Флуоресценция при использовании метода

При использовании метода добавок определение проводят также по измерениям относительной интенсивности. При этом исследуемый образец сравнивают не с растворами чистого соединения, а с исследуемым образцом, в который введены добавки 3,4-бензпирена. Этим обеспечивается одинаковый состав примесей в стандартах и изучаемом образце, что приводит к компенсации эффектов реабсорбции и возможного тушения флуоресценции посторонними примесями. [c.291]

Кристаллофосфор, приготовленный из вольфрамового ангидрида, карбонатов лития и магния, активированный марганцем, имеет ярко-красную флуоресценцию, интенсивность которой зависит от концентрации марганца. Спектр флуоресценции литий-магний-вольфраматного кристаллофосфора, активированного марганцем, представляет собою бесструктурную полосу с максимумом 668 ммк. Для количественного определения марганца использован метод фотографирования флуоресценции приготовленных кристаллофосфоров с заранее приготовленной шкалой и фотометрирования полученных на фотопластинке пятен. Зависимость между разностью почернений пятна и фона (Д5) и логарифмом количества марганца в кристаллофосфоре является линейной в интервале от 0,001 до 0,1 мкг в 50 мг основы. [c.502]

При использовании методов люминесцентного анализа во многих случаях для обнаружения и исследования флуоресцирующего вещества достаточны чрезвычайно малые его количества. Кроме того, в ряде случаев отпадает необходимость подвергать изучаемое или искомое вещество химическим воздействиям . Не случайно, что первые шаги по использованию флуоресценции для целей анализа сделаны именно биологами [85]. [c.210]

Следует отметить, что растворитель, использованный при получении спектров, показанных на рис. 137—140, содержал 10% циклогексана. Был взят циклогексан, который применяют для приготовления концентрированных стандартных растворов веществ. Дело в том, что если работать с большим количеством образцов (например, в аналитической практике), то для всех разбавлений, за исключением последнего, удобно использовать именно циклогексан, поскольку его высокочистые образцы. легкодоступны, в то время как очистка н-парафинов — сложная и длительная процедура. Присутствие малых количеств циклогексана на спектры практически не влияет. Однако если спектры Шпольского измеряются в чистом циклогексане, то необходима надлежащая тепловая обработка замороженной смеси, поскольку вид спектра зависит от того, какая из двух возможных кристаллических форм циклогексана используется — кубическая или моноклинная. Для полного превращения в форму, устойчивую при 77 К (моноклинную), замороженную смесь перед охлаждением нужно подвергнуть тепловой обработке при 145—150 К. Лич и сотр. [302] использовали флуоресценцию как метод изучения фазовых превращений циклогексана, в том числе образования третьей, метастабильной модификации. [c.367]

Для молекул с квантовым выходом флуоресценции, не равным нулю, может быть использован метод определения e j,, основанный на измерении падения интенсивности флуоресценции. Оптическая плотность фотохромного слоя вне области активации [c.200]

Определение полиароматических углеводородов в объектах окружающей среды включает концентрирование их путем экстракции, а затем идентификацию и количественное определение. Количественное определение 3,4-бензпирена с использованием внутренних стандартов проводят по линейчатым спектрам флуоресценции экстрактов с пределом обнаружения 10 % [546, 547], а с использованием метода добавок — до Ы0 % [548—552]. Определение в воде полициклических ароматических соединений, включая 3,4-бензпирен, в основном проводят путем экстрак- [c.255]

Для количественного определения марганца использован метод фотографирования флуоресценции кристаллофосфоров с заранее приготовленной шкалой и фотометрирования полученных на фотопластинке пятен. Фотографирование осуществляют на нега- [c.374]

При использовании метода флуоресценции для проверки подгонки оборудования должны приниматься во внимание следующие особенности. Раствор флуоресцеина должен быть слегка щелочным, так как, будучи нейтральной солью, он гидролизуется в водной среде, и на агрегатах негидролизованной соли и возникающей при гидролизе кислоты происходит сильное рассеяние света. Для удаления суспендированных частиц раствор должен быть центрифугирован. Следует избегать слишком концентрированных растворов, целесообразнее применять очень разбавленные растворы, флуоресценция которых только в несколько раз превышает фон [42]. [c.391]

В работе приведены данные о выходе. [166] Для детектирования использован метод флуоресценции, более чувствительный, чем УФ-спектроскопия [c.433]

Как и следует ожидать из данных ультрафиолетовой поглотительной спектроскопии (см. выше), парафины и нафтены в основном лишь слабо флуоресцируют. Ароматические соединения, начиная от бензола, обладают слегка видимой флуоресценцией (полосы поглощения видны в коротких длинах волн обыкновенного ультрафиолета), но флуоресценция увеличивается по мере усложнения структуры кольца, полосы поглощения близки к видимой области или в самой видимой области [202]. Использование флуоресцирующего спектра при решении аналитических проблем было ограничено, хотя некоторые ароматические соединения, находящиеся в более тяжелых нефтяных фракциях, дают характерные картины [203—204]. Но так как флуоресценция очень чувствительна к следам инородных веществ [205 ], то другой метод, ультрафиолетовая спектроскопия поглощения, должен быть использован в качестве дополнения к этим анализам. [c.190]

Принципиальная схема типового флуориметра показана на рис. 1.34. Излучение источника 1, выделенное первичным светофильтром 2, попадает на кювету с пробой 3. Возникающее излучение флуоресценции Уф через вторичный светофильтр 4 попадает на фотоэлемент или фотоумножитель 5, где оно преобразуется в электрический сигнал, пропорциональный интенсивности флуоресценции, который усиливается электронным усилителем 6 и измеряется миллиамперметром. При использовании линейного участка градуировочного графика воспроизводимость флуориметрических определений составляет приблизительно 5%. Метод применяют для чувствительного определения очень малых количеств элементов при анализе органических веществ, при определении малых количеств витаминов, гормонов, антибиотиков, канцерогенных соединений, нефтепродуктов и др. [c.97]

Как правило, люминесценция нефтяных фракций обусловлена наличием ароматических структур. Сине-голубой цвет флуоресценции позволяет допустить, что в молекулах асфальтенов за подобное свечение ответственны трициклические ароматические ядра. Несмотря на обоснованность и логичность такого рода выводов, сделанных на основе экспериментальных данных по люминесценции, все же информация, получаемая при использовании этого метода, недостаточна для серьезной аргументации структурно-мо-лекулярных концепций асфальтенов. [c.215]

Для анализа полициклических ароматических углеводородов успешно применяют флуоресцентные датчики, высокая чувствительность и селективность которых определяется сильной естественной флуоресценцией этих веществ. В результате чувствительность по 3,4-бензпирену составляет 4-10 г в пробе [15]. Этим методом анализируют растворы, полученные при поглощении ароматических углеводородов из газа, а также экстракты сточных вод. Время выхода веществ при использовании в качестве растворителя водного раствора ацетонитрила (при 60 °С и 5,5 МПа) составляет в мин антрацен — 4,8, пирен— 5,9, хризен — 7,3, [c.324]

Использование графического метода позволяет предсказать изменение характера кинетических кривых флуоресценции и помо- [c.96]

Блок-схема установки, реализующей метод счета фотонов , приведена на рис. 37. В качестве источника возбуждающего света используется импульсная лампа, работающая от источника постоянного тока. Электрические импульсы, получаемые на втором электроде, используются в качестве стартовых импульсов время-амплитудного преобразователя. Серьезной трудностью, ограничивающей разрешающую способность данного метода, является тот факт, что импульсы на выходе ФЭУ имеют длительность нескольких наносекунд и широкий разброс по амплитуде. Электронная аппаратура позволяет регистрировать положение крутого переднего фронта импульсов с точностью до 0,01 не, однако само его положение зависит от амплитуды импульса (рис. 38), Преодолеть эту трудность позволяет использование дискриминатора импульсов с изменяющимся порогом, зависящим от амплитуды поступающего импульса. Таким путем удается резко повысить временную разрушающую способность метода (без такого дискриминатора не удается получить разрешение лучше нескольких наносекунд). Преобразование интервала времени в амплитуду импульса производится гак называемым время-амплитудным преобразователем, имеющим два входа старт и стоп соответственно для первого и второго импульсов. Такие схемы хорошо разработаны в электронике. Особенность таких преобразователей в том, что они срабатывают от первого поступающего импульса стоп и не регистрируют никаких последующих импульсов в течение определенного мертвого времени . Поэтому, если на фотоумножитель после импульса возбуждения попадут последовательно два фотона, будет зарегистрирован лишь первый из них. В результате при большой интенсивности флуоресценции, когда вероятность попадания более чем одного [c.106]

Метод импульсного фотолиза может быть использован для изучения флуоресценции (интенсивности, тушения флуоресценции). При помощи импульсного фотолиза очень удобно исследовать замедленную флуоресценцию. Для изучения флуоресценции в установке импульсного фотолиза в самом простом варианте исключается зондирующий свет. Если для измерения флуоресценции использовать дополнительную отражающую полупрозрачную пластинку, расположенную на пути зондирующего луча, то в одном эксперименте одновременно можно измерять оптическую плотность короткоживущих продуктов, например триплет — триплетного поглощения, и интенсивность флуоресценции. [c.169]

В связи со все более широким проникновением микроэлектроники в аналитическую практику и использованием в лабораториях все более сложных и эффективно действующих аналитических приборов и систем иногда недооценивают значение точных химических методов анализа. Студент-химик должен как можно раньше понять, что во всех современных физических методах серийных анализов, например основанных на использовании явлений атомной абсорбции, УФ-эмиссии или рентгено-флуоресценции, необходимо применять градуировку, которую [c.100]

Причины возникновения флуоресценции были кратко описаны выше. Использование этого явления в анализе основано на способности некоторых веществ флуоресцировать под действием ультрафиолетового излучения. Число таких веществ невелико, так что метод вначале в основном применяли для анализа органических веществ и в меньшей степени для неорганических. В последние годы метод успешно применяют и для чувствительного определения многих неорганических соединений. [c.367]

Если атом, находящийся в парообразном состоянии, излучает после поглощения резонансного излучения, то возникает атомная флуоресценция. На использовании этого явления основан метод атомно-флуоресцентной спектрофотометрии. [c.381]

При низкой интенсивности возбуждающего света, когда [7)], а следовательно, и [Тмалы, использование метода стационарных концентраций позволяет получить для интенсивности замедленной флуоресценции (/( /) следующее выражение [c.129]

Из приборов, основанных на использовании этого метода и отвечающих современному уровню, следует отметить газоанализатор мод. 82А (Seres, Франция). Газоанализаторы, основанные на использовании метода пламенной фотометрии, более сложны в эксплуатации, чем приборы, основанные на использовании метода флуоресценции, так как требуют при эксплуатации наличия вспомогательных газов (водорода и т. п.). [c.212]

Определение марганца методо>1 приготовления кристаллофэс-форов. Кристаллофосфор, приготовленный из вольфрамового ангидрида, карбонатов лития и магния и активированный марганцем, имеет ярко-красную флуоресценцию, интенсивность которой зависит от концентрации марганца. Спектр флуоресценции литий — магний — вольфраматного кристаллофосфора, активированного марганцем, представляет собой бесструктурную полосу с максимумом 668 нм [3031. Для-количественного определения марганца использован метод фотографирования флуоресценции полученных кристаллофосфоров совместно с заранее приготовленной шкалой и фотометрирования возникших на фотопластинке пятен. Метод весьма специфичен. Другие ионы в количестве до 2 мкг практически не мелхают определению марганца. Чувствительность определения 1-10 % при навеске 10 г (воды или кислоты). Ошибка определения не превышает 30%. Этот способ использован для определения марганца в воде и соляной кислоте [72, 73, 75, 76, 6111. [c.71]

Использование метода пропускания ограничено еще и тем, что материал подлонши (в общем случае — стекло) и слой сорбента поглощают УФ-излучение. Поэтому измерение пропускания света с длиной волны меньше 325 нм возможно только в методе гашения флуоресценции (недостатки последнего описаны ниже). Предположим, что более 80% веществ, разделяемых методом ТСХ, поглощают только УФ-свет, тогда ясно, что б лабораторной практике нельзя проводить измерения по методу пропускания, особенно в УФ-области. В связи с этим часто применяют опрыскивание пластинки растворами красите- [c.183]

Для титрования комплекса кадмия (а также Mg и 2п) с 8-оксихинолин-5-сульфокислотой, флуоресцирующего при 495— 515 предложен метод, сочетающий фотолиз с флуориметрией. Он основан на фотохимической генерации ионов Со (из Со2(С204)з), вытесняющих кадмий из его комплекса с образованием нефлуоресцирующего соединения. Для фотолиза и возбуждения флуоресценции использован один и тот же источник ультрафиолетового излучения [491], [c.82]

Не слишком узкая ( 0,05 ям) линия генерации ЛОС может быть перестроена в спектральном диапазоне шириной вплоть до нескольких десятков нанометров без смены активной среды. Представляет интерес дальнейшее увеличение диапазона плавной перестройки. С этой целью применяются два -способа. Первый состоит в том, что используется слолшая активная среда — смешанный раствор двух (или более) органических соединений, выбранных так, чтобы спектр поглощения одного по возможности слабо перекрывался со спектром флуоресценции другого и чтобы они имели различный стоксов сдвиг спектра флуоресценции. Другой метод заключается в использовании в качестве активного вещества неустойчивых в основном состоянии продуктов фотохимических реакций, которые претерпевает возбужденная молекула. Спектры образующихся продуктов часто сдвинуты в длинноволновую сторону по отношению к спектру флуоресценции исходных молекул. [c.193]

Несомненно, что большие успехи спектрофлуориметрии в области биохимии, биологии и медицины в значительной степени обусловлены фундаментальными работами Юденфренда и сотрудников, большинство из которых описано в нр.екрасной монографии [342]. Мы кратко остановимся на этих областях применения прежде всего для того, чтобы проиллюстрировать использование метода для анализа органических веществ. Многие биологически важные соединения флуоресцируют (правда, иногда в области довольно коротких длин волн), и наилучшие методы, основанные на природной флуоресценции, заключаются обычно в регистрации испускания при больших длинах волн, где не мешают другие соединения, присутствующие в биологическом материале. Методы, основанные на естественной флуоресценции, используются, например, для анализа витамина А, рибофлавина, лекарственных препаратов (хинин и порфирины) и растительных пигментов. [c.435]

Лигнин и лигнинсульфоновые кислоты можно определять физическими методами измерением оптической плотности в видимой и в УФ-областях спектра, а также измерением флуоресценции. Химические методы определения этих веществ основаны на использовании фенольных свойств лигнина. Некоторые реактивы [c.180]

Информация о свойствах молекул во флуоресцентном возбужденном состоянии может быть значительно расширена, если наряду с обычным спектром флуоресценции измерять спектр флуоро-метрической фазы, т. е. запаздывание по фазе света люминесценции относительно возбуждающего света в узких спектральных участках на протяжении всего спектра флуоресценции. Этот метод, предложенный Черкасовым и сотрудниками, был использован ими для исследования растворов производных фталимида [70—73]. Было обнаружено, что в растворах производных фталимида в неполярных растворителях имеются, по крайней мере, два типа люминес-цирующих центров — с более коротковолновым (центры I) и более длинноволновым (центры И) спектрами флуоресценции, причем центры II образуются из непосредственно возбуждаемых центров I за время жизни возбужденного состояния. Установлено, что центры II представляют собой ассоциаты возбужденных молекул фталимидов с молекулами воды. [c.243]

При определении содержания некоторых металлов в крови часто существенно пользоваться методом имеющим малый абсолютный предел обнаружения с тем, чтобы ограничиваться небольшим объемом пробы расходуемой на анализ. С этой целью был разработан микро-метод определения цинка и кадмия в сыворотке крови [147, с. 311]. Атомизация производилась путем непосредственного испарения пробы из небольшой металлической чашки (диаметр 9 мм, глубина 6 мм). Чашка изготовлена из относительно тугоплавких металлов (Ni или Та), точка плавления которых ограничивает температуру испарения. Для анализа сыворотка разбавлялась в 50—100 раз и 1 мкл этого раствора пипеткой вводили в чашку, которая высушивалась вблизи пламени аналитической горелки (защищенное азотом воздушно-ацетиленовое пламя). После охлаждения к осадку добавлялось 20 мкл пергидроля и он снова высушивался. Вся эта процедура занимала около двух минут. После сушки чашка вдвигалась в пламя и измерялся интегральный сигнал флуоресценции, возбуждаемой лампой с полым катодом типа Сулливана — Уолша. Для анализа строились градуировочные кривые по растворам с известной концентрацией, проходившей ту же процедуру, что и измеряемые образцы. Производились также анализы с использованием метода добавок. Ряд образцов измерялся обычным методом АФА с введением разбавленной в 25 раз сыворотки с помощью распылителя в- пламя горелки. В табл. IV. 23 приведено сравнение результатов, полученных этими тремя методами. [c.105]

Определенные достижения в исследованиях карбенов физическими методами связаны с усовершенствованием флуоресцентного метода в газовой фазе, давно используемого для получения спектров испускания как стабильных соединений, так и свободных радикалов (см. выше). Этот метод успешно применен (см., например, [352, 353]) и при низких давлениях— до 0,1 гПа. Использование метода индуцированной лазерной флуоресценции в исследовании карбенов F 1 и FBr, полученных в разрядно-проточной установке [354, 355] (атомы О получены СВЧ-разрядом в смеси Аг—О2) [c.41]

Приведенные выше примеры иллюстрируют, какие возможности дает повышение чувствительности обнаружения продукта индикаторной ферментативной реакции в ИФА. Для более полного использования этих возможностей можно сочетать преимущества флуориметрических методов детектирования с лазерным возбуждением флуоресценции. Использование лазера в качестве источника возбуждения флуоресценции при ИФА дает три важных преимущества. Во-первых, высокая интенсивность лазерного облучения позволяет непосредственно наблюдать более интенсивную флуоресценцию. Усиление флуоресцентного сигнала наблюдается как для тестируемого объекта, так и для фона, поэтому необходимо принимать специальные меры (см. ниже) для поддержания фонового сигнала на относительно невысоком уровне. Во-вторых, лазерное излучение является монохроматическим, поэтому возможное наложение рэлеевских и раманов-ских зон невелико и может быть отсечено с помощью определенных фильтров. И в-третьих, лазерный пучок легко сфокусировать на образце с минимальным объемом. Проточная ячейка для лазерного флуориметрического ИФА типа той, что показана на рис. 19-2, может быть очень маленькой и простой по конструкции. [c.293]

Ранее нами была высказана гипотеза, что стабилизация и переориентация доменов под действием антигенной детерминанты индуцируют изменение характера относительного движения всех остальных доменов, входящих в состав молекулы IgG (Кяйвяряйнен и др., 1973). Это должно приводить к изменению не только конформации РаЬ- и Рс-субъеди-ниц, но и к изменению взаимодействия между субъединицами. Эта гипотеза в настоящее время находит подтверждетше в цитированных выше работах с использованием метода малоуглового рентгеновского рассеяния и метода круговой поляризации флуоресценции. [c.34]

Люминесцентные методы включают в себя исследования с использованием флуоресценции (флуориметрия) и фосфоресценции (фосфориметрия). Наиболее широко люминесцентные измерения используются как методы анализа и контроля за протеканием химических и биохимических реакций, а также для кинетических исследований быстрых реакций электронно-возбужденных молекул. [c.49]

Определение ПАУ в объектах окружающей среды, основанное на применении эффекта Шпольского, включает в себя их концентрирование путем экстракции н-гексаном, а затем идентификацию и количественное определение. В частности, количественное определение бенз(а)пирена проводят по линейчатым спектрам флуоресценции экстрактов [18]. Предел обнаружения с использованием внутренних стандартов составляет 10 7-10 8 о/д а д случае метода добавок - до 3 10 %. Как правило, спектры люминесценции регистрируют при 77 К (жидкий азот). Снижение температуры позволяет улучшить отношение сигнал/шум, однако сложность требуемого оборудования (гелиевые криостаты) гфепятствует внедрению сверхнизких температур. Обычно экстракт замораживают быстрым по-фужением тонкостенной кварцевой пробирки в жидкий азот. Иногда наносят каплю раствора на охлаждаемую площадку криогенератора. Для возбуждения люминесценции гфименяют источники с непрерывным спектром (ксеноновые лампы), из которого с помощью монохроматора или интерференционного фильтра вьщеляют полосы в 1-3 нм. Длины волн, рекомендуемые для возбувдения каждого ПАУ, приведены в [c.250]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология