АНАЛИЗ СМЕСЕЙ СОЕДИНЕНИИ С ОДИНАКОВЫМИ ФУН

Особое значение метод хроматографии приобрел для изучения природных соединений. Чувствительность метода так велика, что позволяет подчас разделять смесь веществ, близких по построению и обладающих одинаковыми спектрами поглощения. Рассмотрим некоторые случаи использования хроматографии в фармацевтическом анализе. [c.43]

Необходимым условием применения этого метода является регистрация всех компонентов пробы и одинаковая чувствительность детектора к разным веществам. Для большинства детекторов это, в общем, справедливо, если анализируется смесь родственных соединений, молекулярные массы которых значительно не различаются или все компоненты пробы имеют большие молекулярные массы. Например, не требуется калибровка при анализе смеси циклогексана и бензола или при анализе изомеров ксилола. Этот вариант метода имеет ограниченное применение. В большинстве случаев приходится учитывать разный отклик детектора к различным веществам пробы с помощью калибровочных коэффициентов, зависящих от свойств вещества, способа детектирования, а также от конструкции детектора. [c.114]

Особенно полезен метод РТЛ для целей рутинных анализов, когда следует сравнить несколько хроматограмм, полученных на разных приборах, или анализируется смесь неизвестного состава. Рис. Х.4 демонстрирует полезность РТЛ при необходимости сравнения результатов газохроматографического анализа (детектирование при атмосферном давлении) и хромато-масс-спектрометрии (детектирование в вакууме). Если хроматограммы получены в одинаковых условиях, в случае ГХ/МС будут немного короче, чем в случае использования ГХ/ПИД-системы. При этом порядок элюирования некоторых соединений может измениться на противоположный, а разные сигналы (разных детекторов) могут далее еще больше усложнить задачу корреляции (отождествления) соответствующих пиков на двух хроматограммах. С помощью РТЛ можно скомпенсировать разницу в условиях получения хроматограмм (длина колонки, давление газа-носителя и др.) и осуществить корреляцию внутри очень узкого диапазона их значений. [c.558]

Ход анализа. В коническую колбу помещают 100 г сухих дрожжей и 100 мл 0,01 н. раствора соляной кислоты. Смесь тщательно перемешивают в течение 15 мин, добавляют к ней 700 мл воды, взбалтывают еще 15 мин и фильтруют через стеклянный фильтр. Осадок на фильтре промывают дистиллированной водой. Фильтрат и промывные воды собирают в мерную колбу вместимостью 1 л. Промывку осадка заканчивают, когда объем фильтрата с промывной водой достигнет 1 л. Берут две маленькие делительные воронки, в одну из них вливают 2 мл стандартного раствора витамина Вь а в другую — 2 мл раствора, приготовленного из пробы дрожжей. В каждую воронку вливают 2 мл метилового спирта, 1 мл 20%-ного раствора едкого натра и 1 каплю 1%-ного раствора ферроцианида калия. Содержимое воронок взбалтывают. в течение 2 мин, затем в каждую воронку добавляют по 0,5 мл дистиллированной воды, 10 мл бутилового спирта, снова взбалтывают в течение 1 мин и оставляют в покое для расслаивания. После разделения жидкостей нижний, водный, слой выливают прочь, а верхний, спиртовый слой из каждой воронки выливают в отдельную пробирку. Пробирки должны быть из бесцветного стекла одинакового диаметра. В темной комнате содержимое пробирок облучают ультрафиолетовым светом. В присутствии гидрохлорида тиамина образуется окрашенное соединение. Сравнивая окраску раствора в пробирке, в которую был добавлен испытуемый раствор, с окраской в пробирке с раствором гидрохлорида тиамина известной концентрации (стандартный раствор), находят содержание витамина В1 в анализируемой пробе. [c.232]

Определение. Осторожно отгоняется (лучше всего в вакууме, в подогреваемом эксикаторе) растворитель от определенного количества липидного экстракта или соответствующего соединения. Остаток растворяют в 1 мл хлороформа и к нему очень точно отмеряют 2 мл бромного реактива. Точно выдерживать время реакции нет нужды, и одинаковые результаты получаются при 1—4 часах нет необходимости также защищать реакционную смесь от света, но следует по временам осторожно ее покачивать. При добавлении 1 мл KJ неизрасходованный бром освобождает йод, освобождающийся йод оттитровывается гипосульфитом из микробюретки на 10 мл при индикаторе — крахмале. Переход ясный даже и при 0,002 н. гипосульфите (при некотором навыке). Если имеются большие количества жира, то в 1 мл хлороформа растворяют в два с половиной раза большие количества, бромного реактива (0,02 н.) прибавляют 2,5 мл и титруют 0,005 н. гипосульфитом. Для расчета умножают разность между холостым опытом и анализом (с учетом титра) при О, 005 н. гипосульфите на 0,6345, а при 0,002 н. гипосульфите — на 0,2538. Получается израсходованный в пробе йод. Нужно так подобрать количество жира, чтобы расход брома был не меньше 12% и не больше 60% прибавленного количества. Иначе цифры получаются или выше или ниже действительных. По данным Траппе и других исследователей, этим способом получаются цифры, близкие к теоретическим, для различных жирных кислот и триглицеридов. [c.231]

Рентгеновский порошковый диффракционный анализ дает возможность определить характер химического соединения каждого из присутствующих элементов и применим к твердым продуктам, имеющим кристаллическую структуру. Для этого типа анализа не требуется спектрометра. Метод заключается в следующем. Измельченный материал помещают в трубку, через которую пропускают пучок монохроматических рентгеновских лучей. Спектр фотографируется или, что еще лучше, регистрируется электронным самопишущим аппаратом. Полученную рентгенограмму затем сравнивают с типовыми рентгенограммами, предварительно полученными для многих н ш еств. Каждое кристаллическое вещество дает свойственную ему, всегда одинаковую, рентгенограмму, независимо от присутствия других веществ. Таким образом, наблюдаемая рентгенограмма смеси представляет собой сумму наложенных друг на друга рентгенограмм, которые дает каждое вещество в отдельности при действии на него рентгеновских лучей в продолжение такого же промежутка времени. Этот закон распространяется не только на положение диффракцион-ных линий, но и на их интенсивности при условии, если абсорбция каждого компонента ничтожна благодаря этому метод может быть использован для количественного анализа. При работе по этому методу можно не обнаружить всех компонентов, входящих в смесь, например нри анализе аморфных продуктов, таких, как уголь или стекло. Не удается обнаружить вещества, находящиеся в виде твердого раствора в кристаллах, а также компоненты, содержащиеся в малых количествах. Диффракционный метод обычно применим для определения компонентов, концентрации которых составляют около 5% ни в отдельных случаях он может быть применен и для определения веществ при более низких концентрациях — порядка 1—2%. X [c.182]

В обоих этих определениях отсутствует строгость. В первом определении вопрос о том, что имеется в виду, когда говорят один сорт молекул , остается открытым. В обычном химическом смысле молекулы различного изотопного состава одинаковы, однако во многих случаях, включающих даже определенные химические исследования, изотопные соединения являются примесями. Смесь кетоэнольных таутомеров можно рассматривать как чистое соединение , если в некоторой реакции все вещество реагирует как в одной, так и в другой форме. Однако с физической точки зрения такая система, очевидно, содержит более одного сорта молекул и не является чистой . Аналогично положение и с оптически активными изомерами. Возможно даже, что подбором соответствующего катализатора можно изменить пропорциональное распределение органических молекул по состояниям их ядерного спина [35]. Если это действительно так, то ядерно-спиновый изомер также следовало бы рассматривать как примесь. Полимеры представляют особую проблему молекулы различного молекулярного веса с различными разветвлениями или пространственной конфигурацией можно рассматривать или не рассматривать как примеси в зависимости от точки зрения исследователя [73, 78]. Второе определение чистоты оставляет открытым вопрос о том, сколь малое изменение состава ощутимо при выбранном методе анализа. По мере роста чувствительности и тонкости аналитических методов количество примеси, удовлетворяющее понятию чистый , будет уменьшаться. Таким образом, нельзя дать универсального и точного определения чистоты. Чистоту образца можно определить точно только в зависимости от применяемой высокочувствительной аналитической техники, а также в зависимости от целей исследования. Глубокий обзор концепций химической, индивидуальности и чистоты, а также критериев чистоты дал Тиммермане [130]. [c.162]

Тиоамиды обычно изображают структурой (403). Однако рентгеноструктурный анализ показал, что в кристаллическом состоянии ключевые атомы этих соединений расположены в плоскости аналогично расположению заместителей у обычной олефиновой двойной связи. Это указывает на большие вклады зр -гиб-ридных орбиталей центральных атомов углерода и азота или, в терминах теории валентной связи, на значительное преобладание полярных резонансных структур типа (404) [374], Этот вывод подтверждается данными рентгеноструктурного анализа (длины связей и валентные углы) (табл. 11.22.11). Вследствие такого строения М-монозамещенные и несимметричные Н-дизамешенные тиоамиды должны обладать способностью к геометрической изомерии, т. е. могут существовать в одной из двух (или в обеих) жестких формах (403) и (405) в зависимости от конкретных стерических особенностей. Действительно, надежно установлено существование геометрической изомерии [цис-транс- или [Е)- 2)-изомерии], главным образом на основании изучений спектров ЯМР Н [374—376]. В некоторых случаях удается разделить смесь изомеров на два изомера [374, 377]. Еще одним следствием существования плоской жесткой тиоамидной структуры является то, что в спектрах тиоамидов с одинаковыми заместителями у атома азота (403 R = Р ) обычно обнаруживаются различные сигналы протонов этих заместителей, поскольку их магнитное окружение различно. При температурах выше ПО—170 °С резонансные сигналы заместителей у атома азота сливаются, поскольку при этих температурах молекула получает достаточное количество энергии для осуществления быстрого свободного вращения вокруг связи С(8)—N. Оказалось, что изучение температурной зависимости спектров ЯМР Н является очень полезным способом [c.647]

В соответствии с методикой Г. А. Разуваева и сотрудников из форона (стр. 34) и NH4NO3. была получена парамагнитная реакционная масса, которая в. течение нескольких дней давала спектр ЭПР, характерный для стабильных иминоксильных радикалов (рис. 11). Результаты анализа реакционной массы методом тонкослойной хроматографии на окиси алюминия дали возможность заключить [18—21], что исследуемая смесь содержала не менее четырех органических соединений, из которых удалось надежно идентифицировать только окись мезитила и изофорон. Строение аминокислоты, также выделенной из реакционной массы, точно установить не представилось воз-.можным. Два совершенно различных парамагнитных вещества, снятые с бумажной хроматограм.мы, показывали практически одинаковые триплетные спектры ЭПР. [c.42]

Другой метод дезактивации носителя предусматривает тренировку колонки - повторные вводы проб полярных соединений (дпя этой цели можно использовать и анализируемую смесь) и их хроматографирование. Эта операция повторяется до тех пор, пока детектор, установленный на выходе из колонки, не станет давать воспроизводимые показания. Этот метод не вполне надежен, и применять его следует весьма осторожно. Главная проблема состоит в том, что трудно определить тот момент, когда положительное влияние тренировки колонки прекращается, а установить это важно, поскольку, когда влияние тренировки исчезает, колонка начинает вновь необратимо адсорбировать компоненты анализ№-руемой пробы. Убедиться в том, что получаемые результаты являются точными, можно только, ГфОВОДЯ калибровку с использованием стандарта непосредственно до и после каждого анализа. Если две такие калибровки дают одинаковые результаты, то можно считать, что результаты анализа ире вильные и что предварительная обработка колонки пока еще достаточно эффективна. Этот метод использовался в анализе пестицидов, стероидов и т. д. и во всех тех случаях, когда было необходимо компенсировать активность твердых носителей. В первых работах по анализу пестицидов содержались рекомендации, которые прегогсматривали в качестве стандартных приемов кондиционирование колонки в течение двух недель и введение миллиграммовых количеств пестицидов для того, чтобы насытить активные места твердых носителей и аппаратуры. Такая методика рекомендовалась для недостаточно инертных твердых носителей. Для выпуо- [c.48]

Во всех случаях (также при термическом расщеплении твердого триазена) анализ показал одинаковый изотопный состав крайних атомов азота триазена. Отсюда авторы сделали вывод, что твердый меченый диазоаминобензол представляет собой равномолекулярную смесь двуизотопных изомеров I и II, а не соединение I, строение которого вытекает из его синтеза [c.128]

Попытки разделить смеси спиртов с одинаковой длиной цепи, но с различным числом ненасыщенных связей имели на колонках с этими набивками ограниченных успех. Смесь спиртов, полученная из соевого масла, дает только пять пиков при использовании колонки длиной 38 см, заполненной карбоваксом (фирмы Wilkens , № 3), при 217°. Пик ig оказался частично разделенным, что указывает на возможное присутствие в смеси стеарило-вого, олеилового и линолеилового спиртов. Отделение насыщенных соединений от ненасыщенных недостаточно для количественного и качественного анализов. Однако количество стеарилового спирта и общее количество ненасыщенных соединений можно определить, извлекая последние броми-рованием. [c.464]

ТСХ является также прекрасным методом разделения окси-коричных кислот и кумаринов. Смесь эфиров л-кумаровой кислоты, извлекаемых из сосновой пыльцы, можно разделить с помощью двумерной хроматографии на силикагеле в системах хлороформ — ацетон (2 1) и этилацетат — диметилформамид (50 1) [51]. Систему хлороформ — этилацетат — муравьиная кислота (2 1 1) можно использовать для разделения эфиров кофейной кислоты эта система позволяет также отделить ко-феилглюкозу от оробанхина (эти два соединения обладают одинаковой подвижностью на бумаге во всех опробованных системах растворителей) [45]. Общая методика анализа смесей свободных оксикоричных кислот включает стадию предварительной очистки экстрактов на колонках с полиамидом с последующей ТСХ на силикагеле в нижней фазе системы дихлорметан—вода— уксусная кислота (2 1 1) [52]. Для определения этих соединений применяли также множество других методик, в том числе хроматографию на пластинках с силикагелем, обработанных паром, на пластинках со смесью целлюлозы и силикагеля (1 1) и многократно исключающую ТСХ (т. е. метод удаления примесей с многократно элюируемых хроматограмм) [53]. [c.259]

Для раздельного определения продуктов необратимых реакций применяли следующую методику. Три одинаковые порции реакционной смеси, содержавшие по 3 г желатины и 20 мл 0,002Ы AgNOз общим объемом 100 мл, после выстаивания 24 часа в термостате при 80° С и введения уксусной кислоты (до pH 3,0) подвергали потенциометрическому титрованию в следующей последовательности. В одной порции определяли общее количество необратимо связанных желатиной ионов серебра. Во вторую и третью порции до введения К прибавляли по 1 жл 0,1Л раствора соответственно персульфата или бихромата калия и реакционные смеси выдерживали 30 мин. при 80° С. Для разрушения избытка бихромата в третью порцию вводили 0,8 мл 1%-ного свежеприготовленного раствора КагЗОз и реакционную смесь выдерживали 15 мин. После этого во вторую и третью порции вводили 10 мл 0,004Л раствора К и обратным титрованием азотнокислым серебром определяли количество связанных ионов серебра. Вычитая из общего количества связанных ионов количество продуктов во второй реакционной смеси (после окисления персульфатом калия), определяли содержание в желатине восстанавливающих примесей. В третьей реакционной смеси (после окисления бихроматом калия) определяли содержание комплексообразующих веществ, дающих с ионами серебра необратимые комплексы. Количество серусодержащих соединений в желатине определяли по разности анализов во второй и третьей реакционных смесях. [c.211]