Скорость реакции спектрофотометрия

Постоянство оптической плотности раствора реакционной смеси на какой-то длине волны свидетельствует о том, что концентрация вещества, поглощение которого на данной длине волны значительно больше, чем поглощение других компонентов реакционной смеси, остается постоянной в течение опыта. Современные двухволновые спектрофотометры открывают широкие возможности в химической кинетике. Использование их позволяет фиксировать не оптическую плотность на одной длине волны, а разность оптических плотностей на двух длинах волн. Эти длины волн могут быть выбраны таким образом, что вклад остальных компонентов в поглощение будет пренебрежимо мал и вся регистрируемая разность оптических плотностей может быть отнесена к исследуемому компоненту. Если поддерживать постоянной концентрацию поглощающего вещества в условиях, когда остальные компоненты реакционной смеси находятся в избытке, то реакция будет протекать с постоянной скоростью, т. е. кинетическая кривая в координатах расход титранта (поглощающего реагента) — время будет представлять собой прямую с тангенсом угла наклона, равным начальной скорости реакции при выбранной концентрации вещества. Возможность растянуть таким образом начальный период реакции позволяет с большей точностью измерить ее начальную скорость, а следовательно, и константу скорости реакции. Это особенно важно при изучении ферментативных процессов. Пусть в системе осуществляется реакция по уравнению [c.282]

Так как при разбавлении конец реакции становится менее резким, измерения при 80° пе производились при более высоких разбавлениях. Кроме того, в этих измерениях трудно определить отдельно период индукции. Измеряя же скорость реакции при комнатной температуре при помощи спектрофотометра, можно определять период индукции и работать с более высокими разбавлениями. Результаты этих измерений приведены на рис. 3. [c.137]

Во-вторых, величина х не обязательно является причиной регрессии величины у, ибо другой фактор 2 может изменяться в соответствии с х и быть истинной причиной. Например, скорость реакции окисления воздухом могла меняться в зависимости от pH и быть истинной причиной регрессии объема раствора, израсходованного на титрование в зависимости от pH. С другой стороны, наклон линии наименьших квадратов абсорбционной способности и зависимости от концентрации часто принимается непосредственно за коэффициент экстинкции, в то время как в действительности наклон может подвергаться воздействию третьей переменной, такой, как ширина щели спектрофотометра. [c.613]

Для относительно медленных реакций, таких как окисление глюкозы, описанное выше, смешивание реагентов вручную обычно достаточно для проведения интересующей реакции. Все реагенты за исключением глюкозы можно добавлять в соответствующую кювету для пробы, помещенную на пути светового пучка в спектрофотометре. Затем в кювету можно прибавить аликвоту раствора с неизвестным содержанием глюкозы, перемешать и измерить начальную скорость реакции. [c.669]

Очень важной количественной характеристикой двухквантовых реакций является квантовая эффективность у двухквантовой реакции. Величина у определяется как отношение числа прореагировавших молекул к числу квантов света, поглощенных в триплетном состоянии. Для определения y необходимо измерить скорость реакции и скорость поглощения света триплетными молекулами. Так как среди продуктов реакции всегда имеются парамагнитные частицы (радикалы, ион-радикалы, электроны), то наиболее общим методом определения скорости реакции является метод ЭПР. Если известен коэффициент экстинкции продукта реакции, то возможно использование метода низкотемпературной спектрофотометрии. [c.69]

Для определения скорости реакции измеряют концентрацию индикаторного вещества обычно физико-химическими методами оптическими (фотоколориметрия, спектрофотометрия, люминесценция), электрохимическими (потенциометрия, амперометрия, кулонометрия, полярография), термометрическими и др. Эти методы обеспечивают непрерывное измерение концентрации индикаторного вещества. [c.65]

При температуре 60°С на время от 15 мин до 1 ч. (Время и температура реакции зависят от скорости реакции определяемого фенола.) После этого с помощью спектрофотометра с кюветами с /=1 см при 515 нм измеряют поглощение растворов в обеих пробирках относительно поглощения метанола. Содержание фенола определяют затем с помощью калибровочного графика по значению разности поглощений анализируемого и холостого растворов. [c.41]

Для измерения скорости реакций с участием окрашенных реагентов применяют фотоэлектроколориметры ФЭК-М и ФЭК-Н или спектрофотометры [1]. [c.35]

Если реагирующее вещество или продукт реакции представляет собой хромофор, скорость его потребления или образования можно определить, измеряя оптическую плотность при фиксированной длине волны через те или иные промежутки времени или следя за изменением поглощения во времени с помощью самописца. Скорость реакции можно определить по наклону кривой зависимости оптической плотности от времени. Для этой цели разработаны специальные спектрофотометры и приставки к стандартным спектрофотометрам. Некоторые из них, специально предназначенные для определения скоростей реакций, катализируемых ферментами, регистрируют величины оптической плотности непосредственно на бумаге самописца, что дает возможность следить одновременно за протеканием нескольких реакций. [c.178]

Разработаны многочисленные методики определения ферментов с использованием радиоизотопов. В ряде случаев никаких других удобных способов просто не существует. Кроме того, методам с применением изотопов присуща высокая чувствительность, что необходимо для проведения многих видов исследований. Как отмечается в другом разделе данного руководства (разд. 18.2.2), количество фермента пропорционально скорости превращения субстрата или образования продукта. Следовательно, необходимо иметь данные об изменении концентрации субстрата или продукта в зависимости от времени. Для того чтобы анализ был достоверным, начальная скорость реакции должна быть постоянной в течение небольшого промежутка времени и пропорциональной содержанию фермента в исследуемой пробе. Некоторые приборы, такие, как спектрофотометры и рН-метры, позволяют непрерывно следить за скоростью реакции в одной анализируемой пробе, причем ход реакции часто регистрируется самописцем на бумажной ленте. Однако в других случаях, как, например, при исследовании ферментов с помощью радиоизотопов, скорость реакции можно определять лишь путем периодического измерения радиоактивности в отдельных аликвотах реакционной смеси. [c.242]

Кюветы спектрофотометра заполняют средой, содержащей фосфатный буфер (pH 7,4), 1 мМ K N, 1 мкМ ротенон, 1,5 мМ НАДН, 10—20 мкМ цитохром с. Устанавливают длину волны 550 нм (точно ). Для этого кювету помещают в кюветное отделение, устанавливают длину волны по шкале прибора на отметке 550 нм и добавляют к среде нейтрализованный (pH 7,4) раствор аскорбиновой кислоты (конечная концентрация — 5—10 мМ). Цитохром с немедленно восстанавливается, и раствор меняет цвет от красновато-оранжевого до ярко-розового. Устанавливают шкалу длин волн на 550 нм по максимальному поглощению раствора восстановленного цитохрома с, при дальнейшей работе установку длин волн не меняют. Реакцию начинают внесением препаратов в кювету, содержащую окисленный цитохром с, и регистрируют увеличение поглощения при 550 нм. Рассчитывают удельную активность препаратов в микроэлектронэквивалентах за 1 мин в расчете на 1 мг белка. Коэффициент миллимолярной экстинкции для цитохрома с Активность фермента, характерного для внешней мембраны, определяют по разнице скоростей реакций в присутствии и в отсутствие ротенона. [c.412]

Поскольку регистрация скорости реакции проводится фото- или спектрофотометрически по поглощению золя свободного теллура в растворе желатина, то лгетод часто относят к спектрофотометрическому. Следует отметить, что приведенная выгае реакция практически не протекает в отсутствие рения. Мнкроколичества рения ускоряют ее и через 1—2 часа наблюдается выделение черного осадка элементарного теллура. Серо-черный раствор легко коло-риметрируется визуально, на фотометре или спектрофотометре. [c.142]

Долзилом была описана аппаратура, использующая в качестве детектора стандартный спектрофотометр Бекмана. Горизонтальная стеклянная трубка для наблюдений длиной 30 сж и с внутренним диаметром 2 мм закрепляется в прямоугольном металлическом блоке, который можно передвигать через отделение для ячеек спектрофотометра отсчеты оптической плотности берут обычным образом для ряда положений. Смесительную камеру изготовляют, просверливая два отверстия у конца трубки для наблюдения. Растворы реагирующих веществ из резервуаров подают в смесительную камеру давлением газа (2—3 атм). Для каждого опыта требуется около 500 мл кан дого из реагирующих веществ. Можно исследовать реакции с временем полупревращения примерно до 5 мсек. Если температура постоянна с точностью до 0,1°, константы скорости реакции воспроизводятся с точностью до 2—3%. Такую степень термостатирования нетрудно получить в области температур 10—30° для этого достаточно иметь баню с постоянной температурой, окружающую резервуары, а также нагревающие элементы в металлическом блоке. Значительным достоинством этой аппаратуры является то, что с ней легко работать и не требуется знания электроники. Такую аппаратуру можно использовать для исследования любой реакции, приводящей к изменению поглощения в видимой или ультрафиолетовой части спектра, если только имеется достаточное количество реагирующих веществ и растворителя. [c.45]

Равновесная концентрация реагента или продукта может быть измерена в какой-либо одной точке трубки для наблюдения (метод одного наблюдения ). При этом измеренная концентрация соответствует определенному времени контакта. В серии опытов достигаются разные времена контакта путем варьирования скорости введения реагентов в трубку для наблюдения или путем измерения в разных точках вдоль трубки для наблюдения. И в этом случае наиболее удобными являются фотометрические методы, поскольку при изучении разных скоростей реакций можно выбирать различные точки для наблюдения вдоль трубки, достигая тем самым максимальной чувствительности без перестройки установки. Далциел [67] показал, что к проточной системе можно приспособить продажный спектрофотометр. Полезные сведения об экспериментальной методике можно найти в изложении недавнего исследования реакции Ре(1П)-8СК- [35]. [c.91]

В растворах хлорной кислоты при облучении ультрафиолетовым светом (лампа спектрофотометра Сагу , модель 14) нептуний(У) окисляется до нептуния(У1) [183]. Скорость окисления не зависит от концентрации НС1О4 в пределах 0,5—2 М. Константа скорости реакции окисления при 60 °С равна (6,28 0,58)-10- . [c.94]

При добавлении пиридина скорость реакции увеличивается и достигает предельного значения при некоторой его концентрации. На этом плато кинетическое уравнение по форме подобно (8), лишь кру > >к. Семейство спектров, полученных с помощью спектрофотометри-ческих измерений, можно объяснить, полагая существование равновесия [c.286]

Скорость реакции определяли двумя способами в одном случае следили за увеличением интенсивности спектральной линии при длине волны 273 ммк (связанной с нептунием (IV)), спадом интенсивности линии при 649 ммк (уран (IV) и уменьшением интенсивности линии при 983 ллг/< (нептуний (V)). Спектры снимали на спектрофотометре Бекман DU или на регистрирующем спектрофотометре Кери 14, при этом кюветы термостатировали. В другом методе, нептуний(IV) экстрагировали теонилтрифторацетоном, и его концентрацию определяли радиометрическим анализом. Когда уран (IV) был в избытке при относительно низких концентрациях кислоты, концентрация Np(IV) достигала максимума, что свидетельствует о дальнейшем восстановлении Np(IV) до Np(III) ypanoM(IV). Это дальнейшее восстановление нептуния (IV) ураном (IV) изучалось [c.309]

Кинетические методы предусматривают инициирование химической реакции и последуюш,ее наблюдение за ее развитием во времени. Метод часто используется при определении дегидрогеназ человека [12]. Одним из наиболее важных соединений этого класса является а-гидроксибутиратдегидрогеназа (GBD), измерение концентрации которой в сыворотке крови проводится при диагностике инфаркта миокарда. Авторами работ [13, 14] предложен метод определения концентрации GBD при по.мощп специального спектрофотометра, называемого анализатором скорости реакции. Принцип метода заключается в следующем GBD катализирует реакцию (субстрат +МАО продукт + -fNADH-f-H+ (где NAD — р-никотинамидадениндинуклеотид) следовательно, скорость этой реакции, которая может контролироваться по интенсивности поглощения при 340 нм, является мерой ферментативной активности и соответственно концентрации. В прибор помещают одиовремепио до 16 образцов, где они последовательно автоматически анализируются. Результаты могут быть либо представлены в виде графика (и тогда их обработку проводит сам экспериментатор), либо переданы в компьютер (через соответствующий электрический интерфейс) для автоматической обработки. [c.28]

Гидратированный алектрон в ая возникает как лабильная промежуточная частица при облучении водных (я спиртовых) растворов алектронамн, рентгеновскими лучамн н ультрафиолетовым светом. Константы скорости реакций сольватированного электрона измерен ны методами ИР н МКР. За расходованием в ад следили методом скоростной спектрофотометрии (максимум поглощения вдд лежит в области 700 ммк). Ковстанты скорости реакции с ль-шинством ионов н органических соединений имеют порядок 10 и лимитируются днффу ей.КоаффиаиеяТ диффузии ад, согласно бЗ], рав н 4,7 10 см .сек, а его радиус г - 2,5 - ЗА [2543. [c.516]

Это наглядно показали Гутман и др. кинетическими исследованиями редокс-реакций в неводных средах методом спектрофотометрии остановленной струи [61]. Исследуя кинетику восстановления сольватов железа (III), Гутман и сотр. показали, что чем меньше координационное число образующихся сольватов, тем выше скорость восстановления субстрата. Для значений констант скорости восстановления сольватов гексакоординированного и пентакоординирован-ного железа (III) разность может составлять даже несколько порядков величины. Если же образуются сольваты с одним и тем же координационным числом, но в разных растворителях, то с увеличением донорной способности растворителя скорость реакции восстановления уменьщается. Последняя зависимость является следствием более высокой устойчивости сольватированного иона, находящегося в более высокой степени окисления. [c.201]

На рис. 9.9 представлена оптическая схема инфракрасного спектрофотометра Бекман Асси1аЬ1 . Прибор имеет двухлучевую оптическую систему и три скорости сканирования. Образцами могут служить газы, жидкости, твердые тела. Прибор позволяет регистрировать пропускание как функцию волнового числа или времени (при измерении скоростей реакций). Этот гфибор дает возможность работать в интервале частот от 4000 до 600 СМ . В настоящее время выпускаются в продажу и другие прекрасные спектрофотометры для измерений в са.мых различных спектральных интервалах. [c.506]

Применяя перечисленные выше способы ультрафиолетовой и видимой спектрофотометрии, можно определять спектральные свойства растворов в состоянии равновесия. Совершенно очевидно, что спектральные методы могут быть использованы и для изучения кинетики любой реакции, сопровождающейся образованием, разрушением или изменением хромофора, при условии, что реакция происходит в доступном для наблюдения интервале времени. Примерами такого рода исследований могут служить работы в области энзимологии, в которых скорость реакций, сопровождающихся восстановлением НАД+ и НАДФ+, измеряли по изменению поглощения при 340 нм. Наблюдаемое изменение поглощения обусловлено изменением я-электронной системы пиридинового кольца в результате восстановления, сопровождающегося удалением положительного заряда с атома азота и добавлением в сопряженную систему атома водорода в пара-положении относительно атома азота. [c.526]

О скорости нитро-аципревращения 1-нитроциклогексена су дили по уменьшению высоты полярографической волны. Реакцию проводили непосредственно в термостатированной полярографической ячейке с выносным насыщенным каломельным полуэлементом. Полярографические кривые регистрировали на полярографе ЬР-60. При малых скоростях реакции следили за изменением высоты волны во времени, а при больших — регистрировали высоту волны при постоянном потенциале, соответствующем середине площадки предельного тока. Величины pH буферных растворов измеряли на потенциометре ЛПУ-01. ИК-спектры в растворах ССЦ снимали на спектрофотометре иН-Ю с призмой из N30. [c.80]

Как отмечалось выше, при изучении скоростей реакции перекрестного роста методом спектрофотометрии было найдено, что скорость присоединения стирола к полибутадиениллитию была одной и той же в отсутствие и в присутствии бутадиена [121], что, по мнению авторов, не согласуется с представлениями о наличии избирательного комнлексообразования лития с бутадиеном. Однако показано [178], что при учете явления ассоциации данные этой работы вполне согласуются и со случаем избирательного ком-плексообразования молекулы диена с активным центром и не могут служить основанием для опровержения гипотезы о роли таких комплексов в реакциях роста цепи. При этом следует отметить, что опубликованные результаты по гомо- и сополимеризации, инициированной RLi, также хорошо объяснимы и на основе представлений об одностадийном механизме реакций роста цепи [16] (без предварительного комнлексообразования мономера с активным центром). [c.376]

С помощью спектрофотометров для измерения поглощения в ультрафиолеговой и видимой областях спектра определяют способность растворенных веществ поглощать свет при определенных длинах волн. График, на котором поглощение света отложено против длины волны (спектр поглощения), помогает идентифицировать соединения и дает информацию о структуре хромофоров. Количество света, поглощенного измеряемым веществом при той или иной длине волны, позволяет определять его концентрацию, а изменение поглощения во времени — скорости реакций. [c.168]

Смотреть страницы где упоминается термин Скорость реакции спектрофотометрия: [c.431] [c.354] [c.68] [c.41] [c.41] [c.149] [c.486] [c.366] [c.244] [c.243] [c.159] [c.14] [c.495] [c.144] [c.829] [c.136] [c.1173] [c.100] [c.323] [c.142] [c.397] [c.113] [c.58]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология