Методика получения ДНФ-аминокислот

По химическим принципам многочисленные методы получения производных аминокислот можно разделить на две большие группы. К первой группе относятся методы, при использовании которых молекула аминокислоты как таковая не затрагивается — ее функциональные группы блокируются так называемыми защитными группировками. Методикам защиты аминокислот посвящена обширная литература. Для второй группы методов характерно су-, щественное изменение молекулы аминокислоты, причем эта группа в свою очередь подразделяется на подгруппы. При химическом превращении одна или несколько функциональных групп аминокислоты замещаются на менее полярные группы или элиминируются в ходе направленной деградации молекулы аминокислоты. Пиролиз в этом смысле составляет исключение он приводит к полному разрушению исходного соединения., [c.310]

Общая методика получения а-аминокислот по Штрекеру [c.435]

Методика получения пептидных карт или отпечатков пальцев очень полезна при определении идентичности полипептидных цепей. Согласно этой методике, белок обрабатывают трипсином, который избирательно гидролизует пептидные связи, образованные карбоксильными группами основных аминокислот, аргинина и лизина. Образующаяся смесь пептидов разделяется с помощью хроматографии и электрофореза. Эквивалентный вес полипептидной цепи рассчитывают по количеству аргинина и лизина в белке и числу разных пептидов, получаемых при триптическом гидролизе. Теоретически общее число пептидов должно равняться сумме числа остатков аргинина и лизина плюс один, [c.401]

Общая методика получения а-аминокислот по Штреккеру (табл. 140). [c.143]

С целью применения специалистами в их практической работе разбираемых методов и приемов синтеза летучих производных аминокислот в первой и второй главах приводятся оригинальные методики получения этих производных. [c.3]

Бенсон [16] усовершенствовал методику анализа аминокислот. Полученные им результаты (рис. 5.28) представляются весьма перспективными. Автор предполагает, что такая методика жидкостного хроматографического анализа в скором вре- [c.311]

Очевидно, что описанные параметры газо-хроматографического анализа К-ТФА-бутиловых эфиров аминокислот могут быть использованы с меньшими или большими видоизменениями и для разделения ТФА-производных других эфиров. Это тем более важно, так как методика получения бутиловых эфиров К-трифтор-ацетилированных аминокислот является весьма трудоемкой и для получения соответствующих производных требуется значительно больше времени, чем для проведения собственно хроматографического разделения. Поэтому в настоящее время усилия многих исследователей направлены на исследование возможности более простого и количественного превращения аминокислот в летучие производные, что является необходимым условием для количественных определений аминокислот методом газо-жидкостной хроматографии. [c.265]

Методика получения ДНФ-аминокислот [c.136]

Многие методики получения производных аминокислот включают этерификацию карбоксильных групп. Хотя сами по себе эфиры некоторых аминокислот достаточно летучи и их можно [c.74]

Лабораторная методика получении ь-аминокислот ос.ч., отвечающих офазцам США и отчет по разработке методик. П.я. А-7815, 1966 г. [c.15]

Наконец, следует подчеркнуть, что как для количественного превращения и разделения аминокислот, так и для хорошей воспроизводимости сигналов с достаточной точностью необходима в первую очередь соответствующая калибровка. При этом площади пиков можно было бы непосредственно и надежно сопоставлять с количеством микромолей аминокислот. О ценности методики можно судить только после ее применения для анализа подходящего пептидного гидролизата и сравнения с результатами, полученными другими методами. [c.337]

Как уже было упомянуто выше, получение таких производных фталевой кислоты (методика 4) и хиральных соединений типа оптически активных аминокислот позволяет прийти к соединениям, удобным с экспериментальной точки зрения. Эти вещества можно выделять с помощью кислотно-основной экстракции, используя реакции карбоксильной группы. Применение названного реагента позволяет отличить друг от друга первичные, вторичные и третичные амины и дает возможность приготовить характерные производные первичных и вторичных аминов. [c.264]

Контрольный вопрос. 1. Предложите механизм реакции с нингидрином. Методика 24. Получение л-толуолсульфонильных производных аминокислот [c.280]

Методика 25. Получение 2,4-динитрофенильных производных аминокислот [c.281]

Методика 404. Общий способ получения Воо-аминокислот [c.119]

Методика 158. Общий метод получения эфиров аминокислот /26 7 [c.179]

Общая методика получения а-аминокислот ао Штреккеру <та6л. 115). [c.135]

Общая методика получения а-аминокислот из а-галогениро-ванных жирных кислот. В круглодонной колбе с обратным холодильником нагревают 8 молей карбоната аммония в 140 мл воды до 55°,. охлаждают при встряхивании до 40° и при этой температуре добавляют 6 молей концентрированного водного раствора аммиака. Смесь оставляют стоять 30 мин. Затем порциями прибавляют 1 моль соответствующей а-галогенкарбоновой кислоты и выдерживают при температуре 40—50° (в случае бромзамещенных кислот — 24 час, а в случае хлорзамещенных — 40 час). Аммиак и углекислоту удаляют, упари-. вая раствор в фарфоровой чашке на голом пламени, пока его температура не достигнет 112°. Затем кипятят несколько минут с активированным углем, фильтруют, охлаждают до 60° и смешивают сЗ л метилового спирта. Выпавший после стояния в течение ночи в холодильнике осадок отфильтровывают и промывают метиловым спиртом. Получают аминокислоту высокой степени чистоты. [c.188]

Хотя Герке выбрал н-бутиловые эфиры [78], на основании количественного измерения потерь при упаривании эфиров N-ТФА-аланина было сделано заключение, что достоверные результаты можно получить только с -амиловыми производными [27]. Потерь метиловых эфиров N-ТФА-аминокислот удавалось избежать только при упаривании избытка реагентов при низкой температуре [30]. По предварительным данным, полученным в лаборатории авторов, метиловые, этиловые и н-пропиловые эфиры ацетилированных аминокислот пригодны для газохроматографического разделения в интервале температур 100—240 °С. Этерификация проходит быстро, и при простой двухстадийной методике получения ацетил-н-пропиловых эфиров [23] нет потерь, связанных с упариванием (табл. 4). По этим причинам, а также из-за легкости разделения на покрытых карбоваксом хромосорбах G или W (высококачественные), мы остановили свой выбор на ацетил-н-пропиловых эфирах (см. разд. 2.4.7). [c.116]

Этерификацию можно контролировать с помощью тонкослойной хроматографии, так как отсутствие реакции с нингидрином указывает на ацилирование а-аминогруппы. Будучи полезной на первом этапе исследования, методика, однако, не является удовлетворительной для определения процента превращения малых количеств аминокислоты. Сравнение площадей пиков в ГХ аминокислот, прошедших все микроколиче-ственные синтетические операции, с пиками высокоочищенных стандартных образцов позволяет провести точную количественную оценку методики получения соответствующих производных [41, 84]. Намного труднее поставить опыты для доказательства того, что вещество устойчиво на колонке, а площадь регистрируемого пика действительно отвечает известному количеству аминокислоты. Большинство исследователей довольствовалось предположением, что пик правильной формы измеряет все количество аминокислоты, нанесенной на колонку. Частичное решение этой проблемы было предложено Блау [И], рекомендовавшим сравнивать площади пиков, полученных на выбранной фазе и на очень неполярных фазах (5Е-30). Для того чтобы компенсировать потери, связанные с обработкой или различными условиями ввода пробы, необходимо включать внутренний стандарт. В пламенно-ионизационных детекторах молярная интенсивность сигналов для всех аминокислот различна, но линейность интенсивности сигнала в нормальных рабочих пределах позволяет проводить количественное измерение неизвестных соединений, поэтому между ними существует прямо пропорциональная зависимость. Для вычисления молярных соотношений (например, в пептидном гидролизате) внутренний стандарт не требуется. Его нужно включать в одинаковой концентрации в стандартную анализируемую смесь в том случае, если нужно рассчитать абсолютное количество каждой аминокислоты (см. разд. обсуждение в работе [41]), [c.127]

Общая методика получения а-аминокислот из а-галогенокарбоновых кислот (табл. 45). В круглодонной колбе с обратным холодильником нагревают [c.289]

Шляпников и Карпейский [24] исследовали эффективность газохроматографического разделения 12 аминокислот в виде эфиров их Н-формил- и К-ацетилпроизводных (рис. 3). Авторами предложена методика получения эфиров К-формиламинокислот. [c.13]

Бензиловый эфир хлоругольной кислоты был получен действием фосгена на бензиловый спирт -2. Описанную выше методику получения бензилового эфира хлоругольной кислоты и карбобенз-оксипроизводных глицина и аланина в основном разработали Бергман и Зервас . Карбобензоксипроизводные других аминокислот удобно получать таким же способом. Бензиловый эфир карбаминовой кислоты был получен действием аммиака на бензи- [c.102]

По более новой методике (Фукс, 1922) для получения N-к pбoк и-ангидридов аминокислоту обрабатывают фосгеном в толуоле или ди-океане [c.712]

Штеттен (D. Stetten, jr., частное сообщение) установил, что если синтез /-а-аминофенилуксусной кислоты проводить по методу Зелинского и Стадникова [ЖРХО, 40, 792 (1908)] и выделять аминокислоту описанным выше способом, то полученный выход будет не намного больше того, который указан Б приведенной методике. [c.65]

Приведенная выше методика применима и к другим аминокислотам, причем работать можно и в больших масштабах. Так, при работе с 1,5 моля из -аланина был получен N-фта-лил-р-аланин с выходом 96% и из L-аланина — Ы-фталил-1-аланин с выходом 91% из хлористоводородной соли этилового эфира глицина (с применением более 1 молярного эквивалента триэтиламина) был получен этиловый эфир N-фталилглицина с выходом 96%. [c.167]

В этом синтезе использован метод получения а-аминокислот по Штреккеру, описанный Линном [1] см. также методику, описанную Кларком и Бином [2]. [c.200]

Другой способ удаления воды рекомендован Зомзели и др. [131]. Основываясь на ранее описанной методике [57], авторы добавляли к кислому этанольному раствору кеталь, полученный из соответствующего спирта и ацетона (диалкоксипропан). Кеталь удаляет воду, используя ее на расщепление до спирта и ацетона. Однако, согласно некоторым данным [19], ни метод Джонсона и др. [42] с использованием НС1 вместо НВг, ни последняя методика [131] не годятся для получения н-амиловых эфиров. Применение кислых ионообменных смол [77] также не привело к удовлетворительным результатам. Количественное образование н-амиловых эфиров идет лишь при более высокой температуре и при введении в смесь газообразного НС1 [19]. Превращение аминокислот в высшие эфиры затруднено тем, что определенные аминокислоты, такие, как цистин, очень плохо растворимы в спиртах, насыщенных НС1. н-Бутиловые эфиры были приготовлены [53] переэтерификацией [c.320]

Методика опыта. В пробирку вносят 3 капли 1%-ного раствора сульфаниловой кислоты в 2%-ном растворе НС1, добавляют 3 капли раствора NaNOg и перемешивают. В полученный диазореактив вводят 5 капель испытуемого раствора. Появление красного окрашивания указывает на присутствие гистидина и тирозина или одной из этих аминокислот. Красное окрашивание объясняется образованием азокрасителя. [c.15]

Выше рассмотрены основные закономерности хроматографии на силикагеле в нормально-фазовом режиме. Такой способ использования силикагеля — исторически первый, и с помощью его решено множество практически важных задач. Впоследствии силикагель в значительной степени был вытеснен обращенно-фазовыми сорбентами. Однако данные самого последнего периода свидетельствуют о том, что возможности силикагеля далеко не исчерпываются классической нормальнофазовой Хроматографией. Помимо относительно малополярных элюентов при хроматографии на силикагеле могут использоваться различные нетрадиционные подвижные фазы. При этом возможно получение хороших практических результатов даже для таких сорбатов, которые, как правило, рекомендуют разделять в обращенно-фазовом режиме. Механизм сорбции в таких случаях довольно сложен и изучен еще недостаточно. Обычно принято считать, что поверхность силикагеля слабокислая, и это иногда является причиной затруднений при нормальнофазовой хроматографии оснований. Установлено, однако, что современные марки силикагеля для ВЭЖХ, имеющие сферическую форму частиц, могут быть как кислыми, так и щелочными [128]. Это обстоятельство следует иметь в виду при разработке методик, так как высокое значение pH силикагеля может положительно сказаться на форме пиков оснований и селективности разделений. Аналогичен результат при применении буферированного силикагеля [343, 344]. Для получения этого материала силикагель пропитывали 0,1 М раствором соли или кислоты, после чего высушивали в вакууме и затем заполняли колонку суспензионным способом. В качестве подвижных фаз использовали обычные для нормально-фазовой хроматографии системы например, смеси гексана с диэтиловым эфиром в различных соотношениях. Пропитка силикагеля гидросульфатом натрия либо щавелевой, лимонной, винной кислотами способствовала существенному улучшению формы пиков изомеров гераниевой кислоты. Аналогичного эффекта для сорбатов основного характера — производных антраниловой кислоты — удалось добиться пропиткой фосфатно-цитратным буфером. Последний прием позволил также получить вполне симметричные пики ФТГ-производных аминокислот. [c.157]

Известна антибактериальная и фунгицидная активность 5-замещенных-[1,3,4]окса-диазол-2-тиолов и соответствующих тиоэфнров [1, 2]. Их метод получения, заключающийся в гетероциклнзацин гидразидов карбоновых кислот сероуглеродом, даже в случае бензойных кислот довольно капризен, и не всегда приводит к высоким выходам желаемых соединений [3]. Целью настоящей работы является разработка удобных методик препаративного синтеза 5-амнноалкнл-[1,3,4]оксадиазол-2-тиолов на основе N-защищенных природных аминокислот, как бифункциональных N-концевых матриц в пептидном синтезе. [c.94]

К счастью, несколько иная методика измерения была разработана рядом хроматографистов, одним из которых был Г. Поллок, работающий в том же самом Научном центре в Эймсе. Основанный на газовой хроматографии, метод Поллока требует всего лишь нескольких микрограммов пробы и может быть применен к сложным смесям атаино-кислот. Первым этапом методики была этерификация аминокислот чистым (только одним энантиомером) 7 -2-бутанолом. Полученный эфир имел два асим метрических центра и мог существовать в виде-двух диастереомеров ЯЯ и где первая буква относится к конфигурации спирта, а вторая — к конфигурации аминокислоты. Затем эфиры были переведены в амиды обработкой трифторуксусным ангидридом для уменьшения полярности амино-группы и повышения летучести производных аминокислот, что позволило проводить успешное их хроматографирование. Используя капиллярные колонки, имеющие характеристики, приведенные на рис. 17-16, Поллок получил хроматограмму смеси диастереомерных производн ых аминокислот. Заметим, что каждая аминокислота дает пару пиков. Эксперименты доказали, что каждый пик отвечает одному из двух диастереомеров и что характеристики удерживания диастереомеров, которые отличаются только конфигурацией при асимметрическом углеродном атоме, как оказалось, были вполне достаточными, чтобы можно было проводить их разделение на газохр оматографической колонке. Таким образом, относительные количества Я- и 5-энантиомеров для некоторых отличающихся между собой аминокислот можно было определить хроматографированием,, сравнивая относительные высоты ЯЯ- и 5-пиков для каждого производного аминокислоты, причем для обнаружения требуется всего несколько нанограммов каждой аминокислоты. [c.585]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология