160]

Ионообменная хроматография широко применяется в агрохимическом анализе. С ее помощью в лабораторных условиях получают дистиллированную оду высокой степени чи тoтыJ про одят разделение аминокислот, сахаров, карбоновых кислот ее также используют для изучения явлений поглощения в почвах, процессов питания растений и запасов питательных веществ, находящихся в усвояемом для сельскохозяйственных культур состоянии в почве. [c.351]

С помощью ионообменной хроматографии [22] из кислотных гидролизатов дезоксирибонуклеиновой кислоты были выделены родственные 3, 5 -дифосфаты тимидина, 2 -дезоксицитидина [22, 80— 83] и 5-метил-2 -дезоксицитидина. Образующийся при каталитическом гидрировании тимидин-3, 5 -дифосфата дигидротимидин-3, 5 -дифосфат подвергался кислотному гидролизу в мягких условиях, в результате которого были получены дигидротимин и обладающий восстановительными свойствами дифосфат сахара, что подтверждает установленное для этого соединения строение [80]. [c.138]

В принципе почти все ионообменные разделения могут быть в той или иной степени автоматизированы, однако, как и следовало ожидать, до сих пор развитие автоматических методов почти полностью сосредоточено на длительных и трудоемких разделениях аминокислот и сахаров, определение которых является важной частью биохимических и клинических исследований. Различается два основных уровня автоматизации оборудования для ионообменной хроматографии а) автоматизация последовательности операций от загрузки пробы в колонку до колориметрического измерения и регистрации концентраций разделенных компонентов и 6) автоматизация не только разделения и регистрации данных, но и последовательной загрузки ряда проб после каждого законченного aнaJ изa. Ниже описываются примеры автоматического оборудования для ионообменной хроматографии обоих типов с указанием классов анализируемых соединений. [c.285]

Разделение и анализ сложных смесей сахаров имеет большое значение в биохимии и медицине. Показано, что ионообменная хроматография является одним из наиболее эффективных средств достижения этой цели. Основная методика анализа сахаров разработана Кимом и Пиллом [3], использовавшими способность углеводов с соседними гидроксильными группами в ммс-положении образовывать анионные бо-ратные комплексы, которые могут быть разделены ионным обменом. Для элюирования индивиду альных сахаров с колонки с сильноосновной [c.301]

Нуклеотиды сахаров выделяют из природных источников, как правило, методом ионообменной хроматографии и очищают хроматографией на бумаге. Для этих соединений характерно наличие гликозильного остатка, присоединенного сложноэфирной связью к терминальному фосфату нуклеозид-5 -дифосфата. К настоящему времени выделено свыше 70 соединений этого класса [1]. Нуклеозидная часть в них представлена одним из следующих пяти основных нуклеозидов уридином, гуанозином, аденозином, цитидином или дезокситимидином. Чтобы легче было выделять нуклеотиды и определять их выход, целесообразно проводить выделение в присутствии следовых количеств меченных по углероду нуклеотидов каждого типа. Порядок элюирования нуклеозиддифосфатсахаров с колонки зависит прежде всего от природы основания и практически не зависит от структуры сахарного остатка, если этот остаток не заряжен. Поэтому после разделения фракции лучше объединять, исходя из количества содержащейся метки а не по их оптической плотности, тем более что лишь в некоторых случаях количество отдельного нуклеотида бывает достаточным для обнаружения того соединения по поглощению в УФ-свете. [c.326]

Ионообменная хроматография является методом разделения веществ по их способности мигрировать по ионообменной колонке или по пластине, покрытой ионо-обменником. Ионы (катионы и анионы) разделяются в результате ионообменных реакций, характерных для каждого типа ионов. Хроматография, в которой молекулы веществ, например сахаров [1] или карбоновых кислот [2], разделяются на ионообменной колонке, но не путем ионообменных реакций, называется ионоэксклю-зионной распределительной хроматографией. [c.8]

Ионообменную хроматографию на колонках со смолами в боратной форме применяли для разделения и анализа не только сахаров, но и полиолов [84, 85]. Для этой цели использовали такую же хроматографическую систему [85], как и в случае разделения сахаров [78], но хроматографию проводили при более высокой температуре колонки (75 °С) и при большей скорости подачи буферов (70 мл/ч). Это обеспечивало разделение смеси, содержащей этиленгликоль, пять полиолов и два аминодезокси-полиола, за 4 ч [78]. С помощью анионообменной хроматографии в боратных буферах был успешно разделен ряд производных углеводов, в том числе несколько метилгликозидов [80], а также метиловые эфиры п-ксилозы, о-глюкозы и о-маннозы [c.23]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология