Минимальные вируса

Перед вами стоит задача разработать простой, чувствительный и воспроизводимый тест для обнаружения содержащего двухцепочечную ДНК вируса, вызывающего летальную инфекцию у крупного рогатого скота. Поскольку эффективность лечения зависит от ранней и точной диагностики заболевания, необходимо использовать методы, позволяющие выявлять вирус при его минимальном содержании в организме инфицированного животного, еще до появления каких-либо симптомов заболевания. Кратко опишите и обоснуйте последовательность ваших действий. [c.203]

РПГ позволяет выявить антигены в материале при использовании тест-системы, состоящей из антигена оспенной группы и иммунной сыворотки. При положительных результатах линии преципитации иммунной сывороткой тест-антигена и исследуемого антигена совпадают. Минимальная концентрация вируса, выявляемая в реакции, — 10" ООЕ/мл. [c.287]

НЫ, состоящие полностью из мономера А, ведут себя, как типич-ице полиэлектролиты, т. е. обладают высокой характеристической вязкостью, которая понижается при увеличении ионной силы, (На рисунке приведены данные только для одного значения ионной силы.) В этом случае не проводились опыты с растворами, имеющими достаточно высокую ионную силу и приближающимися к идеальным, но предельная минимальная идеальная характеристическая вязкость была оценена на основании данных, полученных для подобных полимеров она оказалась равной 112 сж /г, в случае же раствора с ионной силой 0,0226 эта величина составляет 500 ог /г. При замене мономерных звеньев типа А мономерными звеньями типа В происходит очень сильное уменьшение вязкости, и когда количество звеньев типа В составляет 28,5%, характеристическая вязкость достигает своего минимального значения, равного 4 см г. При сравнении табл. 21 и 27 видно, что это значение [г)] имеет тот же порядок величины, что и соответствующие значения, наблюдаемые для глобулярных белков и кристаллических вирусов. Растворенные макроионы должны быть чрезвычайно компактными, причем внутри их клубков должно быть очень мало растворителя. [c.582]

Из табл. 28 видно, что каждое последующее десятикратное увеличение концентрации вируса в воде влияло на динамику его инактивации и вдвое увеличивало дозу ультрафиолетовых лучей, необходимую для снижения исходного содержания вируса до минимального уровня возможного его выделения из воды. Анализ процента инактивации вируса через различные сроки облучения в пробах воды, содержавших разные исходные концентрации вируса, показывает, что независимо от начальной концентрации вируса в воде при одной дозе ультрафиолетового облучения инактивируется приблизительно одинаковый процент начальной концентрации вируса. [c.140]

В действительности роль, которую играет вода в распространении некоторых вирусных заболеваний, очень спорна. Более того, если мы обратимся к сообщениям о тех редких случаях, когда в возникновении вирусных эпидемий можно обвинить воду, то увидим, что использованная вода всегда была серьезно загрязнена сточной водой. По-видимому, опасность эпидемии возникает только в экстремальных условиях, но наши знания о минимальных опасных дозах вирусов все еще недостаточны. [c.412]

Имеются указания, что для обоих этих вирусов с уменьшением концентрации доза инактивации не уменьшается бесконечно, хотя имеющиеся данные и нельзя пока считать вполне убедительными. Это может зависеть от того, что, как изложено в гл. II, в очень разбавленных растворах большинство активных радикалов, вместо того чтобы реагировать с растворенным веществом, реагируют друг с другом. С другой стороны, поскольку в этих опытах не использовалась специально очищенная вода, эффект мог зависеть от случайного присутствия в воде минимального количества примеси, оказывавшей защитное действие. [c.93]

Время продвижения вируса по нервным стволам соответствует инкубационному периоду заболевания. Его длительность может быть различной минимальной (10—14 дней) при укусе в голову и лицо и более продолжительной (месяц и более) при укусах в конечности. [c.142]

На ранних этапах изучения инфекционной РНК ВТМ важно было установить отсутствие в ней вирусного белка с большей точностью, чем это позволяет чувствительность описанных методов. При использовании стандартных методов выделения нуклеиновых кислот содержание белка в выделенном препарате редко бывает ниже 1 %, а в случае ВТМ это соответствует комплексу одной молекулы РНК ВТМ с одной субъединицей оболочечного белка. Однако если выделять РНК в присутствии бентонита, то загрязнение препарата белком значительно снижается. А в случае ВТМ содержание примеси можно снизить еш,е больше (до 1 белковой субъединицы на 20—50 молекул РНК), если использовать метод реконструкции вируса (см. ниже). Определение следовых количеств примесей всегда сопряжено с трудностями методического характера, а достоверность результатов, полученных с помощью различных тестов на минимальных концентрациях веществ, сомнительна. Для определения примеси белка в препаратах вирусных нуклеиновых кислот были поставлены опыты с радиоактивной меткой ( 8) белка. Все, что удалось извлечь из этих опытов, сводится к тому, что содержание остаточного белка, судя по количеству метки, соответствует 0,04% (при пересчете на содержание серы в белковой оболочке ВТМ). Действительно, то соотношение аминокислот, которые в следовых количествах были обнаружены в препаратах нуклеиновых кислот, не соответствует количественным соотношениям этих же аминокислот в белковой оболочке. Тот факт, что препараты, содержащие 0,04 и 1% белка, не различаются по своей инфекционности (на 1 мг РНК), убедительно доказывает, что инфекционность — свойство, присущее вирусной РНК [142, 455]. Положение это убедительно было доказано только для РНК ВТМ. Однако нет никаких оснований сомневаться в том, что вывод этот носит общий характер и что инфекционность всех вирусов заключена в их нуклеиновых кислотах. [c.179]

Излучение суспензии клеток, зараженных чувствительным к ним вирусом, имеет ярко выраженный характер в течение первых 40—60 мип контактирования клеток с вирусом интенсивность излучения на 100—400% выше, чем у незараженных клеток в начале этого периода наблюдается возрастание интенсивности, а в конце — резкий спад до уровня фона затем следует темповой период 1,5—3 ч интенсивность имеет минимальное значение, близкое к уровню фона затем интенсивность вновь возрастает, как правило, превышая первоначальное значение в 2—3 раза и в течение следуюш их 2—6 ч регистрируется электромагнитное излучение значительной интенсивности. [c.79]

Особый интерес представляет соответствие различий в этих временных интервалах для различных вирусов у РНК-содержащего вируса соответственно все периоды в 1,5—2 раза короче, чем у ДПК-содержащих аденовирусов, и кривая излучения культуры КЭ, зараженной вирусом, аналогично сжата в 1,5—2 раза по сравнению с кривыми излучения культуры ФЭЧ, зараженной Ad-23, и культуры Z-клеток, зараженной Ad-b, с другой стороны, минимальное время проявления зеркального эффекта для опытов с вирусом FPV — 4 ч, а для аденовирусов —6ч можно объяснить тем, что интенсивность излучения за соответствующее время заведомо достигает максимального значения. [c.80]

Электронный микроскоп, создающий изображение благодаря прохождению (просвечиванию) электронов сквозь тонкопленочный образец, называется просвечивающим или трансмиссионным (ТЭМ). Он позволяет выявить детали внутреннего строения микроорганизмов, а также особенности их взаимодействия в анализируемом образце. Предварительно образец фиксируют химически, заливают в различные смолы и контрастируют солями тяжелых металлов. Часть электронов проходит через объект, часть в той или иной степени рассеивается тяжелыми атомами, связав-щимися с компонентами структуры, вследствие чего и формируется контраст изображения. Необходимая для трансмиссионной микроскопии минимальная толщина образца обеспечивается применением специальных устройств для приготовления срезов — ультрамикротомов. Микроорганизмы и вирусы можно наблюдать в ТЭМ и без заливки в смолы. Для этого каплю суспензии помещают на пленку-подложку, высущивают и контрастируют химически или физически — косым напылением металлов (оттенение). [c.97]

Самые мелкие из известных прокариотных клеток — бактерии, принадлежащие к группе микоплазм. Описаны микоплазы с диаметром клеток 0,1—0,15 мкм. Поскольку молекулы всех соединений имеют определенные физические размеры, то, исходя из объема клетки с диаметром 0,15 мкм, легко подсчитать, что в ней может содержаться порядка 1200 молекул белка и осуществляться около 100 ферментативных реакций. Минимальное число ферментов, нуклеиновых кислот и других макромолекулярных компонентов, необходимых для самовоспроизведения теоретической минимальной клетки , составляет, по проведенной оценке, около 50. Это то, что необходимо для поддержания клеточной структуры и обеспечения клеточного метаболизма. Таким образом, в группе микоплазм достигнут размер клеток, близкий к теоретическому пределу клеточного уровня организации жизни. Мельчайшие ми-коплазменные клетки равны или даже меньше частиц другой группы микроскопических организмов — вирусов. [c.22]

Рекомендуемые минимальные концентрации бактерицидного остаточного хлора приведены в табл. 7.1. Эти данные основаны на экспериментах, проведенных при температурах между 20° и 25°С после 10-минутного контакта со свободным хлором и 60-минутного контакта со связанным хлором. Минимальные содержания остаточного хлора, необходимые для разрушения цист и инактивации вирусов, значительно выше эффективным антивирусным агентом считается только недиссоции-рованная хлорноватистая кислота. Поэтому, хотя концентрации остаточного хлора, приведенные в табл. 7.1, обычно считаются вполне приемлемыми, вода, забираемая из загрязненных рек и озер, обычно обрабатывается более высокими дозами хлора. Например, может быть использовано предварительное хлорирование (до точки перегиба) для образования и сохранения свободного остаточного хлора в обрабатываемой воде во время прохождения ею всех стадий процесса очистки. [c.193]

Другой тин стабильного и симметричного построения найден у икоса-эдрических вирусов, например у вируса кустистой карликовости томатов. Изометрический капсид этого вируса (диаметром около 200 А) состоит приблизительно из 60 капсомеров, содержащих около 200 структурных субъединиц. Образование такой структуры есть, несомненно, результат процесса более сложного, чем простая ах регация компонентов. Для этой структуры характерна минимальная площадь поверхности, контактирующей с внешкей средо11. Необязательно, видимо, такяге, чтобы вся нуклеиновая кислота находилась в контакте с белковой оболочкой, а сама белковая оболочка не долн на разрушаться для того, чтобы генетический материал вируса мог выйти из нее наружу. [c.161]

В отношении вирусов отсутствует единство мнений об их положении в таксономической системе. Вирусы определяют как минимальные по размерам живые организмы или же как наиболее активные системы смежных органических соединений. Из этого вытекает, что у вирусов нет определенного места в таксономии и на них не распространяются зоологические или ботанические закономерности, которые при строгом применении ограничили бы нежелательную путаницу независимо от того, какое место в таксономии займут вирусы в будущем. Первое обобщение, сделанное Холмсом [128], уточнили Штейнхауз [243] и Бергольд [45] в своих статьях, посвященных бинарной номенклатуре энтомопатогенных вирусов. Аналогичные попытки предпринял также Жданов [325], но без соблюдений правил и приоритета. [c.65]

В области защиты здоровья человека, главным образом в борьбе с переносчиками возбудителей эпидемий и эпизоотий, сделаны первые успешные шаги к интеграции методов. Например, почти полностью уничтожен важнейший переносчик Aedes aegypti) вируса желтой лихорадки в Центральной и Южной Америке (1900— 1925 гг.) для этого проводили массовую санацию местностей, уничтожение мест выплода и прямую борьбу с личинками комаров при обязательном учете экологических требований. К сожалению, при уничтожении насекомых, вредящих здоровью человека, часто создается неблагоприятная ситуация, так как сохраняющаяся после обработок часть популяции должна быть минимальной. Попытки резко сократить численность переносчиков только с помощью химических инсектицидов, давали очень впечатляющие быстрые результаты при борьбе с некоторыми эпидемиями, однако длительный эффект был редко удовлетворительным и почти всегда [c.300]

Иод широко применяется в качестве дезинфицирующего средства . Минимальной концентрацией иода в воде, при которой в течение 1 мин погибают при благоприятных условиях определенные типы бактерий , является концентрация 0,6 мг л. Так как иод действует не селективно, он может быть применен для уничтожения бактерий всех видов. Иод также эффективен против всех трех видов вирусов полимиелита . Содержание иода в количестве менее 1 части на миллион может быть определено по реакции с а-иафтафлавоном . [c.330]

Таким образом, теория строения белков как полипептидов, обоснованная Э. Фишером, стала прочным фундаментом исследования белков. Неясным оставалось, как при столь однообразном строении различных белков объяснить их весьма разнообразные физические и биохимические свойства. В 20-х годах XX века на примерах каучука, целлюлозы, крахмала были развиты представления о высокомолекулярных соединениях. В то же время были разработаны методы определения молекулярного веса высокомолекулярных соединений и, в частности, белков. Ранее о минимальном молекулярном весе протеидов судили по содержанию в них простетических групп (или каких-либо специфических атомов этих групп, например атома железа в гемоглобине), исходя из предположения, что одна простетическая группа содержится в одной молекуле протеида. Молекулярные веса и таким путем получились огромные, например для гемоглобина 68 000. Применение осмометри-ческого метода определения молекулярного веса (Серенсен, 1917 г.) и особенно разработка ультрацентри(1)угальпого метода (Сведберг, 1926 г.) позволили систематически исследовать молекулярные веса растворимых белков. Оказалось, что их молекулярные веса располагаются в широком интервале величин от 10 000 и ниже для ряда ферментов и гормонов (6500 для инсулина) до 6 600 000 (гемоцианин улитки) и даже до 320 000 000 (белок вируса гриппа). Если принять средний молекулярный вес аминокислотного остатка, входящего в полипептидную цепь белка, равным 115, то окажется, что число аминокислотных остатков в молекулах белков колеблется от нескольких десятков до немногих миллионов. Таким образом, уже по молекулярным весам белки представляют величайшее разнообразие. Простейшие из них вряд ли могут быть отнесены к высокомолекулярным соединениям, между тем как некоторые представляются одними из высокомолекулярных соединений с наиболее громоздкими молекулами. Существеннейшим отличием белков как высокомолекулярных соединений от таких синтетических полимеров, как капрон, полистирол, и таких природных высокомолекулярных соединений, как каучук, целлюлоза, крахмал, является разнообразие элементарных звеньев ( мономеров ), из которых построены белки. Взамен одного мономера (например, остатка ю-аминокапроно-вой кислоты или глюкозы, стирола, изопрена) в белки входит более 20 разных аминокислотных остатков. Это было и вдохновляющим и обескураживающим обстоятельством. Если молекула состоит всего из 20 разных аминокислотных остатков, для нее возможно [c.655]

Другой опыт в 1969 г. был поставлен там же в Краснодарском крае на поздней капусте с целью определить минимальную эффективную концентрацию вируса при применении ВИРИН-ЭКС в борьбе с капустной совкой. Для испытаний использовали препарат, полученный от гусешщ, которых выращивали на лебеде. Испытывали четыре концентрации препарата в двух повторностях. Площадь участка каждой повторности составляла 100 кв. м. Опрыскивание проводили из ранцевых опрыскивателей <(Тремас из расчета 600 л на 1 га. [c.341]

Степень спиральности РНК, по данным различных исследователей колеблется от 50 до 84%. Так, согласно спектрофотометрическим исследованиям, около 76% нуклеотидов в рРНК принимает участие в образовании спирализованных участков (pH 7 ионная сила 0,1 25° С), а в РНК вируса табачной мозаики спиральность достигает 84%. Длина спиральных участков в молекуле РНК окончательно не установлена. Большинство авторов считает, что в образовании одной спирали участвует максимально 10 пар нуклеотидов, что соответствует одному витку спирали, а минимальный размер спирали, по-видимому, ограничен 4—6 парами нуклеотидов Неспаренные мононуклеотиды, как шарниры, соединяют отдельные спиральные участки. Подобная вторичная структура РНК [c.430]

В тех случаях, когда для данного вируса животных или растений метод подсчета бляшек или локальных поранчений не применим, концентрацию инфекционного вируса можно определять менее точными методами. Один из этих методов сводится к тому, что с помощью последовательных разведений определяют минимальную концентрацию, вызывающую типичные симптомы заболевания. В других случаях о концентрации вируса судят по времени, необходимому для получения определенной цитонатической ответной реакции. [c.23]

Особенно хорошо изучена чувствительная к нуклеазе область мини-хромосомы вируса SV40. Короткий сегмент около точки начала репликации, непосредственно предшествующий промотору для поздней единицы репликации, предпочтительно расщепляется ДНКазой I, нуклеазой микрококков и другими нуклеазами (в том числе рестриктирующими ферментами). По минимальной оценке область предпочтительного расщепления имеет в длину 400 п. н., причем этот фрагмент может быть вырезан в виде свободной ДНК. [c.391]

Вероятно, изучение диссоциации ГТХ под действием мочевины [14], рассмотренное выше, необходимо проводить параллельно с измерением отношения осей по вязкости. Такой подход позволил прийти к важному выводу о том, что угнетающее действие на гемагглютинацию, вызываемое вирусами, оказывают в равной степени основные молекулы ГТХ, половина и четверть молекулы (ГТХ 2 , ГТХ 2" и ГТХ 2" ). Более мелкие фрагменты не оказывают угнетающего действия на гемагглютинацию. Другими словами, существует определенный минимальный размер субъединиц ГТХ, необходимый для эффекта угнетения гемагглютинации под действием вирусов. Мягкая обработка, приводящая к диссоциации молекул ГТХ, не затрагивает углеводную часть молекулы и не оказывает влияния на активность той ее части, которая является субстратом для нейраминидазы. Действительно, все фрагменты ГТХ, обладающие ингибирующей активностью, дают положительную реакцию Шиффа (йодная кислота реактив Шиффа). Влияние размера молекулы гликопротеипа па его ингибирующие свойства было ранее подчеркнуто Готтшалком [32]. В дальнейшем этот вопрос специально изучали Фазекас де Санта Грос и Готтшалк [33]. [c.157]

Показано, что в ГТХ количество аспарагиновой кислоты (21,3 остатка на минимальный молекулярный вес) выше, чем содержание в нем глутаминовой кислоты (15,4 остатка на минимальный молекулярный вес ГТХ). К этой особенности в аминокислотном составе ГТХ чувствителен вирус гриппа (штамм Ли). Оксипролин не обнаружен в ГТХ. Кривая титрования 121] показала, что в ГТХ имеется только 18 титруемых групп на минимальный молекулярный вес. Однако на основании аналитических данных можно было ожидать наличия в ГТХ минимум 41 титруемой группы. Эти данные свидетельствуют о компактной с большим количеством поперечных связей молекуле ГТХ и хорошо согласуются с данными о высокой резистентности ГТХ к протеолитическим ферментам. [c.159]

Одну пару камер разъединяли через 2, 4, 6, 8, 12, 24, 48 ч контакта, затем зараженную зеркальную и клеточные культуры помещали отдельно в разные термостаты. Демонтирование камер, фиксирование, окраску и морфологические исследования стекол проводили через 18, 24, 48 ч раздельного культивирования. Оказалось, что минимальное время контакта, необходимое для появления зеркального ЦПЭ, равно 4 ч для вируса РРУ и 6 ч для аденовируса, вируса Коксаки А-13 и сулемы. Более короткая экспозиция четкого эффекта не дает. Зеркальный эффект при [c.29]

Видно, что увеличение избыточности и одновременно уменьшение энтропии происходит в ряду от MS2 к SV40. У генома MS2, избыточность которого минимальна, гены практически не перекрываются друг с другом. Геномы вирусов G4, ФХ174, SV40 имеют зоны перекрытия функциональных единиц иногда весьма обширные. Такого рода наложения увеличивают число ограничений, которым должна удовлетворять нуклеотидная последовательность, и повышают ее избыточность. [c.77]

Окислительно-восстановительный потенциал (ОВП), нли редокс-потенциал, является показателем заряда среды, и его величина, следовательно, определяется соотношением окисляющих и восстанавливающих химических соединений, концентрации кислорода и pH. При изготовлении свежей среды и помещении ее в культуральный сосуд требуется время для установления равновесного ОВП (процесс называется уравновешиванием). Оптимальный уровень ОВП для роста многих линий клеток составляет +75 мв, что соответствует значению рОг растворенного кислорода 8—10%. Некоторые исследователи предпочитают контролировать поступление кислорода в культуру с помощью окислительно-восстановительного, а не кислородного электрода. При прослеживании изменения ОВП с помощью редокс-электрода и рН-метра (с милливольтовой шкалой) можно получить данные о характере роста клеток [5]. Это связано с тем, что значение ОВП снижается в течение логарифмического роста клеток и достигает минимального значения примерно за 24 ч до наступления стационарной фазы (рис. 3.5). Такой способ оценки роста культуры является особенно эффективным, когда невозможно отбирать пробы клеток. Этот метод полезен также для предсказания момента окончания логарифмической фазы роста, чтобы смена среды, добавление вирусов или промоторов образования клеточных продуктов были произведены в оптимальное время. Влияние ОВП на клеточные культуры подробно рассмотрено Гриффитсом [6]. [c.71]

Смотреть страницы где упоминается термин Минимальные вируса: [c.260] [c.251] [c.256] [c.260] [c.285] [c.80] [c.186] [c.537] [c.40] [c.93] [c.491] [c.387] [c.256] [c.99] [c.308] [c.316] [c.150] [c.27] [c.163] [c.14] [c.19] [c.75] [c.228] [c.84]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология