Элюент выбор

Правильный выбор элюента при разделении часто имеет не менее важное значение, чем выбор адсорбента. На данном адсорбенте вещество может удерживаться требуемое время или не удерживаться совсем, в зависимости от свойств элюента. В адсорбционной хроматографии молекулы [c.599]

Элюенты. При выборе растворителей или их смесей для ТСХ учитывают растворимость разделяемых соединений в подвижной фазе. Важное значение имеет избирательная растворимость по отношению к отдельным компонентам смеси. Методика выбора растворителей — элюентов для ТСХ — зависит от типа разделяемой смеси. Различают два основных случая 1) разделение веществ с близкими значениями R и 2) разделение веществ с сильно различающимися Rj. В первом случае применяют проточное непрерывное элюирование, во втором случае — метод антипараллельных градиентов, заключающийся в разделении веп еств в камерах с ненасыщенной атмосферой, при котором уменьшается подвижность соединений в направлении элюирования. [c.358]

Адсорбируемость, как теперь установлено, довольно правильно понижается с возрастанием полярности растворителя (на таких адсорбентах, как алюмосиликаты, силикагель, окись алюминия). Элюирующая способность веществ обратна их растворяющей способности, поэтому наиболее полярные растворители являются наилучшими элюентами. Выбор подходящих растворителя, элюента и адсорбента зависит от свойств каждого из них. При применении менее полярного растворителя вещество задерживается в колонке, при более полярном вымывается быстрее. [c.89]

В жидкостно-жидкостном варианте к подвижным фазам предъявляются значительно более жесткие требования, чем в адсорбционном варианте. Одним из обязательных условий является несмешиваемость элюента и неподвижной жидкой фазы. Растворимость определяемого вещества в элюенте должна быть достаточно высокой. Для предотвращения чрезмерно быстрого элюирования и ухудшения разрешения анализируемые соединения должны растворяться в неподвижной фазе более легко, чем в элюенте. Выбор системы элюент — неподвижная фаза облегчается благодаря наличию соответствующей информации об экстракционных системах. Объемная скорость элюента обычно равна в среднем 1 мл/мин. [c.67]

Определение компонентного состава битумов. В зависимости от выбора экстрагентов для осаждения, элюентов и адсорбентов для хроматографирования результаты определения могут быть неодинаковыми, что и наблюдается в работах разных авторов. Наибольшее применение при исследовании компонентного состава битумов у нас в стране нашли лишь несколько методик. Они отличаются в основном аппаратурным оформлением, но не полученными результатами. [c.8]

Для того чтобы активность сорбента не изменялась, применяемые в качестве элюента растворители должны быть хорошо высушены. Обычно в качестве элюентов используют следующие растворители петролейный эфир, четыреххлористый углерод, циклогек-сан, сероуглерод, эфир, ацетон, бензол, толуол, хлороформ, спирты, пиридин и органические кислоты. В этом ряду растворители расположены по мере возрастания их сорбируемости и каждый из них вытесняется из сорбента последующими. Успех разделения зависит от правильного выбора сорбента и элюента. [c.47]

К моменту полного насыщения адсорбента вытеснителем детектор запишет ступенчатую выходную кривую, отличающуюся от фронтальной кривой тем, что каждая ступень соответствует чистому компоненту. Высота ступени характеризует компонент с качественной стороны, а длина ступени пропорциональна содержанию данного компонента в исследуемой смеси. Обязательным условием для хорошего разделения, в противоположность элюент-ному способу, является резко выраженная выпуклая форма изотерм адсорбции разделяемых компонентов и вытеснителя. А это условие выполнимо лишь в случае применения высокоактивных адсорбентов активированных углей (березового БАУ, каменноугольного антрацита АГ-2, норита), силикагелей различных марок и др. Трудность выбора концентрации вытеснителя в проявителе, взаимная диффузия на границе зон, препятствующая получению на выходе из колонки достаточно чистых компонентов разделяемой смеси, а также длительность процесса разделения затрудняют [c.16]

Выбор матрицы и элюента [c.192]

Многочисленные и разнообразные примеры успешного применения в аналитической химии разделения катионов многих металлов приведены в обзорных статьях [119, 1211. Простота и доступность метода распределительной хроматографии на бумаге, возможности большого выбора элюентов способствовали широкому применению этого метода и для разделения разновалентных ионов одного элемента. Однако обычные разделения методом бумажной хроматографии производятся в течение 1—6 ч и лишь очень немно- [c.180]

Описанная картина ионных взаимодействий веществ с обменником подсказывает два главных способа управления силой этих взаимодействий (прочностью ионной сорбции), а следовательно, и значениями коэффициентов распределения компонентов смеси веществ между фазами, и возможностью их хроматографического фракционирования во-первых, управление степенью ионизации ионогенных групп обменника и вещества путем вариации рИ буфера и, во-вторых, регулирование степени блокирования их зарядов путем выбора концентрации соли в элюенте. Рассмотрим эти способы подробнее. [c.262]

При выборе обменника решающую роль могут иногда сыграть факторы, на первый взгляд второстепенные. Например, жесткость обменника и сохранение объема при изменениях pH и ионной силы элюента могут играть очень важную роль в случае разделения смеси компонентов, сильно различающихся между собой по сродству к обменнику, когда для элюции может оказаться необходимым использование широкого диапазона концентраций соли или pH буфера, [c.288]

ВЫБОР ОБЪЕМА ЭЛЮЕНТА [c.292]

ВЫБОР ЭЛЮЕНТА И МЕТОДА ЭЛЮЦИИ [c.406]

Радиальная ТСХ позволяет имитировать (с целью выбора хроматографической системы) процесс жидкостной колоночной хроматографии (ЖКХ). По центральному капилляру на пустую пластинку подают небольшую порцию элюента, так что близ центра пластинки образуется область равновесия неподвижной и подвижной жидких фаз. Потом в тот же капилляр с помощ,ью специального шприца вручную впрыскивают препарат и продолжают подачу элюента из основного шприца (5). Препарат сорбируется в центре пластинки в тех же условиях, как при ЖКХ, а затем элюируется оттуда равномерно по всем направлениям, так что хроматографические фракции (после окраски) имеют вид концентрических колец. [c.477]

Необходимо, чтобы противоион растворялся в элюенте. Неправильный выбор противоиона может привести к образованию осадка, что вызовет возрастание значений к, размывание пика и заметное повышение давления на входе. Концентрация обычно колеблется от 0,01 М для противоиона с малой длиной цепи до 0,005 М для противоиона с более длинной цепью. [c.81]

Рефрактометр представляет собой недеструктивный концентрационный детектор средней чувствительности. Последняя определяется разностью показателей преломления элюента и анализируемых веществ и часто может быть повышена за счет правильного выбора подвижной фазы. В оптимальных условиях предел обнаружения для рефрактометра достигает 5 10" г/мл. Основные недостатки рефрактометрических детекторов— практическая невозможность использования при градиентном элюировании и необходимость тщательной стабилизации температуры. Для работы на максимальной чувствительности нужно поддерживать температуру элюента и обеих ячеек кюветы, с точностью до 10 -10 °С, что затруднительно даже при помещении кюветы в металлический блок с большой теплоемкостью и использовании эффективных теплообменников. Последние, в свою очередь, увеличивают мертвый объем между колонкой и кюветой детектора, что приводит к дополнительному размыванию хроматографических зон и снижению эффективности разделения. [c.153]

При элютивной (или элюептной) хроматографии первая стадия процесса принципиально не отличается от первой стадии вытеснительной хроматографии. Разница лишь в том, что первичная хроматограмма занимает значительно меньшую часть колонки, чем при вытеснительном процессе. Затем следует стадия вымывания (элюции) сорбированной смеси подходящим элюентом. Выбор элюента подчинен менее строгим требованиям по сравнению с теми, которые предъявляются к элюенту в вытеснительной хроматографии. Элюент не должен мешать определению разделяемых ионов в элюенте или должен легко удаляться из последнего. Как правило, элюцию начинают раствором, который использовался для первоначальной обработки колонки перед сорбцией и в котором разделяемая смесь вводилась в колонку, хотя это и не является обязательным. Концентрация ионов в элюенте обычно берется достаточно высокой, чтобы в колонке с первых моментов ионы элюента были в избытке по сравнению с разделяемыми ионами. Благодаря этому элюент создает фон относительно высокой концентрации в любой точке колонки, вследствие чего равновесие обмена разделяемых ионов с ионами элюента описывается линейными уравнениями [c.315]

Для выбора оптимальных условий хроматографического разделения были рассчитаны объемы промывных растворов, соответствующие максимумам выходных кривых для каждого иона (Ктах), при задэнных величинах концентрации элюентов по иону-вытеснителю. Эти расчеты выполнялись при помощи уравнения Г, М. Колосовой и М. М. Сенявина (П. 97) путём подстановки в него известных значений концентрационных констант ионного обмена, взятых из табл. 6. В табл. 8 приведены в качестве примера расчетные величины Утах для элюирования катионов раствором соляной кислоты, содержащим 80% этанола. [c.136]

В ТСХ, как и в других видах жидкостной хроматографии, одной из наиболее важных проблем является правильный выбор состава элюента. Следует руководствоваться элюотроппым рядом, в котором растворители расположены в порядке возрастания элюирующей силы, а также данными о свойствах разделяемых веществ и их способности взаимодействовать с подвижной и неподвижной фазами. В ТСХ выбор растворителя аналогичен выбору состава элюспта в адсорбционной хроматографии. Не следует выбирать многокомпонентную смесь, предпочтительней применение одно- нли двухкомионентпых элюентов для облегчения воспроизводимости условий ТСХ. [c.613]

Хроматографическая бумага должна быть чистой, однородной по плотности, структуре и ориентации во-Л01ЮН. В наиболее простом случае используют плотные сорта фильтровальной бумаги. Обычная бумага гидрофильна и содержит до 20 % влаги, что является вполне достаточным количеством в том случае, когда НФ служит вода, а ПФ — несмешивающийся с водой органический растворитель. В хроматографии на бумаге можно реализовать обращенно-фазовый вариант. В этом случае бумагу предварительно пропитывают гидрофобным веществами (парафин, каучук и др.), либо подвергают специальной химической обработке, устраняя гидроксильные группы ,еллюлозы. Подвижной фазой в обращенно-фазовом варианте служат вода и смеси воды с полярными органическими растворителями. В хроматографии на бумаге, как и в других видах хроматографии, большое значение имеет правильный выбор неподвижной и подвижной фаз. Используемые фазы ие должны смешиваться друг с другом. Анализируемые вепгества должны растворяться в НФ луч не, чем в ПФ, иначе они будут двигаться со скоростью движения фронта элюента. В настоящее-время в качестве ПФ индивидуальные растворители используют, как правило, реД со. Чаще применяют смеси эмпирически подобранных компонентов. Хроматограмма аналогична полученной в методе ТСХ и имеет вид пятен более или менее отделенных друг от друга. Для проявления пятеп пригодны методы, описанные для ТСХ. [c.615]

Возможность фракционирования компонентов смеси веществ обусловлена здесь различием в значениях их суммарных зарядов. Последние зависят как от числа и характера ионогенных групп в молекулах, так и от полноты их диссоциации, которую можно контролировать путем выбора pH и ионной силы элюента. Чем больше в данных условиях элюции суммарный заряд того или иного компонента смеси, тем сильнее его взаимодействие с ионообменни-ком н тем медленнее он мигрирует вдоль колонки. На очерченный здесь основной процесс ионообменной хроматографии влияет ряд дополнительных факторов. Среди них, кроме уже фигурировавшей ранее затрудненной (особенно для крупных молекул) диффузии внутри гранул, следует назвать возможность неионпой адсорбции на поверхности матрицы ионообменннка. Однако при правильном выборе материала обменника, и в частности его порнстостп, основную роль в процессе фракционирования играет явление понного обмена. [c.10]

Из формулы (21) следует, что улучшать разрешение эффективнее не за счет длины колонки, а за счет выбора хроматографической системы, обеспечивающей более выраженное различие сродства двух веществ к неподвижной фазе. Следует подчеркнуть, что если хроматографическая система разделения близких зон отработана на малой колонке, то при переносе ее на колонку большего размера следует увеличивать объем только за счет ее диаметра, оставив подобранную длину колонкп неизменной. Скорость элюции (мл/ч) следует повысить ироиорционально увеличению площади сечентш колонки, с тем чтобы линейная скорость течения подвижной фазы (илп, что то же самое, расход элюента в расчете на 1 см площади сечепия колонки) оставалась неизменной. [c.35]

В большинстве случаев перед хроматографическим процессом стоит задача надежного разделенпя двух илп более заранее известных компонентов исходной смеси. Еслп хроматографическая система j e определена, то в распоряжении экспериментатора етце остается возможность выбора целого ряда физических параметров процесса с целью оптимизации условий разрешения зон (пиков) в этой снстеме. Краткое знакомство с основами теории хроматографии имело целью дать обоснования для такого выбора. Теперь можно подвести итоги. Последовательно рассмотрим следующий ряд параметров геометрия колонки, размер гранул, набивка колонки, скорость элюции, физические свойства элюента (вязкость, температура) и, наконец, загрузка колонки. Рассмотрение будем вести с позиции улучшенпя разрешения и одновременно уменьшения продолжительности хроматографического процесса. Но сначала надо привести еще одну зависимость — скорости ЭоЛюции и от разности давлений иа входе и выходе колонкп Д/ ( перепад давления ) и от размера гранул. Ее описывает уравнение Дарси [c.36]

Put. 12. Влияние выбора силы элюента при пзократической злюцип на характер разрешения компонентов смеси, принадлежаш пх к различным по прочности сорбции группам (сы. текст) [c.42]

I Выбор между ступенчатым и непрерывным законами изменения силы элюеита диктуется в первую очередь степенью различия ио сродству к неиодвпжной фазе между группами кодгаонентов и внутри них. Если различия между группами очень велики, то предпочтение следует отдать ступенчатому градиенту (рис. 13). Конечно, можно задать столь крутой закон постепенного (наиример, линейного) нарастания силы элюента, что эти группы окажутся достаточно сближенными, но разрешение инков внутри групп при этом может пострадать, так как предел сужению зон внутри груииы кладет диффузия вещества и неоднородность, в то время как уменьшение расстояния мен ду зонами с ростом крутизны градиента ничем не ограничено. Однако, прежде чем в каждом конкретном случае сделать выбор между ступенчатой н непрерывной градиентными элю-циями, следует принять во внимание целый ряд чисто практических соображений, которые изложены нин е в форме сжатого перечисления достоинств и недостатков обоих типов градиентной элюции. [c.43]

Это означает, в частности, что фракционирование макромолекул путем изократической элюции в большинстве случаев имеет мало шансов на успех. Подавляющее большинство макромолекул ири данном выборе элюента либо уже будет находиться в подвижной фазе, либо окажется слишком прочно связанным с неподвижной фазой. Непрерывная линейная градиентная элюция здесь удобнее, так как она для одиого белка за другим создает ситуацию, отвечающую быстрой десорбции. Отметим нонутно, что можно исходно уменьшить среднее число точек сорбции и тем самым улучшить условия разрешения, если уже при внесении вещества на колонку уравновесить ее жидкой средой, которая препятствует многоиози-циопной сорбции вещества в колонке, напрпмер солевым раствором умеренной концентрации. Одиако подобрать такую концентрацию, которая была бы оитимальпои для всех компонентов смеси макромолекул, удастся редко. [c.46]

Этот выбор определяется, в первую очередь, условиями растворимости и сохранности материала препарата. Эти соображения мoгy J диктовать pH и ионную силу буфера, наличие в нем мочевины и детергентоп. Одпако надо иметь в впду и возможное воздействие выбора элюента на ход самого хроматографического процесса. Во-первых, такое воздействие может проявляться в изменениях конформации пли плотности упаковки макромолекул, диссоциации белков па субъединицы, диссоциации кофакторов от ферментов и др. Во-вторых, следует проверить устойчивость материала матрицы к выбранному значению pH и диссоциирующим добавкам. Наконец, не следует упускать пз виду возможности влияния элюента на взаимодействие разделяемых веществ с материалом матрицы, т. е. [c.135]

II Впнтцерпс исследовали влияние на характер задержания РНК на нитроцеллюлозе выбора соли и температуры элюента, а также провели сопоставление возможностей использования для рассматриваемого разделенпя различных [c.179]

Мы бегло упомянули основные особенности трех компонентов системы ионообменной хроматографии ионообменннка, элюента и вещества. Углубленное знакомство с ионообменной хроматографией целесообразно начать с более полного описания и характеристики всех компонентов, включив сюда и некоторые справочные данные о продажных ионообменниках. Это позволит нам подойти к обоснованию выбора параметров хроматографического процесса, а также в полной мере оценить приведенные далее многочисленные практические примеры. [c.250]

Итак, при выборе режима хроматографии или при анализе результатов описанного в литературе хроматографического эксперимента следует оценить роль следующих параметров элюента природы, концентрации, pH и емкости буфера, в частности близости выбранного значения pH к границе нормального диапазона эффективной буферной емкости природы ь концентрации ионов соли температуры, вязкости п диэлектрической проницаемости растворителя (с ее уменьшением ослабляется ионизация обменника) наличия в элюенте добавок, обеспечивающих нативность биологического препарата (глицерин, р-меркаптоэтанол или ДТТ, ионы Mg и др.), улучшающих его растворимость или препятствующих агрегации его молекул (детергенты, мочевина, органические растворители), блокирующих негиецифическую сорбцию вещества на материале матрицы (мочевина, детергенты и др.). [c.256]

Если элюент должен составляться на основе буфера, то, помимо соответствия диапазона буферной емкости нужному значению pH, необходимо обдумать выбор химической природы буфера в связи с возможностью его взаимодействия с обменником. В состав любого буфера входит обеспечивающий само явление буферности неполностью диссоциированный остаток слабой кислоты или слабого основания. Если такой остаток (в диссоциированной форме) сорбируется на обменнике, то буферное равновесие нарушается и изменяется pH. Во избежание этого хроматографию на апионообменниках предпочтительно вести в таких буферах, у которых буферный компонент является катионом, т. е. в трисовом, пиридиновом или имидазоль-ном, а для катиоиообменников следует использовать такие буферы, как ацетатный, фосфатный, бикарбонатный и др., где буферным компонентом служит анион кислотного остатка. [c.290]

Этой перспективе посвящен следующий раздел, а здесь отметим, что в случае хроматографии на уровне микрограммовых количеств препарата следует принять меры для уменьшения потерь белков за счет сорбции их на материале колонки — стекле или пластике. С этой целью в элюент можно вводить глицерин (до 50%) или Тритон Х-100 (до 0,2 мМ). Для стекла при низкой ионной сило элюента лучше использовать глицерин, при высокой — Тритон Х-100. Впрочем, этот выбор зависит и от природы белка [Знекег, БсЬиса, 19831. [c.313]

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ (ТСХ), вариает хроматографии, основанный на различии в скорости перемещения компонентов смеси в плоском тонком слое (толщина 0,1-0,5 мм) сорбента при их движении в потоке подвижной фазы (элюента). Последняя представляет собой, как правило, жидкость, однако осуществлен и газовый вариант ТСХ. В качестве сорбентов используют мелкозернистые силикагель, Al Oj, целлюлозу, крахмал, полиамид, иониты и др. Суспензиями этих сорбентов покрывают пластинки из стекла, фольги или пластика для закрепления слоя применяют крахмал, гипс или др. связующие, Пром-стью вьшускаются готовые пластинки с уже закрепленным слоем сорбента. Элюентами служат обычно смеси орг. р-рителей, водных р-ров к-т, солей, комплексообразующих и др. в-в. В зависимости от выбора хроматографич, системы (состава подвижной и неподвижной фаз) в разделешш в-в осн. роль могут играть процессы адсорбции, экстракции, ионного обмена, комплексообразования. На практике часто реализуются одновременно неск, механизмов разделения. [c.608]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология