Метанол растворитель неподвижной фазы

Однако наиболее часто применяют ион-парную хроматографию на обращенной фазе, при которой в качестве подвижной фазы используют водный буферный раствор и органический растворитель, смешивающийся с водой, обычно метанол или ацетонитрил. В подвижную фазу добавляют противоион, заряд которого противоположен заряду молекулы, а в качестве сорбента используют силикагель с химически привитой фазой, обычно Се или i8. Иногда разделение осуществляют с применением несмешиваемой с водой механически удерживаемой фазы, например, бутанола. При разделении на обращенной фазе более стабильной, чем механически удерживаемая фаза, водные образцы могут непосредственно вводиться в колонку, что особенно важно для анализа биологических образцов. При этом нет необходимости в предварительной очистке, так как гидрофильные компоненты мгновенно вызываются из колонки. Градиентное элюирование проводят, изменяя концентрацию противоиона в подвижной фазе или меняя полярность растворителя. При изменении концентрации противоиона, который остается в неподвижной фазе, изменяется сила растворителя, а при изменении pH подвижной фазы изменяется селективность разделения. [c.75]

При исиользовании обычных капиллярных колонок длиной 25-30 м и внутренним диаметром 0,32 мм и объеме пробы 1 мкл размывание зоны визуально не наблюдается, поскольку форма пика в таких условиях не ухудшается. Только тщательный анализ хроматограммы позволит выявить размывание зоны. В работе К. Гроба-младшего [24] приведен типичный пример размывания зоны в пространстве. К. Гроб анализировал метиловые эфиры Жирных кислот Се — С1з (в виде растворов в различных растворителях). Псиользовали ввод пробы без деления потока. Для сравнения проводили ввод пробы с делением потока. Па рис. 3-21,а приведена хроматограмма, полученная при вводе пробы с делением, потока — при этом размывания зон не происходит. Хроматограмма на рис. 3-21,6 (раствор анализируемой смеси в н-гексане) получена при вводе пробы без деления потока и температуре 25°С. Растворитель конденсируется в начале колонки, а анализируемые вещества распределяются на смоченной растворителем зоне. Размывание ников составляет примерно 30%, за исключением эфира С , который полностью концентрируется в том месте, где происходит исиарение последней порции растворителя (эффект растворителя). При 60° эффект растворителя минимален и размывания ника в пространстве не происходит (рис. 3-21, в). Размывание зон С и С обусловлено размыванием во времени и отсутствием эффекта растворителя. Как указывалось выше, размывание пробы в пространстве часто нельзя наблюдать визуально, поскольку форма Пиков не искажена. С другой стороны, если растворитель недостаточно хорошо смачивает неподвижную фазу, что имеет место нри исиользовании полярных растворителей (метанола) на неполярных фазах, форма пиков на хроматограмме искажена. Это объясняется тем, что длина зоны, смоченной растворителем, слишком велика [c.44]

От природы неподвижной фазы зависит, какой растворитель следует применять. Растворитель, безусловно, должен кипеть при низких температурах и очень хорошо растворять неподвижную фазу. Чаще всего для этого применяют диэтиловый эфир, петролейный эфир, хлористый метилен, ацетон, хлороформ, метанол, четыреххлористый углерод, этанол, метил-этилкетон, бензол или смеси этих растворителей. [c.99]

Стеклянные двух- и трехступенчатые колонки высотой в 150 и 250 см заполнялись измельченным силикагелем марки ШСМ, крупностью 0,056—0,315 мм, которым адсорбировалась неподвижная фаза — метиловый спирт. Применяемый силикагель не требовал особой подготовки и был готов к работе после промывки его метанолом, вытеснявшим воду и окрашенные, адсорбированные силикагелем, загрязнения. В качестве вымывающего растворителя применяли бензол или петролейный эфир. Порядок работы был следующим. [c.261]

Триметиленгликоль. Эта неподвижная фаза также применяется с углеводородными подвижными фазами, которые могут,быть удовлетворительно модифицированы полярными растворителями. Наиболее часто используемые модификаторы — тетрагидрофуран, диоксан и хлороформ. Спиртовые модификаторы должны быть по возможности исключены, так как они могут вымывать неподвижную фазу. Триметиленгликоль проявляет достаточную селективность при разделении спиртов, так что, используя его, можно провести разделение метанола, этанола, пропанола, изопропанола, бутанола, изо-бутанола и трег-бутанола. [c.272]

Методы нанесения кислот на бумагу. На стартовую линию каждой полосы бумаги наносят жирные кислоты, растворенные в метаноле, смеси спирта с эфиром (1 1) или хлороформе, в количестве 5—30 мкг каждой кислоты в общем объеме 5—10 мкл. Предпочтительно растворение в первых двух растворителях, так как хлороформ растворяет неподвижную фазу. Если жирные кислоты плохо растворимы в указанных растворителях, последние подогревают. Обычно метчики (стандартные растворы кислот) наносят на одну крайнюю и на одну среднюю полосу, если пользуются сложной формой полос бумаги. При работе способом круговой хроматографии [190] из бумаги вырезают диски диаметром 10—20 см. Последние делят на секторы, отделяя один от другого щелью шириной 1 мм, а в центре круга делают отверстие для фитиля. В каждый сектор на расстоянии 1 см от центра круга наносят раствор кислот, в отверстие круга вставляют новый фитиль и проводят хроматографирование. Поступление растворителя на бумажный диск возможно и по бумажному язычку, имеющему ширину 7—8 мм. [c.12]

Приготовление фаз. Во всех случаях твердый носитель добавляют чаще всего к 10—20% раствору жидкой фазы в хлороформе, эфире или метаноле и растворитель выпаривают при интенсивном перемешивании. Полученную таким образом сырую неподвижную фазу сушат при [c.60]

Распределительная хроматография анионов в оригинальном варианте с использованием сульфокатионита СБС в Na-форме в качестве носителя была впервые осуществлена Г. Л. Старобинцем и С. А. Мечковским для разделения смеси анионов солей галогеноводородных кислот. В качестве подвижной фазы был применен органический растворитель, неограниченно смешивающийся с водой — ацетон (или метанол). При этом катионит как гидрофильный носитель удерживает преимущественно воду, которая не вымывается органическим растворителем. Катионит предварительно набухал в водно-органическом растворителе, содержащем 80% ацетона. Благодаря избирательному характеру набухания катионит, обогащенный водой, приходил в равновесие с бинарным раствором, обогащенным органическим компонентом. Таким образом, в качестве неподвижной фазы, удерживаемой катионитом, и подвижной фазы служат водно-ацетоновые смеси переменного состава — не- [c.152]

I — растворитель 2 — бензол 3 — нафталин 4 — антрацен 6 — пнрен 6 — хризен 7 — бензопирен 8 —1,2-бензопирен. Колонка 1 м X 2.1 мм. Неподвижная фаза углеводородный полимер. Носитель зипакс (37 мкм). Подвижная фаза 60 об. % БОДЫ + 40 об. % метанола. [c.66]

Описанный подход к подбору состава подвижных фаз, для ВЭЖХ в настоящее время общепринят. В состав почти любой подвижной фазы входит компонент, сорбционно менее активный, выполняющий преимущественно транспортную функцию, и компонент, сорбционно активный, служащий для регулирования равновесия. В соответствии со сложившейся практикой далее в этой книге растворители первого рода обозначены буквой А, растворители второго рода — Б. Естественно, роль одного и того же компонента в различных подвижных фазах и в зависимости от характера неподвижной фазы различна. Например, в подвижной фазе гексан—хлороформ последнее соединение выступает в качестве растворителя Б, а в системе хлороформ—метанол — как растворитель А. [c.43]

Наблюдаемые различия в селективности могут определяться не только самим сорбентом, но и типом органического модификатора подвижной фазы [397]. Так, плоские ароматические молекулы сильнее удерживались октадецилсиликагелем, по сравнению с октнлсилнкагелем, лишь в том случае, когда подвижная фаза содержала метанол. Если же в качестве органического растворителя использовали ацетонитрил, селективность этих неподвижных фаз была близкой. [c.60]

Разделение в последних системах происходит за счет комбинации механизмов разделения и адсорбции, хотя до конца они не поняты. Даже шривитые фазы, такие, как is, хорошо адсорбируют некоторые количества органических растворителей из водно-органической подвижной фазы, образуя жидкую неподвижную фазу in situ [40, 54, ПО, 111]. Природа таких адсорбированных слоев может изменяться с изменением концентрации органического растворителя в подвижной фазе. Так, компоненты смеси стероидов, предварительно разделенные традиционной распределительной жидко-жидкостной хроматографией после введения в колонку, заполненную фазой is, элюируются в нормально-фазном порядке при использовании элюента метанол—вода (60 40), но р обращенно-фазном порядке, если отношение метанол —вода меняется на 40 60 [115]. Такое обращение порядка элюирования было бы маловероятным, если бы единственным механизмом, действующим в этой хроматографической системе, была твердофазная адсорбция (гидрофобное взаимодействие). [c.74]

Обычным испытанием чистоты растворителя является газо-хроматографический анализ. Однако часто эти результаты могут ввести в заблуждение, так как методики газохроматогра-физического разделения пе принимают во внимание присутствие некоторых типов нелетучих или высококипящих загрязнений (например, 1,4- бутанд1иола—продукта гидролиза пероксида, присутствующего в ТГФ). Стандарты Американского химического общества часто рекомендуют определять уровень кислотных или щелочных материалов, присутствующих в растворителе, с помощью титрования. Кислотно-основное титрование не является достаточно чувствительным, например, для контроля низкого уровня примеси аминов в метаноле (образующихся в одном из промышленных процессов, иопользуемом для получения метанола), которая, однако, легко детектируется по характерному запаху. В этом и других случаях важно то, что при использовании больших объемов растворителя в препаративной ЖХ загрязнения, присутствующие в небольших концентрациях, могут концентрироваться на неподвижной фазе и вследствие этого изменять характеристики удерживания и форму полосы различных растворенных веществ в процессе использования насадки колонки (см. также разд. 1.6.1.1). [c.95]

Обычно в методе жидкостной адсорбционной хроматографии предлагается использование полярных неподвижных фаз в сочетании с неводными подвижными фазами. Типичными сорбентами являются силикагель, оксид алюминия, силикагель с привитыми полярными группировками (амино-, циано- или диольными). Обычно используются однокомпонентные растворители или растворители, состоящие из "неполярного носителя" (гексан или фреон-113), в который для регулирования элюирующей способности растворителя и селективности вводят различные полярные растворители ("модификаторы"), например метиленхлорид, различные простые эфиры, этилацетат, метанол, ацетоннтрил и т.д. [c.13]

В лаборатории авторов [202] при изготовлении такого типа колонок суспензия аэросила 200 в полярной неподвижной фазе карбовакс 1540 наносилась статическим способом под давлением (рис. 3.12). Из числа растворителей, дающих стабильную суспензию аэросила, наилучшим оказался метанол. Кроме того, как показали эксперименты, одностадийный метод смачивания дает лучшие результаты, чем двухстадийный. [c.77]

Рис 7-49 Хроматограммы проб сыворотки крови полученные при разделении на капиллярной колонке на внутренние стенки которой нанесена неподвижная фаза Колонка 1 О мм (внутр диам) X 1 м неподвижная фаза силикагель, модифицированный С18 (размер частиц 10 мкм) исходный элюент метанол/вода (75/25) конечный элюент 100%-ный метанол экспоненциальный градиент (кривая No 9 программатора состава растворителя фирмы Waters) объемная скорость 40 мкл/мин, детектор УФ, 254 нм [c.207]

Этот вид хроматографии применяют гораздо менее часто в синтетической органической химии. Наиболее часто применяемым носителем для полярной неподвижной фазы является диатомитовая земля [целит или гифло супергель], но также применяют порошкообразную целлюлозу и другие носители. В качестве неподвижной фазы применяют различные полярные органические растворители, часто содержащие воду. Наиболее часто применяют водный метанол или уксусную кислоту (для желчных кислот) и формамид. В качестве подвижной фазы используют различные парафины или их смеси с другими неполярными растворителями (бензолом, толуолом и т. д.). Для заполнения колонок [19] целит или гифло супергель промывают 6 н. раствором соляной кислоты с целью удаления ионов металлов, после чего промывают водой с отмучиванием до полного удаления ионов хлора и пыли. Наконец, носитель промывают абсолютным метанолом, петролейным эфиром и высушивают. Компоненты распределительной системы встряхивают в воронке и оставляют на сутки для установления необходимого равновесия между ними. Отмытый кизельгур (10 вес. ч.) обрабатывают 5—<6 объемами низшей фазы (например, 90%-ным метанолом) и смесь перемешивают до равномерного распределения растворителя. Затем добавляют высшую фазу (например, триметилпентан) с образованием взвеси. Поместив небольшой кусочек стекловаты на дно хроматографической колонки, в колонку вносят небольшое количество взвеси, которую упаковывают перфорированным дне- [c.216]

Колонка 50x0,27 см носитель диатомитовая земля с размером частиц 28—32 мкм неподвижная фаза обогащенная водой смесь вода—метанол—2,2,4-триметилпентан (состав в молярном отношении 0,229 0,680 0,091) элюент обедненная водой смесь тех же растворителей (состав в молярном отношении 0,019 0,177 0,805) температура разделения 22 °С детектор спектрофотометр фирмы Zeiss марки PMQ II с проточной ячейкой емкостью 7,5 мл. Сигнал с детектора подается на линейный самописец (2 мВ) (фирмы Servogor, Туре RE-511). [c.234]

Использование хроматографии на бумаге в ее первоначальном виде для разделения встречающихся в природе сложных смесей липидов не было возможным вследствие гидрофильной природы применяемого инертного носителя и неподвижной фазы. Хроматографическое разделение липидов могло быть осуществлено лишь после введения Рамсаем и Паттерсоном [1] в 1948 г. принципа обращенных фаз . В этом методе хроматографируемые вещества растворены в неподвижной гидрофобной фазе и разделяются вследствие непрерывного распределения между нею и подвижной гидрофильной фазой. В 1950 г. Болдинг [2] употребил для разделения метиловых эфиров высших жирных кислот обработанную вулканизованным латексом бумагу и смесь равных объемов ацетона и метанола в качестве растворителя однако после погружения хроматограммы в растворы липофильных красителей пятпа были плохо различимы на интенсивно окрашенном фоне. Высшие жирные кислоты этим методом не могли быть разделены. Ранние работы по хроматографии липидов на бумаге приведены в обзоре Хольмана [3]. [c.347]

При приготовлении насадки рекомендуется также использовать для растворения неподвижной фазы относительно высококипяшие растворители, а не хлористый метилен, метанол и ацетон. Растворители с более низкой температурой кипения часто улетучиваются чрезмерно быстро и при использовании подогрева частицы носителя могут растрескиваться. Особенно важна летучесть растворителя, если используется метод фильтрации, поскольку более летучий растворитель часто испаряется с верхней поверхности слоя насадки и не проходит вглубь. Это приводит к локальному покрытию носителя чрезвычайно большим количеством неподвижной фазы или даже высаждению самой неподвижной [c.146]

До некоторой степени противоположная цель преследовалась авторами работы [74], которые пытались снизить число неподвижных фаз до одной путем выбора связанной цианоироииль-ной фазы промежуточной полярности, которая может быть использована как в нормальном, так и в обращенно-фазовом режиме (см. рис. 3.8). Более того, благодаря разумному выбору модификаторов общее число необходимых растворителей было ограничено шестью н-гексаном, хлористым метиленом, ацетонитрилом, тетрагидрофураном для нормально-фазовой хроматографии и тетрагидрофураном плюс метанол и вода для ОФЖХ. Благодаря применению ограниченного числа двойных и тройных подвижных фаз оказалось возможным разделить ряд образцов различных фармацевтических препаратов. [c.271]

Выбор системы растворителей для разделения стероидов зависит от полярности соединения, т. е. от числа кислородсодержащих функциональных групп, присоединенных к скелету стероида или терпеноида. Чаще всего применяются системы типа предложенных Бушем и Заффарони. В системах Буша неполярные и летучие растворители, например гексан, гептан, петролейный эфир, толуол, тетрахлорметан, сочетаются с водно-спиртовыми неподвижными фазами. Компоненты систем смешивают, встряхивают, дают смеси расслоиться на фазы, после чего используют нижнюю фазу для насыщения атмосферы камеры и приведения бумаги в равновесие с нею, а верхней фазой проводят элюирование. Буш пользовался следующими системами (перечисляются в порядке возрастания полярности) 1) петролейный эфир — метанол — вода (10 8 2) 2) толуол — петролейный эфир — метанол — вода (5 5 7 3) 3) толуол — петролейный эфир — метанол — вода (667 333 600 400) 4) петролейный эфир — бензол — метанол — вода (667 333 800 200) 5) толуол— метанол — вода (10 5 5) 5) бензол — метанол — вода (10 5 5) 7) толуол — этилацетат — метанол — вода (9 1 5 5). Если элюирование ведется перечисленными растворителями, важно привести бумагу в равновесие с неподвижной фазой, т. е. со смесью метанола и воды. Для этого хроматограмму перед элюированием выдерживают над парами неподвижной фазы до следующего дня. Далее, очень важно, чтобы атмосфера камеры была насыщена всеми компонентами системы. Очень полезно также небольшое повышение температуры (до 37 °С). В разд. 3.1.2 и в статье [19] описывается способ ускорения до- [c.118]

В данной работе использовался газовый хроматограф Биохром-1, исполнение 1 с пламенно-ионизационным детектором, предназначенный для работы со стеклянными каин. лярными колонками. Колонка — капилляр из борсиликатного стекла, внутренним диаметром 0,45 и длиной 40 мм. Для дезактивации и создания шероховатости внутренней поверхности капилляра колонку заполняли метанолом, содержащим 0,05 процента хлорида калия и 0,03 процента полиэтиленгликоля ПЭГ-20М, один конец колонки запаивали и растворитель выпаривали высокотемпературным статическим методом (ВСМ) (10) при температуре термостата 270° С. Неподвижную фазу — политрифторметилсилоксановый эластомер СКТФТ-50Х наносили из 0,5-процентного раствора в хлористом метилене методом ВСМ при температуре термостата 200° С. Эффективность колонки по додекану при 100 ° С составила 50 т теоретических тарелок. [c.76]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология