Хроматография на бумаге нисходящая

Методики получения распределительных хроматограмм на бумаге. Методика проведения анализа на бумаге аналогична методике, применяемой в тонкослойной хроматографии и описанной в гл. IV. Анализ может выполняться восходящим или нисходящим способом на полосках специальной бумаги. Кроме того, исходная смесь может наноситься в центр круга и далее распределяться концентрическими кольцами от центра к периферии. В этом случае получают круговую хроматограмму. Прибор для получения круговой хроматограммы изображен на рис. 11.2, а приспособление крз жка бумаги для получения круговой хроматограммы — на рис. 11.3. Для подачи подвижной фазы в центр круга в бумаге вырезается фитиль, как показано на рис. 11.3. Конец фитиля опускается в сосуд с подвижной фазой. При нисходящей хроматографии пользуются прибором, изображенным на рис. 11.4. Стартовая линии а этом случае находится в верхней части полоски бумаги. [c.219]

Рис. 19. Установка для хроматографического разделения аминокислот на бумаге (нисходящая хроматография)

Техника проявления. По технике проявления различают следующие методы хроматографии восходящий, нисходящий и горизонтальный. Наиболее часто применяют метод восходящих хроматограмм, для чего бумагу при по- [c.356]

Таблица 20.2. Хроматография на бумаге (нисходящая) некоторых сахаров в трех широко используемых растворителях

Одномерная нисходящая хроматография. В верхней части цилиндра (см. рис. 79, б) укрепляют небольшую ванночку, в которую наливают подвижный растворитель, насыщенный неподвижным. На дно цилиндра помещают бюкс с неподвижным растворителем, насыщенным подвижным. Это создает в цилиндре атмосферу насыщенных паров, предотвращающих испарение растворителя с бумаги. [c.75]

Разделение методом бумажной хроматографии. Кислоты переводят в соответствующие гидроксамовые кислоты, которые разделяют на бумаге нисходящим методом в системе растворителей бутиловый спирт — уксусная кислота — вода 4 1 5. Проявление раствором хлорида железа (III) — образование фиолетовых пятен. [c.100]

При электрофорезе с последующим хроматографированием на бумагу, пропитанную раствором электролита, наносят каплю анализируемого раствора и проводят электрофорез, подключая концы листа бумаги через электроды к источнику постоянного тока. После окончания электрофореза бумагу вынимают из прибора, сушат и переносят в камеру для хроматографирования по способу восходящей или нисходящей хроматографии. После окончания хроматографирования бумагу проявляют и проводят качественные и количественные определения. Метод раздельного электрофореза и хроматографирования позволяет проводить эти две операции при различных значениях pH, что улучшает возможности разделения. [c.220]

Нисходящая хроматография. Бумага погружается в подвижную фазу верхним концом. Впитывание и сте-кание жидкости происходят под действием- силы тяжести [c.77]

В растворах частицы аминокислоты несут неодинаковые по величине (а иногда и по знаку) заряды, поэтому в электрическом поле они имеют различную направленность и скорость перемещения на бумаге, что обеспечивает их разделение на основные, кислотные и нейтральные. При последующем использовании хроматографии в нисходящем потоке подвижного растворителя осуществляется их дополнительное разделение вследствие различия в коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися жидкостями. [c.161]

Бумажная хроматография. Метод прост по аппаратуре и чрезвычайно эффективен для аналитических целей, что приводит к его использованию практически во всех химических лабораториях. Для получения бумажной хроматограммы небольшое количество раствора (1—3 мм ) исследуемой смеси наносят в виде пятна на расстоянии см от конца полоски хроматографической бумаги, которую затем этим концом опускают в специальный подвижный растворитель. В зависимости от применяемого метода подвижный растворитель может поступать сверху или снизу (нисходящая и восходящая бумажная хроматография). Время развития хроматограммы составляет, как правило, 8—20 мин. Бумага может быть расположена горизонтально, как, например, при использовании круглых фильтров. При этом раствор и подвижный растворитель помещаются в центр фильтра, а хроматографические зоны располагаются в виде концентрических кругов. Бумага должна нахо- [c.245]

При определениях сахаров проводят нисходящую хроматографию. Бумагу укрепляют в ванночке хроматографической камеры, в которую наливают растворитель, и плотно закрывают камеру. [c.78]

Камеры для получения хроматограмм. К основной аппаратуре, используе ,10Й в ТСХ, относится разделительная камера, или камера для получения хроматограмм. Такие камеры, применяемые для метода хроматографии в тонком слое, близки по конструкции к камерам, используемым в хроматографии на бумаге. Имеются специальные камеры для 1) восходящей хроматографии, 2) нисходящей хроматографии, 3) проточной, горизонтальной и круговой хроматографии. [c.120]

Требования к пробе. Проба должна содержать около 1 % каждого из определяемых веществ. Эта концентрация является контрольной. На бумагу наносят 5—50 мкг, т. е. 0,5—5 мкл пробы. В работе применяют микропипетки для качественного анализа лучше пользоваться тонкими капельницами или трубочками, применяемыми для определения температуры плавления веществ. Пробу наносят на бумагу в заранее отмеченное место, находящееся на расстоянии около 2 см от нижнего (или верхнего при получении нисходящей хроматограммы) края, в виде точек или полос. Иногда при проведении количественного анализа предпочитают наносить пробу в виде полос. Перед проведением хроматографии необходимо удалить растворитель, нанесенный вместе с определяемыми веществами, высушивая бумагу горячим, воздухом. [c.354]

Нисходящая хроматография на бумаге, импрегнированной погружением в 30% раствор формалина в метаноле. [c.139]

При работе по методу нисходящей хроматографии с незакрепленным слоем требуется специальное устройство, схема которого изображена на рис. 1У.13. Сосуд с растворителем устанавливают в кристаллизаторе на подставке так, чтобы растворитель мог подаваться в верхнюю часть пластинки. Подача и слив растворителя (при проточном методе) происходят по фитилям нз фильтровальной бумаги, помещаемым в щели (рис. 1У.13). Пластинку помещают на раму и устанавливают в кристаллизаторе под углом 15—20°. Кристаллизатор герметизируют, после чего производят хроматографирование, останавливая движение фронта растворителя за несколько сантиметров до нижнего края слоя сорбента. [c.144]

Поток элюента может перемещаться вверх по полоске бумаги благодаря капиллярным силам (восходящая хроматография) или вниз самотеком (нисходящая хроматография). Прибор для восходящей хроматографии изображен на рис. 59. [c.50]

Хроматография на бумаге. Известны следующие разновидности хроматографии на бумаге одномерная, двумерная, круговая и электрофоретическая. Одномерная и двумерная бумажная хроматография может быть восходящей и нисходящей. [c.158]

Для выделения, очистки и анализа алкалоидов, антибиотиков, витаминов применяются ионообменные смолы (иониты), уголь, окись алюминия, силикагель, бентонит и другие сорбенты. Распределительная хроматография на бумаге, чаще всего нисходящая, применяется в анализе аминокислот, алкалоидов, сульфаниламидных препаратов, антибиотиков и других органических соединений, а также смесей катионов и анионов. [c.516]

Техника проведения хроматографии на бумаге. В настоящее время получили развитие следующие виды проведения хроматографического процесса на бумаге одномерная и двумерная (восходящая и нисходящая), круговая и электрофоретическая хроматография. Для успешного разделения необходимо, чтобы атмосфера камер, где проводится разделение, была насыщена всеми компонентами системы растворителей. Это насыщение обычно осуществляют, помещая на дно камеры чашку с обеими фазами системы растворителей или укрепляя на стенках камеры бумагу, смоченную растворителями. [c.115]

Подготовка бумаги. Для разделения аминокислот используют бумагу для хроматографии № 1 или 2, предварительно обработанную раствором 8-оксихинолина или раствором трилона Б для удаления следов катионов металлов. Листы бумаги, соответствующие по размеру хроматографической камере, помещают в 0,1 %-ный раствор 8-оксихинолина (раствор 0,1 г 8-оксихинолина в 100 мл смеси, состоящей из н-бутилового спирта, ледяной уксусной кислоты и воды в объемном соотношении 4 1 1). Через 1—2 мин бумагу вынимают, подсушивают, помещают в хроматографическую камеру для нисходящей хроматографии, закрепляют один конец в кювете с подвижным растворителем — смесью н-бутилового спирта, уксусной кислоты и воды (4 1 5 по объему). [c.110]

Часто применяют нисходящую бумажную хроматографию (рис. 58), при которой лист хроматографической бумаги свисает из укрепленной в верху сосуда специальной лодочки со смесью растворителей. Ток этой смеси перемещает разделяемые вещества, нанесенные у верхнего края бумаги, на разное расстояние. Отношение скорости движения растворителя к скорости движения какого-либо вещества называется коэффициентом распределения (Ry) и в стандартных условиях является величиной постоянной. [c.146]

Восходящая бумажная хроматография отличается от нисходящей лишь тем, что лодочка с растворителем стоит на дне сосуда и ток растворителя движется по вертикальному листу бумаги снизу вверх. [c.146]

Часто применяют нисходящую бумажную хроматографию (рнс. 66), при которой лист хроматографической бумаги свисает из укрепленной в верху сосуда специальной лодочки со смесью растворителей. Ток этой смеси перемещает разделяемые вещества, нанесенные у верхнего края бумаги, на разное расстояние. Отношение скорости движения компонента к скорости движения раствори- [c.171]

Рис. бб. Установка для нисходящей бумажной хроматографии лодочка с растворнтелем —герметически закрытый сосуд 3 —. хроматографическая бумага [c.171]

Рис. 422. Принцип хроматографии на бумаге, а—нисходящая хроматография (бумага подвешена на кювете с растворителем) б — восходящая хроматогра- фия (бумага погружена в растворитель нижннм концом).

По оформлению хроматографию можно подразделить на колоночную и тонкослойную. Колонки сорбента могут состоять из активированного угля, хроматографической окиси алю.миния, пермутита, силикагеля, целлюлозы, ионообменных смол (катиониты и аниониты). Разделяемая смесь перемещается в колонке или сверху вниз, или снизу вверх (нисходящая хроматография, восходящая хроматография). В качестве сорбента или носителя используют бумагу, тонкие слои окиси алюминия, силикагеля, геля желатина. Тонкослойная хроматография, впервые предложенная Н. А. Измайловым и М. С. Шрайбер (1937). [c.140]

Принцип распределительной хроматографии основан на различии в коэффициентах распределения аминокислот между водой и органическим растворителем. Особенность метода распределительной хроматографии на бумаге по сравнению с обычной экстракцией ам.инокислот из водного раствора органическим растворителем заключается в том, что одну из фаз, чаще всего водную, помещают на какой-нибудь инертный твердый носитель, а органический растворитель — подвижная фаза,— проходя через первую, извлекает и распределяет аминокислоты на бумаге в соответствии с их коэффициентами распределения. Положение аминокислот на бумаге определяют по отношению скорости движения аминокислоты скорости движения фронта растворителя и обозначают Rf. Величина за висит в первую очередь от строения аминокислоты, затем от системы растворителей, pH среды и сорта бумаги, Чем полярнее аминокислота, тем меньше она растворяется в органических растворителях и тем меньше ее R . Увеличение длины углеродной цепи повышает . Введение в молекулу полярных групп, например, гидроксильной, аминной или карбоксильной понижает Rf Так, Rf фенилаланина в системе фенол/вода = 0,85, а тирозиит 0,51. Другие примеры изменения в зависимости от строения аминокислоты представлены на рис. 3 и 4. Подбирая соответствующие смеси растворителей, можно провести достаточно тонкое разделение аминокислот. Наиболее часто пользуются для такого разделения системами вода — фенол — аммиа вода — бутапол — уксусная кислота бутанол — аммиак — коллидин и т. д. Разделение можно проводить на одномерной или двумерной хроматограммах. Можно пользоваться также различными типами распределительной хроматографии на бумаге — нисходящей, восходящей и радиальной. Величины Rt для каждой из систем растворителей оказываются постоянными при соблюдении [c.479]

Описанные приемы относятся к восходящей хроматографии. Важное значение имеет метод нисходящей хроматографии, когда поток растворителя (подвижная фаза) движется сверху вниз по хроматографической бумаге. При работе по методу нисходящей хроматографии [c.521]

Получение хроматограммы. Растворитель постепенно стекает под действием капиллярных сил в толще хроматографической бумаги в направлении сверху вниз (нисходящая хроматография). Одновременно передвигается по бумаге на определенное расстояние для каждого компонента разделяемой смеси и содержимое нанесенных капель (пятен) как исследуемого, так и стандартных веществ, образуя новые пятна (до проявления практически не всегда различимых глазом). Расстояния, на которые перемещаются пятна, зависят от химического состава и строения компонентов исследуемой смеси. Продолжительность опыта обычно 12—24 ч в зависимости от длины куска бумаги и состава разделяемой смеси. Полученную первичную хроматограмму вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф на 15—20 мин при соответствующей температуре. [c.523]

Листы фильтровальной бумаги Ленинградской фабрики им. Володарского (выпуск 1953 г.) или Ленинградской фабрики Гознак размером 4,5x55 см промывали в камере для хроматографии в нисходящем потоке 50%-ной уксусной кислотой до обесцвечивания элюата и высушивали. При этом с бумаги удаляли соли тяжелых металлов. [c.352]

Хроматография на бумаге. — Этот метод, введенный Мартином и Синджем в 1944 г., используемый теперь iBo всех областях химии, применим, в частности, для идентификации компонентов смеси аминокислот с ди- и трипептидами, получаемой при частичном гидролизе белков и полипептидов. Компоненты гидролизата распределяются между одой, адсорбированной на целлюлозе и являющейся неподвижной фазой, и органическим растворителем, подвижной фазой (например, водный этиловый спирт, бутиловый спирт, фенол), которая движется вдоль листа вверх или вниз, — восходящий или нисходящий способы. Более липофильные аминокислоты сильнее увлекаются органическим растворителем, более гидрофильные —проявляют большую тенденцию связываться с неподвижной водной фазой. Гомологичные соединения, отличающиеся даже на одно метиленовое звено, движутся с различной скоростью и легко могут быть разделены. По окончании хроматографии бумагу высушивают н опрыскивают нин-гидрином для проявления аминокислот в виде окрашенных пятен. Нингидрин (2-гидрат индантриона-1,2,3) окисляет аминокислоты до R HO, NHa и СОг. Образующееся дигидросоединение при взаимодействии с аммиаком образует соответствующий пигмент [c.636]

Полученные экстракты подвергали хроматографическому разделению с помощью бумажно хроматографии [бумага леппи-градская медленная растворитель н-бутаиол—уксусная кислота (ледяная)—вода, 4 1 5, органическая фаза хроматограмма нисходящая]. В качество свидетелей наносили хлорогеновую и кофейную кислоты. [c.127]

Извлечение миогоядерных ароматических углеводородов из сточной воды проводится методом экстракции хлороформом или бензолом (из подщелоченного до рН = 9 —12 стока). Для экстракции необходима трехкратная обработка каждого литра сточных вод (из 5—8 взятых для анализа) 50 ли растворителя. Полученный экстракт упаривают до 20 мл и разбавляют очищенным циклогексаном до 150 м.1. Упарку и разбавление повторяют 3—4 раза для более полного удаления экстрагирующего растворителя. Приготовленный таким образом экстракт наносится на хроматографическую бумагу. Хроматографию осуществляют нисходящим путем в качестве разделяющей смеси применяется уайт-спирит, насыщенный метилпирролп-доном (в соотношении 1 1). Проявление длится около 9 часов, пока фронт растворителя не расположится иа расстояии 1 30 см от линии растворителя. Затем пятна маркир ют при 66 [c.66]

Хроматография осуществляется нисходящим путем. Стартовую линию располагают на расстоянии нескольких сантиметров от верхнего края ленты, который опускается в ванночку с подвижным растворителем уайт-спирит + метилпирроли-дон (1 1). Разделение миогоядерных ароматических углеводородов происходит во время движения растворителя вниз по бумаге в атмосфере насыщенных паров уайт-спирита и метил-ппрролидона при комнатной температуре. Эффективное разделение достигается при прохождении растворителем не менее 50 см. Проявление длится около 8 часов. За это время фронт растворителя достигает нижнего края ленты. Идентификация веществ, соответствующих отдельным зонам хроматограммы, проводится при освещении фильтрованным ультрафиолетовым светом (люминесцентный осветитель ОИ-18, светофильтры СЗС-7, УФС-3). Для [c.69]

Отличие восходя]цей хроматографии от нисходящей состоит в том, что растворитель при восходящей хроматографии поднимается вверх по бумаге. В связи с этим возникает возможность упрощения камеры, так как отпадает необходимость в лодочке и опорной конструкции для нее. Подвижную фазу можпо поместить в чашке на дне камеры или палить непосредственно на дно. Дальнейшая задача заключается в способе нодвеип -вания хроматограммы. [c.126]

Для идентификации антибиотиков и их отнесения к той или иной группе антибактериальных препаратов служит ряд хроматографических методов. До недавнего времени наиболее распространенным методом была бумажная хроматография (восходящая, нисходящая, круговая, центрифужная, одно- и двумерная бумажная хроматография, хроматография на бумаге, пропитанной буферами [2], на ионообменной бумаге [3] и т. п.), однако впоследствии широкое распространение получила также ТСХ (преимущественно на силикагеле или на оксиде алюминия), отличающаяся простотой аппаратурного оформления и высокой скоростью анализа [4—9]. Чтобы придать сорбенту определенные свойства, его можно предварительно обработать соответствующим реагентом. Например, для разделения тетрациклинов, способных образовывать хелаты, Нишимото и др. [10] использовали пластинки с силикагелем, пропитанным раствором динат-риевой соли ЭДТА. Известны примеры хроматографического [c.144]

Для бумажной хроматографии применяют специальные установки. Простейшая установка представляет собой стеклянный цилиндр, в который помещают кювету с растворителем, опустив в нее один конец полосы фильтровальной бумаги. Чаще всего кювету, содержащую растворитель, располагают так, чтобы вер.хний край бумажной хроматограммы находился в этой кювете, т. е. используют нисходящий поток растворителя. Однако применяют и восходящий поток растворителя. [c.293]

Техника выполнения хроматографии на бумаге может быть различной (табл. 5.5). Каплю исследуемого раствора наносят на фильтровальную бумагу, подсушивают, далее бумагу подвешивают вертикально в сосуде с растворителем. Растворитель может либо стекать сверху (нисходящая хроматограмма), либо подниматься вверх по бумаге, нижний конец которой опущен в растворитель. Радиальная хроматограмма получается при нанесении капли испытуемого раствора в центр круглого листа хроматографирующей бумаги. Растворитель в этом случае подается по фити- [c.112]

Нередко применяют друмерную бумажную хроматографию проведя разделение способом, например, нисходящей хроматографии, лист бумаги поворачивают на 90° и повторяют разделение, но с другими растворителями (в этом случае разделяемые вещества будут характеризоваться уже другими значениями Rf). В результате после фиксации и окраски специфическими красителями получают хроматограммы (рис. 59), на которых пятна соответствуют каждому из разделяемых веществ. Для идентифицирования пятен обычно рядом со смесью разделяемых веществ наносят отдельно капельки чистых компонентов смеси (так называемые свидетели ) при сравнении их расположения [c.147]

Пластинки, бумага или пленка могут располагаться горизонтально или вертикально в последнем случае движение подвижной фазы может быть восходящим или нисходящим — это не играет принципиальной роли, так как оно обусловлено в основном капил-лярнылги силами. Препараты на пластинки или бумагу чаще всего наносят в виде полоски или пятна раствора у одного края сорбента, неподалеку от уровня элюирующей жидкости, в которую этот край погружают. В последнее время для ТСХ все чаще применяют вариант кольцевой хроматографии, когда исходный препарат наносят в виде кольца, а элюция идет радиально. [c.13]

В силу капиллярности органический растворитель будет передвигаться по листу хроматографической бумаги. Нанесенное на бумагу вещество движется с током растворителя. Степень сорбции исследуемого вещества--на гидратированных волокнах бумаги (воздушно-сухие листы фильтровальной бумаги в камере, насыщенной парами водонасыщенного органического растворителя, содержат до 20% воды) определяет скорость его передвижения. Вещества, хуже сорбирующиеся на гидратированных волокнах бумаги, будут передвигаться быстрее. После прохождения фронтом растворителя определенного расстояния бумагу высушивают и обрабатывают тем или иным проявителем. Параллельно с опытным раствором на тот же лист бумаги наносят стандартный раствор исследуемого вещества (свидетель), который будет указывать местоположение определяемого вещества. Для идентификации вещества можно также пользоваться величиной Rf, которая является отношением расстояния, пройденного данным веществом, к расстоянию, пройденному фронтом растворителя. Величина Rf зависит от растворителя и качества бумаги. Различают восходящую (растворитель поднимается по бумаге вверх) и нисходящую (растворитель движется по бумаге вниз) хроматографию. [c.46]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология