Обнаруживающие реагенты

Тонкослойный электрофорез (ТСЭ). Аналогично ТСХ, ТСЭ проводят на тонких слоях высокодисперсных сорбентов. Преимуществом метода ТСЭ является возможность использования универсальных обнаруживающих реагентов, применяемых в ТСХ. [c.364]

Специфические реагенты указаны в соответствующих разделах этой главы, а также в разд. 9.9 гл. 9, где дан список обнаруживающих реагентов. В этом разделе мы приведем лишь несколько общих неспецифических реагентов. [c.95]

А. НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ОБНАРУЖИВАЮЩИЕ РЕАГЕНТЫ [c.139]

При обнаружении незакрепленных слоев опрыскиванием необходимо соблюдать осторожность, чтобы не сдуть слой сорбента. Опрыскивание производят с большего расстояния, чтобы обнаруживающий реагент оседал на хроматограмму под действием силы тяжести в виде тонкого тумана. Целесообразно опрыскивать незакрепленные слои еще влажными, т. е. сразу после проявления. Если хроматограмма проявлялась в летучем растворителе, можно рекомендовать хроматограмму высушить и проявить повторно в неполярном растворителе с более высокой температурой кипения (например, высококипящим углеводородом). При этом величины Rf не изменятся, а слой останется влажным. Описан также метод, согласно которому к системе растворителей добавляют небольшое количество декалина [87]. [c.73]

Полный гидролиз полисахарида проводят для установления природы и соотношения составляющих его моносахаридных остатков. Качественный анализ гидролизата в настоящее время неизменно выполняют с помощью распределительной хроматографии на бумаге, что требует лишь микроколичеств сахаров и вместе с тем дает возможность идентифицировать присутствующие нейтральные, основные и кислые моносахариды. По хроматографии углеводов существует обширная литература [91, 97, 127, 131, 162]. Было испытано множество систем растворителей и много обнаруживающих реагентов как специфических, так и неспецифических, и составлены таблицы относительных скоростей движения сахаров на бумажных хроматограммах [131]. Для окончательной идентификации определенного сахара не достаточно одного только хроматографического анализа. [c.303]

В этой главе мы увидели, что ТСХ является простым методом, использующим дешевое оборудование и материалы. Этот метод позволяет быстро проводить не слишком сложные разделения и при разумном использовании обнаруживающих реагентов и значений Кр является хорошим аналитическим методом качественного анализа функциональных групп. Однако при расширении области применения ТСХ для более сложных разделений становятся заметными ограничения этого метода, и он проигрывает при сравнении с недавно развитым методом высокоэффективной высокоскоростной хроматографии в колонках, который позволяет более просто контролировать экспериментальные переменные и который, кроме того, можно автоматизировать. [c.185]

Другой фактор, который может повлиять на выбор обнаруживающего реагента, — сложность химической реакции, необходимой для получения требуемого результата. Предпочтительность выбора одностадийного процесса обусловлена не только временем, но также и возможной ошибкой, возникающей в каждой дополнительной стадии. [c.146]

ОСНОВНЫЕ ОБНАРУЖИВАЮЩИЕ РЕАГЕНТЫ ДЛЯ БХ И ТСХ [c.139]

В этом разделе приведены некоторые обнаруживающие реагенты (от ОР-1 до (ЭР-31), применяемые в бумажной и тонкослойной хроматографии. Если реагент пригоден только для какого-либо одного типа хроматографии, то это указывается особо. [c.139]

В группу алкалоидов входят соединения настолько различные по структуре, определяемой основным скелетом молекулы, и полярности, зависящей от характера заместителей, что указать какие-либо общие принципы их хроматографирования не представляется возможным. Поэтому мы ограничимся лишь тем, что приведем примеры разделения определенных групп алкалоидов в нескольких растворяющих системах и перечислим основные обнаруживающие реагенты. [c.128]

Чтобы результаты хроматографирования были воспроизводимыми, необходимы очень чистые растворители с постоянными характеристиками. Иногда наличие даже 1 % примеси в растворителе может быть причиной значительного изменения значений Rf хроматографируемых соединений. Например, у абсолютного хлороформа элюирующая способность меньше, чем у медицинского хлороформа, содержащего в качестве стабилизатора около 2% этанола. Подобное же влияние оказывает на этилацетат добавка воды этилацетат легко гидролизуется и образующиеся при гидролизе этиловый спирт и уксусная кислота значительно повышают полярность растворителя. Для обнаружения также требуются высококачественные растворители примеси могут подавлять флуоресценцию или каким-либо образом нарушать действие обнаруживающих реагентов. [c.71]

Элюированные в летучих растворителях хроматограммы свободно подвешивают для сушки на воздухе, лучше всего в вытяжном шкафу или в токе воздуха под вытяжным колпаком. При использовании малолетучих растворителей (например фенола, коллидина) или бумаги, пропитанной формамидом или пропиленгликолем, лучше всего сушить хроматограммы в сушильном шкафу с циркуляцией воздуха. Если хроматографируемые вещества достаточно термостойки, хроматограммы можно сушить над нагревательной плиткой. Когда для обнаружения используют индикаторы, надо специально проследить, чтобы с бумаги испарился весь кислотный или основный растворитель, входящий в состав обнаруживающего реагента, а также чтобы сушка хроматограмм проводилась в нейтральной атмосфере. Соляную кислоту нельзя удалить с бумаги полностью. Удаление следов уксусной кислоты с хроматограмм можно ускорить, если подержать хроматограммы горизонтально над паром, идущим от плоской чашки с кипящей водой, или обдувать их горячим паром. [c.94]

Анион Обнаруживающий реагент и окраска Предел обнаружения, мкг [c.169]

Перечисленные реактивы были подобраны для определенной хроматографической системы. В ряде случаев состав подвижной фазы, пропитывающей тонкий слой сорбента при проведении хроматографического процесса, может оказывать значительное влияние на эффективность действия обнаруживающего реагента. [c.43]

Предпочтительный метод выбора растворитепя как для хроматографии в тонком слое, так и для колоночной хроматографии основывается на работе Пайфера /11/. Сложенную вместе пару покровных стекол для микроскопа погружают в суспензию адсорбента, состоящую, например, из 35 г силикагеля И в растворе хлороформ - метанол (65—35 об,%), которая хранится в высоком стеклянном сосуде. Слайды вынимают, разделяют и дают им высохнуть. После этого на них наносят 2 мл 1%-ного раствора образца, подлежащего испытанию, и проявляют в сосуде для реактивов, содержащем немного растворителя с небольшой эгаоирующей силой. Это обычно занимает 2-3 мин. Обработанные таким образом пластинки вынимают, быстро сушат и устанавливают положение пятен с помощью подходящего обнаруживающего реагента. Эту операцию повторяют, используя растворители с большей элюирующей силой и, если необходимо, применяя для проявления бинарные или тройные смеси, до тех пор, пока значения Яр интересующих нас компонентов не будут находиться между 0,3-0,8. При этом имеется также возможность попробовать различные обнаруживающие реагенты. [c.145]

Обладающие прочными слоями адсорбентов пластинки с готовым слоем фирмы "Мегск" или менее объемистые листы фирмы "СЬгогго - гат " можно сохранять в лабораторных журналах или в темных ящиках. Детали хроматограмм можно осторожно описать на пленке адсорбента мягким карандашом или даже шариковой ручкой. В тех случаях, когда пятна видны только в ультрафиолетовом свете, их границы надо обвести карандашом прямо на слое. Используемые обнаруживающие реагенты йолжны давать стабильную окраску. Хорошим обнаруживающим реактивом общего назначения является фосфорномолиС-ценовая кислота, и мы в течение нескольких пет сохраняли хроматограммы, выявленные этим реактивом. [c.167]

Точность метода измерения гашения флуоресценции ниже, чем точность прямого измерения флуоресценции, и стандартные отклонения /38, 39/ составляоот 4-7%, Чувствительность метода гашения суже, чем чувствительность, достигаемая при использовании большинства обычных обнаруживающих реагентов, и примерно равна 5-10 мкг. Как и в случае измерения флуоресценции, в зависимости от того, происходит гашение без предварительного опрыскивания или после опрыскивания флуорогенными реагентами, например родамином В можно различить два случая /40/. [c.175]

Если для данного определения возможен выбор обнаруживающих реагентов, то при разработке метода усилия для проведения сравнительных испытаний с различными реагентами оправданы. Очевидно, чем выше чувствительность реагента, тем больше различия в окраске для стандартных добавок вещества, и тогда определение можно проводить более точно. В том случае, если реагенты приблизительно одинаковы по чувствительности, но дают различные окраски, оптимальный выбор может быть сделан чисто субъективно. Лучше всего сравнивать чистые цвета, такие, как красный и голубой, чем смешанные (фиолетовый и оранжевый). Сравнение коричневых цветов, полученных, например, с помощью метода обугливания, с точки зрения точного разграничения различных содержаний веществ представляет наибольшу.ю трудность для всех исследователей. [c.146]

Другой фактор, который может повлиять на выбор обнаруживающего реагента — с.тожность хндшческой реакции, необходимой для получения требуемого результата. Предпочтителен выбор одностадийного процесса, так как уменьшаются время проведения хроматографического процесса и возможные ошибки, возникающие на каждой дополнительной стадии. [c.268]

Среди современных хроматографических методов, в значительной мере способствовавших развитию анализа органических и биоорганических соединений и совершенствованию способов препаративного разделения, заметное место занимает тонкослойная хроматография. В процессе разделения указанным методом анализируемая смесь перемещается вместе с подвижной фазой по тонкому слою порошкообразного сорбента, обычно нанесенного на стеклянную пластинку. В зависимости от природы сорбента при этом допускается использование одного или сразу нескольких принципов хроматографического разделения. Тонкослойная хроматография начала быстро развиваться примерно с 1958 г. главным образом благодаря работам Шталя [46] усовершенствовавшего методику ТСХ и предложившего практи чески современный ее вариант. До 1958 г. в печати, безусловно появлялись отдельные статьи, посвященные данной теме так первые статьи были опубликованы еще в конце прошлого века но они почти не были замечены. Истории развнтия хроматогра фии посвящен специальный раздел монографии Кирхнера [26] Главная причина относительно быстрого распространения ТСХ заключается в следующем этот метод позволяет достаточно быстро осуществить довольно эффективное разделение (400— 3000 теоретических тарелок в зависимости от характера и метода разделения [16]), используя простые и недорогие приспособления. Другое преимущество ТСХ — широкая область применения— от качественного и полуколичественного анализа до препаративного разделения. Так, методом ТСХ можно обнаруживать следы соединений и выделять за одну о-перацию порядка одного грамма соединения, пользуясь легкодоступными сорбентами, растворителями и обнаруживающими реагентами. Кроме [c.85]

Следует отметить, что некоторые обнаруживающие реагенты образуют сильно корродирующие и ядовитые аэрозоли, поэтому опрыскивание пластинок следует вести в специальных камерах, изготавливаемых из химически стойких пластмасс (поливинилхлорида, полиэтилена), которые непосредственно присоединяют к вытяжке. Схема такой камеры представлена на рис. 9.8. Подлежащие обнаружению пластинки помещают на стойке, также изготовленной из поливинилхлорида. На такую же стойку помещают и микропластинки. Выпускаются в продажу также камеры, которые не нужно подсоединять к вытяжке при проведении опрыскивания некоторые камеры, предназначенные для краткосрочного пользования, изготавливаются даже из специальной бумаги. [c.96]

Ацетилированные целлюлозы (с различной степенью ацети-лирования) также используются, хотя и очень редко, в хроматографии, главным образом обращенно-фазной (см. разд. 9.8.9). Макоималвное содержание ацетильных групп составляет 44,8%, что соответствует триацетату. Ацетилированная целлюлоза растворяется в ряде галогенсодержащих растворителей, диоксане, кетоиах и сложных эфирах она сильнее подвержена разрушающему действию обнаруживающих реагентов. Адгезионные свойства ацетилированной целлюлозы хуже, чем у неацетили-рованной, поэтому, приготавливая из нее тонкие слои, необходимо применять связующее. [c.105]

Химические методы обнаружения применяются чаще всего. При обнаружении указанны(Ми методами хроматограмхму после окончания разделения обрабатывают газам , например аммиаком, бромом, иодом или опрыскивают различными неспецифическими или специфическими обнаруживающими реагентами. В главе, посвященной бумажной хроматографии, указаны распространенные типы пульверизаторов для опрыскивания (см. гл. 3, рис. 3.11). Реагентов для опрыскивания известно очень много, большинство их используется и в БХ. Некоторые из. наиболее важных реагентов перечислены в разд. 9.9. Обнаружение с помощью химических реагентов очень эффективно, поскольку они часто образуют окрашенные производные сразу при опрыскивании или в процессе последующего нагревания,, которое может проводиться при температуре, превышающей 100 °С. Иногда в процессе нагревания можно наблюдать характерное изменение окраски, что также позволяет качественно-идентифицировать некоторые соединения. [c.118]

Адсорбент — силикагель элюент — смесь хлороформ — метанол (95 5) обнаруживающий реагент — насыщенный раствор хлорида сурьмы(1П) в хлороформе (100 °С). А — исходное соединение Б — целевой продукт гидроксилироваиия В — побочный продукт гид-роксилирования (глюкозид) цифры —номера пробирок 17, 13, 9, 5, Г — собранные- [c.275]

Способы приготовления наиболее важных обнаруживающих реагентов для БХ и тех описаны в перечне обнаруживающих реагенто в гл. 9. Ниже эти реагенты обозначены буквами ОР с дефисом и номером, соответствующим номеру в этом перечне. [c.100]

Сахара, сахарные спирты, вообще полиолы и их производные очень гидрофильны и обнаруживаются без труда. Описан ряд обнаруживающих реагентов на сахара. Чаще всего для обнаружения используются реакции сахаров со спиртами, приводящие к образованию фурфурола, который легко дает цветные реакции. Другие реакции обнаружения основываются на восстанавливающих свойствах многочисленных сахаров, наличии в них карбонильной или вицинальной диольной группы. [c.103]

В качестве обнаруживающего реагента первой группы часто применяют опрыскивание 3%-ным раствором гидрохлорида -п-анизидина во влажном -бутаноле [57] и нагревание до 100— 105 °С. Альдогексозы дают коричневые, а альдопентозы розовые пятна. Вместо гидрохлорида можно использовать фосфат, а вместо н-бутанола — водный этанол с добавкой фосфорной кислоты. К числу реагентов общего назначения относится ани-линбифталат (ОР-17). Альдопентозы дают светло-красные пятна и флуоресцируют, альдогексозы, метилальдопентозы и гексу-роновые кислоты дают оливково-коричневые пятна и флуоресцируют желтым цветом, Фталевую кислоту можно заменить на щавелевую, а вместо указанных выще двух оснований можно использовать для обнаружения следующие основания или их соли ж-фенилендиамин, фосфат о-дианизидина, фосфат дифениламина, ацетат или трихлорацетат бензидина, гидрохлорид л-толуидина, оксалат л1-фенилендиамина, /г-аминобензойную кислоту и др. [c.104]

Хроматографические свойства этих соединений, как и соединений других типов, зависят от нх гидрофильности, т. е. от числа полярных функциональных групп, главным образом гидроксильных. Для обнаружения соединений этой группы используются специфические реакции с участием фенольных гидроксильных групп. К числу основных обнаруживающих реагентов относятся 0,1%-ный раствор хлорида железа(П1), который дает зеленую окраску с о-диоксифенолами и чернильно-синюю окраску с вицинальными триоксифенолами, нитрат серебра (ОР-2), растворы диазотированных аминов, например сульфаниловой кислоты (ОР-20) или п-нитроанилина (ОР-19). Реже применяется классический реагент Фолина-Дениса или Гиббса (1%-ный этанольный раствор 2,6-дихлорхинонхлоримида). Удобен также реагент, в состав которого входят хлорид железа (III) и ферри-цианид калия (ОР-21) в реакцию с этим реагентом вступают не только фенолы, но и все другие восстанавливающие вещества. Флавоноиды и кумарины можно также обнаружить по их флуоресценции. Флавоноиды, если только не происходит гашения флуоресценции, обычно проявляют себя флуоресценцией от желтого до зеленого цвета, которая усиливается после обработки хроматограммы парами аммиака. Кумарины чаще всего об- [c.115]

Хроматографически эти соединения не отличаются существенно от кислородсодержащих. Вклад атома серы в полярность лищь ненамного меньше вклада атома кислорода. Однако наличие серы в молекуле позволяет использовать некоторые специфические обнаруживающие реагенты. Типичным реагентом для обнаружения таких соединений является иодно-азидный реагент (ОР-28), который реагирует с тиолами, тионами и дисульфидами, а также с определенными гетероциклическими се-русодержащими соединениями. [c.135]

При отделении цинка от кадмия в качестве электролита использовали 0,1 М НС1. Электрофоретический процесс проводили при напряжении 200 в в течение 30 мин. Обнаруживающим реагентом служил 0,05 М раствор К2СО3, насыщенный дитизоном. [c.134]

Дитман [9] разделил ряд оксикислот на слоях целлюлозы, элюируя кислоты смесями растворителей амиловый спирт— муравьиная кислота—вода (4 40 2), -бутанол—муравьиная кислота—вода (60 10 20) и вгор-бутаиол—2 н. раствор аммиака (80 20). Гетлбауэр [8] провел хроматографический анализ 10 оксикислот в виде солей с диэтил амином на целлюлозе, применяя смесь н-бутанол—диэтиламин—вода (85 1 14). Роль обнаруживающего реагента выполнял нингидрин такой способ позволяет определять 0,5 мкг кислоты. В работе [32] описана методика разделения 4-(4-диметиламинофенилазо)фенациловых эфиров шести оксикислот [32]. [c.391]

Адсорбент кизельгур G вещество для пропитки парафиновое масло (10 % в петролейном эфире с т. кип. 50—60°С) элюирующий растворитель 85 %-ная уксусная кислота длительность разделения 2,5 ч обнаруживающий реагент фосфомолибденовая кислота количество анализируемого соединения синтетические вещества всегда 2 мкг, неизвестные вещества всегда 10 мкг. [c.408]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология