И не только амилаза

Следует подчеркнуть, что в этом небольшом, казалось бы, химическом процессе - отщепление гексапептида от предшественника-заключено важное биологическое значение, поскольку при этом происходят формирование активного центра и образование трехмерной структуры трипсина, а известно (см. главы 1 и 4), что и белки биологически активны только в своей нативной трехмерной конформации. В том, что трипсин, как и другие протеиназы, вырабатывается в поджелудочной железе в неактивной форме, также имеется определенный физиологический смысл, поскольку в противном случае трипсин мог бы оказывать разрушающее протеолитическое действие не только на клетки самой железы, но и на другие ферменты, синтезируемые в ней (амилаза, липаза и др.). В то же время поджелудочная железа защищает себя еще одним механизмом-синтезом специфического белка ингибитора панкреатического трипсина. Этот ингибитор оказался [c.420]

Оказалось, что молекула крахмала имеет длинную разветвленную цепь (аналогия с кораллом или елкой). В основе такой молекулы лежат более мелкие цепи из - - 250 остатков глюкозы, в которой через некоторые промежутки присоединены боковые цепи по 20 остатков глюкозы. Выяснено, что фермент а-амилаза действует только на центральную цепь, гидролизуя ее на декстрины [- -ами-лаза действует на боковые цепи, отрывая от них молекулы мальтозы. [c.536]

Из полиаз наибольшее производственное значение имеют амилазы — ферменты, катализирующие гидролиз крахмала, а- и р-Ами-лазы катализируют разрыв только а-1,4-глюкозидных связей. [c.118]

Значительно сложнее картина ферментативного расщепления гликогена и крахмала под действием а-амилазы — фермента, имеющего универсальное распространение. Этот фер.мент расщепляет только 1,4-связи однако, благодаря эндо-действию, он способен обходить места разветвлений и в отличие от фосфорилазы и (i-амилазы полностью расщеплять гликоген и крахмал до низкомолекулярных соединений. Основные продукты реакции — мальтоза, мальтотриоза, глюкоза и низкомолекулярные предельные а-декстрины , образующиеся из участков молекулы исходного полисахарида, содержащих связи между цепями. При действии а-амилазы на разветвленный полисахарид четко наблюдаются две стадии ферментативной реакции. Сначала происходят быстрые разрывы гликозидных связей внутри цепей полисахарида, что приводит к быстрому уменьшению степени разветвления и накоплению высокомолекулярных линейных декстринов. Затем значительно медленнее происходит гидролиз линейных декстринов, причем скорость гидролиза замедляется по мере уменьшения молекулярного веса декстрина гидролиз мальтотриозы до мальтозы и глюкозы протекает чрезвычайно медленно. [c.618]

Ферменты микроорганизмов. Ферментами, или энзимами, называются специфические белки с высоким молекулярным весом,, входящие в состав клеток и тканей живых организмов и значительно ускоряющие биохимические реакции. Поэтому они получили название органических или биологических катализаторов. Ферменты находятся везде, где только проявляется органическая жизнь. Их вырабатывают живые клетки, но осуществлять свое действие они могут и вне клеток. Очень велико значение ферментов в процессах обмена веществ внутри микробной клетки и между микроорганизмом и внешней средой, так как они ускоряют различные реакции, а следовательно, и весь обмен веществ. Ферменты были открыты в начале XIX в. В 1814 г. русский химик К. С. Кирхгоф обнаружил, что под действием вытяжки из проросших зерен крахмал превращается в сахар. Так был открыт первый фермент диастаз, или амилаза. В настоящее время открыт целый ряд ферментов, которые катализируют многочисленные реакции в живых организмах и, в частности, в микроорганизмах. Хи,мические реакции могут происходить и без ферментов, но при более высокой температуре и в присутствии кислот илн щелочей. [c.518]

В результате восстанавливается структура активного центра фермента, и он готов к осуществлению следующего каталитического акта в гидролизе гликозидной связи. Есть достаточно оснований считать, что не только амилазы, но и все другие гликозидазы (см. ниже) действуют в соответствии с приведенным выше механизмом. [c.332]

Через 10 мин в пробирки 1, 2 и 3 прибавьте 1-2 капли раствора иода и перемешайте смесь. Наблюдайте за изменением окраски. Еще через 15 мин прибавьте такую же порцию иода в пробирки 4, 5 и 6, а еще через 10 мин - в остальные пробирки. Крахмал и декстрины, как вы помните, дают различную окраску с иодом, и по мере разрушения крахмала амилазой цвет меняется. Так можно судить не только о распаде крахмала, но и о том, какая среда - кислая, нейтральная или щелочная - более благоприятна для этого процесса. [c.152]

Следует отметить, что нелинейные уравнения типа (31) возникают оттого, что в таком подходе используются только кинетические параметры, анализ которых не позволяет различить позиционные изомеры (например, верхний и нижний для тримера на рис. 9). Это, в свою очередь, приводит к появлению разности в правой части уравнения (31). Если бы авторы измерили также относительные частоты расщепления связей (как в описанном выше случае картирования активного центра Така-амилазы А), то стало бы возможным использовать соотношения (24) и (25), [c.53]

Дальнейшая информация о структуре обоих полисахаридов крахмала была получена из данных ферментативного гидролиза его амилазой. При этом амилоза гидролизуется до мальтозы полностью, в то время как амилопектин в этих условиях превращается в мальтозу только на 62%. Связь между положением 1 одного глюкозного остатка и полол<ением 6 — другого является местом прекращения ферментативного гидролиза. Образующийся устойчивый к действию фермента остаток, известный под названием предельного декстрина, изображен в части формулы, на которой показано внутреннее разветвление цепи. Найдено, что внешнее разветвление составляет более чем две трети молекулы. [c.567]

Явления брожения и переваривания известны с незапамятных времен, однако зарождение учения о ферментах (энзимология) относится к первой половине XIX в. Первое научное представление о ферментах было дано еще в 1814 г. петербургским ученым К.С. Кирхгофом, который показал, что не только проросшие зерна ячменя, но и экстракты из солода способны осахаривать крахмал с превращением его в мальтозу. Вещество, извлекаемое из проросшего ячменя и обладающее способностью превращать крахмал в мальтозу, получило название амилазы. Ю. Либих и Ф. Велер открыли агент, расщепляющий амигдалин, содержащийся в эфирном масле горького миндаля. Этот агент был назван эмульсином. В последующие годы были описаны другие ферменты, в частности пепсин и трипсин, вызывающие распад (гидролиз) белков в пищеварительном тракте. [c.116]

Однако ингибирующая амилазу активность была обнаружена только у отдельных представителей семейств, приведенных в таб. 1. [c.215]

Многие ферментные препараты микробного происхожДёййя являются комплексными и наряду с амилазами содержат значительные количества протеаз. Наличие последних часто б1ываёт опасным, так как они могут частично расщеплять клейковину муки, что отрицательно сказывается на формоустойчивости хлеба, особенно если клейковина была слабой. В связи с этим более целесообразен выпуск препаратов, содержащих только амилазы с тем, чтобы количество протеаз, если их введение необходимо, точно дозировалось путем добавления специального препарата. [c.227]

Неамилолитические ферменты. При проращивании зерна выявляется не только амилаза, но и другие ферменты, из которых наибольшего внимания заслуживают протеолитические. [c.105]

Анализ распределения продуктов по олигосахаридам привел Хироми к выводу, что каталитический центр в обоих случаях расположен между шестым и седьмым сайтами. В критических замечаниях по поводу данной работы Аллен [5] указывает, что корректный анализ продуктов распределения был проведен только для а-амилазы штамма BLA-F (данные относятся к более ранней работе Хироми), где в качестве исходных субстратов использова- [c.51]

Пример 3. При исчерпывающем действии р-амилазы на мальто-гептаозу О в реакционной смеси присутствовали только мальтоза н мальтотриоза. В аналогичном эксперименте, но при неполной степени конверсии (55%). также не было обнаружено Оз (первичного продукта при действии, р-амилазы на О7) [7]. Авторы заключили, что р-амилаза полностью гидролизует каждую молекулу исходного субстрата (вплоть до Оз), прежде чем атакует следующие. При этом не были найдены относительные скорости гидролиза Ог, 05 и Оз и не был оценен нижний предел чувствительности метода, используемого для определения олигосахарндов в ходе гидролиза. [c.82]

Возможно, при занятии различных участков связывания в активном центре деполимеразы разными олигомерными субстратами конформация активного центра несколько отличается, что и приводит к соответствующим отклонениям в рН-зависимостях ферментативного катализа. Естественно, это предположение остается в высшей степени гипотетическим, но оно доступно экспериментальной проверке. Для этого следует только определить pH- или температурные зависимости гидролиза О и Об под действием р-амилазы. Если они действительно окажутся различными, предположение о рН-зависимости степени множественной атаки нельзя считать экспериментально подтвердившимся. Поскольку влияние pH на относительное образование 0з /05 было весьма малым (данное отнощение уменьшалось всего в 2,5 раза при изменении pH от 5 до 9), то и отличия в рН-зависимости для объяснения этого эффекта требуются весьма небольщие. [c.84]

Пример 9. В ранней работе Робита п Френча [11] степень множественной атаки о для действия а-амилаз различного происхождения на амилозу была рассчитана из отношения концентрации восстанавливающих групп ВСобщ, образующихся в ходе ферментативного гидролиза амилозы и принадлежащих как коротким, так и длинным олигосахаридам, к концентрации восстанавливаю-нщх групп ВСполиы, принадлежащих только длинным олигосахаридам (осаждаемым 67%-ным этанолом из реакционной системы) [c.89]

Эти положения иллюстрируются рис. 6.18. Рис. 6.18, в и г показывают, почему молекулы, сходные с субстратом, но отличные от него по размерам, нереакционноспособны. Согласно модели Кошланда специфичность и каталитическая эффективность фермента связаны друг с другом, но их механизмы различны, и реакция осуществляется только при надлежащем взаимном расположении сорбирующих и каталитического центров относительно молекулы субстрата. Кошланд иллюстрирует это примером Р-амилазы [71]. Этот фермент действует на конечные группы амилозы, но не на другие глюкозидные связи полисахарида. Циклоамилозы являются конкурентными ингибиторами фермента. Сказанное поясняется схемой на рис. 6.19. Реакция происходит лишь при определенном пространственном расположе- [c.388]

При этом априори принималось, что короткие олигосахариды образуются только в результате множественной атаки. Полученные величины степени множественной атаки оказались равны 7,0 для а-амилазы из поджелудочной железы свиньи, 3,0 — для а-амилазы из слюны человека 2,9 — для а-амилазы из Aspergillus oryzae и для сравнения 1,9 для 1 М серной кислоты при 60°С. [c.89]

Мальтоза получается с выходом около 80% при ферментативном расщеплении (под действием фермента амилазы) крахмала. Поскольку этот дисахарид при гидролизе кислотой или при действии фермента мальтазы (а-глюкозидазы) дает только О-глюкозу, то он является а-глюкозилглюкозой. Мальтоза — восстанавливающий сахар и, следо-аательно, имеет одну потенциальную альдегидную группу. Метилированием доказано, что мальтоза имеет структуру 4-0-(а-О-глюкопирано-зил) -О-глюкопиранозы [c.557]

В отличие от целых клубней картофельную кашку подваривают лишь до температуры 40°С, так как из-за клейстеризации свободных крахмальных гранул вязкость настолько возрастает, что кашка утрачивает текучесть. На рис. 22 представлены изменения динамической вязкости кашки, определяемой ротационным вискозиметром при постепенном нагревании и перемешивании. Из него видно (кривая /), что при температуре выше 50°С вязкость резко возрастает и достигает очень больших значений. При разжижении достаточным количеством бактериальной а-амилазы (кривая 3 вязкость картофельной кашки даже при нагревании до температуры 80°С только на немного поднимается выше вязкости при 40°С. Следовательно, применение,а-амилазы на стадии подваривания открывает [c.71]

Подваривание сырья до полного набухания и клейстеризации возможны только при одновременном разжижении замеса бактериальными а-амилазами. Препараты бактериальных а-амилаз, особенно термофильных культур Вас. subtilis или Вас. diastati us, хорошо разжижая крахмал при температурах до 95°С, гидролизуют его до высокомолекулярных декстринов. В отличие от а-амилаз солода и плесневых грибов разжижение бактериальными а-амилазами не приводит к значительному накоплению сахаров, следовательно, можно не опасаться увеличенных потерь сбраживаемых веществ при разваривании. [c.74]

Амилолитическую способность (АС), отражающую в со.1оде совместное действие и р-амилаз, в ферментных препаратах только З определяют по исчезновению цветной реакции крахмала и высокомолек. ярных декстринов с йодом. 1 м. е. АС обозначает, что 1 г натурального солода, i воздушно-сухой поверхностной микробной культуры или 1 мл ГЛУОИННОН RU т ры при температуре 30 С в течение 1 ч катализирует гидролнз 1 г крахмала д о с-цветных декстринов. [c.122]

В самом деле, под воздействием р-амилазы на крахмал гидролиз его идет сравнительно медленно, так как содержится только вколо 3% нередуцирующих концов цепей и, кроме того, крупной молекуле р-амилазы трудно подойти к тесно-расположенным ответвлениям в молекуле амилопектина. В присутствии а-амилазы количество нередуцирующих концов сильно возрастает, что усиливает функцию р-амилазы во много раз. То же относится и к кооперированному действию глюкоамилазы и а-амилазы культур плесневых грибов. [c.179]

На кинетику гидролиза значительное влияние оказывает и изменяющаяся степень сродства продуктов гидролиза к ферменту. Например, гидролиз глюкоамилазой плесневых грибов замедляется на коротких цепях. Гидролиз олигосахаридов происходит либо по многоцеиочечному, либо по комбинированному способу с уменьшением степени множественной атаки до единицы по мере укорочения цепей субстрата. Таким образом, гидролиз глюкоамнлазой в присутствии а-амилазы ускоряется только в начальных стадиях процесса. [c.179]

Что определяет характер включения сахарных единиц в полисахариды Некоторые гомополисахариды, такие, как, например, целлюлоза и линейная форма крахмала (амилоза), содержат только один моноса-харидный компонент и только в одном типе связи. Для образования таких цепей один фермент может добавлять одну единицу активированного сахара ко второй со стороны растущего конца. В отличие от этого для сборки молекулы гликогена необходимы по крайней мере два фермента. Одним из них является синтетаза, катализирующая перенос активированных глюкозильных единиц от иОР-глюкозы к растущему концу полимера, а другим — трансгликозилаза, выполняющая функцию ветвящего фермента. После того как длина концов цепи достигнет приблизительно десяти единиц, ветвящий фермент атакует гликозидную связь в каком-нибудь месте цепи. Действуя аналогично гидролазе, он образует, по-видимому, промежуточное соединение, которое представляет собой гликозилфермент или стабилизированный карбоний-ион. В любом случае фермент не освобождает оторванный фрагмент цепи (как это имеет место в случае а-амилазы гл. 7, разд. В,6), а переносит его к другому, близко расположенному активному участку молекулы гликогена. Здесь фермент снова присоединяет связанную с ним цепь к свободной 6-гидроксильной группе гликогена, создавая таким образом новую ветвь, присоединенную при помощи а-1,6-связи. [c.493]

Наблюдаются и такие цепи катаболических реакций, когда субстрат действует как индуктор фермента только для первой реакции, затем первый промежуточный продукт А индуцирует биосинтез следующего фермента и т. д. Использование регуляторного механизма индукции ферментов дает возможность значительно увеличить синтез этих ферментов. При длительном выращивании культуры Е. oii на среде с лактозой содержание Р-галактозидазы увеличивается в 1000 раз. После индукции количество этого фермента в клетке достигает 3% общего содержания белков. Аналогичная картина наблюдается при работе с продуцентом амилазы — плесневыми грибами рода Aspergillus. [c.47]

Принципиальным преимуществом ферментативного гидролиза перед кислотным является его специфичность, позволяющая не только устанав- ливать строение полисахарида по сохранившимся фрагментам, но и по-, лучать определенные сведения о гликозидных связях, разорвавшихся при гидролизе. Однако для того, чтобы судить об этом достаточно определен-, но, необходимо знать специфичность данного фермента. Специфичность разных ферментов может различаться очень сильно. Некоторые из них катализируют гидролиз гликозидных связей определенной конфигурации нескольких родственных моносахаридов, другие специфичны как к кон--фигурации гликозидного центра, так, и к остатку моносахарида, а третьи, требуют определенного расположения моносахаридов, удаленных от расщепляемой гликозидной связи. Так, например, амилазы обладают прак- тически абсолютной специфичностью, вызывая расщепление то ько х-1- -4-связей О-глюкопираноз в крахмалоподобных полисахаридах , и чрезвычайно чувствительны даже к незначительным изменениям структуры субстрата. В общем случае специфичность действия фермента Может Зыть очень сложной, а, влияние неизвестных ранее структурных особен- [c.510]

Гликоген — гомополисахарид, построенный из D-глюкозы. Методами метилирования , периодатного окисления " , частичного кислотного гидролиза и ферментативного pa щeплeния " доказано, что он является ближайшим аналогом амилопектина (см. стр. 534), т. е. обладает ветвистой структурой, построенной из а-1—4-связанных остатков D-глюкопиранозы со связями а-1 6 в точках разветвления. Отличие от амилопектина сводится к большей разветвленности и более тесной упаковке полимерной молекулы . Так, типичные гликогены имеют среднюк> длину цепи 10—14 моносахаридных остатков, из которых на внешние цепи приходится 6—10, а на внутренние —2—4 (см. рис. 11). В соответствии с этим р-амилаза гидролизует гликоген только на 40—50%, а R-фермент, расщепляющий связи а-1- 6 в амилопектине и р-декстринах, на гликоген не действует, по-видимому, из-за пространственных затруднений, создаваемых высокой степенью разветвленности . С другой стороны, конка-навалин-А—белок, не взаимодействующий с амилопектином, образует с гликогеном нерастворимый комплекс, причем существует линейная зависимость между способностью к комплексообразованию и степенью разветвления полисахарида . [c.540]

Смотреть страницы где упоминается термин И не только амилаза: [c.153] [c.80] [c.81] [c.568] [c.149] [c.182] [c.183] [c.20] [c.83] [c.216] [c.80] [c.222] [c.227] [c.238] [c.118] [c.166] [c.125] [c.397] [c.398] [c.234] [c.97]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология