Аминокислоты скорость перемещения

С помощью распределительной хроматографии легко осуществляется разделение аминокислот и определение их в-смеси. Метод заключается в том, что каплю смеси аминокислот или гидролизата белка наносят на полоску фильтровальной бумаги, конец которой опускают в подходящий органический растворитель. Растворитель насасывается полоской фильтровальной бумаги и увлекает за собой нанесенные на бумагу аминокислоты. Скорость перемещения аминокислот на бумаге зависит от химического строения аминокислот и от их способности растворяться в подвижном и неподвижном растворителе. В качестве подвижного растворителя употребляют, например, водонасыщенный фенол (или н. бутиловый спирт, амиловый спирт и др.). Неподвижным растворителем является вода, пары которой насыщают фильтровальную бумагу (внешне бумага остается сухой). Чем меньше растворимость аминокислот в воде и чем больше их растворимость в феноле, тем быстрее они движутся вслед за фронтом органического растворителя. [c.21]

Известно, что в молекулах аминокислот имеются ионогенные кислотные и основные группы. Поэтому в зависимости от pH среды аминокислоты обнаруживают катионную или анионную подвижность. Если каплю водного раствора аминокислоты поместить на смоченную буферным раствором полоску фильтровальной бумаги, через которую пропускается постоянный электрический ток, то ионы аминокислоты начнут перемещаться к соответствующим электродам. Скорость перемещения ионов при данном напряжении пропорциональна величине их заряда. [c.148]

Коэффициент скорости перемещения веществ по фильтровальной бумаге Щ (отношение расстояния, пройденного аминокислотой, к расстоянию, пройденному фронтом растворителя) является постоянной величиной для каждого вещества при определенных растворителях, сортах бумаги, температуре, а также при сохранении других условий. [c.21]

Экспериментальные наблюдения с использованием меченых атомов указывают на прямое участие РНК-переносчика в синтезе белка. Так, например, неоднократно отмечалась взаимосвязь между скоростью присоединения аминокислот к Р-РНК и скоростью белкового синтеза. Далее было отмечено накопление комплексов Р-РНК с аминокислотами в случае прекраш е-ния белкового синтеза, наоборот, при снятии факторов, тормозящих синтез, происходило перемещение меченых аминокислот с Р-РНК на белок. [c.84]

Качественное и количественное определение аминокислот проводят после их разделения методом хроматографии на бумаге. Разделение основано на различии в скорости перемещения по бумаге компонентов хроматографируемой смеси с растворителем. [c.109]

В растворах частицы аминокислоты несут неодинаковые по величине (а иногда и по знаку) заряды, поэтому в электрическом поле они имеют различную направленность и скорость перемещения на бумаге, что обеспечивает их разделение на основные, кислотные и нейтральные. При последующем использовании хроматографии в нисходящем потоке подвижного растворителя осуществляется их дополнительное разделение вследствие различия в коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися жидкостями. [c.161]

Наибольшей скоростью прохождения колонки обладают компоненты, не способные проникнуть в зерна гелевой фазы. Сефадексы 0-10 и 0-15 служат для фракционирования низкомолекулярных веществ, первый из них используется для веществ с молекулярным весом до 700, а второй — до 1500. Гели сефадекса 0-25 не способны поглощать, а следовательно, и задерживать перемещение по колонке веществ с молекулярным весом 3500— 4500. Этот предел для сефадекса 0-50 лежит в области значений молекулярных весов 8000—10000, а для сефадекса 0-75 эта величина достигает 40000—50000. Медленно перемещаются по колонке низкомолекулярные вещества, для которых коэффициент распределения между гелевой и жидкой фазами приближается к единице. Во многих случаях компоненты смеси при хроматографическом разделении на сефадексах следуют в порядке уменьшения их молекулярных весов. Однако наблюдается иногда и специфическое сорбционное взаимодействие разделяемых веществ с матрицей сефадекса, что влечет за собой увеличение коэффициента распределения К и снижение скорости перемещения по колонке. Так, замедление движения хроматографических зон наблюдается у основных пептидов и аминокислот в основных растворителях и кислых аминокислот и пептидов в кислых растворителях. Наблюдается также повышение степени удерживания в колонке ароматических веществ при гельфильтрации [22]. Ряд белков, таких как рибонуклеаза, лизоцим, трипсин, бычий сывороточный альбумин, в отсутствие солей также сорбируется и удерживается сефадексом при хроматографии. В связи с этим целесообразно проводить элюирование на сефадексах растворами солей или кислот. [c.202]

Как известно, первым листовым вариантом хроматографии явилась распределительная хроматография на бумаге, предложенная в 40-х годах для разделения смесей аминокислот [19]. В этом варианте, в котором, как и обычно, разделение является результатом различий в скоростях перемещения компонентов по сорбенту, разделяемые компоненты четко локализуются на хроматограмме после проявления ее специально подобранными реагентами. Природа компонента характеризуется при этом расположением зоны (часто уточняемым по положению зоны стандарта), а количество — размером пятна. Количество устанавливают более точно обычными химическими методами после десорбции компонентов с хроматограмм. В неорганическом анализе хроматография на бумаге оказалась полезной для определения состава смесей предельно близких по свойствам редкоземельных элементов, актинидов и металлов платиновой группы. Во всех этих системах эффективное хроматографическое разделение, как было показано, обусловлено процессом комплексообразования. [c.233]

Каждая аминокислота характеризуется относительной скоростью перемещения Кр, которая определяется отношением [c.143]

Скорость перемещения макромолекул в электрическом поле служит их полезной характеристикой. Это свойство можно использовать для определения молекулярной массы белков, для различия макромолекул на основе их общего заряда или формы, для определения изменений в аминокислотном составе при замене заряженной аминокислоты на незаряженную и наоборот, а также для количественного разделения различных видов молекул. Методы, при помощи которых получаются эти результаты, рассматриваются в данной главе. [c.223]

Так как различные аминокислоты в данном буферном растворе могут обладать разным по величине и знаку зарядом, то скорость и направление их перемещения в электрическом поле также будут отличаться. Благодаря этому смесь аминокислот можно разделить на отдельные компоненты. Число компонентов и их соотношение в смеси определяют после специальной обработки бумажных полосок, на которых проводится разделение (электрофореграмм). В результате обработки на электрофореграмме появляются окрашенные полосы, каждая из которых соответствует определенному компоненту. [c.148]

Для того чтобы понять, каким образом вода проходит через мембрану, представим себе,, что клетка, в вакуоли которой содержатся соли, сахара, аминокислоты и прочие вещества, помещена в сосуд с дистиллированной водой (рис. 6.1). Согласно молекулярно-кинетической теории молекулы всех веществ находятся в состоянии быстрого хаотического движения, скорость которого зависит от энергии этих молекул Средняя скорость их движения определяется температурой (и служит, в сущности, ее мерой). Поскольку молекулы воды малы и проходят через клеточные мембраны намного быстрее, чем молекулы других веществ, мы можем простоты ради ограничиться рассмотрением перемещения только молекул воды. Молекулы эти диффундируют во всех направлениях в клетку и из клетки, в различные клеточные органеллы и из них. Мы знаем, однако, что [c.170]

Юлоски бумаги 0,1—0,2% спиртовым раствором нингидрина и последующим нагреванием ее в сушильном шкафу. Отдельные аминокислоты обнаруживаются в виде пятен, окрашенных в голубой, фиолетовый или оранжевый цвет (в зависимости от химической структуры аминокислоты). Скорость перемещения отдельных аминокислот может быть выражена посредством ко- [c.22]

В приборе предусмотрен простой измеритель скорости потока жидкости 17). Он представляет собой стеклянную трубку с двумя рисками. На вход трубки подаются пузырьки воздуха, скорость перемещения которых легко подсчитать по времени прохождения известного расстояния между рисками. Манипулируя работой насосов 5) и 11), можно установить отдельно скорость элюцип колонки и скорость подачи нингидринового реактива (для указанного выше состава последнего соотношение скоростей должно быть 2 1). На выходе всего прибора имеется запорный клапан 16). Внешний вид аминокислотного анализатора Biotronik L 7000 представлен на рис. 183. Прибор можно укомплектовать интегратором с микрокомпьютером (например, типа SP4100). Он производит обсчет площади пиков и (с учетом данных по калибровке прибора стандартной смесью аминокислот) печатает на ленте аминокислотный состав исследуемого препарата. [c.522]

Разделение аминокислот основано на их различной растворимости в двух несмешиваюшихся жидкостях. Одной из жидкостей служит вода, другой — насыщенный водой органический растворитель. Водная фаза неподвижна, так как фиксирована на бумаге (специально изготовляемая хроматографическая, фильтровальная бумага, будучи помещенной во влажную камеру, удерживает до 20—22% воды). Подвижной фазой могут служить различные органические растворители, насыщенные водой, например изопропиловый, изобутиловый или бутиловый спирты, фенол и др. Каплю смеси аминокислот или гидролизата белка наносят на полоску фильтровальной бумаги, конец которой опускают в подходящий органический растворитель. Растворитель поднимается по полоске бумаги, растворяет нанесенные на бумагу аминокислоты и увлекает их за собой. Скорость перемещения аминокислот по бумаге зависит от степени их раст- [c.15]

В этом случае разделение лигандов происходит благодаря неодинаковой скорости перемещения комплексов МЬм, МЬлг,...,МЬлг, и вероятнее всего последовательность появления лигандов в фильтрате будет пропорциональна устойчивости этих комплексов. Описанным методом разделяют сильные лиганды, такие, как аминокислоты [67, 68]. [c.312]

Расположение аминокислот на бумаге после обработки нин-гидрином обнаруживается в виде отдельных окрашенных пятен. Скорость перемещения аминокислот на бумаге может быть выражена через весовое количество воды и растворителя на бумаге и через коэ4 фициент распределения соответствующей аминокислоты. Для этой цели удобно пользоваться полосками бумаги, подвешенными к лотку, содержащему растворитель, насыщенный водой. Прибор помещают в закрытый сосуд, воздух внутри которого насыщен парами воды и растворителя. Так были найдены отношения скорости перемещения полосы данной аминокислоты к скорости движения фронта жидкости для 23 различных аминокислот. Отсюда могут быть вычислены коэффициенты распределения. [c.156]

Наконец, нельзя исключить возможность регуляции процесса трансляции путем изменения скорости перемещения рибосом по матрице, мРНК. Если нормальная скорость трансляции у Е. oli соответствует включению 15—17 аминокислот в секунду иа рибосому, то при медленном росте на минимальной среде эта скорость может снижаться почти вдвое. Механизмы управления в этом случае остаются неизвестными. [c.45]

Определить скорость движения жидкости можно, наблюдая за перемещением при электрофорезе незаряженного вещества глюкозы, декстрана, нейтральной аминокислоты в изоэлектрической области и т. д. Для удобства это вещество мон1но окрасить (например, декстран — йодом). Следует иметь в виду, что нейтральное вещество может в некоторых случаях приобретать заряд, образуя комплекс с ионами буфера (например, сахара образуют комплекс с боратными ионами). [c.83]

Синтез БОК-аминокислот с использованием авто-титратора метод Шнабеля [ПО]. 0,05 моля аминокислоты и 0,055 моля БОК-азида суспендируют в смеси воды и диоксана (по 10 мл каждого) и помещают в колбу рН-стата (автотитратора). Резервуар рН-стата заполняют 4 н. NaOH. По перемещению стрелки на шкале значений pH прибора судят о скорости реакции. Некоторые аминокислоты вступают в реакцию при pH 8,5, большинство же реагирует при pH 9,8. Для некоторых аминокислот необходимо поддерживать pH 10,2, чтобы обеспечить приемлемую скорость реакции. Процесс обычно завершается через несколько часов, однако реакции с некоторыми аминокислотами идут очень медленно и могут продолжаться более 24 час. Производные аминокислот, содержащие группы, не устойчивые в щелочной среде (например, сложные эфиры и амиды аспарагиновой и глутаминовой кислот), необходимо обрабатывать осторожно реакцию следует проводить при возможно более низком pH. Более чистые продукты можно получить из этих производных, применяя методику с диметилсульф-ексидом (см. стр. 73). [c.69]

Рибосомный синтез белка заключается в росте полипептидной цепи путем последовательного присоединения очередной аминокислоты к карбоксильной группе предшествующего остатка. Отдельный цикл элонгации включает три этапа связывание аминоацил-тРНК, образование пептидной связи и транслокацию рибосомы — перемещение ее вдоль молекулы мРНК в направлении 5 3 от одного кодона к другому. И так до встречи с одним из трех стоп-кодонов. Рост белковой цепи заканчивается присоединением к стоп-кодону фактора освобождения, останавливающего трансляцию и вызывающего отделение завершенного полипептида от рибосомы. До этого растущий С-конец последовательности все время остается ковалентно фиксированным в пептидилтрансферазном центре, а N-конец — свободным. При отсутствии каких-либо регуляторных воздействий на биосинтез белка скорость считывания мРНК может достигать у прокариот около 50 нуклеотидов в секунду, а эукариот — около 30 [152], Следовательно, элонгация белковой цепи небольших размеров продолжается не менее 10—30 с. За это время совершается множество конформационных изменений растущего пептида, поскольку единичное изменение — поворот атомной группы вокруг одинарной связи, занимает всего 10 — 10 с. [c.406]

Модель солитонного переноса энергии. В работах А. С. Давыдова [11, 43] развивается концепция солитонного переноса энергии в белках. Сама идея солитонов, т. е. одиночной волны возбуждения (электронов или вибрационного возбуждения) представляет интересную попытку предложить возможное решение проблемы переноса энергии на большие расстояния (до 70 А ). Процесс перемещения этих квазичастиц, происходящий, со скоростью, превышающей скорость звука, сопровождается локальной деформацией цепей. Движение солитонов, переносящих дипольное вибрационное возбуждение или электроны, рассмотрено на системах пептидных групп. При этом оно происходит без потерь энергии, напоминая явления сверхпроводимости и сверхтекучести. Показана значительная устойчивость солитонов к различным возмущающим воздействиям. Однако ряд свойств, солитонов сильно ограничивает возможное их распространение в биоструктурах. Во-первых, солитонная волна может возникнуть только при определенном минимальном числе групп. Во-вторых, в отличие от окситонов, возбуждение светом является запрещенным для солитонов, в соответствии с принципом Франка-Кондона, по которому оптический перенос не должен сопровождаться сдвигом тяжелых частиц, т. е. солитоны, по-видимому, неприменимы для процессов фотосинтеза. В-третьих,, модель солитонов рассмотрена только для случая одномерной, молекулярной цепи, состоящей из пептидных связей. Как мы упоминали в разд. З.1.1., помимо систем пептидных связей, существенную роль в надмолекулярных структурах играют а разветвленные системы водородных связей аминокислот, способные включаться и в структуру систем пептидно-водородных связей. Пока возможность солитонного механизма переноса энергии по таким системам не рассматривалась. Отметим, чта недавно предпринята попытка экспериментального обнаружения биологических солитонов [21]. [c.51]