Глицерин, центрифугирование

На дно пробирки будет действовать давление, равное 5,35-754 = = 4030 г см . Вполне понятно, что ири таких давлениях пробирка может лопнуть, если она недостаточно прочна. Этого можно избежать двумя способами. Либо применяют пробирку из более прочного материала (целлулоид, силон, нержавеющая сталь), либо между пробиркой и внешним металлическим стаканом наливают жидкость, которая своим гидростатическим давлением противодействует давлению жидкости внутри пробирки. Само собой разумеется, что для этого пригодны только такие жидкости, которые не корродируют стенки металлического стакана. Для этих целей применяют воду, гликоль и глицерин. Рассмотрим опять вышеприведенный пример центрифугирования крови, если пространство между стеклянной пробиркой и металлическим стаканом заполнено водой до уровня 4,5 см от дна пробирки. [c.182]

Обогащение исследуемого материала. Для концентрирования возбудителей в моче используют методы осаждения или центрифугирования. Не менее 50 мл мочи, собранной в середине дня, помещают в конический стакан и дают отстояться в течение 30 мин. Верхнюю часть сливают, каплю из осадка мочи помещают на предметное стекло, готовят мазок и микроскопируют под малым увеличением. Добавление к осадку мочи 1 — 2 капель глицерина осветляет осадок и облегчает исследование. [c.379]

Из тканей и органов животных и растительных организмов многие ферменты легко извлекаются водой, растворами солей, очень слабыми кислотами или щелочами, водными растворами глицерина и др. Органы животных (печень, мозг, слизистая оболочка желудка и т. п.), предназначенные для получения того или иного фермента, отмывают от крови и измельчают обычно на холоду для предотвращения разрушения части ферментов другими (протеолитическими) ферментами. После измельчения ткань экстрагируют той или иной жидкостью. Хорошим растворителем для большинства ферментов является глицерин. Глицериновые экстракты отличаются стойкостью, представляют мало подходящую для развития бактерий среду и содержат лишь небольшое количество посторонних белковых примесей. Полученные путем настаивания с измельченными органами водные или глицериновые вытяжки отделяют затем от частиц ткани фильтрованием или центрифугированием. [c.126]

На рис. 72 приведены зависимости между логарифмами средней скорости выхода фугата п временем при центрифугировании на пробирочной центрифуге суспензии кварцевого песка в глицерине. В соответствии с уравнением (578) зависимости, показанные на рис. 71 и 72, являются прямолинейными. [c.199]

Рис. 78. Кривые изменения удельной влажности в зависимости от толщины слоя осадка при центрифугировании суспензии кварцевого песка в водном растворе глицерина

На фиг-. 48 приведены графики зависимости между логарифмами средней скорости процесса и временем для случая центрифугирования на пробирочной центрифуге суспензии кварцевого песка в глицерине [c.113]

При исследовании водных растворов ддя предупреждения испарения и вызываемых им конвекционных нарушений необходимо покрывать мениск раствора слоем вазелинового масла. При работе с органическими растворами во избежание испарения следует наполнять кювету до отказа и плотно закрывать ее отверстие с помощью конической иди винтовой пробки. Для покрытия мениска растворов различных веществ в хлороформе может быть использован глицерин. Необходимость защитить мениск от испарения такими жидкостями была обнаружена еще на ранних этапах разработки методов центрифугирования этот прием имеет решающее значение и может предопределить успех или неудачу исследования. [c.499]

Ресуспендировать клетки в среде для хранения до концентрации 5-10 —6 10 клеток в 1 мл. Вместо осаждения клеток центрифугированием суспензия может быть смешана с содержащей глицерин средой до конечной концентрации глицерина 10%. [c.99]

Проведены эксперименты по промывке кристаллической соли (после дегидрохлорирования и гидролиза ЭПХГ и ДХГ до глицерина) от оставшихся в ней после центрифугирования примесей. Результаты показывают, что содержание глицерина и других примесей в соли после промывки снижается до следовых количеств. Промывка кристаллической соли позволит использовать хлорид натрия в электролизе без предварительной электрохимической очистки. [c.122]

Выделение. Одии из первых этапов выделения Б,-получение соответствующих органелл (рибосом, митохондрий, ядер, цитоплазматич. мембраны) с помощью дифференциального центрифугирования. Далее Ь переводят в растворимое состояние путем экстракции буферными р-рами солей и детергентов, иногда-неполярными р-рителями. Затем применяют фракционное осаждение неорг. солями [обычно (N 14)2804], этанолом, ацетоном или путем изменения pH, ионной силы, т-ры. Для предотвращения денатурации работу проводят при пониж. т-ре (ок. 4°С) с целью исключения протеолиза используют ингибиторы протеаз, нек-рые Б. стабилизируют полиоламн, иапр. глицерином. Дальнейшую очистку проводят по схемам, специально разработанным для отдельных Б. илн группы гомологичных Б. Наиб, распространенные методы разделения-гель-про-никающая хроматография, ионообменная и адсорбц. хроматография эффективные методы-жидкостная хроматография высокого разрешения и аффинная хроматография. [c.250]

Проведение анализа. Пробу, содержащую 50—75 мкг соли аммония в 50 мл воды, переносят в делительную воронку емкостью 125 мл. Кран воронки не следует смазывать обычной смазкой, для этого лучше применять смесь глицерина с крахмалом. Затем в воронку добавляют 5 мл раствора карбоната натрия, 1 мл раствора бромфенолового синего и точно 10 мл бензола. После этого воронку встряхивают в течение 2,5—3 мин, дают жидкости отстояться (20—30 с), снова взбалтывают ее и вновь дают отстояться. Затем пробирку для центрифугирования емкостью 15 мл ополаскивают порцией нижней водной фазы, полностью удаляют эту фазу из воронки и наливают в пробирку бензольную фазу. Пробирку закрывают чистой резиновой мембрановой пробкой (заглушка) и центрифугируют содержащийся в ней раствор со скоростью примерно около 1000 об/мин для отделения от примесей. Порцию прозрачного окрашенного раствора переносят в сухую пробирку (кювета) Клетта и, используя фильтр № 60, измеряют ее поглощение. [c.288]

Хасс и Паттерсон [821] очищали глицерин, полученный гидрогенизацией, растворением его в равном объеме н-бутилового спирта. Раствор переносили в склянку с хорошо пришлифованной пробкой и охлаждали после внесения затравки раствор медленно вращали в сосуде с тающим льдом до начала кристаллизации. Примеси и большую часть растворителя удаляли центрифугированием. Кристаллы промывали холодным ацетоном или изопропиловым зфиром. Свыше 60% фракции, кипящей при 290°, было выделено в виде кристаллического глицерина. Последний удовлетворял требованиям фармакопеи (USP). В качестве растворителей можно использовать также н-пропиловый спирт, пентанолы или жидкий аммиак. [c.337]

В делительную воронку Сквибба емкостью 125 мл вносят 50 мл водного раствора пробы, содержащего 50—75 мкг соли четвертичного аммония. Не следует применять обычную смазку для кранов вполне пригодна смесь крахмала с глицерином. Прибавляют 5 мл 10%-ного раствора карбоната натрия, 1 мл 0,04%-ного водного раствора бромфенолового синего и точно 10 мл бензола. Раствор индикатора готовят в день проведения анализа растворяют 40 мг порошкообразного красителя в 100 мл воды, содержащей 1 мл 0,01 и. раствора гидроксида натрия. Реакционную смесь в воронке взбалтывают 2,5—3 мин, дают расслоиться (20—30 с), затем снова энергично взбалтывают и выдерживают несколько минут до хорошего разделения смеси. Пробирку для центрифугирования емкостью 15 мл ополаскивают порцией нижнего, водного, слоя, полностью отделяют его и отбрасывают, а бензольный слой наливают в пробирку. Горлышко пробирки закрывают каучуковой пленкой и центрифугируют ее содержимое несколько минут при частоте приблизительно 1000 об/мин (если необходимо осветлить жидкость). Загем раствор переносят в трубку колориметра Клетт — Саммерсон и измеряют интенсивность окраски, пользуясь светофильтром Я 60. [c.524]

В колбе на 50 мл смешивают нитробензол, анилин, глицерин и серную кислоту. Затем осторожно нагревают маленьким пламенем газовой горелки до начала реакции, становящейся далее очень энергичной. Когда реакция в основном закончится, массу нагревают с обратным холодильником на песчаной бане /2 часа при кипении. Затем разбавляют небольшим количеством воды и из кислого раствора отгоняют не вступивший в реякцию нитробензол с водяным паром. Остаток в колбе подщелачивают конц. раствором едкого натра и отгоняют с водяным паром хинолин и анилин, который не вступил в реакцию. Дестиллат, собранный в делительной воронке, извлекают эфиром. Эфирный ряствор переносят в пробирку и испаряют эфир. Остающуюся смесь анилина с хинолином растворяют в 0,5 мл 2 н. соляной кислоты. К прозрачному теплому раствору добавляют раствор 0,75 хлористого цинка в 1,25 мл 2 н. соляной кислоты. После охлаждения кристаллизуется двойная соль хннолина, которую отделяют центрифугированием и промывают 2 н. соляной кислотой. Затем двойную соль разлагают конц. раствором едкого натра, переливают в колбу на 50 мл, споласкивают пробирку небольшим количеством того же раствора щелочи и отгоняют хинолин с водяным паром. Дестиллат собирают в делительную воронку, извлекают эфиром эфирную вытяжку сушат твердым едким кали и Тюсле испарения эфира отгоняют хинолин при 237°. [c.141]

Хромосомная инженерия — ветвь генетической инженерии Объектами ее являются хромосомы клеток прокариот и эукариот Донорами хромосом могут быть различные суспензионные и субстрат-зависимые клеточные линии Из клеток прокариот хромосому (ДНК) выделяют из супернатанта после центрифугирования дезинтеграта или лизата клеток (протопластов) Клетки эукариот блокируют на стадии мейоза, хромосомы выделяют, применяя "гипотонический шок" и гомогенизацию с последующей очисткой их дифференциальным центрифугированием Хромосомы осаждают на поверхности реципиентных клеток хлоридом кальция и через несколько часов клетки обрабатывают реагентом — "перфоратором" (например, глицерином) Реципиентные клетки могут содержать донорный материал в широком диапазоне (встроенным в геном, изолированно) [c.184]

Ход определения. Исследуемое масло (подсолнечное, льняное) в количестве 10—15 г отвешивают в сухую предварительно взвешенную пробирку. Туда же добавляют (по разности весов) 1—2 г дистиллированного или динамитного (конц. 88—ЭО-о/о) глицерина. Закрывают пробирку пробкой и смесь взбалтывают в течение 5 мин путем многократных опрокидываний пробирки. Сильных встряхиваний при этом следует избегать, так как это может привести к образованию стойкой неразделяющейся на слои эмульсии. Затем пробирку помещают в ручную центрифугу Гербера и уравновешивают ее другой пробиркой. Затем производят центрифугирование в течение 1—2 мин. [c.128]

Воду, в которую сливали поверхностную пленку, фильтруют через фильтры № 6, помещая их в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу. При отсутствии прибора для фильтрования можно применить следующий способ осадок обрабатывают, как описано выше, после первого центрифугирования с нитратом натрия центрифужные пробирки устанавливают в штатив, осторожно доливают из пипетки тот же раствор до образования выпуклого мениска и на 20—30 мин покрывают предметными стеклами размером 6X12 см, которые должны быть хорошо обезжирены. Стекла снимают, переворачивая нижней стороной вверх, наносят на мазок 1—3 капли 50%-ного водного раствора глицерина и микроскопируют при малом увеличении. Процедуру повторяют 2—3 раза. Эффективность последнего варианта в среднем 73%. [c.199]

Осадок смешивают с 20 мл 5%-ного раствора NaOH или КОН. По истечении 1 ч осадок со щелочью встряхивают в течение 20 мин в закрытых резиновыми пробками центрифужных Пробирках в шюттель-аппарате. Смесь центрифугируют 1—2 мин, после чего раствор щелочи сливают, а осадок тщательно смешивают с одним из рекомендованных выше насыщенных растворов соли и центрифугируют по 2 мин не менее четырех раз. После каждого центрифугирования поверхностную пленку, осторожно сливая, переносят в стаканчик с небольшим количеством водопроводной воды. Воду, в которую сливали поверхностную пленку, фильтруют через предварительные мембранные фильтры. Фильтры помещают в чашки Петри на влажную фильтровальную бумагу и соскобы с них исследуют под микроскопом в капле 50%-ного глицерина. Без ущерба для точности определения можно исключить обработку пробы со щелочью и встряхивание в шюттель-аппарате и производить обработку только насыщенным раствором соли. [c.175]

Для размножения вирусов in vivo обычно проводится непрямая инокуляция личинок путем загрязнения корма оптимальной дозой вируса в оптимальное время (фаза развития). Затем личинок инкубируют до накопления достаточного титра вируса, их трупы гомогенизируют и сырой продукт фракционируют градиентным центрифугированием. Фракцию вирусов (вирионов или белковых включений) консервируют в глицерине, хранят в виде буферного раствора при глубоком замораживании или лиофилизируют с добавлением защитных коллоидов белковые включения можно также подвергать распылительной сушке. [c.151]

Вытяжку взбалтывают с суспензией окиси алюминия и отделяют центрифугированием. Адсорбируется до 90% всей липазы. Сначала сорбат промывают раствором глицерина и затем два раза извлекают смесью растворов двузамещенного фосфорнокислого аммония, аммиака и глицерина. [c.164]

Выше были рассмотрены факторы, способствующие отходу жидкости из пор осадка. Остановимся далее на факторах, замедляющих ход процесса обезвоживания. К ним в первую очередь относится вязкость жидкой фазы. На рис. 11 приведены графики, иллюстрирующие влияние кинематической вязкости жидкой фазы на кинетику обезвоживания. Опыты проводились с суспензией маршалита в водных растворах глицерина различной концентрации. Из графиков видно, что с увеличением v возрастает продолжительность отхода основной массы гравитационной жидкости (прямолинейные начальные участки кривых) и замедляется пленочное ее течение. Характерно, что даже после 5 ч центрифугирования остаточная влажность осадка существенно зависит от вязкости жидкости. [c.56]

Микрометод [85]. Глицерин в количестве, помещающемся на ушке платиновой проволоки, обрабатывают в пробирке для центрифугирования пятикратным количеством раствора соды и 2—3-кратным по отношению к глицерину количеством брома. Хорошо перемешивают и по окончании реакции (10 мин.) разлагают избыток брома двуокисью серы. Прибавляют несколько капель щелочи и раствор Фелинга в присутствии глицерина восстановление происходит уже на холоду иногда закись меди удается отделить в узкой части пробирки центрифугированием и затем исследовать под микроскопом. Такую же реакцию и в тех же условиях дают этиленгликоль и -маннит. Пределы чувствительности для глицерина 10—20-[, для этиленгликоля 8ОО7, для -ман-нита 90у. [c.82]

Получаемый разбавленный раствор глицерина поступает далее на упаривание в двух- или трехкорпусную вакуум-выпариую установку, подобную установке, применяемой для упаривания электролитического щелока (см. том I, стр. 544—546). По мере упаривания из раствора глицерина выделяется мелкокристаллический осадок поваренной соли, отделяемый затем центрифугированием. В результате упаривания получают 90%-ный глицерин-сырец. [c.425]

Следуюш,ей стадией определения является экстракция реакционной смеси равным объемом 5%-ного (вес к объему) раствора трикаприлил-метиламмония в фреоне-ТР. Экстракцию проводят в стеклянном или полиэтиленовом сосуде с завинчивающейся крышкой, так как фреон легко летуч. Объем сосуда должен быть вдвое больше объема заключенной в нем жидкости. Смесь осторожно встряхивают вручную или на механическом встряхивателе в течение 10 мин. Если расслоение фаз после экстракции идет очень медленно, смесь помещают в открытые стеклянные, полиэтиленовые или лустероидные (нитрат целлюлозы) пробирки и центрифугируют 5 мин. Обычно после экстракции образуются два прозрачных слоя. Если концентрация перйодата в растворе до экстракции составляет примерно 0,02 моль/л, в органической фазе появляется второй слой, содержащий перйодат. Верхний водный слей, содержащий иодат, отделяют пипеткой. В тех случаях, когда центрифугирование проводят в пробирке из лустероида, нижний слой сливают, проделав отверстие в дне пробирки. Однократная экстракция позволяет удалить из водного слоя более 99% перйодата, при этом в органический слой попадает лишь 2—6% иодата. Чтобы удалить следы перйодата из водного слоя, проводят повторную экстракцию. Иногда вместо последней операции к водному слою добавляют небольшой избыток глицерина или этиленгликоля. При этом перйодат превращается в иодат, коэффициент экстинкции которого в 10 раз меньше [8]. [c.77]

Концентрированные суспензии воздушных спор 10—14-дневной культуры, выросшей на среде Чапека с глицерином и NaNOs, получали по описанной методике [23]. Суспензию стерильно фильтровали через ватный и бумажный фильтры, трижды промывали при центрифугировании стерильной дистиллированной водой и гомогенизировали, затем вновь фильтровали через бумажный фильтр. Полученные таким образом суспензии хранили в холодильнике при температуре 4—5°. Количество проросших спор определяли под микроскопом на окрашенных метиленовой синью препаратах, подсчитывая число спор с ростовыми трубками. Подсчет проводили посЛе восьмичасового культивирования на качалке при температуре 27—28° на жидкой среде Чапека, в которую вместо NaNOs добавляли различные аминокислоты в концентрации 0,5 % или вместо глицерина — другой источник углерода в концентрации 10 М [13]. Обработку спор НММ и НЭМ вели в течение 2 час. при концентрации мутагенов 0,025— [c.154]

Было проведено сравнительное изучение седиментационных свойств РНК вируса саркомы Рауса и седимеп-тационных свойств РНК других вирусов. Наряду с центрифугированием в градиенте плотности глицерина после обработки диметилсульфоксидом или после нагревания была использована и новая методика — непосредственная обработка 99%-ным раствором диметилсульфоксида, которая гарантирует полную денатурацию нуклеиновых кислот и, таким образом, дает возможность выявить такие разрывы цепей и более длинные пропуски которые [c.114]

Для вычисления и Агд но постоянным таблицам удобно пользоваться специальной логарифмической линейкой. Логарифмы значений и Дгр из постоянных таблиц откладываются на бегунке, но оцифровку их производят соответствующими значениями [х — хо]. На линейке нанесена равномерная логарифмическая шкала, причем начальный штрих шкалы бегз нка может быть установлен на требуемое значение После этого, передвигая визир, отсчитывают ряд значений и Дгд без перемещения бегунка. В табл. 29 приведен пример вычисления таких данных для эмульсии масла N 11)01 в 65-процентном растворе глицерина, для которой седиментационные кривые были представлены на рис. 130, (Г. Они относятся к снимку, сделанному через 7 мин. после начала центрифугирования. Рис. 131 показывает кривую распределения, полученную путем нанесения d dr на график в зависимости от г , для трех моментов времени (7, 12 и 21 мин. после начала вращения), представленных седимен-тациоиными кривыми на рис. 130, о. Средний радиус, соответствуьо- [c.516]

Клетки выращивают в соответствующей среде. В случае жидких культур клетки отделяют в стерильных условиях центрифугированием и ресуспендируют осадок в стерильной свежей среде, содержащей или 10% (объем/ объем) глицерина (готовят добавлением 20%-ного глицерина к равному объему стерильной среды), или 5% (объем/объем) ДМС (приготовленного добавлением соответствующего количества 1007о-ного ДМС к стерильной среде). В случае роста культур на агаре клетки смывают с его поверхности стерильной жидкой средой, содержащей подходящий криопротектор, и разливают в стерильные маркированные ампулы по 0,4 мл суспензии, содержащей не менее 10 клеток/мл. [c.528]

Отмывание эритроцитов от глицерина проводят в настоящее время тремя методами многократного центрифугирования, обратимой агломерации и автоматического непрерывного центрифугирования. Все методы от.мывания основаны на принципе постепенного разведения содержащих глицерин эритроцитов гипертоническими растворами не проникающих в клетки веществ — дисахаридов, многоатомных спиртов, электролитов и др. Осмотическая активность отмывающих растворов понижается по мере уменьщення концентрации внутриклеточного глицерина. После процедуры отмывания в эритроцитах, как правило, остается менее 0,5% глицерина. [c.70]

Метод серийного центрифугирования оказывается наиболее приемлемым для отмывания небольщих (до 20%) концентраций глицерина. Он заключается в последовательном разведении суспензии клеток растворами понижающейся осмотичности и центрифугировании препаратов после каждой процедуры разведения с удалением надосадочной жидкости. После отмывания эритроциты разводят в соотнощении 1 1 одним из взвешивающих растворов, разработанных в Центральном научно-исследовательском институте гематологии и переливания крови [c.70]

Метод цитоагломерации исключает процедуру центрифугирования в процессе отмывания эритроцитов от глицерина. В этом случае используют явление агломерации эритроцитов в растворах неэлектролитов со слабокислым pH (5,2—6,1) с последующим оседанием агломератов. К недостаткам метода относятся высокий уровень свободного гемоглобина, значительные потери (около 25—30% клеток) и необходимость применения больших объемов отмывающих растворов. [c.70]

При производстве препарата вирин-ЭКС полиэдры осаждают из фильтрата центрифугированием. Осадок суспендируют в минимальном количестве дистиллированной воды и добавляют предварительно простерилизованный глицерин до титра 1 млрд. полиэдров в 1 мл. Готовый препарат разливают во флаконы в количестве, соответствующем одной или нескольким гектарным нормам. [c.79]

Предметные стекла помещают в лунки цитоцентрифуги и предварительно центрифугируют со 100 мкл 3%-ного БСА — ЗФР, чтобы на поверхности стекла образовалась тонкая белковая пленка. Затем в каждую лунку вносят по 100 мкл клеточной суспензии и вновь центрифугируют 15 мин при 800—1000 об/мин (для хрупких клеток, например клеток миеломы или экспланти-руемых клеток, скорость должна быть меньше). После центрифугирования алмазной иглой на стекле очерчивают круг, внутри которого должно находиться клеточное пятно , плохо различимое на влажной поверхности. Препарат фиксируют этанолом или смесью этанола с 5% уксусной кислоты в течение 10 мин, а затем трижды по 10 мин отмывают в ЗФР после этого вокруг очерченного пятна стекло подсушивают фильтровальной бумагой и на клетки наносят 10—20 мкл меченой антисыворотки. Стекла инкубируют во влажной камере при комнатной температуре в случае высыхания антисыворотки возникает яркое неспецифическое свечение фона. После инкубации предметные стекла трижды отмывают ЗФР и заключают в забуференный фосфатами глицерин. Фиксированные клетки можно окрашивать непрямым способом, инкубируя их сначала со специфической немеченой антисывороткой, а затем, после тщательного отмывания, — с флуоресцирующим антиглобулииовым реагентом. [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология