Хроматографическое разделение на анионообменных колонках

Условия хроматографического разделения органических кислот на анионообменных смолах с использованием в качестве элюента муравьиной кислоты были изучены в работе [54]. Авторы нашли, что степень поперечной сшивки сильноосновной анионообменной смолы дауэкс-1 не влияет на порядок элюирования карбоновых кислот. Молярную концентрацию муравьиной кислоты, необходимую для элюирования 94 кислот из колонки, заполненной дауэксом 1-Х10, определяли по методу Дэвиса и сотр. [55]. Условия элюирования зависели от рК разделяемых кислот. Важна также и растворимость кислот в муравьиной кислоте, потому что она влияет на образование хвостов хроматографических зон. При выборе соответствующего градиента концентрации муравьиной кислоты было достигнуто полное или частичное отделение некоторых кислот (яблочной от мезовинной, янтарной от адипиновой и винной от хинолиновой кислоты), при этом было подавлено образование хвостов . Элюат собирали по фракциям, состав которых анализировали с помощью хроматографии на бумаге после предварительного удаления муравьиной кислоты путем выпаривания досуха в вакууме над силикагелем. [c.177]

Прежде чем тот или иной метод анионообменной хроматографии получит широкое применение, должен быть рассмотрен ряд вопросов, таких, как стабильность функциональных групп смолы, поперечное сшивание смолы или стабильность матрицы полимера, воспроизводимость партий смолы. Потеря стабильности активного участка влияет на результаты хроматографического разделения двояким образом во-первых, уменьшение числа теоретических тарелок ионообменной колонки [95] приводит к изменению последовательности элюирования хроматографируемых зон во-вторых, продукты разложения смолы являются во многих случаях нингидрин-положительными, что приводит к нестабильной фоновой линии (так называемые химические помехи). Воспроизводимость смолы от партии к партии необходима для того, чтобы каждый разработанный и опубликованный хроматографический метод мог быть повторен без лишних усилий, а не стал достоянием отдельных исследователей. [c.20]

Хроматографический метод анализа анионов, описанный в предыдущей главе, заполнил огромный пробел в анализе неорганических веществ. Однако необходимость во второй (компенсационной) колонке усложняет оборудование и до некоторой степени ограничивает выбор элюента и разделительную способность метода. Несомненным достоинством системы было бы непосредственное подключение детектора электропроводности к анионообменной разделяющей колонке. Это возможно лишь в том случае, если концентрация солей в элюенте очень низка, а потому очень низка и фоновая проводимость. Однако обычные ионообменные смолы содержат много обмениваемых групп (в полистирольных смолах примерно одну на каждое бензольное кольцо), и для хроматографического разделения анализируемых ионов требуется применять элюент с высокой концентрацией солей. [c.102]

Одноколоночный метод позволяет осуществить быстрое разделение анионов, причем отсутствие компенсационной колонки никогда не затрудняет анализа. На рис. 5.2 приведен пример хроматографического разделения четырех анионов на колонке с анионообменной смолой емкостью 0,007 мэкв-г-. Смесь элюировали 1,0-10- М фталатом калия при pH 7,1. Хлорид, нитрат, тиоцианат и иодид появляются после ложного пика (происхождение которого обсуждается ниже). На рис. 5.3 приведен пример быстрого разделения хлорида, нитрата и сульфата. Емкость смолы составляет 0,04 мэкв-г-, а в качестве элюента пользовались 5,0-10— М фталата калия при pH 6,2. Если провести анализ пяти образцов, содержащих постоянное количество ионов хлора и нитрата. [c.106]

Как показало кинетическое исследование [269] явления массопереноса бычьего сывороточного альбумина (БСА) в двух разных анионообменных колонках (Resouг e-Q и Т8К-СЕЬ-ВЕАЕ-5РЛ ), концентрационная зависимость общего коэффициента скорости массопереноса показывает, что при хроматографическом разделении в колонках и анионообменниках происходят несколько процессов продольная дисперсия, массоперенос из жидкости в частицу, диффузия внутри частиц и адсорбционно-десорбционные процессы. В колонке Resouг e-Q диффузия внутри частиц дает основной вклад в уширение полосы по сравнению с уширениями от других процессов. Коэффициент диффузии по поверхности БСА имеет положительную концентрационную зависимость, которой, по-видимому, можно объяснить линейную зависимость коэффициента скорости массопереноса от концентрации БСА. С другой стороны, в колонке Т8К-ОЕЬ-ВЕАЕ-5РЛ вклад адсорбции/десорбции имел почти такую же величину, как вклад из-за диффузии внутри частиц. В целом кинетика массопереноса на этих двух анионообменниках имеет некоторые отличия. Авторы делают вывод, что положительная концентрационная зависимость коэффициента диффузии по поверхности может быть объяснена моделью гетерогенной поверхности. [c.440]

Наиболее важным методом, используемым для хроматографии кислот, является ионообменная хроматография. Это обусловлено главным образом присутствием карбоксильной группы, ионогенные свойства которой позволяют разделять кислоты на основе различных механизмов ионного обмена. Удерживание анионов органических кислот на анионообменных смолах зависит от их кислотности. Это обстоятельство используется при хроматографическом разделении органических кислот на анионообменных смолах в гидроксильной, карбонатной, формиатной, ацетатной и хлоридной формах. Для элюирования использовали воду, разбавленную муравьиную, уксусную и соляную кислоты или их буферные растворы. Разделение двух кислот тем эффективнее, чем больше разница в их константах диссоциации. Разделение двух слабых кислот происходит наиболее четко в том случае, когда pH элюата на V2 ниже величины /zipKi + pKz), где / l и /Сг — константы диссоциации этих разделяемых кислот [2]. Эффективность разделения можно увеличить, если применять смеси растворителей. Из колонок, наполненных анионооб-менной смолой, органические кислоты элюируются быстрее смесью метанол—вода, чем чистой водой [3]. [c.151]

Высокоскоростные хроматографические разделения выполняют на колонках, заполненных ионообменной смолой с регулируемой поверхностной пористостью, по методу, разработанному Кирклендом [65]. Такие анионообменные смолы состоят из твердых сферических кремнистых частиц с твердой, непроницаемой сердцевиной, которая окружена оболочкой с мелкими неглубокими порами толщиной около 2 мкм. Ионообменной средой является полимер метакрилата, содержащий сильноосновные тет-раалкиламмониевые группы. [c.179]

Рис. 12.12. Хроматографическое разделение мочи с УФ-детектором. Колонка 100 см X 2,4 мм (внутренний диаметр) носитель сильноосновная анионообменная смола, размер частиц 12—Шмкм остальные условия описаны в тексте.

Большинство ионообменных разделений неорганических ионов проводят на колонках, содержащих катионообменную, анионообменную или хелатную ионообменную смолу. В качестве катионообмёнников обычно используют органические полимеры с функциональными сульфогрулпами, присоединенными к бензольным кольцам полимера. Наиболее распространенными анионооб-менниками являются органические полимеры с четвертичными аммониевыми функциональными группами. Эффективность хроматографического разделения повышается при использовании колонок, тщательно заполненных однородными частицами сферической формы и малого размера. Для разделения органических ионов пользуются высокоэффективными наполнителями, состоящими из мелких пористых частиц силикагеля, покрытых ионообменным материалом, но пока такие наполнители не нашли широкого применения для разделения неорганических ионов. [c.16]

Альдегиды и кетоны можно разделить хроматографически, если они находятся в свободном состоянии или в виде производных. Хотя карбонильные соединения являются неионогенными, большинство исследователей для их разделения используют ионообменную хроматографию. Очень часто также необходимо решать задачи группового отделения альдегидов и кетонов от органических кислот и других веществ. Кислоты связываются количественно на колонке с сильноосновной анионообменной смолой амберлит IRA-400 (НСО ). Альдегиды и кетоны переходят в фильтрат, а кислоты затем десорбируются раствором карбоната натрия [1]. Для отделения кетонов от спиртов можно использовать количественную сорбцию кетонов на анионообменных смолах в бисульфитной форме, тогда как спирты переходят в элюат. Кетоны можно элюировать горячей водой или раствором, содержащим смесь карбоната и бикарбоната [2]. [c.49]

Анионообменный хроматографический метод был развит для автоматического определения идоновой и глюконовой кислот на колонке с дауэксом 1-ХВ (С1 , 400 меш) размером 200X9 мм. Элюирование осуществляли при температуре 30 °С 0,4 М буферным раствором бората с pH 7,35, содержащим 0,05 М хлорида натрия [51]. Кислоты анализировали периодатным методом. Добавление хлорида натрия и повышение температуры способствовали более эффективному элюированию компонентов. Этот метод оказался также пригодным для разделения и определения 5-ок-соглюконовой, арабоновой и 2-оксоглюконовой кислот в реакционных смесях. [c.176]

Дальнейший прогресс в выделении и изучении свойств катехинов связан с применением хроматографического метода анализа. Открытый замечательным русским исследователем М. С. Цветом еще в 1900—1906 гг. хроматографический метод получил широкое развитие лишь спустя несколько десятилетий Из трех основных типов хроматографического метода адсорбционной, ионообмен ной и распределительной хроматографии для изучения катехинов до сих пор с успехом был применен лишь последний. Адсорбционная хроматография непригодна для разделения катехинов вследствие их лабильности. Так, на AljOg и MgO (адсорбент средней силы) происходит необратимая адсорбция катехинов, сопровождающаяся окислением последних. На колонках же слабых адсорбентов (например сахарозы) катехины не разделяются. Получившие распространение в последние годы для разделения ряда фенольных соединений колонки из порошкообразного полиамида (перлон, капрон) пока не дают удовлетворительного разделения катехинов. Как показали наши исследования, анионообменные смолы даже при их использовании в ацетатной форме также необратимо свй.чнвяюткятехиньт- ----------- [c.73]

Описаны методы ступенчатого [99] и градиентного элюирования [134] пептидов с использованием анионообменной смолы. Сильноосновный анионит дауэкс 1-Х2 с низкой сшивкой был использован в дополнение к методике разделения пептидов на катионите. Эта низкосшитая смола имеет недостаток она сильно сжимается, что приводит к резкому повышению рабочего давления на колонке. Часто это вызывает необходимость повторной набивки колонки. Анионообменники к тому же имеют ограниченный срок службы, поскольку из-за нестабильности функциональных групп — третичных и четвертичных аммониевых оснований — меняется профиль элюирования хроматографических пиков. Некоторые из этих недостатков удалось устранить, применяя полученную сравнительно недавно анионообменную смолу типа 1-5 [92], которая была использована для хроматографии нейтральных сахаров. [c.37]

Церей и Триулзи [1101 установили, что для восьми более легких редкоземельных металлов (от лантана до гадолиния) на обыкновенной хроматографической бумаге при проявлении О—3 М азотной кислотой в водном метаноле, содержащем -0—99,9 об. % спирта, значения Я/ близки между собой и находятся в пределах 0,54—0,86. Однако на диэтиламиноцеллюлозной бумаге при этом же тройном проявителе разделение было гораздо лучше. Увеличение концентрации метанола или азотной кислоты в проявителе приводит к уменьшению значений Rf и лучшему разделению. Это объясняется тем, что метанол и азотная кислота способствуют образованию анионных комплексов. Авторы приводят состав восьми проявителей из воды, метанола и азотной кислоты, каждый из которых может выделить три элемента из смеси. Поведение этих металлов на диэтиламиноцеллюлозной бумаге напоминает их поведение в колонке с анионообменной смолой. Однако любо- [c.322]

Описан способ определения неорганических и органических анионов с помон1ью выпускаемой промышленностью хроматографической системы с кондуктометрическим детектированием. Патентованная система состоит из двух последовательно установленных колонок. Разделение осуществляется на поверхностно-пористой анионообменной смоле в среде основного элюента. Вторая колонка служит для обмена катионов в элюенте и образце на водород. Реакции обмена приводят к снижению электропроводности элюента и увеличению анионной проводимости анализируе.мого образца. [c.61]

В конце 1978 г. в Университете шт. Айова (США) была разработана простая хроматографическая методика разделения ряда распространенных ионов, которая описана в статьях [4, 5]. В этой новой системе для анионной хроматографии имеется анионообменная разделяющая колонка, присоединенная непосредственно к детектору электропроводности, а компенсационная колонка не требуется. В системе применены два принципиальных новшества 1) специальная анионообменная смола с очень малой емкостью (0,007—0,040 мэкв.-г ) 2) элюент, обладающий очень низкой электропроводностью. Элюенты представляют собой водные растворы натриевых, калиевых или аммониевых солей бензойной, фтале-вой и о-сульфобензойной кислот с концентрацией (l- 5) 10 М. Все это позволило добиться очень быстрого разделения анионов, и ни в одном случае отсутствие компенсационной колонки не помешало анализу. [c.104]

Ионообменную хроматографию на колонках со смолами в боратной форме применяли для разделения и анализа не только сахаров, но и полиолов [84, 85]. Для этой цели использовали такую же хроматографическую систему [85], как и в случае разделения сахаров [78], но хроматографию проводили при более высокой температуре колонки (75 °С) и при большей скорости подачи буферов (70 мл/ч). Это обеспечивало разделение смеси, содержащей этиленгликоль, пять полиолов и два аминодезокси-полиола, за 4 ч [78]. С помощью анионообменной хроматографии в боратных буферах был успешно разделен ряд производных углеводов, в том числе несколько метилгликозидов [80], а также метиловые эфиры п-ксилозы, о-глюкозы и о-маннозы [c.23]

Общее содержание цистина и цистеина можно, однако, определить, окисляя интактный белок надмуравьиной кислотой, которая превращает оба типа остатков в цистеиновую кислоту. Белок затем гидролизуют и сильную цистеиновую кислоту отделяют или на сильноосновной анионообменной смоле, такой, как дауэкс-2 [108], или на сильнокислотной катионообменной смоле типа, обычно используемого для разделений аминокислот [102]. Последний способ более удобен, так как цистеиновая кислота вымывается в виде пика с нулевым удерживаемым объемом (фракции 3—10 на колонке длиной 15 см), но первый метод дает возможность более строгой хроматографической идентификации и отделения цистеиновой кислоты от других сильнокислых соединений, реагирующих с нингидрином. Скорость окисления остатков цистина в белках сходна со скоростью окисления свободной аминокислоты. Нерастворимые белки для полного окисления требуют более продолжительной обработки. [c.148]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология