Действие пепсина молекулярные веса

Образование трипсина из трипсиногена, которое в физиологических условиях происходит в основном в результате действия энтерокиназы, по крайней мере в начальной фазе активации, и последующего включения аутокаталитического механизма, обусловленного появлением трипсина (поскольку трипсин также превращает трипсиноген в трипсин), не сопровождается значительным изменением молекулярного веса. Молекулярный вес трипсиногена 23 040—23 800, а трипсина — 22 680 — 23 800. N-концевая аминокислота в трипсиногене — валин, в то время как в трипсине — изолейцин. Поскольку ни в трипсиногене, ни в трипсине других N-концевых аминокислот не обнаружено, можно считать, что молекула как трипсиногена, так и трипсина, по-видимому, построена из одной полипептидной цепи, а не из нескольких (аналогичные выводы, даже более экспериментально обоснованные, сделаны в отношении пепсиногена и пепсина). [c.332]

Описан ряд аналогичных реакций [473—477]. К ним относится, например, образование пластеинов [478—482] — нерастворимых высокомолекулярных пептидов с молекулярным весом 2000—400 ООО. Пластеины образуются в известных условиях при действии некоторых гидролитических ферментов (например, пепсина, папаина, химотрипсина) на частично гидролизованные белки. Природа пластеинов и их роль требуют дальнейшего из -чения. По-видимому, при синтезе пластеинов возникают новые [c.262]

Превращение протромбина в тромбин некоторые авторы рассматривают как аутокаталитический процесс, а именно как цепную реакцию. Эта реакция начинается с образования тромбина из протромбина под влиянием тромбопластина и кальция и продолжается затем под катализирующим воздействием самого образовавшегося тромбина [60], подобно тому как это происходит в процессе превращения пепсиногена в пепсин (см. гл. ХП). Физико-химические свойства тромбина сходны с физико-химическими свойствами протромбина. Тромбин экстрагируется из сгустка фибрина солевыми растворами и осаждается из сыворотки крови спиртом. Более чистые препараты тромбина получают при действии тромбопластина на протромбин в присутствии солей кальция [64]. Молекулярный вес тромбина равен примерно 77 000, молекулярный вес протромбина — 140 000 пока еще не установлено, дает ли одна молекула протромбина при своем превращении в активный фермент одну или две молекулы тромбина [50]. Сухие препараты чистого тромбина очень устойчивы и сохраняют свою активность при комнатной температуре в течение многих месяцев [50]. [c.182]

Слизистая желудка содержит неактивный предшественник пепсина, получивший название пепсиногена этот белок также был выделен в кристаллическом виде [69]. Пепсиноген превращается в активный пепсин под действием соляной кислоты, причем в процессе этого превращения от пепсиногена отщепляется 15—20% его азота [69]. Весьма вероятно, что при этом отщепляется полипептид с молекулярным весом 2 500, обладающий свойствами ингибитора пепсина. Пепсин преимущественно расщепляет пептидные связи между аминодикарбоновой кислотой и тирозином одним из наиболее простых субстратов для действия [c.291]

Ферментами или энзимами называются биологические катализаторы, образуемые клетками животных и растений. Общими свойствами ферментов являются их высокая каталитическая активность, специфичность действия, термолабильность и коллоидальный белковый характер. По-видимому, все ферменты — белки с высоким молекулярным весом. Свыше 70 ферментов получены в кристаллическом состоянии. Молекулярный вес кристаллического пепсина 35000, кристаллической лактодегидразы из сердца 135000, дегидразы глутаминовой кислоты из печени 1000000,. алкогольдегидразы из печени лошади 73000 и т. д. [c.249]

Эти рассуждения снова приводят нас к вопросу о том, что активность ферментов можно усилить или подавить. Может быть, диабетогенный гормон подавляет активность гексокиназы, вырабатывая вещества, которые занимают замочную скважину молекулы фермента и таким образом мешают ему воздействовать на нормальный субстрат Может быть, инсулин противодействует тормозящему действию, удаляя эти вещества и тем самым освобождая, так сказать демаскируя , фермент На эти вопросы помогут ответить лишь дальнейшие исследования, но и сейчас уже известно, что демаскирующий эффект имеет важное значение в регуляции действия ферментов при многих биологических процессах. Пепсин, например, чья функция состоит в переваривании белка, выделяется стенкой желудка в виде неактивного вещества пепсиногена, который только в самом желудке под влиянием имеющейся здесь соляной кислоты превращается в активный фермент. Это превращение сопровождается падением молекулярного веса с 42 000 до 38 000, что можно объяснить удалением части белка, маскирующего действие пепсина. [c.179]

Молекулярный вес пепсиногена равен 42 ООО, а пепсина в среднем 35 ООО. От пепсиногена под действием высокой кислотности желудочного сока и активного пепсина отщепляется последовательно примерно Vs часть его молекулы в виде смеси отдельных полипептидов [c.136]

При действии пепсина происходит разрыв внутренних пептидных связей белковой молекулы. Об этом свидетельствует тот факт, что среди продуктов переваривания белков пепсином обнаруживается много полипептидов, построенных из 4—8 аминокислотных остатков. Наряду с ними образуются также полипептиды с более низким молекулярным весом и небольшое количество аминокислот. [c.249]

В соответствии с механизмом гель-фильтрации при выборе марки (О-индекса) сефадекса следует руководствоваться предполагаемой величиной молекулярного веса пептидов. Если гидрОлизат содержит крупные пептиды, целесообразно использовать сефадекс 0-50 или 0-75. Если средняя величина молекулярного веса пептидов невелика, то предварительное фракционирование проводят на сефадексе 0-25. Чем выше специфичность расщепления (например, при действии трипсина на ацетил- и трифторацетилбелки или при расщеплении бромцианом), тем больше вероятность получения крупных пептидов. В этих случаях используется сефадекс с более высоким значением индекса О. При неспецифическом гидролизе (гидролиз химотрипсином, субтилизином, папаином, пепсином, кислотой и т. п.) обычно получаются мелкие пептиды, которые следует предварительно фракционировать на сефадексах с низким значением индекса О. [c.227]

Трипсин — протеаза, ускоряющая гидролиз белков, находящихся в состоянии амфанионов, с оптимумом активности при pH 8,0. Трипсин —белковое вещество с молекулярным весом- 23 ООО. В панкреатической железе образуется неактивный трипсиноген, который при действии специфического активатора— энтерокиназы, выделяемой слизистой двенадцатиперстной кишки и тонкого отдела кишечника, превращается в трипсин (см. работу 30). Трипсин ускоряет гидролиз пептидных связей белков, альбумоз и пептонов. Многие нативные белки лишь с трудом расщепляются трипсином. Триптический гидролиз таких белков идет значительно быстрее после их денатурации или после предварительного расщепления пепсином. Продуктами триптического гидролиза являются поли- и Дипептиды и аминокислоты. Трипсину свойственно и коагулазное действие. [c.186]

Ферментативный гидролиз проходит обычно ступенчато. Высокомолекулярные белки расщепляются под действием пепсина до пептонов (смесь соединений с молекулярным весом 700—2000). Пептоны и не подвергшиеся расщеплению белки гидролизуются в кишечнике трипсином до пептидов, аминокислот и дикетопиперазинов, Пептиды расщепляются пептидазами до аминокислот. [c.703]

Физические свойства растворов белков также резко изменяются в начальной фазе протеолиза снижается вязкость, и белки теряют способность свертываться при нагревании. Это, обычно, связано с превращением белка в пептиды, имеющие меньший молекулярный вес. Так, например, при переваривании яичного альбумина пепсином количество белка, теряющего способность свертываться при нагревании, пропорционально числу освобожденных аминогрупп [3]. С другой стороны, в начальной фазе гидролиза желатины или казеина трипсином не наблюдается прироста свободных аминогрупп [4] и, следовательно, резкое уменьшение вязкости не обусловлено разрывом пептидных связей. Возможно, что на этой стадии ферментного действия происходит распад каких-то очень слабых связей между отдельными группировками белковой молекулы. Поэтому можно было бы сказать, что фермент действует в качестве деполимеразы. [c.362]

Немногие попытки, предпринятые до настоящего времени для выяснения механизма ферментативного распада белка, не дали однозначных результатов. При действии пепсина на яичный альбумин около 35% белка превращается в пептиды с молекулярным весом ниже 1 ООО, 25 % — в пептиды с молекулярным несом в пределах 1 000—10 000, 10% — в обломки с молекулярным весом в пределах 10 000—30 000 и 30% —в еще более крупные обломки [3]. С другой стороны, при действии пепсина на яичный альбумин, растворенный в уксусной кислоте, образуются лишь небольшие пептиды с молекулярным весом около 1 ООО и совершенно не образуются промежуточные соединения с молекулярным весом от 1 000 до 44 000 [17]. В данном случае протеолиз можно сравнить со взрывом, при котором большая молекула распадается сразу на множество мелких соединений без накопления промежуточных продуктов. Другими словами, в этом случае происходит быстрое расщепление ограниченного числа пептидных связей, а не медленное расщепление многих. [c.366]

Соляная кислота, продуцируемая париентальными клетками желудка, создает условия, в которых начинается расщепление белков. При pH 1,5—2,5 происходят превращение профермента пепсиногена в пепсин и гидролиз пептидной связи, в образовании которой участвует аминогруппа ароматической кислоты, под действием пепсина. Если кислота, образующая пептидную связь, содержит свободную аминогруппу, то эта пептидная связь не гидролизуется пепсином. В результате гидролиза молекулы белка расщепляются на полипептиды различного молекулярного веса. 337 [c.337]

Длина пептидной цепочки в белках никем пе была определена, а выделенные из белка полипептиды состояли максимум из пяти остатков аминокислот. Синтетическим путем удалось довести д.чину полипептидной цепочки только до 19 остатков аминокислот, а молекулярный вес естественных белков, исчисляемый в то время десятками тысяч, требовал синтеза полипептида из сотен остатков аминокислот, что совершенпо выходило за пределы возможности эксперимента. С другой стороны, если бы белковая люлекула Илмела линейное строение из сотен остатков аминокислот, то эти цепочки должны были бы легко разрываться, на что не было экспериментальных указаний. После смерти Фишера факты, противоречащие его теории, накоплялись все в большем количестве. Было, например, установлено, что синтетические полипептиды ок га- и нонадекапептид более устойчивы к действию ряда химических реагентов, чем природные белки. Пепсин, легко разрушающий белок, на эти полипептиды не действовал. В продуктах гидролиза белков стали выявляться, кроме аминокислот и полипептидов, еще циклические образования не вторичного происхождения. Все это ставило под сомнение основную идею Фишера о длинном цепочечном строении белков и привело к необходимости пересмотра полипептидной теории во втором десятилетии XX в. [280]. [c.267]

В основу классификации протеолитических ферментов обычно брали молекулярный вес и заряд субстрата. Считали, что протеиназы расщепляют белковую молекулу до полипептидов, последние же гидролизуются пептидазами. Однако оказалось, что даже такие типичные протеиназы, как пепсин и трипсин, расщепляют субстраты с молекулярным весом 300—400 по пептидным связям, но только в том случае, если химическое окрул<ение этих связей соответствует специфичности фермента. Так, для пепсина непременным условием его действия стали считать наличие остатка тирозина или фенилаланина в боковой цепи той аминокислоты, которая связана разрываемой пептидной связью. Аминогруппа, находящаяся в таком же положении, препятствует гидролизу субстрата пепсином. Для расщепления вещества трипсином необходимо наличие в указанном положении остатка лизина или аргинина [c.345]

Пепсин представляет хорошо кристаллизующийся белок, сходный по растворимости с глобулином. Молекулярный вес 35 ООО. Сырой пепсин представляет смесь двух пепсинов, желатиназы и катепсина. Оптимум действия пепсина лежит при pH =1,5—2,0, но кристаллический пепсин расщепляет и при рН=4,1. Пепсин сам себя переваривает. [c.345]

Пепсином гидролизуется большинство высокомолекулярных белков, за исключением фиброина шелка, кератинов, спонгина, конхиолина, муцина и овомукоида. Не действует он на протамины и продукты белкового гидролиза с низким молекулярным весом, хотя им расщепляются некоторые полипептиды, например карбобензокси-/-глютамил-/-тирозин (при pH = 4,0) [c.346]

Бурильон и сотрудники также показали, что -кислый гликопротеин может расщепляться протеолитическими ферментами. Изучая действие этих ферментов на препараты, выделенные из плевральной жидкости человека, эти авторы обнаружили, что трипсин наиболее активно расщепляет гликопротеин, а затем в порядке убывания активности идут пепсин, папаин и химотринсин [138]. Смесь, полученная в результате последовательного действия всех трех ферментов, разделялась при зональном электрофорезе на три компонента, а при хроматографии на ДЭАЭ-целлюлозе — на пять компонентов. При определении коэффициентов седиментации этих фракций были обнаружены очень небольшие различия. Найденные коэффициенты седиментации соответствовали молекулярным весам от 3000 до 3500, Содержание углеводных компонентов в них также было очень сходно, за исключением количества гексозамина. Все гликопептиды содержали одни и те же семь аминокислот (кроме валина), но их молярные соотношения сильно варьировали. На ]Ч-концах были обнаружены четыре различные аминокислоты [25]. [c.92]

Ферментативное расщепление ИгГ имеет особое значение при исследовании различных биологических свойств молекулы. Продолжая работы, начатые по исследованию действия нескольких протеолитических ферментов, ряд авторов показали, что папаин расщепляет ИгГ кролика на три крупных фрагмента — I, ПиШ — с образованием очень малого количества мелких пептидов. Фрагменты I и II имеют молекулярный вес около 42 ООО, III — несколько больше. Как I, так и II содержат участки со свойствами антител, обладающие сродством к специфическому антигену, что было показано несколькими методами [1, 20, 21, 22]. Фрагмент III легко кристаллизуется и содержит в основном изотипические (т. е. видоспецифические) антигенные участки. Аллотипические антигенные участки (т. е. участки, определяющие отличия между иммуноглобулинами разных индивидуумов одного и того же вида) связаны с фрагментами I и II, тогда как способность фиксироваться на KOHie и проходить через плаценту, но-видимому, связана со структурными особенностями фрагмента III. Связывание комплемента после реакции ИгГ со специфическим антигеном представляет собой сложную реакцию, в которой принимают участие все части молекулы, входящие во фрагменты I, II и III [23]. Вполне возможно, что наиболее важным моментом для выяснения структуры молекулы является тот факт, что все указанные биологические свойства сохраняются после расщепления молекулы на три части. Это дает веские основания для предположения, что папаин гидролизует пептидные связи на небольшом уязвимом участке и что исходная молекула состоит из определенных частей, пространственная структура которых не затрагивается при гидролизе. Нисонов и сотр. [24] показали, что при гидролизе пепсином образуется одна фракция с молекулярным весом около 100 ООО, в которой сохраняются оба участка антитела. При восстановлении цистепном в низкой концентрации эта фракция расщепляется на равные части, которые по биологическим и химическим свойствам очень сходны с фрагментами [c.104]

Интересные наблюдения, касающиеся относительной стабильности дисульфидных связей в ИгГ кролика, сделаны Нисоновым и сотрудниками. Ранее авторы сообщали, что после пептического гидролиза ИгГ и последующего мягкого восстановления образуются фрагменты, эквивалентные I и II [24]. Недавно те же авторы показали, что дисульфидная связь, соединяющая эти фрагменты, также лабильна и в интактном ИгГ. Эту связь можно восстановить и блокировать перед гидролизом пепсином, а затем обнаружить ее, действуя в обратном порядке, в двух фрагментах с молекулярным весом около 50 ООО [32]. Основываясь на том же предположении, Пальмер и сотр. [38] показали, что, если к раствору ИгГ кролика добавить 2-меркаптоэтил- [c.105]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология